一种硫酸盐还原菌杀菌剂及其应用的制作方法

1.本发明属于石油工程污水处理技术领域，具体涉及一种硫酸盐还原菌杀菌剂及其应用。


背景技术：

2.油田污水及注水系统中存在大量的硫酸盐还原菌(srb)，该菌以将硫酸根还原为硫离子从而进行大量地繁殖导致地面设施及地下管线的腐蚀破坏以及硫化物污染，给油田造成了巨大的经济损失。
3.抑制srb的方法包括物理方法、化学方法和生物方法。物理方法包括：利用电离射线、超声波或反射线处理；改变介质环境，调整介质的ph值，当ph 值低于4时srb会停止生长；注入高矿化度水或盐水，通过渗透压降低细胞内部的水含量，可抑制srb生长；周期性地注入热水等。生物法，利用微生物之间的共生、竞争以及拮抗关系，可防止微生物对金属的腐蚀。化学法主要通过投加杀菌剂来抑制srb的繁殖。目前常用的杀菌剂类型包括季铵盐类及复配产品；醛类杀菌剂，如戊二醛、丙烯醛；含硫化合物及配产品，如二硫氰基甲烷、异噻唑啉酮；氧化类杀菌剂，如三氯新等；其它如季磷盐类。
4.中国专利申请cn107488166a公开了一种用于油田污水中硫酸盐还原菌的杀菌剂，该杀菌剂是由1-丙醇和2,2,6-三甲基-4-1,3-二氧环己烯-4-酮反应生成中间体，然后采用手性试剂进行拆分，得到最终的杀菌剂。该杀菌剂对油田污水中硫酸盐还原菌的杀菌率达到98％以上。
5.中国专利申请cn102669103a公开了一种用于杀灭硫酸盐还原菌的杀菌剂，其中各组分的重量百分比为：工业甲醛：22.5％-25.0％；医用甲硝唑：2.5％-3.5％；工业戊二醛：20.0％-25.05；水：余量。甲醛具有较强的毒性，大量投入该杀菌剂，会对现场工作人员的健康造成潜在威胁。
6.中国发明专利cn105145631b公开了一种储油罐硫酸盐还原菌抑制剂，其由以下质量份的组分组成：戊二醛或丙烯醛，60-100重量份，和/或十二烷基二甲基苄基溴化铵或十二烷基二甲基苄基氯化铵，30-70重量份；溶菌酶15-20重量份、以及蛋白酶20-30重量份；二邻苯乙二胺基乙酸盐10-20重量份，和/或乙二胺二琥珀酸盐10-20重量份；四羟甲基硫酸磷5-10重量份。该抑制剂含有溶菌酶和蛋白酶，生产成本较高。
7.目前，随着污水软化精细水处理系统的长时间应用，不断发现该系统输出的水中也含有大量的硫酸盐还原菌，申请人通过对污水软化精细水处理系统的生产节点的硫酸盐还原菌、ph值、含氧量、硫化物等检测和微生物样品采集、富集培养、菌株分离优化、基因测序、比较及分析等，首次在现场发现了ph＝10
‑ꢀ
11的高ph值的碱性环境下硫酸盐还原菌超标、菌群存在差异和变异情况。对于耐碱性更强和抗药性更强的硫酸盐还原菌，亟需更为有效的杀菌剂。
8.通过增加对系统的清洗频次和外输前增加常规杀菌剂的方式，srb仍然超标。因此，目前亟需有效抑制变异后硫酸盐还原菌的杀菌剂。


技术实现要素：

9.本发明主要目的在于提供一种硫酸盐还原菌杀菌剂。本发明所述硫酸盐还原菌杀菌剂能够有效抑制硫酸盐还原菌，尤其是对耐碱性、抗药性较强的变异硫酸盐还原菌抑制效果较强，解决了油田污水软化处理过程中，硫酸盐还原菌变异，耐碱性、抗药性增强，现有技术难以对其进行抑制的问题。
10.为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
11.本发明首先提供一种硫酸盐还原菌杀菌剂，其包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵10-40份，戊二醛0-20份，a杀菌剂10-30份，水10
‑ꢀ
80份；a杀菌剂为烷基双季胺盐、十二烷基胍盐酸盐、羟丙基双子季铵盐改性胍中的任一种。
12.进一步地，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵10-30份，烷基双季胺盐10-20份，水50-80份。将该杀菌剂命名为sh-1型杀菌剂。
13.更进一步地，所述烷基双季胺盐烷基碳原子数为10-18。
14.进一步地，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵10-20份，十二烷基胍盐酸盐10-20份，戊二醛4-15份，水45-76份。将该杀菌剂命名为sh-2型杀菌剂。
15.进一步地，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵10-20份、羟丙基双子季铵盐改性胍10-20份、戊二醛4-20份，水40-76份。将该杀菌剂命名为sh-3型杀菌剂。
16.更进一步地，羟丙基双子季铵盐改性胍中烷基碳原子数为10-18。
17.本发明还提供以上所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理中的应用。
18.与现有技术相比，本发明具有以下技术优势：
19.本发明所述硫酸盐还原菌杀菌剂组成简单，对硫酸盐还原菌，尤其是耐碱和变异的硫酸盐还原菌杀菌效果显著。在油田污水软化处理过程中仅需增加少量本发明所述杀菌剂，处理后水中硫酸盐还原菌小于等于25个/ml，可达到a级水质；将处理后的水回注地层，可大大减少对地层的伤害，并且抑菌、防结、防腐效果显著。
附图说明
20.图1为本发明所述污水软化过程处理图；
