真菌来源的组合物、其生产方法和用途与流程

本发明总体上涉及包括来源于灵芝(ganoderma lucidum)真菌的物质的组合物和方法。特别地，本发明涉及包含从所选的灵芝(g.lucidum)株系可获得的生物学活性化合物的混合物的组合物，用于生产所述组合物的方法及其用途，特别地，在预防传播性病毒感染、消毒和生产个人护理产品中的用途。

背景技术：

1、病毒感染是全世界影响人类的最常见疾病。由于病毒复制的高突变率和低保真度，在病毒组中出现新的血清型，因此抵抗病毒感染一直是困难的。

2、非包膜病毒，如肠道病毒、轮状病毒和诺如病毒在表面上保留数周并且甚至数月后仍是稳定的并保持感染性。那些病毒对化学消毒剂显示出低敏感性，并且目前对于感染所提及的病原体的场所尚没有无毒消毒方式。包膜病毒，如寨卡病毒和冠状病毒，包括sars-cov2——covid19大流行病的病原体通常不太稳定并且当用某些清毒剂处理时更倾于降解。尽管如此，这些病毒种中的任一种能够导致严重的全球爆发，从而导致难以应对的症状和高死亡率并且导致全球经济显著损失。

3、举例来说，肠道病毒(ev)代表了全世界最流行的病毒。它们造成了从轻微到严重的一系列感染性疾病，包括急性感染，如脊髓灰质炎、手足口病(hfmd)、脑膜炎、心肌炎、脑炎和急性弛缓性麻痹(afp)。另外，肠道病毒是慢性疾病，如1型糖尿病(t1d)、哮喘和过敏发展中的环境因素。除脊髓灰质炎外，针对肠道病毒没有广泛可获得的疫苗，并且由于新的肠道病毒血清型持续出现的事实，疫苗开发是困难的。

4、整体上，疫苗开发落后于新的病毒出现的速度。预防病毒感染的传播的另外或替代方式包括手和表面消毒，以及穿戴设计以符合不同生物安全水平所设定的要求的保护装置。

5、另一方面，真菌代表了巨大的生物活性分子来源，而一些真菌种包含和/或分泌具有所报道的抗病毒活性的化合物。具体地，在东亚，担子菌灵芝属(ganoderma)，具体地灵芝(g.lucidum)，也称为灵芝(lingzhi)或瑞草(reishi mushroom)，广泛用于医学目的。灵芝属(ganoderma)物种包含三萜类、类固醇、生物碱和多糖，其中三萜类是从它所获得的含量最高的化合物类。

6、对于灵芝三萜类(超过150种化合物)，例如，在us2013/184244 a1(minto等人)中报道了多种治疗效果，如抗炎、抗氧化、抗组胺和降胆固醇效果。在us 6,726,911 b(jülich等人)中还提及了来源于灵芝的提取物的药物性质。jp 2016-044155a(takeshi等人)讨论了灵芝三萜类针对流感病毒的抗病毒活性。在后一个文档中，已通过有机溶剂，如氯仿，或者通过热水提取从真菌提取了三萜类化合物，包括多种灵芝酸的混合物。

7、尽管如此，在多个实例中，相同种内的多种分离株的筛选通常对于确定所选株系是否的确具有预期生物活性是不可缺少的。此外，丝状真菌的工业规模生产需要液体培养条件的仔细优化和株系的选择以避免所期望的化合物的过量生产。

8、每年具有新的血清型的流感流行、冠状病毒大流行病以及近期传染性疾病的爆发，如埃博拉和基孔肯雅病，加剧了对于有效表面清毒需要的需求。由于多种病毒通常通过接触来自感染个体，包括携带传染剂的无症状个体的分泌物，通过直接和间接接触传播，因此毫无疑问地需要安全且广泛作用的杀生物剂以抵抗病毒感染。

9、根据上述内容，似乎期望补充和更新与开发新的、可靠且无毒的抗病毒化合物，具体地，那些外用抗病毒化合物有关的技术领域。在这种意义上，灵芝属物种提供了用于进一步研究所述真菌和通过它生产的物质的生物潜能的吸引人的目标。

技术实现思路

1、本发明的目标在于至少减轻由于相关领域的限制和缺点所引起的每种问题。通过杀病毒组合物、其生产方法和相关用途的多种实施方式实现了所述目标。借此，根据独立权利要求1中所限定的，在本发明的一个方面，提供了杀病毒组合物。

2、在实施方式中，杀病毒组合物包含通过在培养罐或生物反应器中，在基本排除搅动的条件下，在基本液体培养基中培养所述真菌，从所选的灵芝株系可获得的生物学活性化合物的混合物。生物学活性化合物的混合物构成了所述组合物的活性成分。

3、在实施方式中，生物学活性化合物的混合物是从根据布达佩斯条约的规定以登录号cbs 147377、cbs 147378、cbs 147379、cbs 147380保藏的分离的灵芝株系中的任一种或它们的任何组合可获得的。

4、在实施方式中，生物学活性化合物的混合物是在液相中作为由灵芝的菌丝体分泌的产物可获得的，其中所述真菌在培养罐或生物反应器中在基本液体培养基中生长。

5、在实施方式中，从灵芝可获得的生物学活性化合物的混合物包含灵芝酸及其衍生物。

6、在实施方式中，构成活性成分的生物学活性化合物的混合物以所述组合物所占的总体积的约10％至约99.9％之间的范围内的量存在于所述组合物中。

7、在实施方式中，所述组合物还包含半纤维素。在实施方式中，半纤维素是从木质纤维生物质生产的。在实施方式中，木质纤维生物质是木材来源的生物质。

8、在另一个方面，根据独立权利要求9中所限定的，提供了用于生产包含从所选的灵芝株系可获得的生物学活性化合物的混合物的杀病毒组合物的方法。

9、在实施方式中，方法包括：(a)在培养罐或生物反应器中在基本液体培养基中培养灵芝；和(b)收获步骤(a)获得的培养基并作为由灵芝的菌丝体分泌的产物在液相中分离生物学活性化合物的混合物，可选地随后浓缩或稀释所述产物，其中在基本排除搅动的条件下，实施在培养罐或生物反应器中在基本液体培养基中灵芝的培养。

