技术特征：
1.一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、实验菌液的制备所述菌液包括大肠杆菌菌液和金黄色葡萄球菌菌液；将大肠杆菌母液稀释，得到大肠杆菌菌液，所述大肠杆菌菌液的浓度为0.2mg/ml；将金黄色葡萄球菌菌株进行摇床培养，当金黄色葡萄球菌扩增至对数期，其后重悬至2
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108cfu/ml，得到金黄色葡萄球菌菌液；s2、选择小鼠选择性成熟期8-10周的小鼠，所述小鼠中母鼠：公鼠的比例为2:1；s3、实验小鼠的处理麻醉小鼠：向所述小鼠的腹腔注射麻醉剂，待所述小鼠完全麻醉后，正面朝上仰卧保定小鼠，进行脱毛，将小鼠乳头暴露，并用酒精棉球擦拭小鼠乳腺及乳腺周围的皮肤，充分消毒，保持乳腺及乳腺周围皮肤的清洁干净；乳腺处理：利用手术镊将所述小鼠的第四对乳头夹起，并利用手术剪将乳尖剪去，剪除的部位长1mm；注射菌液：利用平头微量注射器吸取0.2mg/ml的lps 50μl或2
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108cfu/ml的金黄色葡萄球菌液20μl，将所述平头微量注射器延伸至所述第四对乳头的乳导管中，延伸深度为4-5mm，所述平头微量注射器垂直进入所述乳导管中，缓慢将所述平头微量注射器中的菌液注入乳腺中，然后缓慢旋转所述平头微量注射器离开乳导管；s4、一段时间后，对所述小鼠进行眼球采血后处死，制备病理切片。2.根据权利要求1所述的一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，其特征在于：步骤s2中所述小鼠均在哺乳期第七天，所述小鼠与仔鼠至少隔离1h，停止哺乳并禁食。3.根据权利要求2所述的一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，其特征在于：所述小鼠为balb/c小鼠、昆明小鼠、c57小鼠任意几种。4.根据权利要求1所述的一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，其特征在于：步骤s3中所述麻醉剂为10％的水合氯醛，所述水合氯醛的注射量为0.1ml。5.根据权利要求1所述的一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，其特征在于，步骤s4中，所述病理切片的制备方法为：沿所述小鼠下腹的腹中线切开皮肤，向两侧拨开分离，将第四对乳腺暴露出，将所述第四对乳腺剥离下来，一侧的乳腺放入4％的多聚甲醛溶液中，制作病理切片，剩余乳腺组织放入4℃冰箱短期保存或﹣80℃冰箱冻存，用于后期实验。6.根据权利要求1所述的一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，其特征在于：实验菌液的具体制备步骤如下：将1mg/ml的大肠杆菌055：b5母液通过pbs溶液进行稀释，稀释至0.2mg/ml浓度，即为大肠杆菌菌液；将所述金黄色葡萄球菌atcc 35556菌株接种至肉汤培养基中，在37℃、ph为7.4的摇床环境下进行扩增培养，当所述金黄色葡萄球菌扩增至对数期后，使用高压灭菌后的pbs溶液进行重悬，重悬至所述金黄色葡萄球菌的浓度为2
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108cfu/ml，其后置于4℃下进行保存，
即为金黄色葡萄球菌菌液。
技术总结
本发明公开了一种建立实验小鼠乳腺炎模型的方法，包括以下步骤：大肠杆菌菌液和金黄色葡萄球菌菌液的制备；选择性成熟期的小鼠；向所述小鼠的腹腔注射麻醉剂，并用酒精棉球擦拭小鼠乳腺及乳腺周围的皮肤；利用手术镊将所述小鼠的第四对乳头夹起，并利用手术剪将乳尖剪去，剪除的部位长1mm；利用平头微量注射器吸取菌液20μL，将所述平头微量注射器延伸至所述第四对乳头的乳导管中，延伸深度为4-5mm，所述平头微量注射器垂直进入所述乳导管中，缓慢将菌液注入乳腺中，然后缓慢旋转所述平头微量注射器离开乳导管；对所述小鼠进行眼球采血后处死，制备病理切片；本发明有效提高乳腺炎模型的成功构建概率，使得成模率搞到95％。使得成模率搞到95％。
技术研发人员：关晴 李春义
受保护的技术使用者：长春科技学院
技术研发日：2022.07.26
技术公布日：2022/10/21