一种烟草育苗基质及其制备方法和应用与流程

本发明属于烟草培育技术领域，尤其涉及一种烟草育苗基质及其制备方法和应用。

背景技术：

在烟草育苗基质中，草炭是主要原料，一般在基质配方中的比例以50％～70％较为适宜。由于草炭属于不可再生资源，储量有限，为减轻草炭资源压力，目前育苗基质研究中多选用其他物料部分替代草炭，以减少草炭添加量，替代物料包括农作物秸秆类、糠类及粉煤灰、蚯蚓粪等，草炭比例可适当降低。但秸秆等需经过炭化或与粪便、泥炭堆腐等措施加工才能安全利用，处理工艺不仅繁琐，而且还增加了劳动成本，因此需要选择性能好且成本低廉的替代物料。

沼渣是厌氧发酵后的残留物，具有有机质含量高、病原菌残留少、np等养分含量丰富等优势，具备作为一种良好育苗基质的潜力，如果不能合理循环利用将增加环境压力。但是沼渣中盐分含量较高、粒径较细，过量使用易造成基质孔隙度减少影响烟苗生长，甚至烧苗情况。

此外，烟苗培育周期长，一般需要80天左右，而且培育期在12月～3月，温度较低，因此低温条件下烟苗促生早发措施，成为提高烟苗成苗率和质量的关键。

综上，为减轻草炭资源压力，丰富烟草育苗基质替代物料选择，拓展畜禽粪污处理过程中产生的大量沼渣废弃物的资源化利用途径，急需一种在烟草育苗基质中利用沼渣替代草炭的方案。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种烟草育苗基质及其制备方法和应用，所述烟草育苗基质中沼渣和假单胞菌，在减轻草炭资源压力，拓展烟草育苗基质替代物料选择，充分利用沼渣废弃物的同时，能够显著提高烟草苗的鲜重。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种烟草育苗基质，包括预混基质和假单胞菌wxx-1；所述预混基质和假单胞菌wxx-1的质量体积比为(8～12)kg:1l；所述预混基质包括沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩；所述假单胞菌wxx-1的保藏编号为cgmccno.11539；所述假单胞菌wxx-1为对数期的菌悬液。

优选的，所述沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩的质量比为(33～37):(33～37):(18～22):(8～12)。

优选的，所述沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩的质量比为(34～36):(34～36):(19～21):(9～11)。

优选的，所述假单胞菌wxx-1的od600大于1.0。

优选的，所述沼渣为猪粪源沼渣。

优选的，所述猪粪源沼渣中n、p2o5和k2o的含量，以烘干基计，分别为0.8％～1.5％、1.8％～2.7％和2.5％～4.0％。

优选的，所述猪粪源沼渣的ph值为6.5～7.5。

本发明提供了所述的烟草育苗基质的制备方法，包括以下步骤：

1)将沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩混合获得预混基质；

2)向所述预混基质中接种假单胞菌wxx-1后，混匀、堆制获得烟草育苗基质。

优选的，步骤2)中所述堆制的时间为4～6d。

本发明提供了所述烟草育苗基质在促进烟草苗生长中的应用。

本发明的有益效果：本发明提供的烟草育苗基质，包括预混基质和假单胞菌，预混基质中的沼渣能够替代部分不可再生的草炭资源，减轻草炭资源压力，同时拓展了畜禽粪便源沼渣的资源化利用途径；本发明所述的烟草育苗基质，含有丰富养分，假单胞菌wxx-1够分泌促生活性物质，在低温条件下能促进烟苗早生快发。根据实施例记载，本发明所述的烟草育苗基质培育的烟草苗与烟草专用商品基质培育的烟苗相比，鲜重增加达155％。

附图说明

图1为实施例中不同的烟草育苗基质培育的烟草苗对比图。

生物保藏说明

假单胞菌(pseudomonasprotegens)wxx-1保藏于中国中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmccno.11539，保藏日期为2015年10月26日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

具体实施方式

本发明提供了一种烟草育苗基质，包括预混基质和假单胞菌wxx-1；所述预混基质和假单胞菌wxx-1的质量体积比为(8～12)kg:1l；所述预混基质包括沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩；所述假单胞菌wxx-1的保藏编号为cgmccno.11539；所述假单胞菌wxx-1为对数期的菌悬液。

在本发明中，所述沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩的质量比优选为(33～37):(33～37):(18～22):(8～12)，更优选为(34～36):(34～36):(19～21):(9～11)，最优选为35:35:20:10。在本发明中，所述沼渣优选为猪粪源沼渣，所述猪粪源沼渣中n、p2o5和k2o的含量优选的分别为0.8％～1.5％、1.8％～2.7％和2.5％～4.0％，更优选为1.2％、2.0％和3.0％；所述猪粪源沼渣的ph值优选为6.5～7.5，更优选为7.0。本发明对所述沼渣的来源没有特殊限定，采用本领域常规的猪粪沼渣即可。本发明对所述草炭、蛭石和珍珠岩的来源和规格没有特殊要求，采用本领域常规的市售草炭、蛭石和珍珠岩即可。

