一种平陆百合的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及食用百合的脱毒快繁，特别是涉及一种针对平陆百合的脱毒苗快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]食用百合鳞茎瓣厚、丰润，口感甜美，药食兼优，具有很高的营养价值，作为特种蔬菜深受消费者的喜爱。山西省平陆县地处中条山麓，为砂质土壤，极宜种植百合，早在明代万历年间就开始栽培百合，历史悠久。平陆百合由野生百合移植培育，质量好，营养价值高，以个头大、瓣肉厚、后味不苔、瓣肉无柴而著称于世。最大者达150克以上，一般的也有100克重，有“中条参”的美称，收获后的鲜百合放置起来干而不烂，埋入湿土可终年保持鲜嫩。平陆百合含有大量蛋白质、脂肪、淀粉、维生素，并含有少量钙、磷、铁等，药用价值高，具有补中益气，温肺止咳，安神、清心之功效。
[0003]平陆百合的繁殖方法很多，包括播种、鳞片扦插、小鳞茎繁殖、株芽繁殖等。以常规繁殖方法小鳞茎繁殖，繁殖系数低，种植过程中极易感染病毒，严重影响百合产量和经济价值，制约了食用百合的生产。
[0004]中国专利200810034181.4公开了一种宜兴百合的脱毒快繁技术，其以再生鳞茎的鳞片分化不定芽作为快繁的主要方式，但由于百合鳞片分化的不定芽需要经过壮苗后方可成苗，繁殖过程繁杂。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种平陆百合的快速繁殖方法，通过对茎尖培养获得的脱毒苗进行快速繁殖，建立完整的脱毒苗无性系应用于生产。
[0006]本发明提供的平陆百合快速繁殖方法包括茎尖培养获取脱毒苗、诱导脱毒苗产生鳞茎、鳞茎的增殖培养、鳞茎生根及移栽，具体步骤包括:
1)、获取脱毒苗母株:
以百合鳞茎为外植体，10?15被％次氯酸钠溶液灭菌处理，剥离出I?3mm的茎尖，接种于MS + 6-BA 0.5?1.5mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 3wt%鹿糖培养基中，诱导莖尖萌动成苗，获得百合脱毒苗；
2)、诱导鳞茎分化:
将获得的百合脱毒苗转接于1/2MS + NAA 0.1?1.5mg/L + 6?10被％蔗糖培养基中，诱导脱毒苗分化产生小鳞茎；
3)、诱导鳞茎增殖:
将诱导产生的小鳞茎接种于MS + 6-BA 0.2?1.0mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培养基中，诱导小鳞茎增殖；再转接于MS + ZT 1.0?3.0mg/L + 2，4-D 0.5?
1.0mg/L + 6?10wt%蔗糖培养基中，诱导鳞茎大量增殖；
4)、诱导鳞茎生根: 将大量增殖的百合鳞茎接种于1/2MS + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培养基中，诱导鳞茎生根；
5)、移栽百合鳞茎:
将生根后的百合鳞茎移栽至基质中培养。
[0007]其中，所述的基质是由蛭石、沙、土按照1:2:3的质量比混合得到的基质。
[0008]本发明所述步骤I)?4)的培养过程均在培养温度22?27°C、光照强度2000?3000Lx、光照时间14?16小时/天的培养条件下进行。
[0009]本发明方法以平陆食用百合为材料，经茎尖培养获得脱毒苗，以脱毒苗为母株诱导鳞茎产生，通过两步法对鳞茎进行快速繁殖，继而使鳞茎生根后移栽，能够在短期内提供大量百合种球。
[0010]本发明方法利用茎尖脱毒技术培养脱毒苗，获得了优质的脱毒苗，脱毒苗产生球茎大小一致，鳞片色泽洁白，提高了百合的质量和产量，进一步提高了其经济效益。
[0011]本发明方法突破了以往百合脱毒快繁中普遍采用的以鳞片分化不定芽为增殖方式的培养过程，以直接诱导百合鳞茎增殖为主要繁殖方式，通过两步诱导，先后使用两种增殖培养基直接繁殖鳞茎，繁殖系数达11倍以上，在保证了较高繁殖率的同时，获得了具有较大鳞茎的壮苗，便于移栽，移栽成活率可以达到90%以上，且移栽后当年即可定植用于生产。
[0012]本发明提供的百合组织培养技术具有繁殖速度快、不受季节影响等特点，且培养过程简单，一次成苗，适合进行大规模工厂化生产，具有较高的应用价值。