21.图2为门水平物种分布柱状图；
22.图3为属水平群落heatmap图；
23.图4为chao指数图；
24.图5为ace指数图；
25.图6为shannon指数图；
26.图7为simpson指数图；
27.图8为weighted unifrac热图；
28.图9为unweighted unifrac热图；
29.图10为基于weighted unifrac的pcoa；
30.图11为基于unweighted unifrac的pcoa；
31.图12为unweighted unifrac tree图；
32.图13为unweighted unifrac tree图；
33.图14为基于weighted unifrac的nmds；
34.图15为基于unweighted unifrac的nmds；
35.图16为门水平差异性矩阵热图；
36.图17为种水平样品聚类树与柱状图组合分析图。
具体实施方式
37.应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
38.需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。
39.为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
40.实施例1
41.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，其由以下成分及其重量份组成：十二烷基二甲基苄基氯化铵10份、十二烷基胍盐酸盐10份、戊二醛4份，水76份。
42.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，如图1所示，具体包括以下步骤：
43.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.6，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
44.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 9.0；经多介质过滤器后，加入实施例1所述杀菌剂50mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
45.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
46.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
47.实施例2
48.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，其由以下成分及其重量份组成：十二烷基二甲基苄基氯化铵13份、十二烷基胍盐酸盐14份、戊二醛5份，水68份。
49.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
50.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.8，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
51.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 8.9；经多介质过滤器后，加入实施例2所述杀菌剂55mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
52.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形
成泥饼后外运；
53.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
54.实施例3
55.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，其由以下成分及其重量份组成：十二烷基二甲基苄基氯化铵20份、十二烷基胍盐酸盐20份、戊二醛15份，水55份。
56.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
57.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至11，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
58.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 9.0；经多介质过滤器后，加入实施例3所述杀菌剂50mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
59.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
60.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
61.实施例4
