C的频率，从26°C升高到28?29°C，此时鞍带石斑鱼可达性成熟。
[0017]4、营养强化:营养强化选择在亲鱼培育水温由最低值开始升温时进行，一般在第二年I月份，营养强化包括增加鱿鱼、维生素C、维生素E、裂壶藻。
[0018]5、精子超低温冷冻保存:第二年4月份开始进行鞍带石斑鱼精子超低温冷冻保存。通过镜检的方式确定雄鱼发育及精子质量情况，选择发育成熟、成活率达到95%以上的精子进行超低温冷冻保存。按照精子与冷冻稀释液体积比1:1将精子加入到冷冻稀释液中，一并置于液氮中保存备用。其中冷冻稀释液的配比是:以IL溶液为例，需葡萄糖24g，氯化钠8g，碳酸氢钠0.08g，二甲基亚砜(DMSO) 10mL，胎牛血清(FBS) 10mL，用去离子水定容至IL0
[0019]6、雌性亲本催产:第二年4月份开始对云纹石斑鱼雌鱼进行镜检，挑选腹部明显膨胀，卵巢发育至IV期(IV期特征:卵巢呈青灰色稍带棕黄色，卵粒明显，放置固定液中可游离脱落)的雌鱼放养在尺寸6mX 6mX 3m的培育池内，水温维持23°C。对云纹石斑鱼雌鱼进行药物注射催产。注射所用催产剂制备方法:取人绒毛膜促性腺激素(HCG)400?800IU/kg鱼体重和促排卵素3号(LRH-A3)(促排卵素3号属于促黄体生成素释放激素类似物)2?3ug/kg鱼体重，混合后0.9%的生理盐水5ml/条鱼溶解，配置成催产剂。将催产剂一次性进行鱼体注射，注射部位为背部肌肉。注射后效应时间约为36小时，可进行人工挤卵。间隔3天后可重复进行催产。
[0020]7、人工授精:对催产后腹部柔软轻压有透明卵流出的云纹石斑雌鱼，进行人工挤卵，使用玻璃或塑料容器接收；将鞍带石斑鱼冷冻精液在38?40°C水浴中快速复温解冻，解冻后的精液按照1:10比例加入28?29°C海水进行稀释，然后按照精、卵数量比1:1000的比例混合均匀，干法授精，将受精卵放在孵化槽内，孵化22小时左右，收集上浮卵。
[0021]8、受精卵消毒:利用碘消毒方式进行消毒。收集的受精卵发育至肌肉效应期，此时对外界环境耐受性最强，收集后的上浮卵用海水冲洗2?3次，用50ppm的聚维酮碘进行消毒。消毒方式为??每1L消毒液每次不超过500ml受精卵，消毒时间5?10分钟，然后布池。
【主权项】
1.云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于: 1)、亲本选择:云纹石斑鱼选择4龄以上健康雌性亲本，鞍带石斑鱼选择6龄以上健康雄性亲本； 2)、亲本培育:雌雄亲本分别放于不同培育池内；云纹石斑鱼养殖水温保持在20?26°C，鞍带石斑鱼养殖水温保持在25?30°C ; 亲本培育过程中，通过调节亲鱼培育水温，实现对亲鱼性腺成熟的调控，从而控制育苗时间在每年6月份；具体措施为:云纹石斑鱼亲鱼从第一年的10月份开始，培育水温从25°C逐步降低至16°C再逐步升温至23°C不再升高，升温和降温频率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份达到性成熟；鞍带石斑鱼亲鱼从第一年的10月份开始，培育水温从29°C逐步降低到20°C再逐步升温至26°C，升温和降温频率控制在每7?10天升高或降低1°C，至第二年4月份准备产卵时，按照每3天升高1°C的频率，从26°C升高到28?29°C，此时鞍带石斑鱼达到性成熟； 3)、精子超低温冷冻保存及雌性亲本催产:第二年4月份开始进行鞍带石斑鱼精子超低温冷冻保存；按照精子与冷冻稀释液体积比1:1将精子加入到冷冻稀释液中，一并置于液氮中保存备用；挑选腹部明显膨胀，卵巢发育至IV期的雌鱼放养在培育池内，水温维持在22?24°C，对棕点石斑鱼雌鱼进行药物注射催产，将催产剂一次性进行鱼体注射，注射部位为背部肌肉；注射后效应时间为30?40小时； 4)、人工授精:对催产后腹部柔软轻压有透明卵流出的云纹石斑雌鱼，进行人工挤卵；将鞍带石斑鱼冷冻精液在38?40 °C水浴中快速复温解冻，解冻后的精液加入28?29°C海水进行稀释，然后将精子和卵子混合均匀，实施干法授精。2.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于:其中步骤2)中，亲本投喂饵料为鲐鱼、鲅鱼的任一种或者两种的任意比例混合投喂，水温彡24°C时2天投喂I次，20?23°C时每周投喂2次，每次投喂量占鱼体体重的1%。3.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于:在第二年I月份实施营养强化，营养强化包括增加鱿鱼、维生素C、维生素E和裂壶藻。4.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于:其中步骤3)中冷冻稀释液的配比是:每升含葡萄糖24g，氯化钠Sg，碳酸氢钠0.08g，二甲基亚砜10mL，胎牛血清10mL，余量为去离子水。5.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于其中步骤3)中注射所用催产剂制备方法是:取400?800IU/kg鱼体重的HCG和2?3ug/kg鱼体重的LRH-A3，混合后加0.9%的生理盐5ml/条鱼溶解。6.如权利要求1所述的云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，其特征在于:其中干法授精中，将受精卵放在孵化槽内，孵化20?24小时，收集上浮卵，收集后的上浮卵用海水冲洗2?3次，然用50ppm的聚维酮碘进行消毒，每1L消毒液每次不超过500ml受精卵，消毒时间5?10分钟，最后布池。
【专利摘要】本发明是一种云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼的工厂化杂交育苗方法，选择云纹石斑鱼雌性亲本，鞍带石斑鱼雄性亲本；雌雄亲本分别放于不同培育池内；云纹石斑鱼养殖水温保持在20～26℃，鞍带石斑鱼养殖水温保持在25～30℃；经精子超低温冷冻保存及雌性亲本催产，第鞍带石斑鱼精子超低温冷冻保存，按照精子与冷冻稀释液体积比1:1将精子加入到冷冻稀释液中，一并置于液氮中保存备用；挑选腹部明显膨胀，卵巢发育至Ⅳ期的雌鱼放养在培育池内，水温维持在22～24℃，对棕点石斑鱼雌鱼进行药物注射催产，最后人工授精。通过云纹石斑鱼与鞍带石斑鱼杂交，获得种间杂交品种；通过受精卵的安全消毒，防止细菌、病毒性疾病从受精卵到苗种的垂直传播。
【IPC分类】A01K61/00
【公开号】CN105123580
【申请号】CN201510555456
【发明人】武鹏飞, 庞尊方, 马文辉, 李文升, 孙礼娟, 邵光彬, 张平, 孙芳芳, 刘江春, 翟介明, 李波
【申请人】莱州明波水产有限公司
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年9月6日