一种富贵竹的培育方法与流程

本发明涉及观赏植物育种领域，具体涉及一种富贵竹的培育方法，特别是一种富贵竹的组合诱导育种方法。

背景技术：

富贵竹为龙舌兰科龙血树属常绿灌木状植物，又称“万年竹”、“转运竹”、“开运竹”、“幸运竹（luckybamboo）”等，原产非洲刚果，因其形态似竹，造型独特，形式多样，富有竹韵，高贵典雅，观赏价值高，寓意吉祥、平安、富贵和奋发向上，深受人们喜爱。

国内富贵竹行业的发展存在的主要问题是品种单一。现有的富贵竹品种已种20多年，造成种性退化严重，缺乏搭配品种和接班品种。随着经济的发展和人们生活水平的提高，人们的生活品位好、审美标准也越来越高，对富贵竹新品种的要求日益提升。

富贵竹的新品种选育可以通过大田芽变育种、组织培养育种、诱变育种等多种途径实现。作为一种无性繁殖的观叶植物，富贵竹的新品种选育一般是通过大田芽变育种方法进行，但此方法选育进程缓慢，周期长。组织培养育种方法是采用化学药剂对富贵竹愈伤组织进行处理，离体培养获得富贵竹新品种，但富贵竹愈伤组织较难获得，技术要求较高，操作复杂，对培养环境要求高，需要多种设备，导致了该育种方法不易操作，该过程需要经过组培苗再生、移栽等过程，不能在m0代进行直接筛选，且需时较长，组培苗茎细小，很难进行筛选。

针对无性繁殖观叶花卉采用诱变育种是一项有效的育种技术。诱变育种一般采用物理和化学方法诱导，植物发生可遗传变异，经过筛选，可以直接或者间接育成新的品种。化学诱变常常以点突变为主，操作简单，突变率高，因此广泛应用。在化学诱变过程，通常采用化学诱变剂，目前主要的化学诱变剂是烷化剂和叠氮化物两大类，其中，烷化剂中的甲基磺酸乙酯(ems)和叠氮化物中的叠氮化钠(nan3)应用最多。现有技术中，cn108522281a公开了一种利用甲基磺酸乙酯离体诱变梁山慈竹的育种方法，但其技术方案是通过甲基磺酸乙酯单一诱导剂进行诱变，存在诱变效率低的不足。未见采用组合诱导剂对富贵竹进行育苗的公开报道。

本发明针对现有技术的不足，建立一种通过组合诱导剂对富贵竹进行无性繁殖育种的方法，用于满足国内外花卉市场的需求。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种富贵竹的培育方法，具体是利用甲基磺酸乙酯、秋水仙素和二甲基亚砜作为组合诱导剂对富贵竹进行诱变育种的方法，解决现有富贵竹的品种选育方面存在的不足。

本发明的技术方案如下：一种富贵竹的培育方法，采用如下步骤：

（1）材料处理前准备：用剪刀把富贵竹顶端生长的茎叶逐层剪掉，直至顶端生长点为止，等待顶端切口处呈干燥状态时，用条带把脱脂棉固定在切口处；

（2）组合诱导剂配置：以甲基磺酸乙酯、秋水仙素、二甲基亚砜混合均匀，配置组合诱导剂溶液；其中，甲基磺酸乙酯浓度为0.1-0.5%，秋水仙素浓度为0.05-0.20%，二甲基亚砜浓度为2%；

（3）组合诱导剂处理：取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的地方，使组合诱导剂溶液浸透脱脂棉，然后盖上锡箔帽，减少水分的散失、避免组合诱导剂见光分解，处理完毕，用5%硫代硫酸钠终止反应，并用无菌水将切口冲洗干净，得到处理组材料；另取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，不采用组合诱导剂处理，得到对照组材料；

（4）材料移栽、鉴定：观察经步骤（3）处理的处理组材料并与对照组材料进行对比；在第20天后从处理组材料的切口处长出3-5个侧芽，2个月时间长出5-6片叶时，选取处理组材料上与对照组材料相比有差异并有观赏价值的侧芽作为选育材料，用剪刀取下，进行杀菌、催根，然后移栽到育苗盘中育苗。