62.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵10份，十(十二)烷基双季胺盐10份，水80份。
63.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
64.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.7，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
65.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 8.8；经多介质过滤器后，加入实施例4所述杀菌剂48mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
66.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
67.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
68.实施例5
69.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵30份，十八烷基双季胺盐20份，水50份。
70.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
71.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.9，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
72.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 8.9；经多介质过滤器后，加入实施例5所述杀菌剂50mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
73.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
74.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
75.实施例6
76.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵12份，十二烷基双季胺盐15份，水73份。
77.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
78.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.7，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
79.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 8.9；经多介质过滤器后，加入实施例6所述杀菌剂46mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
80.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
81.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
82.实施例7
83.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵10份、羟丙基双子季铵盐改性胍10份、戊二醛4份，水76 份。
84.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
85.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至11.1，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
86.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至9.0；经多介质过滤器后，加入实施例7所述杀菌剂52mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
87.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
88.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
89.实施例8
90.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵13份、羟丙基双子季铵盐改性胍14份、戊二醛15份，水68 份。
91.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
92.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.8，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
93.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 8.8；经多介质过滤器后，加入实施例8所述杀菌剂55mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
94.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
95.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
96.实施例9
97.一种硫酸盐还原菌杀菌剂，所述杀菌剂包括以下成分及其重量份：十二烷基二甲基苄基氯化铵20份、羟丙基双子季铵盐改性胍20份、戊二醛20份，水40 份。
98.所述硫酸盐还原菌杀菌剂在油田污水软化处理过程中的应用，包括以下步骤：
99.步骤1.油田污水进入软化罐进行软化处理时，先将软化罐内水溶液ph值调至10.9，再加入絮凝剂进行沉降，得低硬度软化水；
100.步骤2.低硬度软化水进入酸碱中和罐时，将酸碱中和罐内水溶液ph值调至 9.0；经多介质过滤器后，加入实施例9所述杀菌剂52mg/l后再进行金属膜过滤器过滤，并输送至注水罐；
101.步骤3.经软化罐排出的沉积泥排至沉泥池，然后输送至压泥机，进行固液分离，形成泥饼后外运；
102.步骤4.将沉泥池上部清水排入清水池，进行循环利用。
103.(一)对软化水处理过程中各节点硫酸盐还原菌进行检测
104.桩74站正常运行状态下，从2019.9.15～9.19，现场沿程取样检测5天，检测各节点srb、ph、硫化物、溶解氧等指标，实验数据见表1、表2。
105.表1桩74站沿程污水srb菌检测表
106.[0107][0108]
表2桩74站沿程污水检测表
[0109]
[0110][0111]
(1)来水的ph值在7左右，srb范围为6～250个/ml，工程设计ph值控制在10.0-10.5左右，以控制srb菌的生存与生长。检测数据显示加碱软化后软化罐出口ph值在10.20左右，srb范围为2.5
×
102～2.5
×
104个/ml，结合排泥口srb数值2.5
×
104～2.5
×
105个/ml，初步推断在软化罐罐底污泥存在细菌滋生繁殖和变异现象；
[0112]
(2)中和罐用盐酸调节ph值在9.0，srb数值6
×
102～2.5
×
104个/ml，较软化罐细菌略有增长；
[0113]
(3)金刚砂滤罐ph值在9.0，srb数值2.5
×
103～2.5
×
104个/ml，均较中和罐出口提高了一个数量级，结合金刚砂滤罐反冲洗水中srb数值6
×
102～ 2.5
×
104个/ml，可初步推断截留的沉淀颗粒无法完全被反冲洗干净，金刚砂滤料可能被污染；
[0114]
(4)金属膜滤罐出口ph值在9.00,srb数值2.5
×
102～2.5
×
103个/ml，比金刚砂滤罐降了一个数量级，说明金属膜滤罐有一定的截留效果。
[0115]
(5)污水池污水来源于污泥池上部，srb数值2.5
×
103～2.3
×
103个/ml，与排泥口(2.5
×
104～2.5
×
105个/ml)相比较，srb数值降低一个数量级，与污泥池敞口曝氧有关。
[0116]
(6)反冲洗缓冲罐污水、污水池污水进入软化回收罐(污水池污水是24 小时往软化回收罐打水，反冲洗则是12小时一次，在缓冲罐沉降一段时间后再打到软化回收罐)，srb数值2.5
×
102～2.5
×
103个/ml。
[0117]
综上所述，srb菌超标节点为：软化罐污水、金刚砂滤料和反冲洗水质；金刚砂滤料有被污染的可能性，污水经过会造成二次污染，反冲洗效果不明显，需定期清洗滤料。srb菌在软化罐ph值10.2左右并没有得到有效抑制，需要对来水进行室内调节ph实验，排除现场其他因素干扰，单独考察ph对srb的影响。
[0118]
(二)考察ph值对srb细菌的影响
[0119]
用30％naoh调整来水至不同ph值，考察ph值对桩74站污水系统来水及软化罐出水的srb菌的杀菌效果，结果分别如表3、表4所示。
[0120]
表3桩74站来水调节ph值实验
[0121][0122]
表4桩74站软化罐出水调节ph值实验
[0123][0124][0125]
由表3、表4可知，对于桩74站来水，室内调节ph值对srb菌有较明显的抑制效果，ph到9时srb含量25个/ml；但对于软化罐出水，ph值对srb 抑制不起作用，说明软化罐水中细菌在不断补充新水的动态环境下对高ph值适应性增强，需要进一步考察常规杀菌剂对srb细菌的效果。
[0126]
(三)考察杀菌剂对srb细菌的影响
[0127]
取现场软化罐出水，室内进行杀菌剂的筛选，在现场温度40℃下，取不同型号杀菌剂，选取不同投加浓度，考察其对软化罐出水中srb菌的杀菌效果，以确定适宜的投加浓度。试验结果见表5。
[0128]
表5杀菌剂筛选评价
[0129][0130][0131]
软化罐出水srb含量6
×
102个/ml，现场杀菌剂在检测浓度范围内对软化罐出水杀菌效果不好，常规sj杀菌剂对其没有效果。考虑菌群有可能产生进化变异，下一步需要对菌株进行分离鉴定。