在本发明中，所述假单胞菌wxx-1的od600优选的大于1.0；所述假单胞菌wxx-1优选的活化后，进行液体培养获得。在本发明中，所述活化优选的依次包括nb固体平板活化、nb液体活化；所述nb固体平板活化的温度优选为28～32℃，更优选为30℃；所述nb固体平板活化的时间优选为20～28h，更优选为24h。在本发明中，所述nb液体活化的温度优选为28～32℃，更优选为30℃；所述nb液体活化的时间优选为20～28h，更优选为24h；所述nb液体活化的转速优选为150～200rpm，更优选为170rpm。在本发明中，所述液体培养的温度优选为28～32℃，更优选为30℃；所述液体培养的时间优选为20～28h，更优选为24h；所述液体培养的转速优选为170～190rpm，更优选为180rpm。

本发明提供了所述烟草育苗基质的制备方法，包括以下步骤：1)将沼渣、草炭、蛭石和珍珠岩混合获得预混基质；2)向所述预混基质中接种假单胞菌wxx-1后，混匀、堆制获得烟草育苗基质。本发明对所述预混基质混合的方法没有特殊限定，采用本领域常规的混合方法混匀即可。在本发明中，所述堆制的时间优选为4～6d，更优选为5d；所述堆制的温度优选为28～30℃。。

本发明还提供了所述烟草育苗基质在促进烟草苗生长中的应用。在本发明中，所述烟草育苗基质能够显著增加烟草苗的根长、茎长、最大叶长、最大叶宽、鲜重和干重，具有显著的促生效果。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

假单胞菌(pseudomonasprotegens)wxx-1菌悬液的制备

假单胞菌(pseudomonasprotegens)wxx-1保藏编号为cgmccno.11539。

①将保存于甘油管中的wxx-1菌株在nb固体平板上划线活化，30℃培养箱培养24h。②挑取单菌落于4ml液体nb试管，30℃，170rpm震荡培养24h，菌液作为种子液。③以1％(v/v)的接种量将种子液转接至液体nb摇瓶中，30℃，180rpm培养至对数中期(od600>1.0)，4℃离心收集菌体，菌体用蒸馏水洗涤3次，等体积蒸馏水重悬，得到菌悬液。④所用nb液体培养基配制：牛肉膏5g/l，蛋白胨10g/l，氯化钠5g/l。nb固体培养基在液体培养基基础上添加琼脂20g/l。

wxx-1菌株在20℃下培养24h，od600达1.0以上，菌液通过与salkowski比色液反应显红色，表明wxx-1菌株在较低温度下具有产促生活性物质iaa的能力，产量测定为28mg/l。

烟草育苗基质的制备：

预混基质按照如下质量百分比配置：35％沼渣、35％草炭、20％蛭石、10％珍珠岩；混合均匀。

将所述预混基质和假单胞菌wxx-1按照质量体积比10kg:1l的比例混合均匀后，堆制5d，获得烟草育苗基质(记为t4)。

对比例1

烟草专用商品基质，其质量百分比配置为：30％草炭、40％炭化谷壳和30％珍珠岩，混合均匀(记为ck)。

对比例2

按照如下质量百分比配置：15％沼渣、60％草炭、15％蛭石和10％珍珠岩，混合均匀(记为t1)。

对比例3

按照如下质量百分比配置：35％沼渣、35％草炭、20％蛭石和10％珍珠岩，混合均匀(记为t2)。

对比例4

按照如下质量百分比配置：70％沼渣、20％蛭石和10％珍珠岩，混合均匀(记为t3)。

实施例2

实施例1和对比例1～4中的烟草育苗基质的促生效果检测

烟草品种为云烟87，选择饱满一致的烟草种子，于培养皿中30℃培养2d催芽，穴盘中添加蛭石播种3～5粒露白一致的种子(1cm深)，待烟草长出4叶1心后选取大小一致的烟苗移栽到育苗基质。

育苗试验在可控培养箱内进行，模拟实际烟草大棚育苗，设定分为两个阶段：第一阶段25℃，光照16h，光照强度18000lux，湿度75％；第二阶段20℃，黑暗8h，湿度90％。

以标准50孔穴盘(53cm×27cm)培育烟苗，每个孔穴装入16g烟草育苗基质，每穴移栽1株烟草幼苗，各处理重复20株苗。常规管理，14d后测定烟苗根长、茎长、最大叶长、最大叶宽、鲜重和干重等指标。

表1不同育苗基质培育烟苗试验生物量情况

培养14d后，不同育苗基质烟草生物量指标如表1，所有处理中以t4效果最好。与ck培育的烟苗相比，t1和t2显著增加了根长、茎长、最大叶长、鲜重和干重，但t1和t2处理之间差异不显著；t3培育的烟苗长势较差。与ck培育的烟苗相比，添加了假单胞菌菌剂的t4处理显著增加了根长、茎长、最大叶长、最大叶宽、鲜重和干重，以上各指标分别增加了45.1％、49.4％、49.3％、51.4％、155％和186％(图1)，促生效果明显。因此，实施例1中以一定比例的猪粪源沼渣作为烟草育苗基质原料，接种保藏编号为cgmccno.11539的假单胞菌菌剂，可有效促进低温下烟苗的早生快发，是优质的烟草育苗基质。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。