一种斑嘴环企鹅的人工孵化方法与流程

本发明涉及动物人工繁育领域，具体涉及一种斑嘴环企鹅的人工孵化方法。

背景技术：

斑嘴环企鹅spheniscusdemersus，又名非洲企鹅，隶属企鹅目sphenisciformes企鹅科spheniscidae环企鹅属spheniscus，被列入濒危野生动植物种国际贸易公约(cites)附录ⅱ，是世界自然保护联盟iucn濒危物种红色名录易危(vu)物种，也是《非洲欧亚大陆迁徙水鸟保护协定》列名物种之一。20世纪以来，由于栖息地丧失、食物匮乏、环境污染(包括石油泄露)以及偷蛋等原因，导致斑嘴环企鹅野生种群数量急剧锐减，种群规模不到75000-80000。

在我国圈养条件下，斑嘴环企鹅种群规模较小，截至2017年底，全国动物园共引进饲养斑嘴环企鹅不足200只，其中上海动物园斑嘴环企鹅种群规模达147只，成为国内斑嘴环企鹅种群发展的基础。斑嘴环企鹅种群数量的增长与否除了受基础建群者、疾病及遗传多样性水平等因素影响外，人工孵化及育雏的成功率直接影响到企鹅种群数量的增长。

目前，鸡鸭鹅等早成鸟使用人工孵化、技术的较多，成功率也较高。而晚成鸟中，能成功使用人工孵化技术的相对较少。斑嘴环企鹅属于晚成鸟，孵化出雏后，幼雏不能自行觅食，需要人工饲喂一段时间。在斑嘴环企鹅的人工孵化及育雏方面，仅成都、南昌、温州动物园有过1-2只成功的个例，其他动物园均未有过记录。

当出现亲鸟弃卵、不会哺育等自然行为缺失或圈养条件不足等情况时，一般会采用人工技术来进行人工干预。

人工孵化技术的使用的优势在于：

第一，弥补亲鸟自然行为缺失而造成的种群发展桎梏，可直接增加企鹅数量，促进圈养斑嘴环企鹅种群持续稳定健康的增长；

第二，也可为其他晚成鸟的饲养繁育积累经验；

第三，进一步发挥动物园作为迁地保护场所的重要作用，为斑嘴环企鹅种群野外复壮奠定基础；

第四，可为斑嘴环企鹅的保护和科研提供强有力的数据支撑和基础资料。

技术实现要素：

为了克服现有技术所存在的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种斑嘴环企鹅的人工孵化方法。

为了实现本发明的目的，所采用的技术方案是：

一种斑嘴环企鹅的人工孵化方法，包括孵化前卵的处理、孵化设备的处理、孵化、出雏四个步骤：

孵化前卵的处理：观察卵的形态，将卵重正常、卵壳无破损的筛选出来；卵的保存时间不超过7天，若不能立即入孵，需要将种卵先放入室温在18-24℃、湿度在70％-75％的贮存室进行贮存，卵在存放期内气室必须朝上放置，且每天翻卵2次(向左和向右各45度)；卵完成预热处理后，即在24℃-34℃的温度下静置4-12小时，并消毒后即可进行孵化阶段；

孵化设备的处理：使用具有风扇系统、温湿度控制系统的长度超过60厘米的方形低噪孵化设备；先对箱体进行消毒在开机，并在卵入孵前4-7天持续对方形箱体内8个角落的温度差进行测试，温度差不超过±0.5℃；

孵化：将消毒处理后的卵气室向上竖直放入孵化设备当中，采用恒温孵化法孵化，即整个孵化阶段孵化设备内的温度差异不超过±0.5℃，整个孵化阶段的孵化温度范围为36.3％-36.8％，整个孵化阶段的孵化湿度范围为50％-65％，新出生雏鸟和卵重量相比的失重率不超过16％，在孵化期间每天凉卵不低于1次，气室向上沿短轴翻卵不低于12次，孵化中期每周照卵不低于1次，若有细小裂痕及时进行修补；