[0132]
(四)微生物菌群分离及群落多样性分析
[0133]
取桩74沿程水样和泥样，对样品进行了菌株分离，考察各样品间的微生物群落区别。
[0134]
表6微生物群落分析样品名称及编号
[0135]
样品编号取样地点1#桩西联过滤器出水2#桩74来水3#桩74软化罐出水4#桩74污水回收罐出水1#泥样：软化罐中心筒2#泥样：泥污池底
[0136]
(1)群落结构组成柱状图
[0137]
根据分类学分析结果，可以得知一个或多个样品在各分类水平上的分类学比对情况。在结果中，包含了两个信息：样品中含有何种微生物；样品中各微生物的序列数，即各微生物的相对丰度。由图2可知，样品3、4在门分类水平上的群落结构与其余两组有明显差异。
[0138]
(2)群落heatmap图
[0139]
群落heatmap图可以用颜色变化来反映二维矩阵或表格中的数据信息，它可以直观地将数据值的大小以定义的颜色深浅表示出来。常根据需要将数据进行物种或样品间丰度相似性聚类，将聚类后数据表示在heatmap图上。由图3可知，样品3、4在属分类水平上的物种或样品间丰度相似性聚类与其余两组有明显差异。
[0140]
(3)alpha多样性分析(alpha-diversity)
[0141]
alpha多样性(alpha diversity)包括chao指数、ace指数，shannon指数以及simpson指数等。前面3个指数越大，最后一个指数越小，说明样品中的物种越丰富。
[0142]
chao指数和ace指数反映样品中群落的丰富度(species richness)，即简单指群落中物种的数量，而不考虑群落中每个物种的丰度情况。这2个指数对应的稀释曲线还可以反映样品测序量是否足够。如果曲线趋于平缓或者达到平台期时也就可以认为测序深度已经基本覆盖到样品中所有的物种；反之，则表示样品中物种多样性较高，还存在较多未被测序检测到的物种。
[0143]
由图4、图5可知，样品3、4在群落的数量比其余两组明显较少。
[0144]
而shannon指数以及simpson指数反映群落的多样性(species diversity)，受样品群落中物种丰富度(species richness)和物种均匀度(species evenness)的影响。相同物种丰富度的情况下，群落中各物种具有越大的均匀度，则认为群落具有越大的多样性。
[0145]
由图6、图7也可以反映出，样品3、4在群落的丰富度及多样性比其余两组明显较少。
[0146]
(4)beta多样性分析(beta-diversity)
[0147]
与alpha多样性分析不同，beta多样性(beta diversity)分析是用来比较一对样品在物种多样性方面存在的差异大小。分析各类群在样品中的含量，进而计算出不同样品间的beta多样性值。
[0148]
多种指数可以衡量beta多样性，常用的为bray-curtis，weighted unifrac，unweighted unifrac。
[0149]
1)(un)weighted.unifrac加权分析
[0150]
unifrac分析利用各样品序列间的进化信息来比较环境样品在特定的进化谱系中是否有显著的微生物群落差异。unifrac可用于beta多样性的评估分析，即对样品两两之间
进行比较分析，得到样品间的unifrac距离矩阵。
[0151]
unweighted unifrac可以检测样品间变化的存在，而weighted unifrac可以更进一步定量的检测样品间不同谱系上发生的变异。
[0152]
表7 weighted unifrac差异性矩阵
[0153] 11_mud22_mud34100.5387130.1858550.5615890.7957790.7765541_mud0.53871300.5608050.3201730.7746470.72001120.1858550.56080500.6047180.80380.7901322_mud0.5615890.3201730.60471800.6893350.65061530.7957790.7746470.80380.68933500.08757640.7765540.7200110.7901320.6506150.0875760
[0154]
将表7可视化，可得图8；
[0155]
表8 unweighted unifrac差异性矩阵
[0156][0157][0158]
将表8可视化，可得图9；
[0159]
由表7、表8、图8、图9可知，颜色较重的红色代表微生物群落差异大，即样品3、4与1、2水样在不同谱系上差异巨大；颜色为橘红或橘黄色的差异性居中，即样品3、4与1、2泥样差异性较1、2水样稍小，但仍具有一定的差异性。
[0160]
2)基于(un)weighted.unifrac的pcoa
[0161]
unifrac分析得到的距离矩阵可用于多种分析方法，可通过多变量统计学方法pcoa分析，直观显示不同环境样品中微生物进化上的相似性及差异性。
[0162]
pcoa(principal co-ordinates analysis)是一种研究数据相似性或差异性的可视化方法，通过一系列的特征值和特征向量进行排序后，选择主要排在前几位的特征值，pcoa可以找到距离矩阵中最主要的坐标，结果是数据矩阵的一个旋转，它没有改变样品点之间的相互位置关系，只是改变了坐标系统。通过pcoa可以观察个体或群体间的差异。
