一种用于间充质干细胞的冷冻液及制备方法与流程

文档序号:23094361发布日期:2020-11-27 12:52阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于间充质干细胞的冷冻液,其特征在于,包括按体积百分数计的如下组分:20wt%的人血清白蛋白5-30%、间充质干细胞条件培养基50-80%、羟乙基淀粉0.5-10%、山梨醇0.5-5%、硫辛酸0.1-1%、维生素d0.1-1%、维生素e0.1-1%以及二甲基亚砜和甘油混合物5-15%,其中,20wt%的人血清白蛋白的溶剂为生理盐水,所述间充质干细胞条件培养基为无血清基础培养基。

2.根据权利要求1所述的一种用于间充质干细胞的冷冻液,其特征在于,各所述组分的体积百分数为:20wt%的人血清白蛋白10-30%、间充质干细胞条件培养基55-75%、羟乙基淀粉0.5-10%、山梨醇0.5-5%、硫辛酸0.1-1%、维生素d0.1-1%、维生素e0.1-1%以及二甲基亚砜和甘油混合物8-15%。

3.根据权利要求1或2所述的一种用于间充质干细胞的冷冻液,其特征在于,所述无血清基础培养基为dmem/f12或rpmi1640。

4.根据权利要求1或2所述的一种用于间充质干细胞的冷冻液,其特征在于,所述二甲基亚砜和甘油混合物中的二甲基亚砜和甘油的质量比为1:1.1-2。

5.一种根据权利要求1所述的用于间充质干细胞的冷冻液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

s1、按照比例将间充质干细胞条件培养基和20wt%的人血清白蛋白进行混合;

s2、按照比例配制二甲基亚砜和甘油混合物,将二甲基亚砜和甘油混合物加入到s1步骤所制备的混合物中,然后再依次继续加入羟乙基淀粉、山梨醇、硫酸锌、维生素d和维生素e,并混合搅拌均匀,然后在冰水浴中降温至0℃。

6.根据权利要求5所述的一种用于间充质干细胞的冷冻液的制备方法,其特征在于,在配制二甲基亚砜和甘油混合物之前,需要将二甲基亚砜放入4℃的冰箱中冷冻存储10-30min。


技术总结
本发明提供一种用于间充质干细胞的冷冻液及制备方法,包括按体积百分数计的如下组分:20wt%的人血清白蛋白5‑30%、间充质干细胞条件培养基50‑80%、羟乙基淀粉0.5‑10%、山梨醇0.5‑5%、硫辛酸0.1‑1%、维生素D 0.1‑1%、维生素E 0.1‑1%以及二甲基亚砜和甘油混合物5‑15%,其中,20wt%的人血清白蛋白的溶剂为生理盐水,所述间充质干细胞条件培养基为无血清基础培养基。采用本发明的冷冻液对间充质干细胞进行冻存后复苏,细胞的回收率和复活率较高,说明本发明的冷冻液可用于长时间维持间充质干细胞的活性,且本发明冷冻液的制备方法简单易行,方便进行推广使用。

技术研发人员:王建波
受保护的技术使用者:江苏育瑞康生物科技有限公司
技术研发日:2020.09.09
技术公布日:2020.11.27
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