一种获得线纹海马杂交优势的育种方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于鱼类杂交育种技术领域。更具体地，设及一种利用线纹海马不同群体 进行种内杂交获得杂交优势的育种方法。
【背景技术】
[0002] 海马，属于鱼纲、海龙科、海马属（化，是一种名贵海洋中药材，在我国 素有"南方人参"之称，具有补肾壮阳、强屯、催产、止血镇痛、镇静安神的功效。线纹海马 (化切主要分布在大西洋西岸，是典型的热带亚热带型海马种群，其繁殖 力强、个体较大和生长速率快。近年，我国多家单位将该种从美国引入中国，并在海南、广 东、福建及山东等省沿海进行养殖，目前已经发展为我国主要的养殖品种之一。然而，海马 经过多代的繁殖后，种质退化现象非常严重。本专利发明人团队在2010~2014年期间，连 续对我国部分沿海的养殖现状进行调研，发现我国海马繁殖和养殖模式极其原始，近交衰 退严重，亲本的产卵数量较原代下降了 30~60%，幼体成活率仅15~25%，幼海马的生长速 度较原代下降30%左右。因此，现阶段，我国线纹海马的种质衰退明显，苗种质量成为限制 我国海马养殖业发展的"瓶颈"之一。
[0003] 杂交优势是一种普遍的生物学现象，是指两个遗传背景不同的亲本杂交产生的杂 种F1代在生活力、适应性、抗逆性及生产力等方面比纯种有所提高的现象。杂交育种迄今 为止是国内外动植物遗传改良应用最广泛、最成功的方法之一。在水产养殖领域，杂交育 种也是改良当前水产品养殖性状的主要途径之一，目前，在巧孔扇贝（化lamysfarreri) (常亚青等.2006)、细脚对邮（Penaeusst^irostris)(Bierneetal.2000)、克努克娃 (Oncorhynchustshaw}ftscha)(&rydenetal.2004)及虹縛（0.mykiss)(王炳谦等.2009) 等多种水生动物的杂交育种已取得巨大进展。然而，目前为止，国际上还没有关于线纹海马 杂交育种的研究和报道。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是克服现有线纹海马种质衰退、苗种质量下降的缺陷和 技术不足，提供一种利用国内多个线纹海马养殖群体，进行不同地理群体间的杂交，获得杂 交优势的方法，从而培育出成活率高、生长快的线纹海马，W改善海马养殖产业缺乏优良品 种的现状。
[0005] 本发明目的是提供一种获得线纹海马杂交优势的育种方法。
[0006] 本发明上述目的通过W下技术方案实现： 一种获得线纹海马杂交优势的育种方法，包括W下步骤： 51. 从遗传背景差异较大的群体挑选线纹海马亲本； 52. 对步骤S1中的线纹海马亲本进行强化培育； 53. 将步骤S2中的不同群体的线纹海马亲本按照来源地进行完全双列杂交，进行配组 繁殖； 54. 将步骤S3所得的每一个繁殖组合的怀孕亲本进行精细护养，避免流产； 55. 分别收集一周内步骤S4中每一个繁殖组合的怀孕亲本解出的所有子代； 56. 将步骤S5的子代在相似环境下，按照相同的饲养方式精屯、培育； 57. 子代成活率和生长比较，得到成活率高、生长速度快、遗传多样性好的优质线纹海 马品系。
[0007] 据调查，广东深圳、福建东山和山东烟台等地区在2009年后分别从美国引进不同 地理群体的线纹海马，遗传背景差异较大。
[0008] 因此，优选地，步骤S1是选取广东深圳、福建东山和山东烟台的养殖群体作为亲 本，挑选活力强、无病无害、身体健康强壮、性腺发育良好的线纹海马作为亲本用于繁殖配 对；优选地，亲本的年龄均为1~1. 5年龄，雄性亲本的体重在10. 0gW上，雌性亲本的体 重在8. 0gW上，而且所有父本或母本的体重差别《2. 0邑。
[0009] 其中，优选地，步骤S2所述强化培育的方法是：海马亲本引进后的1~2个月，雌 雄分开饲养，单独培育半个月，期间保持水溫在22~30°C之间，W冰冻邮为主，辅W榜足类 和丰年虫作为巧料进行强化培育，冰冻邮的日投喂量占线纹海马总体重的5%~8%，每天的 投喂分别在上午8点、下午1点和下午6点S次。
[0010] 更优选地，海马亲本引进后放入白桶中进行强化培育，白桶中放置人工水草，可供 海马附着休息。
