非洲爪蟾室内饲养和繁殖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及动物饲养技术领域，尤其涉及一种非洲爪蟾室内饲养和繁殖的方法。
【背景技术】
[0002]两栖类动物是水生生态系统中的重要生物类群，又是联系水生和陆生环境的代表。近20年来，世界范围内两栖类动物种群呈现出显著的衰退现象。非洲爪蟾虽为水陆两栖动物，但可终生生活在水中，其卵、鳃、皮肤均具有渗透性，对环境污染物敏感。此外，非洲爪蟾体外受精、繁殖，产卵量大，一年四季均可通过人工诱导排卵，幼体生长速度快，在性别分化早期，其性腺发育对雌激素和具有雌激素活性的内分泌干扰物十分敏感。因此，非洲爪蟾广泛应用于农药毒性检测、环境雌激素检测等试验中，是生态毒理学研宄中的模式物种。我国《化学农药环境安全评价试验准则》(GB/T 31270.18-2014)推荐使用非洲爪蟾作为试验物种，用于评价农药对天敌两栖类生物的毒性。
[0003]目前，国内没有规模化养殖非洲爪蟾的机构，试验用非洲爪蟾主要依赖于国外进口。专利号为201310071450.5的《一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法》主要建立了一种通过人工注射促黄体素释放激素A3促进非洲爪蟾抱对产卵的方法，此方法对非洲爪蟾的损伤较大，每次注射后的爪蟾需恢复2?3个月才能继续用于繁殖。国内相关试验单位均出现非洲爪蟾自然抱对次数少，人工注射后受精卵孵化率低的问题。因此，提供一种可操作的非洲爪蟾室内饲养方法，实现非洲爪蟾在室内自然抱对产卵，对获取高质量的生物试材、保证药物安全性评估顺利开展、有效评估药物的环境毒性等具有重要作用。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种可操作的、实现非洲爪蟾在室内自然抱对产卵的非洲爪蟾室内饲养方法。
[0005]为解决上述技术问题，提供了一种非洲爪蟾室内饲养和繁殖的方法，包括以下步骤:
51、成蟾饲养:在养殖缸内加饲养用水至水面高度为0.1?0.2m，然后放入非洲爪蟾成蟾，每2天喂食一次；
52、抱对产卵:在养殖缸中放入滤网，将雌性与雄性亲蟾按照1:1的比例放入同一个养殖缸的滤网上，使雌性和雄性亲蟾抱对产卵得到受精卵，待排卵结束后，将雌性与雄性亲蟾移至其他养殖缸饲养；
53、受精卵孵化:在养殖缸中加入饲养用水至水面高度为0.3 m，使受精卵孵化出蝌蚪；
54、蝌蚪饲养:蝌蚪孵出7d后，每天喂食一次，在饲养中采用空气增氧泵持续增氧，使蝌蚪成长为幼蟾；
S5、幼蟾饲养:将幼蟾置于养殖缸内，加饲养用水至水面高度为0.1 m，每天喂食一次，每2天更换一次饲养用水。
[0006]上述的方法，优选的，养殖缸为体积约70 L (长X宽X高为0.6 mX0.3 mX0.4m)的方形玻璃缸。
[0007]上述的方法，优选的，养殖缸初次使用前用20 mg/L高锰酸钾溶液或40 mg/L次氯酸钠溶液浸泡养殖缸30 min，再用清水冲洗干净。
[0008]上述的方法，优选的，所述步骤SI中所述非洲爪蟾成蟾的饲养密度为2?4只/缸，饲养水温为18?26°C。
[0009]上述的方法，优选的，所述步骤SI中喂食的饵料为猪肝、黄粉虫或饲料，猪肝、饲料的饲喂量以15min内吃完为度，黄粉虫的喂食量为3?5条/只爪蟾。
[0010]上述的方法，优选的，所述步骤S2中所述滤网的孔径为2 Cm，高为5?10cm。
[0011]上述的方法，优选的，所述步骤S2中所述抱对产卵的时间为4?6h，抱对产卵过程的饲养水温为24?26°C。
[0012]上述的方法，优选的，步骤S2中雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾的分辨方法为:同龄雌性个体大于雄性；雌性泄殖腔上方有瓣膜，产卵前泄殖腔唇明显突出且变成红色；而性成熟的雄性爪蟾前肢内侧有黑色粗条纹的“婚垫”，泄殖腔上方无瓣膜。
[0013]上述的方法，优选的，所述步骤S3中所述受精卵孵化过程的饲养水温为24?26。。。
[0014]上述的方法，优选的，所述步骤S3中正常发育的胚胎黑色动物极向上，植物极向下，植物极为淡绿色，色泽均匀，受精卵I?3d后孵化出蝌蚪。
[0015]上述的方法，优选的，所述步骤S4中所述喂食的饲料为蛋黄或丰年虫，蛋黄饲喂量为20?50mg/尾蝌蚪，丰年虫投喂量以I d内吃完为宜。
[0016]上述的方法，优选的，所述步骤S4中所述蝌蚪的饲养水温为24?26°C ;
上述的方法，优选的，所述步骤S5中所述幼蟾饲喂的饵料为猪肝和黄粉虫，猪肝的饲喂量以I5min内吃完为度，黄粉虫的喂食量为3?5条/只爪蟾，饲养水温为18?26°C。
[0017]上述的方法，优选的，步骤S4中蝌蚪经5?6周饲养可完成变态发育，成长为幼蟾。
[0018]上述的方法，优选的，所述饲养用水为存放24 h以上并经曝气处理的自来水，pH为6.5?7.5，溶解氧含量不低于空气饱和值的60%，水质硬度为100?300mg/L。
[0019]上述的方法，优选的，非洲爪蟾饲养采用全波长荧光灯照明，所述S4步骤中所述蝌蚪饲养过程中，水面光照强度为600?1200LX ;所述SI步骤中所述成蟾、所述S5步骤中所述幼蟾饲养过程中，养殖缸的水面光照强度为200?300Lx。
[0020]与现有技术相比，本发明的优点在于:
(I)本发明提供了一种非洲爪蟾室内饲养和繁殖方法，操作简单易行，成本低，该方法可保证非洲爪蟾在繁殖季节频繁抱对产卵，且受精卵的孵化率和子代存活率高，符合非洲爪蟾的生活规律，可为药物安全性评价提供高质量的生物试材，可实现非洲爪蟾的批量培养，适用于商业养殖。
[0021](2)本发明提供了一种非洲爪蟾室内饲养和繁殖方法，非洲爪蟾的繁殖期为11月至翌年5月，繁殖期内，非洲爪蟾可自然抱对并产卵受精，若采用本发明的室内饲养方法，受精卵孵化率可达80%以上。
[0022](3 )本发明在抱对产卵过程中，放入滤网，可以避免亲蟾吞食或损坏受精卵。
【具体实施方式】
[0023]以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。
实施例
[0024]以下实施例中所采用的材料和仪器均为市售。
[0025]其中采用的饲养用水为:存放24 h以上并经曝气处理的自来水，pH为6.5?7.5，溶解氧含量为空气饱和值的80?88%，水的硬度(以CaCCU+)为125 mg/L。
[0026]实施例1:
成年非洲爪蟾的饲养方法:
1、用20 mg/L高锰酸