6α-hydroxyeurycomalactone在昆虫拒食活性和抑制发育的应用的制作方法

文档序号:17149804发布日期:2019-03-19 23:19阅读:231来源:国知局

本发明属于生物农药和植物保护领域,具体涉及6α-hydroxyeurycomalactone在昆虫拒食活性和抑制发育的应用。



背景技术:

有害生物防治问题一直都是困扰农业生产的问题,农业广泛应用化学农药,虽然它发挥了重要作用,但是也引用了一系列问题。如害虫抗药性的产生、环境污染以及对天敌和非靶标生物的不利影响等。

而植物源农药的开发一直是农药领域的研究热点,因为它不会污染环境,对农作物和生态环境相对安全,且昆虫也不易产生抗药性。其中,昆虫拒食剂具备“间接”杀虫的一切特点,高效无毒,所以昆虫拒食剂就是一种理想的植物源农药。

目前,人们对拒食剂的准确使用机制、昆虫化学和生理学以及拒食剂对生态体系的影响等还不明确,若能筛选出一种能够能够在植物体内输导的安全高效的昆虫拒食性化合物加以开发利用,就是解决问题的有效手段。



技术实现要素:

本发明的首要目的在于提供6α-hydroxyeurycomalactone在昆虫拒食中的应用。

本发明的另一目的在于提供6α-hydroxyeurycomalactone在对昆虫有生长发育抑制活性的应用。

本发明所采取的技术方案是:

6α-hydroxyeurycomalactone在昆虫拒食中的应用。

6α-hydroxyeurycomalactone在制备对昆虫有拒食活性药剂中的应用。

6α-hydroxyeurycomalactone在制备对昆虫有生长发育抑制活性药剂中的应用。

进一步的,所述药剂可用于植物叶片表面、根部或/和茎部。

进一步的,所述的昆虫为鳞翅目昆虫和同翅目昆虫的至少一种。

进一步的,所述的昆虫为夜蛾科、菜蛾科和蚜科昆虫的至少一种。

6α-hydroxyeurycomalactone在制备抑制昆虫生殖细胞增殖的药剂中的应用。

进一步的,所述的昆虫生殖细胞为斜纹夜蛾卵巢细胞、小菜蛾胚胎细胞。

一种能在植物内输导的昆虫拒食剂,活性成分包括6α-hydroxyeurycomalactone。

进一步的,所述的昆虫为菜蛾科、夜蛾科和蚜科的至少一种。

进一步的,所述的昆虫制剂为乳剂、水剂、水乳剂、可湿型粉剂和微乳剂。

一种使昆虫拒食植物的方法,其特征在于,将含有6α-hydroxyeurycomalactone的药液灌

根或喷洒植物。

本发明的有益效果是:

6α-hydroxyeurycomalactone具有良好的植物内吸特性和输导性,对昆虫生殖细胞有抑制增殖作用,对昆虫有拒食活性以及抑制昆虫的生长发育;本发明是从天然植物中分离纯化得到,对于各种粮食、瓜果、蔬菜等经济作物低毒、无残留、无污染,对害虫能起作用,更有利于环境保护;也能被植物吸收代谢;对昆虫有高的拒食活性,可以达到防治虫害的效果。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

6α-hydroxyeurycomalactone的分子式为c19h24o7。

实施例16α-hydroxyeurycomalactone能够经菜心根部内吸到根内部,并向上输导到叶片,使昆虫拒食菜心叶片

方法:将6α-hydroxyeurycomalactone用dmso溶解,配成10000μg/ml的母液,再用0.5mmcacl2水溶液将母液稀释成100μg/ml的培养液。将事先培育的未经处理的菜心幼苗(6叶期)放在0.5mmcacl2水溶液中预培养2小时后,移入上述已准备好的100μg/ml的6α-hydroxyeurycomalactone培养液中,培养24小时后取菜心顶端叶片0.7克,捣碎后溶于2ml甲醇中,用液相色谱-质谱联用仪可检测到此提取液中含有6α-hydroxyeurycomalactone。经计算,6α-hydroxyeurycomalactone在菜心顶端叶片(鲜叶片)中的含量达到45μg/g。将这种内吸了6α-hydroxyeurycomalactone的菜心顶端叶片打成直径为1.2厘米的圆形叶碟,再接入小菜蛾3龄初幼虫,重复3次。在相对湿度为50%~70%、温度为25℃~28℃的环境中保持24小时后统计取食面积,计算取食率和拒食率。

取食率计算公式为:

拒食率计算公式为:

结果:6α-hydroxyeurycomalactone对植物有较好的内吸特性,通过叶蝶法检测其对小菜蛾的拒食活性发现6α-hydroxyeurycomalactone具有明显的效果,植株在含有6α-hydroxyeurycomalactone的培养液培养48h后,小菜蛾的拒食率高于85.2%,因此6α-hydroxyeurycomalactone可作为良好的灌根生物农药,对昆虫有高的拒食活性,从而可达到防治病虫害的效果。

实施例2:6α-hydroxyeurycomalactone对小菜蛾、斜纹夜蛾细胞增殖抑制作用

探索6α-hydroxyeurycomalactone对小菜蛾胚胎细胞、斜纹夜蛾卵巢细胞的增殖是否有抑制作用,采用cck-8方法检测细胞增殖抑制率,结果如表1所示:

表16α-hydroxyeurycomalactone对昆虫细胞的增殖抑制率

实验结论:从表1可知,6α-hydroxyeurycomalactone对昆虫细胞的增殖有显著抑制作用,与6α-hydroxyeurycomalactone浓度呈正相关。不同浓度的6α-hydroxyeurycomalactone对小菜蛾胚胎细胞的抑制率均大于30%,当浓度大于6.25μg/ml时,抑制率都在50%以上;

6α-hydroxyeurycomalactone对斜纹夜蛾卵巢细胞也有很强的抑制作用;但对斜纹夜蛾卵巢细胞的敏感性略低于小菜蛾胚胎细胞;在实验浓度大于12.5μg/ml的条件下,6α-hydroxyeurycomalactone对两种昆虫细胞抑制率均大于50%。

实施例3:6α-hydroxyeurycomalactone对昆虫的拒食活性

方法:将6α-hydroxyeurycomalactone用丙酮溶解,配成2000μg/ml的母液,再用丙酮将母液稀释成5、10和20μg/ml的药液均匀涂布于直径为1.5厘米的圆形菜心叶碟表面,每片叶碟涂药量为20μl,待叶碟表面的丙酮自然晾干后接入小菜蛾plutellaxylostella(linnaeus)3龄初幼虫,每浓度处理重复3次,在相对湿度为50%~70%、温度为25℃~28℃的环境中保持24h后统计取食面积,计算取食率和拒食率,计算公式见实施例1。

测试6α-hydroxyeurycomalactone对斜纹夜蛾spodopteralitura(fabricius)1龄末幼虫的拒食活性时用木薯叶片;测试6α-hydroxyeurycomalactone对甜菜夜蛾spodopteraexigua(hübner)1龄末幼虫的拒食活性时用苋菜叶片;测试6α-hydroxyeurycomalactone对菜蚜lipaphiserysimi的拒食活性时用菜心叶片,其它处理方法和计算方法同小菜蛾3龄初幼虫。

表26α-hydroxyeurycomalactone对昆虫幼虫的拒食活性(处理后48h)

表36α-hydroxyeurycomalactone和azadirachtin(印楝素)对昆虫的拒食中浓度

结果:6α-hydroxyeurycomalactone处理48h后昆虫的拒食率见表2和表3,6α-hydroxyeurycomalactone对甜菜夜蛾、小菜蛾、斜纹夜蛾和菜蚜均出现不同程度的拒食活性;6α-hydroxyeurycomalactone对甜菜夜蛾的拒食中浓度为6.13μg/g,低于对照组azadirachtin;同一条件下,6α-hydroxyeurycomalactone对昆虫的拒食效果:甜菜夜蛾>小菜蛾>菜蚜>斜纹夜蛾,但是都表现出较高的拒食活性。

实施例4:化合物对昆虫的生长发育有抑制活性

方法:将浓度为5μg/g的6α-hydroxyeurycomalactone添加到饲料中,给昆虫喂食48h,其中小菜蛾为3龄中期幼虫,甜菜夜蛾为2龄末期幼虫;对照组喂食正常饲料;进食48h后取样检测昆虫体重;3龄中期小菜蛾幼虫进食8天,2龄末期甜菜夜蛾幼虫进食10天后计算化蛹率。

表46α-hydroxyeurycomalactone对昆虫生长发育的影响

表56α-hydroxyeurycomalactone对昆虫化蛹率的影响

结果:从表4和表5中得出,6α-hydroxyeurycomalactone均对小菜蛾和甜菜夜蛾均有明显的生长发育抑制,与对照组相比单条虫重量减少了0.006g~0.024g。而且与对照组相比,小菜蛾以及甜菜夜蛾进食6α-hydroxyeurycomalactone后,化蛹率显著低于对照组的化蛹率。

以上所述为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。

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