出雏：当孵化至38-40天，蛋壳上有破壳点后将卵放入出雏箱，在出雏期间每天凉卵不低于3次，卵在出雏期间停止翻卵。

在本发明的一个优选实施例中，还包括人工介入步骤：当孵化天数进入39天时，不见破壳点或出现在远离气室的方向啄壳，此时需要人工开壳观察雏鸟的情况。

在本发明的一个优选实施例中，所述人工介入步骤为：不见破壳点时，在气室中央开孔，观察雏鸟。

在本发明的一个优选实施例中，所述人工介入步骤为：出现在远离气室的方向的卵中央区域啄壳时，在胚胎叫声减弱时从破壳点向破壳齿方向用镊子逐步剥开，然后继续观察。使用镊子剥离蛋壳时，需格外小心。当蛋壳边缘有血迹泛出时，需立即停止，并将其放入出雏箱1-4小时，观察血迹是否收干，若收干，方可用镊子继续一点点将蛋壳剥离，如此反复。

在本发明的一个优选实施例中，所述人工介入步骤为：出现在远离气室的方向的卵的锐端啄壳时，在气室一头打一个小孔，并将气室朝下放置后观察。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化前卵的处理步骤当中，所述卵重正常为：101.45±12.17g(n＝41)，横径51.24±2.20mm(n＝102)，纵径71.75±3.91mm(n＝102)。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化前卵的处理步骤当中，所述预热处理为：先将卵放置在24-28℃的环境中静置6-8h，然后再放入28-34℃的环境中4h；刚产下的卵放入28-34℃的环境中4h。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化前卵的处理步骤当中，所述消毒为：5％的有效碘用30-35℃的水进行5倍稀释后，将卵浸泡10min。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化步骤当中，所述整个孵化阶段的孵化温度为：胚胎发育早期的孵化温度36.8℃，胚胎发育中期36.6℃，阀阅晚期36.3℃。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化步骤当中，所述整个孵化阶段的孵化湿度为：胚胎发育早期湿度设定为50％，中期55％，晚期60％，出雏湿度需要提高至65％。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化步骤当中，所述凉卵为：在孵化期内，需要每天早晚各开启孵化箱门一次，使孵化箱停止加热，但需要保持风扇需继续工作，当箱内温度降至25℃-28℃时，关闭箱门，继续孵化，凉卵完毕。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化步骤或出雏当中，所述翻卵为：每隔2小时自动翻卵1次，全天24小时共翻卵12次。

在本发明的一个优选实施例中，所述孵化步骤和出雏步骤的总天数范围为39-42天。

本发明的主要创新点在于：

解决斑嘴环企鹅亲鸟弃卵、弃仔、不会哺育等自然行为缺失造成的繁殖率低下问题。

突破圈养条件限制，提高幼鸟成活率，增加圈养种群数量，促进圈养斑嘴环企鹅种群持续稳定增长。

积累数据和资料，进一步加强斑嘴环企鹅物种保护的科研工作和科普教育。

真正发挥动物园异地地保护作用，加快斑嘴环企鹅野外种群复壮进程。

附图说明

图1为人工孵化湿度24小时图。

图2为编号2015h#01的失重示意图。

图3为编号2015f#01的失重示意图。

图4为人工孵化的温度示意图。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明作进一步的说明，但这些实施例不得用于解释对本发明的限制。

实施例1

入孵前，对斑嘴环企鹅卵的处理：

新鲜度：斑嘴环企鹅的窝卵数为2-3枚，每隔3天左右产一枚卵，卵壳白色。需进行人工孵化的企鹅种卵保存时间不宜超过7天。若不能立即入孵，需要将种卵先放入室温在18-24℃、湿度在70％-75％的贮存室进行贮存。卵在存放期内气室必须朝上放置，且每天翻卵2次(向左和向右各45度)

卵的形态：入孵前需要观察卵形、颜色、大小、卵壳厚度及整颗卵是否完整。软壳蛋、破损漏液蛋、卵形异常、极度偏小或偏大的卵一般直接剔除，不入孵箱。

卵的称重与测量：入孵前，企鹅卵上要用2b铅笔(一般仅可使用碳素铅笔，以免对卵和胚胎造成伤害)在卵壳上标明产卵日期、入孵日期、来源变化、亲鸟编号等信息。正常企鹅卵卵重约101.45±12.17g(n＝41)，横径51.24±2.20mm(n＝102)，纵径71.75±3.91mm(n＝102)。

卵的保存：进入过贮存室的种卵，入孵前必须对种卵进行“预热”处理，即先将种卵放置在24-28℃的环境中静置6-8h，然后再放入28-34℃的环境中4h。“预热”完毕后，才可以入孵化箱进行人工孵化。“预热”时，因谨防种卵“冒汗”(即种卵表面因温度差异导致细小水滴出现)。种卵“冒汗”一般是由升温过快造成，且会对胚胎造成应激。