优选的，所述步骤（2）中甲基磺酸乙酯浓度为0.2-0.4%，秋水仙素浓度为0.1-0.15%，二甲基亚砜浓度为2%；所述浓度为体积分数。

优选的，所述步骤（2）中，组合诱导剂处理时间为12-24小时。

优选的，所述步骤（3）中，组合诱导剂的用量为1-2ml；或，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的界面，使得组合诱导剂充分浸透脱脂棉。

优选的，所述步骤（3）中，所述杀菌、催根方式是：将选育材料置于0.05-0.1%多菌灵和0.1-0.5mg/l吲哚丁酸混合溶液中进行杀菌和催根。

所述步骤（4）中，育苗可以采用常规的育苗方式，优选采用进口芬兰诺万播基质novarbo培养土32孔育苗盘进行育苗，所述32孔育苗盘规格为：上口5.8cm×高5.0cm×底部3.0cm。育苗后根据需要进行鉴定，计算富贵竹侧芽诱变率、有观赏价值诱变率。

本发明提出了以组合诱导剂诱导培育富贵竹的方法，相比于单一的诱导剂处理方式可大大提高植株的诱导率。甲基磺酸乙酯能诱导植物染色体碱基点突变和染色体的缺失；秋水仙素在植物有丝分裂时，抑制纺锤体微管生成，阻止染色体分离，导致植物染色体加倍，并且可以在植物基因复制时发生偶然配对上的差错，从而导致基因突变。所以这2种诱导剂混合大大提高植株的诱导率。

本发明技术方案选择处理部位是富贵竹顶端的生长点，更有利诱导变异。

本发明技术方案使用锡箔帽辅助提高诱导率，所述锡箔帽是以单层或多层铝箔纸制成适合切口大小的帽状材料，用于戴/罩在富贵竹顶端生长点切口处。在经过组合诱导剂诱导处理后采用锡箔帽完全包裹/遮盖住覆盖了脱脂棉、滴加了组合诱导剂的切口，可防止切口处的水分散失同时避免了组合诱导剂的见光降解，进而提高了诱导效率，且无须采用整株遮盖避光，对材料的其他部分生长无影响。

本发明步骤简便、耗时短、成本低，诱导率高，经鉴定，采用本发明以组合诱导剂组合处理富贵竹，其侧芽诱变率在1.0-2.0%，有观赏价值诱变率0.1-0.5%。

附图说明

图1为富贵竹处理前的准备，其中，a：富贵竹顶端生长点；b：包裹脱脂棉。

图2为组合诱导剂处理富贵竹过程，其中，a：组合诱导剂处理顶端生长点；b：盖上锡箔帽；c：冲洗切口。

图3为诱导处理后富贵竹切口处出芽情况，其中，a：对照组；b：处理组

图4为变异材料图片。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。

实施例1采用如下步骤实现本发明：

（1）材料处理前准备：选择长势好的、健康无病虫害的富贵竹材料，用剪刀把富贵竹顶端生长的茎叶逐层剪掉，直至顶端生长点（图1a）为止，待顶端切口处呈干燥状态时，用条带把脱脂棉固定在切口处（图1b）；

（2）组合诱导剂配置：以甲基磺酸乙酯、秋水仙素、二甲基亚砜混合均匀，配置组合诱导剂溶液；其中，甲基磺酸乙酯浓度为0.1%，秋水仙素浓度为0.20%，二甲基亚砜浓度为2%；

（3）组合诱导剂处理：取经过步骤（1）的富贵竹材料，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的地方（图2a），使组合诱导剂溶液浸透脱脂棉，然后盖上锡箔帽（图2b），减少水分的散失、避免组合诱导剂见光分解，组合诱导剂处理时间为24小时，处理完毕，用5%硫代硫酸钠终止反应，并用无菌水将切口冲洗干净（图2c），得到处理组材料；另取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，不采用组合诱导剂处理，得到对照组材料；