[0011] 优选地，步骤S3所述亲本按照来源地进行完全双利杂交的具体方法为： 531. 按照烟台毕X烟台S、烟台毕X深圳S、烟台毕X东山S、深圳毕X深圳S、深 圳毕X烟台S、深圳毕X东山S、东山毕X东山S、东山毕X烟台S和东山毕X深圳基 九个组合进行配组； 532. 分别将S31的各组亲本放入仿生态白桶中配组繁殖，每一个仿生态白桶中放入亲 本数量> 4对，每一个繁殖组合的亲本总数量> 12对。
[0012] 更优选地，步骤S32所述每一个仿生态白桶中分别放入相同数量的雌性和雄性亲 本；操作时，保证轻拿轻放，并戴上乳胶手套，将缠绕在一起的海马轻轻地在水中分开，尽 量减少对海马的刺激和伤害(此时海马受到刺激后可能会产生繁殖障碍或者流产，W及表 皮的损伤容易引起海马致病菌的侵染，增大患病的风险)。将亲本放入白桶后，保持微流水 0. 05m3A刺激，每天早晨保证周边环境安静(海马多在早晨交配，此时保持周边环境安静， 防止对海马产生干扰)。
[0013] 此时，雌雄亲本先发情，并列游动，相互追逐，当兴奋达到高潮时，雄鱼的育儿袋膨 大，袋口张开，雌鱼的生殖器突出；雌雄尾部相互缠绕在一起，雌鱼将卵子排入雄性的育儿 袋中，并完成受精。
[0014] 优选地，步骤S4所述精细护养的具体条件为：保持养殖环境安静，水溫溫差 《3°C;在人工检查海马身体情况时，操作要轻快，离水时间不能超过2min;投喂巧料较未 怀孕期间适当减少，每天投喂冰冻邮3~5次，总投喂量为海马体重的4%~7%。
[0015]优选地，步骤S6所述精屯、培育是在相似的条件及相同的管理方式下，将不同的繁 殖组合的子代分别放入水桶(优选地，所述水桶的为容积为1m3 )中培育，密度为500尾/ m3,巧料W丰年虫为主，巧料投喂量为下一次投喂时水中的巧料略有剩余为宜；当长到1月 龄时，转入小型水泥池(优选地，所述小型水泥池的为容积为9m3 )培育，密度为100尾/m3， 投喂丰年虫和冰冻邮，冰冻邮的日投喂量为海马总体重的5%~8% ;当长到2~3月龄时， 转入成鱼养殖池(优选地，所述成鱼养殖池的为容积为16m3 )饲养，密度为20尾/m3,投喂 冰冻邮，日投喂量为海马总体重的5%~8%。
[0016] 优选地，步骤S7所述子代成活率和生长比较具体方法是：分别在1、2、4月龄时，比 较各个繁殖组合子代的成活率，在4月龄时(线纹海马达到商品鱼时期）对比各组线纹海马 的体重。
[0017] 作为一种优选的可实施方案，上述获得线纹海马杂交优势的育种方法的具体操作 流程总结如下： (1)从遗传背景差异较大的群体挑选线纹海马亲本； 本步骤中收集的亲本是广东深圳、福建东山和山东烟台的养殖群体(据调查，广东深 圳、福建东山和山东烟台等地区在2009年后分别从美国引进不同地理群体的线纹海马，遗 传背景差异较大。）。
[001引挑选活力强、无病无害、身体强壮及性腺发育良好的作为亲本，从每一群体引进的 亲本数量超过80对，亲本的年龄均为1~1. 5年龄，雄性亲本的体重在10. 0gW上，雌性 亲本的体重在8. 0gW上，且所有父本或母本的体重差别《2. 0邑。
[0019] (2)亲本产前强化培育； 海马亲本引进后的1~2个月进行产前强化培育，保持水溫在22~30°C之间，巧料为 丰年虫和冰冻邮，每天的投喂分别在上午8点、下午1点和下午6点=次，冰冻邮的日投喂 量占线纹海马总体重的5%~8%。
[0020] (3)不同群体的线纹海马亲本按照完全双列杂交的方法进行配组繁殖； 在仿生态白桶中放入雌雄亲本，并按照来源地进行完全双列杂交，即烟台毕X烟台 基、烟台毕X深圳S、烟台毕X东山S、深圳毕X深圳S、深圳毕X烟台S、深圳毕X东 山基、东山毕X东山S、东山毕X烟台A和东山毕X深圳A等九个组合。
[0021] 从候选亲本中，每一个桶中分别随机放入4雌和4雄亲本，每一组设置=个平行。 在操作的时候，一定要轻拿轻放，并戴上乳胶手套，将缠绕在一起的海马轻轻地在水中分 开，尽量减少对海马的刺激和伤害。此时海马受到刺激后可能会产生繁殖障碍或者流产，W 及表皮的损伤容易引起海马致病菌的侵染，增大患病的风险。
[0022] 将亲本在放入白桶后，保持微流水（0.05m3A)刺激。海马多在早晨交配，此时保 持周边环境安静，防止对海马产生干扰。
[0023] 在放入白桶中2~7d后，雌雄亲本先发情，并列游动，相互追逐，当兴奋达到高潮 时，雄鱼的育儿袋膨大，袋口张开，雌鱼的生殖器突出。雌雄尾部相互缠绕在一起，雌鱼将卵 子排入雄性的育儿袋中，并完成受精。
[0024] (4)怀孕海马培育和护理 在怀孕期间，雄性海马体质较弱，对外界干扰较为敏感，需要精细护养。因此，需保持养 殖环境安静，水溫溫差《