3°C;在人工检查海马身体情况时，操作要轻快，离水时间不能超过 2min。投喂巧料较未怀孕期间适当减少，每天投喂冰冻邮3~5次，总投喂量为海马体重 的4%~7%。受精卵在雄性的育儿袋中发育15~22d后，雄性将其排出。
[00巧](5)分别收集一周内每一个繁殖组合解出的所有稚鱼； 由于海马的受精和怀孕时间不同，因此，亲本产幼的时间不同。为了避免由于出生时间 不同而造成较大的误差，分别只收集每一个繁殖组合一周w内解出的所有稚鱼。
[00%] (6)相同饲养方式和相似条件培育子代； 所有子代在相同的管理方式及相似的条件下饲养。将收集刚解出的稚鱼放入水桶中 (容积为1m3 )培育，密度为500尾/m3，巧料W丰年虫为主，巧料投喂量为下一次投喂时水 中的巧料略有剩余为宜。当长到1月龄时，转入小型水泥池(容积为9m3)中培育，密度为 100尾/m3，投喂丰年虫和冰冻邮，冰冻邮的日投喂量为海马总体重的5%~8%。当长到2~ 3月龄时，转入成鱼养殖池(容积为16m3 )饲养，密度为20尾/m3，投喂冰冻邮，日投喂量为 海马总体重的5%~8〇/〇。
[0027] (7)海马子代生长和成活率对比。
[0028] 分别在1、2、4月龄，对每个繁殖组合的子代数量进行统计，进行成活率比较；在4 月龄时(线纹海马达到商品鱼时期)，对每个繁殖组合的子代进行称重，对比各组的体重。
[0029] 我们都知道，杂交育种设及到不同的地理种群(遗传背景较大)，其生活习性或适 宜的生活环境等等因素，都有微妙的变化，因此，是否能够成功地完成不同群体间的杂交W 及杂交后子代能否正常生长，W及子代的成活率，受海马本身的生物学特性、人工操作水平 及养殖环境等多个因素的影响。经过大量的研究和探索得到本发明上述线纹海马的杂交育 种方法，能够成功地、高效地实现不同地理种群(遗传背景较大)的线纹海马的杂交育种。通 过本发明的选育方法利用杂交优势，明显提高线纹海马的成活率和生长速度，增加选育群 体的遗传多样性，提高线纹海马苗种的种质水平，促进优良品系的选育。
[0030] 本发明具有W下有益效果： (1)本发明弥补了现有线纹海马杂交育种技术的空白，研究出了一种获得线纹海马杂 交优势的育种方法，能够培育出成活率高、生长快的线纹海马，可W解决线纹海马种质衰 退、苗种质量下降的问题，改善海马养殖产业缺乏优良品种的现状。
[0031] (2)本发明方法有效利用杂交优势，可W促进线纹海马优良品系的选育，能够提高 线纹海马的遗传多样性水平。
[0032] (3)本发明通过具有明显差异的不同地理群体杂交，线纹海马子代在多个重要经 济性状上出现了超亲的现象，获得了明显的成活率和生长率杂交优势。
【附图说明】
[0033] 图1为深功I、东山和山东的线纹海马群体双列杂交子代的成活率示意图。
[0034] 图2为深功I、东山和山东的线纹海马群体双列杂交子代的体重示意图。
【具体实施方式】
[0035]W下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明 做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试 剂、方法和设备。
[0036] 除非特别说明，W下实施例所用试剂和材料均为市购。 阳〇37] 实施例1 获得线纹海马杂交优势的育种方法，步骤如下： 1、引进不同地理群体的线纹海马作为亲本，并进行产前强化培育 (1)亲本引进 据调查，广东深圳、福建东山和山东烟台等地区在2009年后分别从美国引进不同地理 群体的线纹海马，遗传背景差异较大。
[0038] 2013年2月，本课题组分别从广东深圳、福建东山和山东烟台的线纹海马养殖公 司引进线纹海马亲本80对、82对和85对，并饲养于广东湛江。
[0039] (2)亲本挑选 引进的亲本年龄均为1~1. 5年龄，雌海马亲本体重至少8. 0g，雄海马亲本体重至少 10.0g，亲本间的体重差距《2.0g。挑选活力强、无病无害、身体强壮及性腺发育良好的作 为亲本。
[0040] (3)亲本产前强化培育 引进后的1~2个月，亲本放于白桶中进行培育，白桶中放置人工水草，可供海马附着 休息。在亲本培育期间，保持水溫稳定，在22~30°C之间，巧料投喂主要W冰冻邮为主，辅 W榜足类和丰年虫，冰冻邮每天的投喂量占海马体重的5%~8%，每天的投喂分别在上午8 点、下午1点和下午6点=次。该批线纹海马将作为海马高成活率、生长快品系选育的基础 群体。