（4）材料移栽、鉴定：观察经步骤（3）处理的处理组富贵竹，在第20天，从切口处长出3-5个侧芽，2个月时，长出5-6片叶，此时，将处理组材料与对照组材料对比，选取处理组上与对照组相比有差异并且具有观赏价值的侧芽作为选育材料，用剪刀取下，将选育材料置于0.05-0.1%多菌灵和0.1-0.5mg/l吲哚丁酸混合溶液中进行杀菌和催根，然后移栽到进口芬兰诺万播基质novarbo培养土32孔育苗盘进行育苗，32孔育苗盘规格为：上口5.8cm×高5.0cm×底部3.0cm；育苗后的变异材料生长情况如图4。

实施例2采用如下步骤实现本发明：

（1）材料处理前准备：选择长势好的、健康无病虫害的富贵竹材料，用剪刀把富贵竹顶端生长的茎叶逐层剪掉，直至顶端生长点为止，待顶端切口处呈干燥状态时，用条带把脱脂棉固定在切口处；

（2）组合诱导剂配置：以甲基磺酸乙酯、秋水仙素、二甲基亚砜混合均匀，配置组合诱导剂溶液；其中，甲基磺酸乙酯浓度为0.2%，秋水仙素浓度为0.10%，二甲基亚砜浓度为2%；

（3）组合诱导剂处理：取经过步骤（1）的富贵竹材料，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的地方，使组合诱导剂溶液浸透脱脂棉，然后盖上锡箔帽，减少水分的散失、避免组合诱导剂见光分解，组合诱导剂处理时间为20小时，处理完毕，用5%硫代硫酸钠终止反应，并用无菌水将切口冲洗干净，得到处理组材料；另取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，不采用组合诱导剂处理，得到对照组材料；

（4）材料移栽、鉴定：观察经步骤（3）处理的处理组材料，在第20天，从切口处长出3-5个侧芽，2个月时，长出5-6片叶，此时，将处理组材料与对照组材料对比，选取处理组上与对照组相比有差异并且具有观赏价值的侧芽作为选育材料，用剪刀取下，将选育材料置于0.05-0.1%多菌灵和0.1-0.5mg/l吲哚丁酸混合溶液中进行杀菌和催根，然后移栽到进口芬兰诺万播基质novarbo培养土32孔育苗盘进行育苗，32孔育苗盘规格为：上口5.8cm×高5.0cm×底部3.0cm。

实施例3采用如下步骤实现本发明：

（1）材料处理前准备：选择长势好的、健康无病虫害的富贵竹材料，用剪刀把富贵竹顶端生长的茎叶逐层剪掉，直至顶端生长点为止，待顶端切口处呈干燥状态时，用条带把脱脂棉固定在切口处；

（2）组合诱导剂配置：以甲基磺酸乙酯、秋水仙素、二甲基亚砜混合均匀，配置组合诱导剂溶液；其中，甲基磺酸乙酯浓度为0.3%，秋水仙素浓度为0.15%，二甲基亚砜浓度为2%；

（3）组合诱导剂处理：取经过步骤（1）的富贵竹材料，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的地方，使组合诱导剂溶液浸透脱脂棉，然后盖上锡箔帽，减少水分的散失、避免组合诱导剂见光分解，组合诱导剂处理时间为16小时，处理完毕，用5%硫代硫酸钠终止反应，并用无菌水将切口冲洗干净，得到处理组材料；另取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，不采用组合诱导剂处理，得到对照组材料；

（4）材料移栽、鉴定：观察经步骤（3）处理的处理组材料，在第20天，从切口处长出3-5个侧芽，2个月时，长出5-6片叶，此时，将处理组材料与对照组材料对比，选取处理组上与对照组相比有差异并且具有观赏价值的侧芽作为选育材料，用剪刀取下，将选育材料置于0.05-0.1%多菌灵和0.1-0.5mg/l吲哚丁酸混合溶液中进行杀菌和催根，然后移栽到进口芬兰诺万播基质novarbo培养土32孔育苗盘进行育苗，32孔育苗盘规格为：上口5.8cm×高5.0cm×底部3.0cm。

