一种金针菇菌种的培育方法与流程

本发明涉及食用菌领域，特别涉及一种金针菇菌种的培育方法。

背景技术：

1、金针菇是秋冬与早春栽培的食用菌，以其菌盖滑嫩、柄脆、味美适口而著称于世，特别是凉拌菜和火锅的上好食材，其营养丰富、清香扑鼻而且味道鲜美，深受大众的喜爱。

2、金针菇常采用组织分离法育种技术培养菌丝。通常是取菇帽和菇柄连接处的生长点，放置在pda平板上进行培养，生长点会萌发出菌丝，通过分离纯化、活化、出菇试验，验证该子实体菌种的性能。

3、目前，这种育种技术存在以下问题：

4、1、子实体分离纯化提取的菌种基本都是在pda化学培养基上进行纯化和继代，难以提升分离菌种的活性；

5、2、组织分离提取的菌种性状不稳定，使用周期短。

6、因此，如何设计一种培育菌种质量稳定、活力强的方法，是本领域技术人员亟待解决的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种金针菇菌种的培育方法，其培育过程简单、方便，培育成本低，培育得到的金针菇菌种质量稳定、活力强，满足企业的实际需求。

2、本发明的技术方案是：一种金针菇菌种的培育方法，包括以下步骤：

3、1)制备培养基ⅰ

4、取35-40重量份寒天培养基、5-10重量份琼脂粉，加入水中混匀，灭菌制成固体培养基待用；

5、2)制备培养基ⅱ

6、取木屑、米糠混合，含水率为60-65％，且ph≥6.0，木屑、米糠的质量比为6-7:3-4，灭菌待用，所述木屑为粒度≤2mm的杨木屑，经发酵得到；

7、3)取金针菇子实体，消毒，切取菇帽和菇柄连接处的生长点，接种至固体培养基ⅰ上，且生长点的切面与培养基ⅰ接触，在封闭环境中，于18±0.5℃条件中培养10-13d；

8、4)将气生菌丝的延伸端刮掉1-2cm，且在固体培养基ⅰ上沿气生菌丝的边缘切割多个第一接种块；

9、5)将步骤4)得到的第一接种块接种在另一固体培养基ⅰ上，在18±0.5℃培养8-10d；

10、6)将气生菌丝的延伸端刮掉1-2cm，且在固体培养基ⅰ上切割多个第二接种块；

11、7)将步骤6)得到的第二接种块接种至培养基ⅱ上，在封闭环境中，于19℃条件下培养，至菌丝往下生长至7-9cm；

12、8)切去菌丝中间高度上部的培养基ⅱ，在下部的培养基ⅱ上切割多个第三接种块；

13、9)将步骤8)得到的第三接种块接种至pda平板培养基上，在封闭环境中，于18±0.5℃条件下培养10-15d；

14、10)转接至另一pda平板培养基上，至生长成熟，得到金针菇菌种。

15、进一步的，步骤1)寒天培养基与水的重量体积比为35-45：1000。

16、优选的，步骤1)寒天培养基、琼脂粉、水的质量体积比为35-45：3-6：1000。

17、优选的，步骤1)得到的固体培养基ⅰ的厚度为4-6cm。

18、优选的，步骤2)木屑、米糠的质量比为6.2：3.8，含水率为64％。

19、进一步的，步骤4)通过打孔得到第一接种块，第一接种块的直径为4mm。

20、进一步的，步骤6)通过打孔得到第二接种块，第二接种块的直径为4mm。

21、进一步的，步骤8)第三接种块的尺寸为4mm*4mm*4mm。

22、采用上述技术方案具有以下有益效果：

23、1、本发明培育方法，通过两级培养基ⅰ活化、且在培养基ⅱ中复壮，最后在pda平板培养基上纯化，培育得到的金针菇菌种活力强。培养基ⅱ、pda平板培养基上生成的菌丝浓白、活力好，粉孢子少，摇瓶液体菌种的菌球大小均匀，菌刺长短适中，菌液无明显分层，且使用周期可延长至少3个月。

24、2、本发明培育方法，配置的培养基ⅰ用于活化接种的金针菇生长点，金针菇生长点在培养基上快速萌发、生长，得到活化菌种。配置的培养基ⅱ用于复壮活化后的菌种，最后采用pda平板培养基纯化复壮后的菌种，利用培养基i 和pda培养基作为活化、纯化的培养基，使菌种快速萌发生长，利用培养基ii 对菌种进行复壮，最终得到活化、脱毒纯化、活力佳的菌种。

25、3、本发明先利用分离的金针菇生长点在培养基ⅰ上培养10-13d，切取含有菌丝的培养基ⅰ，且接种至另一培养基ⅰ上，在18±0.5℃，培养8-10d，使得另一培养基ⅰ上生长得到的菌种完成活化、纯化、脱毒，得到单一菌种。再将活化后的菌种接种至培养基ⅱ中，且切去培养基ⅱ的上部，取中部培养基湿度适中、菌丝菌龄适中的培养基进行转接，使菌种在下一步操作中能够快速的生长萌发。

26、经申请人试验验证，采用本发明培育得到的金针菇菌种，与原菌种相比，活力提升，菌丝浓白程度提升，粉孢子数量明显减少，摇瓶液体菌种的菌球大小均匀，菌刺长短适中，生产种菌液菌丝含量稳定在1.1-1.3质检，且栽培得到的金针菇子实体的菇盖大小适中，菇体紧实，是优质的金针菇产品。

27、下面结合附图和具体实施方式作进一步的说明。

技术特征：

1.一种金针菇菌种的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，步骤1)寒天培养基与水的重量体积比为35-45：1000。

3.根据权利要求2所述的培育方法，其特征在于，步骤1)寒天培养基、琼脂粉、水的质量体积比为35-45：3-6：1000。

4.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，步骤1)得到的固体培养基ⅰ的厚度为4-6cm。

5.根据权利要求1所述的金针菇菌种的培育方法，其特征在于，步骤2)木屑、米糠的质量比为6.2：3.8，含水率为64％。

6.根据权利要求1所述的金针菇菌种的培育方法，其特征在于，步骤4)通过打孔得到第一接种块，第一接种块的直径为4mm。

7.根据权利要求1所述的金针菇菌种的培育方法，其特征在于，步骤6)通过打孔得到第二接种块，第二接种块的直径为4mm。

8.根据权利要求1所述的金针菇菌种的培育方法，其特征在于，步骤8)第三接种块的尺寸为4mm*4mm*4mm。

技术总结
一种金针菇菌种的培育方法，通过选取生长良好的子实体，并进行组织分离，在培养基Ⅰ上进行活化、脱毒，然后通过培养基Ⅱ进行复壮并进行出菇验证，实现子实体组织分离菌种的快速活化复壮。本发明培育过程简单、方便，培育成本低，培育得到的金针菇菌种质量稳定、活力强，满足企业的实际需求。

技术研发人员：余娱乐,余清,向超,李世文,罗亚玲,郑海霞,易思富
受保护的技术使用者：重庆华绿生物有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12