%)、发芽势(日发芽种子数达到高峰时的发芽种子总数/100粒X 100% )、发芽指数(Σ (在不同时间的发芽数/相应的发芽天数))，并结合幼苗生长量测量结果计算活力指数(发芽指数X第20天幼苗高度)。为消除材料间差异，各指标采用抗旱系数计算，即抗旱系数=干旱胁迫下的测定值/对照下测定值，计算相对发芽率、相对发芽势、相对发芽指数、相对活力指数和相对幼苗生长量。运用SPSS18.0软件进行各抗旱测定指标相关性和主成分分析。结果表明:培养20d后种子萌发结束；相对发芽率、相对活力指数与其它测定指标极显著相关，相对发芽率决定第一主成分大小。考虑到筛选的工作量和工作强度，最后确定以种子培养20d后测定的相对发芽率为耐旱指标来进行以种子为对象的杜鹃花耐旱种质的筛选。
[0018]由上述本发明提供的技术方案可看出，本发明可以方便快捷地筛选出应用种子繁殖的较为耐旱的杜鹃花种质，基本上客观反映了利用种子繁殖的杜鹃花的耐旱真实情况，为杜鹃花耐旱育种及大量的利用种子繁殖的杜鹃花种质资源和杂交育种后代的耐旱性评价奠定了基础。
【具体实施方式】
[0019]为进一步了解本发明的
【发明内容】
及功效，兹例举以下实施例，实施例中所使用的实验方法若无特殊说明均为常规方法:
[0020]1、种子的准备:贮藏6个月的大白花杜鹃、大果杜鹃、露珠杜鹃、马银花、云锦杜鹃、云南杜鹃蒴果，充分干燥后将其开裂或半开裂的蒴果拨开，将种子用筛子去杂筛选，显微观察法去瘪粒，选取净度为100%，饱满成熟的健康种子。
[0021]2、种子的消毒:将干燥种子浸泡在浓度为10%的次氯酸钠或0.5%的高锰酸钾溶液中lOmin，蒸馏水冲洗3-4次，滤纸吸干备用。
[0022]3、种子萌发:将6份消毒后的种子分别放入直径9cm的垫有滤纸的培养皿中，培养液分别为O (对照)和15%浓度的PEG-6000，每皿100粒，重复4次，置于25°C恒温培养箱中培养。每天向滤纸加相应的O或者15% PEG-6000溶液数滴，以浸透滤纸并稍有剩余为度；15% PEG-6000浓度处理的培养皿每3d更换I次滤纸。
[0023]4、种子耐旱指标的测定与耐旱种质的筛选:培养20d后，以胚根长度达种子长度的1/2为发芽标准统计发芽种子数，计算发芽率，取平均值，按公式相对发芽率=(15%PEG-6000模拟干旱胁迫下的发芽率/对照的发芽率)X 100%计算每份种质的相对发芽率，比较所测得的相对发芽率，相对发芽率较高的杜鹃花种子判定为较耐旱的杜鹃花种质。按此法测得马银花相对发芽率最高(67% )，判定其为测试的6个杜鹃花野生种质中较耐旱的杜鹃花种质；测试种质的耐旱性顺序为马银花>云南杜鹃>云锦杜鹃>露珠杜鹃>大果杜鹃>大白花杜鹃。
[0024]5、田问验证:上述测试的6个野生杜鹃花，播种90d后利用PEG-6000模拟干旱胁迫，观察植株萎蔫、枯萎直至植株死亡，最终植株死亡的顺序依次是大白花杜鹃、大果杜鹃、露珠杜鹃、云锦杜鹃、马银花。与利用种子测定的杜鹃花耐旱种质的顺序恰好相反，由此证明杜鹃花种子相对发芽率越高，该杜鹃花种质的耐旱性能越好。
[0025]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，不是对本发明的具体限制，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种筛选杜鹃花耐旱种质的方法，其特征在以种子为对象，利用聚乙二醇6000 (PEG-6000)模拟干旱胁迫，采用培养皿滤纸法进行培养，选择相对发芽率为耐旱指标进行筛选，具体步骤如下: (1)种子的选取与消毒:选取同一时期的杜鹃花种子，用质量百分含量为10%次氯酸钠或质量百分含量为0.5%的高锰酸钾浸泡消毒lOmin，清水洗净吸干； (2)15% PEG-6000模拟干旱胁迫下种子萌发培养:将经步骤(I)消毒处理后的杜鹃花种子均匀排布于培养皿内已浸透15% PEG-6000溶液的滤纸上，每培养皿I份杜鹃花种质，100粒，4次以上重复，置于温度23?25°C的恒温培养箱中进行培养，每天向滤纸加15 %PEG-6000溶液数滴，以浸透滤纸并稍有剩余为度，每3d更换I次滤纸； (3)蒸馏水(对照)下种子萌发培养:将经步骤(I)消毒处理后的杜鹃花种子均匀排布于培养皿内已浸透蒸馏水滤纸上，每培养皿I份杜鹃花种质，100粒，重复次数和培养条件同步骤(2)，每天向滤纸加蒸馏水数滴，以浸透滤纸并稍有剩余为度； (4)耐旱指标相对发芽率的测定与耐旱种质的筛选:培养20d后，以胚根长度达种子长度的1/2为发芽标准统计发芽种子数，按公式发芽率=(种子发芽总数/供试种子总数(100粒))X 100%计算发芽率，按公式相对发芽率=(15% PEG-6000模拟干旱胁迫下的发芽率/对照的发芽率)X 100%计算相对发芽率，比较所测得的相对发芽率，相对发芽率较高的杜鹃花种子判定为较耐旱的杜鹃花种质。
2.根据权利要求1所述的筛选杜鹃花耐旱种质的方法，其特征在于:所述的杜鹃花种子为杜鹃花蒴果采集后经充分风干、筛选去杂后的成熟饱满、贮藏期不超过10个月的种子。
【专利摘要】本发明公开了一种筛选杜鹃花耐旱种质的方法。该方法以种子为对象，利用聚乙二醇6000(PEG-6000)模拟干旱胁迫，采用培养皿滤纸法进行培养，选择相对发芽率为耐旱指标进行筛选，具体步骤包括：(1)种子的选取与消毒，(2)15％PEG-6000模拟干旱胁迫下种子萌发培养，(3)蒸馏水(对照)下种子萌发培养，(4)耐旱指标相对发芽率的测定与耐旱种质的筛选。该发明利用种子相对发芽率筛选出杜鹃花较为耐旱的种质资源，简单易行、快速可靠，为杜鹃花耐旱育种及杜鹃花种质资源耐旱评价工作奠定了基础。
【IPC分类】A01C1-00
【公开号】CN104541658
【申请号】CN201410810129
【发明人】李畅, 陈璐, 苏家乐, 刘晓青, 陈尚平, 何丽斯, 肖政
【申请人】江苏省农业科学院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月23日