具有丛生生长习性的三倍体西瓜植物的制作方法_6

文档序号:8302436阅读:来源:国知局
ASHS 出版社;Mohr H. C. Watermelon Breeding,于 Mark J. Bassett (编辑)1986Breeding Vegetable Crops, AVI出版公司中描述的方法。
[0138] 保藏信息
[0139] 申请人已于2011年12月1日在NCMB以保藏号NCMB 41907保藏了杂交种 WH3451。Nunhems B.V.于 2011 年 12 月 1 日在 NCMB 分别以保藏号 NCMB 41905 和 NCMB 41906保藏了 WHAATO和WHAAOX的种子。在本申请的待决期,被专利商标局长(Commi ssioner of Patent and Trademarks)确定合格的请求人将有权获得保藏物。
[0140] 遵照37C. F. R. § 1. 808 (b),保藏人对公众获取一个或多个保藏物所提出的所有限 制,将在专利授权时,通过提供从 NCIMB Ltd·,Ferguson Building,Craibstone Estate, Bucksburn,Aberdeen AB219Y A,UK获取至少2500粒种子的保藏物的方式,而不可逆地取 消。保藏物将维持30年、或在最近一次请求后5年、或专利有效期,视时间长者为准,在该 期间如果保藏物失活则替换之。本申请人不放弃基于本申请授权的本专利所赋予的或在植 物品种保护法(Plant Variety Protection Act) (7USC 2321et seq.)下所赋予的任何权 利。 实施例
[0141] 实施例1 :制备三倍体丛生杂交种(bbb)
[0142] 观察到庭院二倍体西瓜具有有趣的生长型。从该观察出发,为了确定该生长型的 可遗传性和固定该生长型,开发了育种程序,以便能够制备具有该生长型的三倍体杂交种。 发现该生长型可作为隐性性状遗传,并将其称为"bush等位基因"(b)。发现该bush等位基 因负责蔓藤长度,而不影响叶片大小或果实大小。
[0143] 为了制备三倍体丛生杂交种,首先制备了自交二倍体丛生父本系和自交四倍体丛 生母本系(见图1)。
[0144] 通过选择具有所观察的生长型的二倍体,以所述二倍体和专利品系进行大量的杂 交,自交所获得的二倍体丛生株系9代以在二倍体株系中固定丛生特性,从而制备了自交 丛生父本。
[0145] 通过如下方式制备了四倍体雌性丛生自交系:选择具有所观察的生长型的二倍体 西瓜,以所述二倍体和专利品系进行大量的杂交,通过自交所获得的株系9代以上以获得 一致的(自交)二倍体丛生株系,从而产生二倍体丛生自交系。然后以秋水仙素处理所产 生的自交二倍体丛生系以加倍染色体;在秋水仙素处理后,选择四倍体株系,并将该株系自 交几代以在四倍体株系中固定丛生特性。在每一代种子中,使用流式细胞仪,检查四倍体株 系倍性水平的增加。
[0146] 将四倍体自交丛生(bbbb)母本(称为WHAAPD)与二倍体自交丛生(bb)父本(称 为WHAA0X)杂交,产生具有三倍体种子(bbb)的果实(称为WH3451)。从该果实收获三倍体 杂交种WH3451的种子,由Nunhems B. V.于2011年12月1日以保藏号NCMB 41907保藏 在NICMB中。WHAAPD和WHMOX的种子由Nunhems B. V.于2011年12月1日分别以保藏号 NCMB 41905 和 NCMB 41906 保藏在 NICMB 中。
[0147] 在以下实施例中分析了三倍体丛生杂交种WH3451的生理和形态特征。
[0148] 实施例2 :三倍体丛生杂交种WH3451与现有技术杂交种的比较
[0149] 2.1材料和方法
[0150] 在意大利(Sant' Agata Bolognese-BO)进行田间试验。于2010年4月7日播 种,2010年5月20日移植到田间(行内100厘米,行间250厘米)。田地包含每个品系10 株植物。
[0151] 通过流式细胞仪确定倍性水平。
[0152] 测定以下特性的平均值:
[0153] -每个品系测量3株植物的1片叶的叶片长度和叶片宽度。
[0154] -在开花日计数每个品系3株植物雄蕊花的数量。计算3株植物的平均数量。
[0155] -测量3株植物主茎中间的平均茎直径并计算平均值。
[0156] -成熟期:通过记录地块上50%的植株显露出至少1朵雌花的日期和地块上50% 的植株具有准备好收获的果实的日期,确定从开花到成熟的天数。
[0157] -茎:平均节间数:测量每个品系3株植物最长蔓藤上节间的平均数。
[0158] -茎:平均节间长度(厘米):每个品系3株植物最长蔓藤上测量的平均节间长度 (厘米)。
[0159] -茎:最长蔓藤的平均长度(厘米):每个品系3株植物测量的最长蔓藤的平均长 度(厘米)。
[0160] -平均果实重量(kg):每个品系从3株植物成熟时随机收获的3个果实的重量的 平均值。
[0161] -平均果实长度(厘米):3个果实的长度的平均值。
[0162] -中间截面的平均果实直径(厘米):3个果实的直径的平均值。
[0163] -果实:测量3个果实的果蒂处外皮厚度(厘米)和果实侧面的外皮厚度。从果 实的外边缘至白色中果皮与有色内果皮的分界处测量外皮厚度。