[0163]
由图10、图11可知，在第一主成分中样品3、4与其他四个样品微生物进化上差异较大，在第二主成分中样品1、2与1#、2#泥样差异较大，3、4居其中。
[0164]
3)基于(un)weighted.unifrac的多样品相似度树分析
[0165]
unifrac分析得到的距离矩阵可用于多种分析方法，通过层次聚类 (hierarchical cluatering)中的非加权组平均法upgma构建进化树等图形可视化处理，可以直观显示不同环境样品中微生物进化上的相似性及差异性。
[0166]
upgma(unweighted pair group method with arithmetic mean)假设在进化过程中所有核苷酸/氨基酸都有相同的变异率，即存在着一个分子钟。通过树枝的距离和聚类的远近可以观察样品间的进化距离。
[0167]
由图12、13可知，样品3、4与其余四个样品不在一个分支上，差异性较大。
[0168]
4)基于(un)weighted.unifrac的非度量多维尺度分析
[0169]
非度量多维尺度法是一种将多维空间的研究对象(样本或变量)简化到低维空间进行定位、分析和归类，同时又保留对象间原始关系的数据分析方法。适用于无法获得研究对象间精确的相似性或相异性数据，仅能得到他们之间等级关系数据的情形。其特点是根据样品中包含的物种信息，以点的形式反映在多维空间上，而对不同样品间的差异程度，则是通过点与点间的距离体现的，最终获得样品的空间定位点图。由图14、15可知，样品3、4在加权后距离样品1、2较远，差异性较大，与1#、2#泥样也有一定的差异性。
[0170]
5)基于物种信息的bray-curtis距离分析
[0171]
bray-curtis距离是反映两个群落之间差异性的常用指标。bray-curtis距离的计算不考虑序列间的进化距离，只考虑样品中物种存在情况。bray-curtis距离的值在0-1之间，值越大表示样品间的差异越大。由图16可知，样品3、4与 1#、2#泥样在门水平上群落间差异较大，与样品1、2在门水平上有一定的差异。
[0172]
6)多样品相似度树与柱状图组合分析
[0173]
由图17可知，样品3、4在种水平与其他四个样品有非常大的差异。
[0174]
通过以上分析可知，桩74软化罐出水及软化回收罐出水与桩西联过滤器出水、桩74来水、软化罐中心筒污泥、污泥池底污泥相比较，在菌群组成和分布上均有较大的差异：微生物种类及含量有较大变化；各分类水平上群落组成的差异性较大；进一步定量的样品间不同谱系上发生了变异。
[0175]
取现场油田油田产出水软化精细水处理一级过滤装置进口硫酸盐还原菌在 2500-25000个/ml的水样，考察实施例1所述杀菌剂(sh-2型)、实施例4所述杀菌剂(sh-1型)、实施例7所述杀菌剂(sh-3型)的作用效果评价试验，各类杀菌剂的使用浓度分别为40mg/l、50mg/l、60mg/l；具体杀菌效果如下表9所示。
[0176]
表9 sh-1型、sh-2型、sh-3型杀菌剂室内杀菌效果
[0177]
[0178]
表9看出，实施例1、实施例4、实施例7所述三种杀菌剂在室内加药40
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50mg/的情况，srb菌控制在25个/ml以内；以上所述杀菌剂杀菌效果明显好于1227杀菌剂。
[0179]
现场试验考察杀菌剂杀菌效果，所得结果分别如下表10、表11、表12所示。
[0180]
表10实施例1所述杀菌剂型现场试验加药效果
[0181][0182][0183]
2019.10.8～2019.10.20，现场连续13天在过滤器后进行药剂优化试验，从表 10看出，实施例1所述杀菌剂在桩74站污水srb菌的控制中具有良好的效果，回注水在加药量为45mg/l时srb菌控制在6个/ml以内，满足了生产的要求。
[0184]
表11实施例4所述杀菌剂型现场试验加药效果
[0185][0186][0187]
2019.11.1～2019.11.21，现场连续13天在过滤器后进行药剂优化试验，从表 11看出，实施例4所述杀菌剂在桩74站污水srb菌的控制中具有良好的效果，回注水在加药量为45mg/l时srb菌控制在25个/ml以内，满足了生产的要求。
[0188]
表12实施例7所述杀菌剂现场试验加药效果
[0189][0190]
2019.12.25～2020.1.6，现场连续13天在过滤器后进行药剂优化试验，从表12看出，实施例7所述杀菌剂在桩74站污水srb菌的控制中具有良好的效果，回注水在加药量为45mg/l时srb菌控制在25个/ml以内，满足了生产的要求。
[0191]
2019.12.18～2021.3.24，现场检测15次74站在现场外输水质，从表13看出，以上所述杀菌剂在桩74站污水srb菌的控制中具有良好的效果。
[0192]
表13桩74站现场外输水质检测效果
[0193][0194]
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。