[0041] 2、按照完全双列杂交进行亲本配组繁殖 (1 )2013年3月20日，引进的海马亲本经过约一个月的强化培育，生长正常，育儿袋、性 腺发育良好。每一个群体随机挑选活力强、体表无伤的雌雄海马(各4尾)放入白桶中，放入 时采用完全双列杂交的方法进行配组，即烟台毕X烟台S、烟台毕X深圳S、烟台毕X东 山S、深圳毕X深圳S、深圳毕X烟台S、深圳毕X东山S、东山毕X东山S、东山毕X 烟台S和东山毕X深圳S。每个组合设置=个平行，即每一个繁殖组合有12对海马亲本。
[0042] (2)将各繁殖组合亲本放入仿生态白桶中，在操作的时候，一定要轻拿轻放，并戴 上乳胶手套，将缠绕在一起的海马轻轻地在水中分开，尽量减少对海马的刺激和伤害。此时 海马如果受到刺激，可能会产生繁殖障碍或者流产，W及表皮的损伤容易引起海马致病菌 的侵染，增大患病的风险。
[0043] 将亲本在放入白桶后，保持微流水（0.05m3A)刺激。海马多在早晨交配，此时保 持周边环境安静，防止对海马产生干扰。
[0044] 3、怀孕海马培育和护理及稚鱼收集 在放入白桶中2~7d后，雌雄亲本先发情，并列游动，相互追逐，当兴奋达到高潮时， 雄鱼的育儿袋膨大，袋口张开，雌鱼的生殖器突出。雌雄尾部相互缠绕在一起，雌鱼将卵子 排入雄性的育儿袋中，并完成受精。在怀孕期间，雄性海马体质较弱，对外界干扰较为敏感， 需要精细护养。因此，需保持养殖环境安静，保持水溫溫差《3°C;在人工检查海马身体情 况时，操作要轻快，离水时间不能超过2min。投喂巧料较未怀孕期间适当减少，每天投喂冰 冻邮4~5次，总投喂量为海马体重的4%~7%。受精卵在雄性的育儿袋中发育15~22d 后，雄性将其排出。 W45] 由于海马的受精和怀孕时间不同，因此，亲本产幼的时间不同。为了避免由于出生 时间不同而造成较大的误差，本次实验收集2013年4月4日~4月11日刚解出的稚鱼(分 别只收集每一个繁殖组合一周W内解出的所有稚鱼)。
[0046] 4、鱼苗在相同的管理方式及相似的条件下培育 每一组繁殖的海马子代分别单独放入水桶中（容积为1m3 )培育，密度为500尾/m3。 期间，每天适当增加巧料的投喂量，巧料主要W丰年虫为主，巧料W丰年虫为主，巧料投喂 量为下一次投喂时水中的巧料略有剩余为宜。
[0047] 随着个体生长，在1月龄时，从每个繁殖组合中随机选取900尾幼海马放入小型水 泥池(容积为9m3 )培育，密度为100尾/m3，投喂丰年虫和冰冻邮，冰冻邮的日投喂量为海 马总体重的5%~8〇/〇。
[0048]在2月龄时，转入成鱼养殖池饲养(容积为16m3 )培育，密度为20尾/m3，直到约 为4月龄，期间投喂冰冻邮，日投喂量为海马总体重的5%~8%。
[0049]5、子代成活率和生长比较 (1) 2013年5月6~8日、6月8~9日、8月7~9日我们分别统计每一个繁殖组合 的成活率。
[0050] 经分析计算，发现线纹海马纯系的4月龄成活率在68. 64%~72. 67%，平均值为 70. 58% ;杂交系成活率在71. 38%~79. 60%，平均值为75. 29%，比纯系提高了 6. 70〇/〇。 阳化U 其中，东山毕X深圳S的杂交优势最明显，比纯系提高了11. 26% ;杂交优势> 8% 的还有东山毕X烟台烟台毕X东山S和深圳毕X烟台S等组合设日表1和图1所示)。
[0052] 表1线纹海马F1代1、2、4月龄的成活率
(2) 2013年8月7~9日我们从每个养殖池中随机抽取100尾海马进行称重。
[0053] 经分析计算，发现线纹海马纯系的4月龄平均体重在5. 20~5. 35g，平均值为 5. 27g;杂交系体重在5. 37~5. 76g，平均值为5. 61g，比纯系提高了 6. 32〇/〇。
[0054] 其中，烟台毕X深功I、S东山毕X深圳S和深圳毕X东山S运几组的平均体重 最高，分别为5.76g、5. 74g和5.65g;东山毕X深圳基、烟台毕X东山S和烟台毕X深 功U运几组的杂交优势最明显，分别为8. 81%、8. 47%和7. 11%巧日表2和图2所示)。 阳化5] 表2线纹海马F1代4月龄的体重
因此，本发明通过不同地理群体杂交获得的线纹海马子代在成活率和生长速度比未杂 交子代有显著的提高；同时由于亲本遗传背景差异较大，子代的遗传多样性水平得到提高， 有利于后续线纹海马优良品种的选育。
[00