对于刚产下的鸟卵，也需要在孵化室24-28℃室温环境中静置4-6h后，再入孵化箱。

卵的消毒：种卵在孵箱前，可对卵进行消毒。消毒方法可采用碘伏消毒法，即5％的有效碘用30-35℃的水进行5倍稀释后，将卵浸泡10min即可。种卵消毒后需立即入孵。

入孵前，对孵化机的处理：

孵化机的选择：上海动物园一般选择使用具有双边风扇系统的孵化机。孵化机规格170*130*105cm，为保证孵化成功率，避免使用规为55*45*75cm的孵化机。孵化机要确保噪音低、温控及湿控能力强、便于消毒。

孵化箱开机前的准备：开机前，需对箱体进行消毒，一般选用紫外线灯消毒、消毒液(百毒杀、百胜、碘伏或1210等兽用消毒液)消毒或熏蒸消毒(每立方米空间用15g高锰酸钾加入30ml福尔马林，消毒4h)。

在卵入孵前4-7天，应开启孵化机依次运行测试，检查箱体内温湿度及报警装置是否处于稳定状态。在测试箱体内温度时，必须对箱体内上下左右8个角的位置都进行温度差(±0.5℃)测试，确保箱体内温度均匀恒定，若不进行测试，极易出现上下层温度不一致，从而对孵化率造成影响。在湿度调试时，若湿度不够，可在孵化箱内放至水盆，用加热棒加热水盆内的水进行调节。

孵化过程及技术：

孵化方法的选择：考虑到每对斑嘴环企鹅产卵时间不一致，且产蛋量有限，一次性收集到的种卵数量无法和家禽卵数量相比，所以一般采用恒温孵化方法，而不采用阶段性温度波动方法。阶段性温度波动方法即根据胚胎的不同发育阶段而通过设置孵化箱的温度进行人工孵化，不同阶段的温度差较大。此方法一般适用于大批量的家禽如养鸡场的鸡蛋孵化。恒温孵化方法，即无论种卵胚胎处于何发育阶段，都使用较恒定的温度，整个孵化阶段孵化箱的温度差异只在±0.5℃之间波动。

孵化温度：斑嘴环企鹅的人工孵化温度一般在36.3％-36.8％之间，胚胎发育早期的孵化温度36.8℃，胚胎发育中期36.6℃，发育晚期36.3℃。胚胎发育早期，对温度变化极度敏感，切不可频繁变化温度，哪怕温度变化相当微小。

孵化湿度：孵化湿度决定了孵化期内种卵的失重率。孵化湿度过低，会造成企鹅卵内水份加速挥发，易引起胚胎与卵壳膜的粘连及雏鸟脱水；湿度过高，易引起企鹅雏鸟腹部肿大，水肿、异位、卵黄囊无法回缩等。

企鹅种卵孵化湿度一般控制在50％-65％之间，胚胎发育早期湿度设定为50％，中期55％，晚期60％，出雏湿度需要提高至65％。种卵的失重率会随着湿度的变化而发生变化，胚胎发育的早期失重率约3％，中期再失重3％-4％，晚期再失重3-5％；新出生的雏鸟重量和种卵重量相比，失重率约达到16％。整个孵化期内可绘制失重曲线进行监测。

通风及凉卵：为了给胚胎发育提供充足的氧气，并排出二氧化碳，孵化中的斑嘴环企鹅种卵必须进行通风和凉卵。凉卵方式：在孵化期内，需要每天早晚各开启孵化箱门一次，使孵化箱停止加热，但需要保持风扇需继续工作，当箱内温度降至25℃-28℃时，关闭箱门，继续孵化，凉卵完毕。当种卵进入出雏箱后，每天凉卵次数需要再增加2次。在凉卵时，切不可将卵取出至孵化箱外，避免过度搬弄导致种卵胚胎损伤。

翻卵：斑嘴环企鹅在自然孵化时，一般每天都会进行一定次数的翻卵。人工孵化期间，一般每隔2小时自动翻卵1次，全天24消失共翻卵12次。当种卵进入出雏箱后，停止翻卵。企鹅卵进入孵化箱后，一般竖放在孵化盘内，气室向上并沿短轴反向转动。

