一种蝴蝶兰的组织培养基及其繁殖方法与流程

1.本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰的组织培养基及其繁殖方法。


背景技术：

2.蝴蝶兰[phalaenopsis]为兰科蝴蝶兰属植物，它是一种热带气生兰，俗称“洋兰”。蝴蝶兰花型似蝴蝶，形态美妙﹑色彩丰富﹑花期长，在热带兰中素有“兰花皇后”之美称。蝴蝶兰种类丰富，分布广，东起菲律宾、新几内亚，南达澳大利亚北部，西苏门答腊，北到我国台湾、云南、四川西部均有原种(野生的蝴蝶兰〉存在，约有50多种，其中我国有7种，全部为附生兰。蝴蝶兰商品化大规模栽培十分成功，是近年来在国际花卉市场上最受欢迎的洋兰。从离体器官诱导产生类原球茎，通过类原球茎的增殖培养，得到大量幼苗，为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。


技术实现要素：

[0003]
本发明所要解决的技术问题是：针对已有蝴蝶兰组培技术中存在的不定芽繁殖系数偏低,从而影响增殖效率与种苗质量的缺陷提供一种能快速\高效获得大量优质种苗的蝴蝶兰组织培养基及繁殖方法。
[0004]
为解决上述技术问题，采用的技术方案为：一种蝴蝶兰的组织培养基，所述培养基包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基；
[0005]
所述的诱导培养基为ms+ba3.5mg/l+naa0.2mg/l+蛋白陈2g/l+椰汁 100ml/l+白糖20g/l+琼脂5g/l，ph＝5.5-5.6。
[0006]
所述的增殖培养基为1/2ms+6-ba 3.5mg/l+kt1.0mg/l+naa0. 4mg/l+蛋白陈2g/l+椰汁100ml/l+白糖20g/l，琼脂5g/l，ph＝5.5-5.6；
[0007]
所述的壮苗培养基为ms+6-ba2mg/l+蛋白陈2g/l+椰汁100ml/l+糖 30g/l+琼脂5g/l，ph＝5.5～5.6；
[0008]
所述的生根培养基为1/2ms+ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+白糖25g/l+琼脂 6g/l+80g/l香蕉泥，ph＝5.5-5.6。
[0009]
所要解决的第二个技术问题是：一种蝴蝶兰的组织培养繁殖的方法，其步骤包括：
[0010]
1)材料消毒：花梗花朵开放2～3朵时采切花梗作为外植体材料；将花梗剪成一芽一段，用自来水清洗干净，无菌水冲洗干净，将每段花梗芽剥去苞皮，用70vol.％酒精与0.1wt.％升汞水溶液形成的混合液浸泡7min灭菌，无菌水冲洗5-6次后，备用；
[0011]
2)外植体接种：将灭菌后花梗段接种到诱导培养基中，在25～28℃、光强1800lx、光照11h/d组培条件下培养6-7天，侧芽膨大并向外伸长到1.0-2.0cm 时成外植体无菌苗；
[0012]
3)组培苗的增殖培养：将诱导的芽切去叶片和基部接种到增殖培养基中，在25～28℃、光强1500～2000lx，光照12h/d，增殖倍数＞5；
[0013]
4)壮苗培养：将增殖的芽切分开转接到壮苗培养基中，培养温度23～27℃，光照
1500～2000lx，每天光照10～12h，培养5～10天；
[0014]
5)生根培养：将经壮苗培养后的蝴蝶兰苗接种到生根培养基中，培养温度23～27℃，光照1500～2000lx，每天光照12h，培养至少具有2条≥长5cm 的根；
[0015]
6)炼苗驯化：将定植子瓶苗转至驯化温室驯化炼苗20～25天；
[0016]
7)移栽：瓶苗在出瓶后，分为大苗及小苗，大苗两叶距在4cm以上，可直接种在1.5"软盆中，根系＜4cm或两叶距小于4cm者种于穴盘中；瓶苗种完后立即喷施多菌灵1500倍；光度应保持在2200～2500lx，日温保持在26～ 28℃，夜温保持在23～24℃，相对湿度在70％～75％。
[0017]
有益效果：具有增殖培养期短，繁殖系数高，移栽成活率可高达99％以上，以上是一种高效、快速提供优质蝴蝶兰种苗的方法。
[0018]
采用本发明的方法，即可大量得到可出瓶种植的种苗是一种不受季节等因素影响，高效、快速提供优质蝴蝶兰种苗的方法，可以加速良种推广速度。
具体实施方式
[0019]
下面结合本发明的方法予以进一步地说明，但并不因此而限制本发明。
[0020]
实施例
[0021]
一种蝴蝶兰的组织培养繁殖的方法，其步骤包括：
[0022]
1)材料消毒：花梗花朵开放2～3朵时采切花梗作为外植体材料；将花梗剪成一芽一段，用自来水清洗干净，无菌水冲洗干净，将每段花梗芽剥去苞皮，用70vol.％酒精与0.1wt.％升汞水溶液形成的混合液浸泡7min灭菌，无菌水冲洗5-6次后，备用；
[0023]
2)外植体接种：将灭菌后花梗段接种到诱导培养基中，在25～28℃、光强1800lx、光照11h/d组培条件下培养6-7天，侧芽膨大并向外伸长到1.0-2.0cm 时成外植体无菌苗；
[0024]
所述的诱导培养基为ms+ba3.5mg/l+naa0.2mg/l+蛋白陈2g/l+椰汁 100ml/l+白糖20g/l+琼脂5g/l，ph＝5.5-5.6。
[0025]
实施例1-3结果
[0026][0027]
3)组培苗的增殖培养：将诱导的芽切去叶片和基部接种到增殖培养基中，在25～28℃、光强1500～2000lx，光照12h/d，增殖倍数＞5；
[0028]
所述的增殖培养基为1/2ms+6-ba 3.5mg/l+kt1.0mg/l+naa0. 4mg/l+蛋白陈2g/l+椰汁100ml/l+白糖20g/l，琼脂5g/l，ph＝5.5-5.6；
[0029][0030]
4)壮苗培养：将增殖的芽切分开转接到壮苗培养基中，培养温度23～27℃，光照1500～2000lx，每天光照10～12h，培养5～10天；
[0031]
所述的壮苗培养基为ms+6-ba2mg/l+蛋白陈2g/l+椰汁100ml/l+糖 30g/l+琼脂5g/l，ph＝5.5～5.6；
[0032]
5)生根培养：将经壮苗培养后的蝴蝶兰苗接种到生根培养基中，培养温度23～27℃，光照1500～2000lx，每天光照12h，培养至少具有2条≥长5cm 的根；
[0033]
所述的生根培养基为1/2ms+ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+白糖25g/l+琼脂 6g/l+80g/l香蕉泥，ph＝5.5-5.6。
[0034][0035]
6)炼苗驯化：将定植子瓶苗转至驯化温室驯化炼苗20～25天；
[0036]
7)移栽：瓶苗在出瓶后，分为大苗及小苗，大苗两叶距在4cm以上，可直接种在1.5"软盆中，根系＜4cm或两叶距小于4cm者种于穴盘中；瓶苗种完后立即喷施多菌灵1500倍；光度应保持在2200～2500lx，日温保持在26～ 28℃，夜温保持在23～24℃，相对湿度在70％～75％。