[0164] -果实:白利度:3个果实的1个读数的平均值,在果实的中间和外皮之间收集;使 用K71901便携式折射计Mod. RLC ATC 0-18% (OPTECH),表示为白利度(° )。
[0165] -播种种子的大小:5粒种子测量的长度(晕米)和宽度(晕米)平均值。
[0166] -颜色:使用 Royal Horticultural Society 微型颜色表(http ://www. rhs. org. uk/Plants/RHS-Publications/RHS-colour-charts)进行评估。
[0167] 2. 2 结果
[0168] 表 1
[0169]
【主权项】
1. 物种西瓜(Citrullus lanatus)的植物,其中所述植物是S倍体且具有丛生生长习 性。
2. 根据权利要求1的植物,所述植物包含3个拷贝的称为bush的隐性等位基因,其中 包含所述等位基因的种子的代表性样品已W保藏号NCIMB 41907保藏。
3. 根据权利要求1或2的植物,其中植物是从具有丛生生长习性的二倍体自交父本系 与具有丛生生长习性的四倍体自交亲本系之间的杂交产生的F1杂交种。
4. 根据上述权利要求之任一的植物,其中植物具有不长于100厘米的最长蔓藤长度。
5. 根据上述权利要求之任一的植物,其中所述植物在最长蔓藤上具有不超过15个的 节间。
6. 根据上述权利要求之任一的植物,其中所述植物在最长蔓藤上的平均节间长度为7 厘米或更小,但至少为4. 7厘米。
7. 根据上述权利要求之任一的植物,其中最长蔓藤长度:最长蔓藤上节间数的比为7 或更小。
8. 根据上述权利要求之任一的植物,其中所述植物具有至少8毫米的茎直径。
9. 根据上述权利要求之任一的植物,其中所述植物包含至少10厘米长和至少15厘米 宽的叶。
10. 根据上述权利要求之任一的植物,其中所述植物在W二倍体花粉授粉后,产生平均 果实重量为至少化g的果实。
11. 可W生长出根据权利要求1至10的植物的种子。
12. 物种西瓜(Citrullus lanatus)的植物或种子,其中所述植物是四倍体且具有丛 生生长习性。
13. 根据权利要求12的植物,所述植物包含4个拷贝的称为bush的隐性等位基因,其 中包含所述等位基因的种子的代表性样品已W登录号NCIMB 41905保藏。
14. 根据上述权利要求之任一的植物的可再生细胞的组织培养物。
15. 根据权利要求14的组织培养物,包含来自植物部分的细胞或原生质体或植物组 织,所述植物部分选自:胚胎、分生组织、子叶、花粉、胚珠、叶、花药、根、根尖、雌蕊、花、种 子、茎。
16. 根据权利要求1至13之任一的植物的植物部分,其中所述部分选自接穗、果实、花 粉、胚珠、茎、子叶、叶、细胞胚胎、分生组织、花药、根、根尖、雌蕊、花、种子。
17. 从权利要求14的组织培养物再生的西瓜植物,其中再生的植物是=倍体或四倍体 且具有丛生生长习性。
18. 用于生产=倍体杂交种西瓜种子的方法,其中从该样的种子生长出的植物具有丛 生生长习性,所述方法包括: a) 提供具有丛生生长习性的二倍体西瓜植物和具有丛生生长习性的四倍体植物, b) W二倍体丛生植物的花粉对四倍体丛生植物的花进行授粉,W及 C)收获四倍体丛生植物的果实中产生的种子。
19. 根据权利要求18的方法,其中所述四倍体植物在其基因组中包含4个拷贝的bush 等位基因化化b)。
20. 根据权利要求18的方法,其中所述四倍体植物具有W下特征:最长蔓藤长度不超 过100厘米,最长蔓藤上平均节间长度为7厘米或更小但至少为4. 7厘米,和产生至少10 厘米长和至少15厘米宽的叶。
21. 用于生产无巧=倍体西瓜果实的方法,所述方法包括: (a)提供具有丛生生长习性的=倍体杂交种西瓜植物, 化)将所述=倍体杂交种植物与二倍体授粉者植物间种, (C)收获(a)的S倍体植物上产生的无巧西瓜果实。
22. 根据权利要求21的方法,其中,与使用具有正常生长习性的=倍体杂交种植物例 如Boston F1时相比,每公顷多种植至少1. 5倍的=倍体丛生植物。
23. 根据权利要求21或22的方法,其中与使用具有正常生长习性的=倍体杂交种植物 例如Boston F1时相比,每公顷多生产至少15%的S倍体果实。
【专利摘要】本申请涉及植物育种领域,尤其是西瓜育种。本发明提供了丛生型三倍体西瓜植物(及能够生长出这些植物的种子)和由这些植物生产的无籽西瓜果实。本发明还提供丛生型授粉者植物和丛生型四倍体植物和用于生产具有丛生生长型的三倍体杂交种的方法、以及用于生产高质量无籽西瓜果实的方法。NCIMB 4190620111201NCIMB 4190720111201NCIMB 4190520111201
【IPC分类】A01H5-00
【公开号】CN104619163
【申请号】CN201380019156
【发明人】格鲁特 E·德, E·基亚帕里诺
【申请人】纽海姆有限公司
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2013年2月8日
【公告号】EP2814316A1, US20150040265, WO2013120781A1
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