一种用于诱导桉树抗青枯病的混合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本发明是在"十二五"农村领域国家科技计划课题"南方短周期工业用材林病虫 害控制技术"（2012BAD19B0802);广东省林业科技创新专项（2010KJCX015-01)的资助下完 成。
技术领域
[0002] 本发明是一种用于控制桉树青枯病的诱导剂，属于森林保护的林木病害防治技术 领域。
【背景技术】
[0003]按树青枯病是由爺拉氏菌（Ralstonia solanacearum(Smith)Yabuuchi et al.) 引起的一种系统性的维管束病害，在巴西、澳大利亚、乌干达、刚果及南非的一些国家都有 报道，中国最早发现于广西的柳桉（E. saliero Sm.)和巨桉（E. grandis Hillex Maid.)等 幼树上，它的主要寄主还有巨尾桉（E.grandisXE.urophylla)、尾叶桉（E.urophylla)、尾 巨桉（E. urophyllaXE. grandis)及朽1檬桉（E. citriodora)等多种桉树，以栽培面积最大 的巨尾桉和尾叶桉发病最严重，在我国广东、云南、海南、福建和台湾等省时有发生和流行。 在桉树青枯病流行年份，感病桉树品种（系）当年新造幼林发病率达20 %-40%，高感桉树 品种（系）高达60%以上，给桉树经营者造成严重的经济损失，威胁着桉树产业的持续发 展。随着连片桉树速生林栽培面积的不断增加，桉树青枯病已成为当前发展桉树的潜在障 碍。
[0004] 桉树同其它植物一样，存在着抵抗大多数病原物侵染的遗传潜力，它们在常态下 不表达，但通过一定的刺激和处理则可被激活而表现出来。因此，人为增强现有和潜在速生 桉树无性系的抗性，以使它们对青枯菌产生足够的抵抗能力即诱导抗性，将是防治桉树青 枯病的一个很有希望的新途径。在防治方面，前人使用水杨酸和芳香酸等诱导剂对桉树抗 青枯病进行了一些研究，收到一定的成效，但还未找到有效控制桉树青枯病的防治方法。尽 管国内外对桉树青枯病的防治进行了大量研究，但仍存在不足。如利用生物源诱导剂及化 学诱导剂组合对桉树青枯病的防治技术未见报道。本发明通过多种具有诱抗活性的化学物 质和生物源物质以及它们的组合对桉树青枯病诱导抗性情况,经过室内外试验筛选得到对 桉树抗青枯病有较强诱导效果的诱导剂。
【发明内容】
[0005] 本发明针对现有桉树青枯病防治技术的不足，提供一种配制方便、使用简单、持效 期长、对环境友好和不使病害产生抗性的诱导剂。
[0006] 为实现上述目的，本发明采取如下技术方案：通过应用化学和生物源诱导剂单独 或混合对桉树苗进行诱导处理，筛选出对桉树抗青枯病有较强诱导效果的诱导剂，即苯并 噻二唑（BTH)和无致病力青枯菌菌株（AXY22)的混合剂，所述苯并噻二唑（BTH)和无致病 力青枯菌菌株（AXY22)的体积比为1 :1。
[0007] 本发明的有益效果是：利用上述混合诱导剂处理桉树幼苗，能显著提高桉树对青 枯病的抗性，既经济、简便、易行，又对环境友好和不致该病产生抗性而可持续应用，达到减 灾的目的。
【具体实施方式】
[0008] 实施例1:
[0009] 用土豆汁培养基，接种无致病力青枯菌菌株（AXY22)，经充分培养后，配制成所需 要的浓度，并与苯并噻二唑（BTH)按体积比为1 :1充分混合，加入0.05%的吐温20,喷雾 桉树幼苗，用〇. 05 %的吐温20水溶液作对照，每隔7喷雾一次，3次诱导后，挑战接种青枯 病，待接种后5d、10d、15d和20d调查对照和处理幼苗的相对病害强度，计算各处理的诱抗 效果。诱导物诱导桉树对青枯病的防效见表1，表中数据为3次平行的平均值，相对标准偏 差小于10%。 表1
【主权项】
1. 混合物用于诱导桉树抵抗青枯病的用途，其特征在于其由苯并噻二唑（BTH)和无致 病力青枯菌菌株（AXY22)组成。
2. 权利要求1的用途，其中所述苯并噻二唑（BTH)配制成lmmol/L的溶液，其获得方法 为：将适量苯并噻二唑（BTH)加入到蒸馏水中，并逐滴加入1% NaOH，调节pH值至中性，配 成浓度为50mmol/L的母液，保存在4°C冰箱中，使用时稀释至lmmol/L的溶液。
3. 权利要求1的用途，其中所述无致病力青枯菌菌株（AXY22)配制成107cfu/mL的悬 浮液，其获得方法为：将无致病力青枯菌菌株（AXY22)接种于NA培养基上30°C培养48小 时，刮下菌体，用水稀释成浓度为10 7cfu/mL的悬浮液。
4. 权利要求1的用途，其中所述无致病力青枯菌菌株（AXY22)获得方法为：将有致病 力的青枯菌菌株（AXY2)接种于NA培养基上30°C培养48小时，刮下菌体，用无菌水稀释 成10 8cfu/mL的悬浮液，在30瓦紫外灯下相距30厘米处照射2分钟。再将悬浮液接种于 TTC培养基上30°C培养48小时，挑取呈规则圆形，奶油状，均匀的深红色，白边窄干燥型单 菌落，再在平板上连续纯化，直至整个平板均为无致病力菌落以获得无致病力青枯菌菌株 (AXY22)。
5. 权利要求2、3项的用途，其中所述lmmol/L的苯并噻二唑（BTH)溶液、IO7CfVmL的 无致病力青枯菌菌株（AXY22)悬浮液按体积比为1 :1混合，加入渗透剂，帮助其在桉树表面 吸附，均匀喷雾与桉树表面，间隔一段时间喷雾一次。经过该方法处理的桉树对青枯病有一 定的防效。
6. 权利要求5的用途，其中所述加入渗透剂是吐温20,使用剂量为万分之五。
【专利摘要】本发明为一种以苯并噻二唑(BTH)和无致病力青枯菌菌株(AXY22)按体积比1：1混配而成的混合物来诱导桉树抗青枯病的方法。利用该种混合物诱导剂喷雾处理桉树幼苗，辅以吐温作为渗透剂，能显著提高桉树对青枯病的抗性，既经济、简便、易行，又对环境友好和不致该病产生抗性而可持续应用，达到减灾的目的。
【IPC分类】A01N43-828, A01N63-00, A01P1-00
【公开号】CN104663720
【申请号】CN201310615999
【发明人】李波, 王军, 孙思
【申请人】华南农业大学
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2013年11月28日