【具体实施方式】
[0013]1、获取脱毒母株:以健壮百合鳞茎为外植体，用10%次氯酸钠灭菌处理13min，剥离出I?3mm的茎尖，接种于MS + 6-BA 0.5mg/L + NAA 0.lmg/L + 3%蔗糖培养基中，暗培养3?5天后，转入光下培养4周，培养温度25°C，光照强度2000?3000Lx，光照时间14?16小时/天，以诱导茎尖萌动成苗。茎尖培养成活率83.4%，以检测后的脱病毒苗为母株进行快繁。
[0014]2、诱导鳞茎分化:将检测后获得的百合脱毒苗转接于1/2MS + NAA 0.lmg/L +10%蔗糖培养基中，诱导其分化产生小鳞茎，培养条件同上，培养4周后，小鳞茎的诱导率达
100% O
[0015]3、诱导鳞茎增殖:将诱导产生的小鳞茎接种于MS + 6-BA lmg/L + NAA 0.1mg/L + 10%蔗糖培养基中，诱导小鳞茎增殖；以上述培养条件培养4周后，再转接于MS + ZT
2.5mg/L + 2,4-D 0.5mg/L + 10%蔗糖培养基中，在上述培养条件下诱导鳞茎大量增殖，培养4周后，鳞茎增殖率达11倍以上，并在诱导鳞茎大量增殖的同时，促进了鳞茎膨大，免去了小鳞茎壮苗的步骤，获得健壮鳞茎直接用于生根培养。
[0016]4、诱导鳞茎生根:将大量增殖的百合鳞茎接种于1/2MS + NAA 0.lmg/L + 10%蔗糖培养基中，诱导鳞茎生根，培养温度22°C，光照强度2000?3000Lx，光照时间14?16小时/天。培养2周后鳞茎即可生根，生根率可达100%。
[0017]5、移栽百合鳞茎:生根后的百合鳞茎在实验室和温室炼苗后进行移栽，移栽基质由蛭石、沙和土混合得到，比例为1:2:3。移栽成活率90%以上，移栽后当年可定植。
【主权项】
1.一种平陆百合的快速繁殖方法，其特征是按照以下步骤进行: 1)、获取脱毒苗母株: 以百合鳞茎为外植体，10?15被％次氯酸钠溶液灭菌处理，剥离出I?3mm的茎尖，接种于MS + 6-BA 0.5?1.5mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 3wt%鹿糖培养基中，诱导莖尖萌动成苗，获得百合脱毒苗； 2)、诱导鳞茎分化: 将获得的百合脱毒苗转接于1/2MS + NAA 0.1?1.5mg/L + 6?10被％蔗糖培养基中，诱导脱毒苗分化产生小鳞茎； 3)、诱导鳞茎增殖: 将诱导产生的小鳞茎接种于MS + 6-BA 0.2?1.0mg/L + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培养基中，诱导小鳞茎增殖；再转接于MS + ZT 1.0?3.0mg/L + 2，4-D 0.5?1.0mg/L + 6?10wt%蔗糖培养基中，诱导鳞茎大量增殖； 4)、诱导鳞茎生根: 将大量增殖的百合鳞茎接种于1/2MS + NAA 0.1?0.5mg/L + 6?10wt%蔗糖培养基中，诱导鳞茎生根； 5)、移栽百合鳞茎: 将生根后的百合鳞茎移栽至基质中培养。2.根据权利要求1所述的平陆百合的快速繁殖方法，其特征是所述基质由蛭石、沙、土按照1:2:3的质量比混合得到。3.根据权利要求1所述的平陆百合的快速繁殖方法，其特征是所述步骤I)?4)的培养过程均在培养温度22?27°C、光照强度2000?3000Lx、光照时间14?16小时/天的培养条件下进行。
【专利摘要】本发明公开了一种平陆百合的快速繁殖方法，包括茎尖培养获取脱毒苗；诱导脱毒苗产生鳞茎；利用两步法先诱导小鳞茎增殖，再诱导鳞茎大量增殖；鳞茎生根及移栽，通过对茎尖培养获得的脱毒苗进行快速繁殖，建立完整的脱毒苗无性系应用于生产。本发明方法通过两步诱导增殖，在保证较高繁殖率的同时，获得了较大鳞茎的壮苗，移栽成活率可以达到90%以上，且移栽后当年即可定植用于生产。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN104969858
【申请号】CN201510293372
【发明人】赵娟, 王玉国, 席丛林, 尹美强, 温银元, 王育选, 殷丽娜, 高雅坤, 任建宏
【申请人】山西农业大学
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年6月2日