一种杂交构树组织培养的方法
【技术领域】
[0001 ]本发明属于树木种植领域，尤其涉及一种杂交构树组织培养的方法。
【背景技术】
[0002]目前杂交构树组织培养的方法各异，但都不是很理想，构树生长慢，长势不好，高度不利于炼苗等。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种杂交构树组织培养的方法，旨在解决现有的杂交构树组织培养的方法，构树生长慢，长势不好，高度不利于炼苗的问题。
[0004]本发明是这样实现的，一种杂交构树组织培养的方法包括:
[0005]步骤一、杂交构树组织培养外植体的采集，采集带腋芽的嫩枝；
[0006]步骤二、对室外采集的外植体进行清洗及消毒；
[0007]步骤三、经消毒处理后的外植体愈伤组织的诱导；
[0008]步骤四、愈伤组织的再分化及继代培养；
[0009]步骤五、脱毒苗木生根培养；
[0010]步骤六、炼苗；
[0011]步骤七、大田种植。
[0012]进一步，采集的外植体长度在2-4cm之间。
[0013]进一步，对室外采集的外植体进行清洗及消毒的具体方法为:
[0014]经流水冲洗5分钟，I%洗涤灵水浸泡5分钟，消毒剂有70%乙醇，消毒30秒，无菌水冲洗4-5遍;然后放入0.1 %氯化汞溶液，消毒5-8分钟，无菌水冲洗5-6次，放入超净台，紫外灯照射30分钟，进行外植体和超净台的同时消毒。
[0015]进一步，经消毒处理后的外植体愈伤组织的诱导的具体方法为:
[0016]切去在消毒过程中坏死的周边组织，剩余部分切成0.5-lcm长，带有一个腋芽的小径段，置于灭菌后的诱导愈伤组织形成的第一培养基或第二培养基上培养，暗处理48小时后，光照时间为14h/d，光照强度15001x，补光应安排于白天进行，温度为25±3°C，培养20-25天。
[0017]进一步，愈伤组织的再分化及继代培养的具体方法为:
[0018]20-25天后，将杂交构树小径段的腋芽抽生出来的枝条割下，分割成带有I个腋芽的小径段继续放到第三培养基上培养，进行增值扩繁，光照时间为10_12h/d，光照强度2000 Ix，温度为25 土 3°C，培养20-25天。再长出3?5片小叶后再次进行次继代培养，一直扩繁到所需的量为止，把愈伤组织分化而成的丛生幼苗用剪刀单个分离开，置于第三培养基上进行继代培养。
[0019]进一步，脱毒苗木生根培养的具体方法为:
[0020]经过大量继代培养的杂交构树组织培养苗，放于第四培养基或第五培养基上进行生根培养，培养2-3个星期后渐渐长出白色的幼根，培养条件是光照时间为10-12h/d，温度为25±3°C，待根生长出4?6条时可以进行炼苗处理。
[0021]进一步，炼苗的具体方法为:
[0022]将生根后的杂交构树组织培养苗先连同组培瓶放于阳光下，4-5天后松开瓶盖，松盖后3天取掉瓶盖，使组培瓶苗处于与外界环境全开放状态，2天后进行移植工作;将组织培养的构树苗由培养基中取出后洗净培养基，用稀释1000倍的多菌灵或百菌清溶液浸泡10-20分钟，随后将杂交构树苗木接入已用千分之三甲醛灭菌处理过的混有园土、蛭石及少量珍珠岩的基质中培养，蛭石、园土、珍珠岩的比值是6:3:1，炼苗条件是温度25°C左右，湿度为75%-90%，在植株上层套上塑料薄膜保水，结合当地环境进行通风换气，培养10天逐渐取下塑料薄膜，成功渡过炼苗的苗木进行大田种植。
[0023]进一步，大田种植优选的时间在春季和秋季。
[0024]进一步，所述第一培养基的组分为:MS+BA1.20mg\L+IBA0.20mg\L+NAA0.30mg\L；
[0025]第二培养基的组分为:MS+BA1.40mg\L+IBA0.32mg\L+NAA0.43mg\L；
[0026]第三培养基的组分为:MS+BA1.00mg\L+NAA0.50mg\L+GAl.00mg\L；
[0027]第四培养基的组分为:1\2MS(MS)+NAA0.31mg\L+GAl.00mg\L；
[0028]第五培养基的组分为:1\2MS(MS)+NAA0.4mg/l+IAAl.5mg/l。
[0029]本发明可有效改良杂交构树组织培养的方法，有效缩杂交构树的组培时间、提高杂交构树组培苗的质量，增殖快，组培苗健壮，生根快，生产成本低，污染低，从外植体接种到出苗时间短。
【附图说明】
[0030]图1是本发明实施例提供的杂交构树组织培养的方法流程图。
【具体实施方式】
[0031]以下结合附图对本发明做进一步描述:
[0032]请参阅图1:
[0033]—种杂交构树组织培养的方法，包括:
[0034]SlOl、杂交构树组织培养外植体的采集，采集带腋芽的嫩枝；
[0035]S102、对室外采集的外植体进行清洗及消毒；
[0036]S103、经消毒处理后的外植体愈伤组织的诱导；
[0037]S104、愈伤组织的再分化及继代培养；
[0038]S105、脱毒苗木生根培养；
[0039]S106、炼苗；
[0040]S107、大田种植。
[0041 ]进一步，采集的外植体长度在2_4cm之间。
[0042]进一步，对室外采集的外植体进行清洗及消毒的具体方法为:
[0043]经流水冲洗5分钟，I%洗涤灵水浸泡5分钟，消毒剂有70 %乙醇，消毒30秒，无菌水冲洗4-5遍;然后放入0.1 %氯化汞溶液，消毒5-8分钟，无菌水冲洗5-6次，放入超净台，紫外灯照射30分钟，进行外植体和超净台的同时消毒。
[0044]进一步，经消毒处理后的外植体愈伤组织的诱导的具体方法为:
[0045]切去在消毒过程中坏死的周边组织，剩余部分切成0.5-lcm长，带有一个腋芽的小径段，置于灭菌后的诱导愈伤组织形成的第一培养基或第二培养基上培养，暗处理48小时后，光照时间为14h/d，光照强度15001x，补光应安排于白天进行，温度为25±3°C，培养20-25天。
[0046]进一步，愈伤组织的再分化及继代培养的具体方法为:
[0047]20-25天后，将杂交构树小径段的腋芽抽生出来的枝条割下，分割成带有I个腋芽的小径段继续放到第三培养基上培养，进行增值扩繁，光照时间为10_12h/d，光照强度2000 Ix，温度为25 土 3°C，培养20-25天。再长出3?5片小叶后再次进行次继代培养，一直扩繁到所需的量为止，把愈伤组织分化而成的丛生幼苗用剪刀单个分离开，置于第三培养基上进行继代培养。
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