实施例4采用如下步骤实现本发明：

（1）材料处理前准备：选择长势好的、健康无病虫害的富贵竹材料，用剪刀把富贵竹顶端生长的茎叶逐层剪掉，直至顶端生长点为止，待顶端切口处呈干燥状态时，用条带把脱脂棉固定在切口处；

（2）组合诱导剂配置：以甲基磺酸乙酯、秋水仙素、二甲基亚砜混合均匀，配置组合诱导剂溶液；其中，甲基磺酸乙酯浓度为0.4%，秋水仙素浓度为0.1%，二甲基亚砜浓度为2%；

（3）组合诱导剂处理：取经过步骤（1）的富贵竹材料，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的地方，使组合诱导剂溶液浸透脱脂棉，然后盖上锡箔帽，减少水分的散失、避免组合诱导剂见光分解，组合诱导剂处理时间为12小时，处理完毕，用5%硫代硫酸钠终止反应，并用无菌水将切口冲洗干净，得到处理组材料；另取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，不采用组合诱导剂处理，得到对照组材料；

（4）材料移栽、鉴定：观察经步骤（3）处理的处理组材料，在第20天，从切口处长出3-5个侧芽，2个月时，长出5-6片叶，此时，将处理组材料与对照组材料对比，选取处理组上与对照组相比有差异并且具有观赏价值的侧芽作为选育材料，用剪刀取下，将选育材料置于0.05-0.1%多菌灵和0.1-0.5mg/l吲哚丁酸混合溶液中进行杀菌和催根，然后移栽到进口芬兰诺万播基质novarbo培养土32孔育苗盘进行育苗，32孔育苗盘规格为：上口5.8cm×高5.0cm×底部3.0cm。

实施例5采用如下步骤实现本发明：

（1）材料处理前准备：选择长势好的、健康无病虫害的富贵竹材料，用剪刀把富贵竹顶端生长的茎叶逐层剪掉，直至顶端生长点为止，待顶端切口处呈干燥状态时，用条带把脱脂棉固定在切口处；

（2）组合诱导剂配置：以甲基磺酸乙酯、秋水仙素、二甲基亚砜混合均匀，配置组合诱导剂溶液；其中，甲基磺酸乙酯浓度为0.5%，秋水仙素浓度为0.15%，二甲基亚砜浓度为2%；

（3）取经过步骤（1）的富贵竹材料，用移液枪将组合诱导剂滴入脱脂棉与切口接触的地方，使组合诱导剂溶液浸透脱脂棉，然后盖上锡箔帽，减少水分的散失、避免组合诱导剂见光分解，组合诱导剂处理时间为12小时，处理完毕，用5%硫代硫酸钠终止反应，并用无菌水将切口冲洗干净，得到处理组材料；另取经过步骤（1）处理的富贵竹材料，不采用组合诱导剂处理，得到对照组材料；

（4）材料移栽、鉴定：观察经步骤（3）处理的处理组材料，在第20天，从切口处长出3-5个侧芽，2个月时，长出5-6片叶，此时，将处理组材料与对照组材料对比，选取处理组上与对照组相比有差异并且具有观赏价值的侧芽作为选育材料，用剪刀取下，将选育材料置于0.05-0.1%多菌灵和0.1-0.5mg/l吲哚丁酸混合溶液中进行杀菌和催根，然后移栽到进口芬兰诺万播基质novarbo培养土32孔育苗盘进行育苗，32孔育苗盘规格为：上口5.8cm×高5.0cm×底部3.0cm。

经鉴定并，采用本发明上述实施例1-5的技术方方案，以混合诱导剂组合诱导处理，富贵竹侧芽诱变率在1.0-2.0%，有观赏价值诱变率0.1-0.5%。