10、在实施方式中，通过深层发酵进行培养。

11、在实施方式中，在步骤(a)，将灵芝在基本液体培养基中的培养实施范围在4周至10周的一段时间，优选地约6周至8周的一段时间。

12、在实施方式中，方法还包括在步骤(c)，向在步骤(b)获得的产物添加半纤维素。在实施方式中，在步骤(c)，以所述组合物所占的总体积的约0.1％至约75％的范围内，优选地约5％至约50％的范围内的量添加半纤维素。

13、在另一个方面，根据独立权利要求15所限定的，提供了在人或非人动物受试者中外用的制剂，其包含根据一些上述方面所述的组合物。

14、在其他方面，根据独立权利要求16所限定的，提供了根据一些上述方面所述的组合物和/或所述的制剂在预防病毒感染的传播中的非治疗性用途。在实施方式中，提供了在预防由小核糖核酸病毒科(picornaviridae)和冠状病毒科(coronaviridae)中的任一种的一个或多个成员所引起的病毒感染的传播中的所述用途。

15、在其他方面，分别根据独立权利要求18和19中所限定的，提供了根据一些上述方面所述的组合物和/或所述的制剂在消毒、卫生消毒和/或清洁以及在生产个人护理产品或护肤产品中的用途。

16、在其他方面，根据独立权利要求20所限定的，提供了用于皮肤或用于非生物表面的清毒剂。

17、在其他方面，根据独立权利要求21中所限定的，提供了灵芝株系。

18、在其他方面，根据独立权利要求22所限定的，提供了包含从所选的灵芝株系可获得的生物学活性化合物的混合物的组合物在预防由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(sars-cov2)所引起的感染的传播中的非治疗性用途。

19、本发明的应用是由于基于其每个具体实施方式的多种原因。

20、首先，本发明提供了具有显著杀生物，具体地，杀病毒性质的无毒性组合物。组合物特别适合于外用，如对皮肤和表面消毒。可以照此使用组合物，或者作为生产多种多样的个人护理物品及其他最终用户产品中的成分使用组合物，个人护理物品及其他最终用户产品如手部卫生消毒剂和通用清毒剂、肥皂、多种保湿剂、清洁片、湿巾和湿纸巾、面膜、用于医院和用于通用目的的纺织物、空气过滤器等。以基本液体形式获得的组合物可以照此用作清洁和/或消毒剂/制剂，或者它可以后处理以形成强效制剂或者基本固体制剂，如皂条，例如。可以在溶液中或者作为喷雾/气溶胶提供液体组合物/制剂；并且例如，它可以进一步用于生产如面部衬垫或面膜的物品。可以进一步生产半固体制剂(护肤/化妆产品，如乳液、乳剂等)。因此，组合物是通用的并且是根据最终用户的需要广泛可调节的。

21、已证实根据本发明公开形成组合物的活性成分的真菌来源的生物学活性化合物的混合物针对一些病毒，包括不同类型的常见肠道病毒、冠状病毒和轮状病毒具有显著的杀病毒活性。因此，本发明提供了外用广谱抗病毒剂，如用于处理表面和物品，以及用于对手消毒，例如，以基本限制常见病毒在公共环境，如医院、学校、托儿所、商场、机场等中的传播。

22、此外，与常规真菌发酵中所使用的生物反应器系统和相关方法相比，本发明使得能够以低能源密集方式实施生产方法。这通过消除对具有搅拌和/或搅动方式的培养罐/生物反应器的需要得以实现。借助于在静置罐或生物反应器(其中静置是指所述罐或生物反应器未配备有搅拌器/搅动器)中实施所述生产方法，所公开的方法因此使得能够降低设备费用以及与能源、水和添加剂消耗有关的成本，因此改善生产方法的总成本-效率并帮助从中试规模转变为商业性生产。另外，本发明使得能够避免或至少最大程度减小旨在优化丝状真菌的生长形态的手段。复杂且昂贵地，生长优化程序是在常规搅拌生物反应器系统中培养真菌所必须的。

23、术语“杀生物的”通常是指破坏任何有害生物、阻止任何有害生物、使得任何有害生物无害或发挥对任何有害生物的控制作用的物质。

24、术语“杀病毒的”通常是指使得病毒无活性的物质(中和或破坏病毒)。术语“抗病毒的”通常是指抑制另外的活病毒在细胞中复制和/或预防病毒颗粒进入细胞，通常通过抑制与细胞受体的结合或干扰关键生物过程的物质。

25、除非另外明确指明，否则在本发明公开的背景中，术语“杀病毒的”和“抗病毒的”是可互换使用的，其中基本上对术语“抗病毒的”分配了“杀病毒的”的常见含义以强调物质破坏或中和病毒的能力。

26、在此使用术语“菌株”以表明就某些遗传元件来说，在特征上不同于(例如)相同种内其他真菌的真菌亚型；然而在此使用术语“分离株”以进一步强调一些分离株是从一个真菌株可获得的。

27、除非另外明确表示，否则术语“第一”和“第二”在此用于仅区分一种元素与另一种元素，而不表示任何具体顺序或重要性。

28、通过考虑详细说明，本发明的不同实施方式将变得显而易见。