照卵：斑嘴环企鹅卵一般入孵前会照卵一次，检查卵的质量和观察胚胎发育程度，并圈出气室。孵化中期每周照卵1次，观察企鹅卵胚胎发育程度。临近出雏，每天照卵一次，观察胚胎发育及啄壳情况。大部分时候，斑嘴环企鹅卵的气室边界清晰可见，气室边缘在破内膜前24-48h通常会发生变化。

孵化周期：野外，斑嘴环企鹅产下第一枚卵后便开始孵化，整个孵化周期约40天。斑嘴环企鹅的人工孵化天数为与自然孵化天数想接近，整个孵化周期约39-42天，平均孵化天数为40天。

其他人工孵化辅助技术：

人工助产技术：正常状态下，斑嘴环企鹅雏鸟大约在38天左右啄壳，40天左右出雏。从啄壳到完成出雏通常需要48h。而当遇到下列情况，需要人工助产技术进行辅助幼鸟出雏。

无破壳点：当孵化天数进入39天时，若有叫声，但不见破壳点，此时需要人工介入。出现这种现象的原因可能有两个，其一，雏鸟体弱，力气不够，破不开蛋壳；其二，胎位不正，其破壳点在气室中央，虽然已破开了内膜，但碰不到蛋壳。通常采用的办法是，先在气室中央打开一个小孔，保证内外空气流通，避免窒息死亡，其次，密切关注雏鸟的动静，听听它的声音，从而对其状态有个预判。随后需要继续等待，等待其卵黄囊吸入腹腔。完全辅助破壳的操作一般不会超出孵化的第42天。

在等待的过程中，若是预判失误，提前辅助破壳，那需要注意的操作是：从气室一侧缓慢用镊子拨开蛋壳，当剥到内膜时，观察血液是否回流入体内(若是血液已回流入体内，卵黄囊基本已吸收进腹腔，可直接破开卵壳并取出雏鸟)。当血液溢出时，需停止操作，并提高出雏箱内湿度继续等待。

若是进入第39天，既没有鸣叫，也没有破壳点，此时也可进行人工介入。出现这种现象的原因可能有两个，其一，胚胎发育不充分，也许是孵化温度偏低，或是晾蛋时间和次数偏多；其二，胚胎较弱。通常采用的保险办法是在气室中央打开一个小孔，静待观察。

赤道线啄壳：赤道线啄壳是指破壳点在卵中央区域，离气室较远，通常是由胎位不正引起的。出现此种现象后，雏鸟无法转动身体，非常容易窒息死亡。可采取的办法是：加强观察，尤其是当喙不在破壳点时；在胚胎叫声减弱时从破壳点向破壳齿方向剥开，然后继续观察。这种情况下，雏鸟窒息死亡率非常高，容易被被羊水等液体、内膜等粘性物质阻碍呼吸。

小头啄壳：小头啄壳是指破壳点在卵的锐端，离气室非常远，通常是由胎位不正引起的。出现此种现象时，雏鸟的头在卵的锐端，死亡率较高。可采取的方法是：在气室一头打一个小孔，并将气室朝下放置，使其可以向空气进来的方向转动。采用这种方法有转回气室并出雏的成功案例，也有直接在小头出雏的个例，但小头啄壳死亡的几率仍然很高。

注意事项：若是介入太早，血液和卵黄囊未吸入体内，雏鸟很容易感染死亡。即便短时间内没有死亡，雏鸟也无着力点吸入，卵黄囊外更容易干燥，外力也难以将卵黄囊缝入雏鸟体内，最终还是死亡。若是介入太晚，雏鸟已经窒息死亡。

当必须进行人工破壳时，优先释放出雏鸟的头部，保证呼吸顺畅。

做好记录，对雏鸟尸体进行观察，对出现的问题从根源上进行解决。若是水肿，则对孵化湿度进行监测并调整。若是发育迟缓，对孵化温度进行监测并调整。

补蛋技术：通过照卵技术，发现部分蛋有裂痕，但内壳膜损伤不严重的，可以利用补蛋技术进行修补。即用专用胶水和专用宣纸将裂横蛋进行修补。在修补破损蛋时，务必要将每道细小裂痕都进行修补，部分裂痕肉眼看不出，需要使用照蛋技术进行观察。

企鹅卵测数据见表1：

表1

其中，10月2日企鹅h对卵一枚，编号2015h#01；10/2入孵；11/8啄壳，失重数据见图2。

2015f#01，鲜重108.7g，8/10产卵，9/16啄壳，数据见图3：

人工孵化温度数据见图4：

人工孵化湿度24小时图，见图1。