一种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体的是一种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗 快速繁殖的方法，包括种苗出瓶后的栽培管理技术。
【背景技术】
[0002] 肉饼类兜兰（Paphiopedilum hybrid)是兰科（Orchidaceae)兜兰属植物杂交种， 其花型奇特且较大，花色艳丽，是一种目前市场上较为流行的兜兰栽培种。
[0003] 兜兰属植物杂交种比原生种花型花姿更为优美，花色更为丰富艳丽，其抗逆性也 更强。在国际市场上，以兜兰为亲本的杂交花卉深受人们的喜爱，已成为世界兰花产业的一 大支柱，取得了巨大的经济效益。但我国肉饼类兜兰的杂交育种工作才刚刚起步。因此，利 用我国丰富的兰科植物资源，进行肉饼类兜兰的杂交育种不仅优势明显而且很有意义。
[0004] 此外，肉饼类兜兰虽具有很高的杂交亲和性，但由于其杂交种子无胚乳或胚发育 不完全，在自然状态下萌发率极低且原球茎褐化率偏高，而利用生物技术可以有效提高萌 发率并达到快速生产健康种苗的目的。
[0005] 公开于该【背景技术】部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应 当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
【发明内容】
[0006] 为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种肉饼类兜兰杂交育种及其种 苗快速繁殖的方法，包括种苗移栽后的栽培管理措施，解决了肉饼类兜兰因种子发芽率较 低而繁殖速度慢的问题，为兜兰新品种的选育提供了具体的操作方法。
[0007] 本发明所提供的技术方案是：
[0008] -种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法，包括以下步骤：
[0009](1)人工授粉：选肉饼类兜兰（Paphiopedilum hybrid)作为母本，自交、同一品种 内不同株系间杂交或不同种内种间杂交，在花朵开放4-15d后进行人工授粉，授粉后生长 得到蒴果；
[0010] (2)种子成熟度的选择：选择生长300-360d的充分膨大蒴果作为种子；
[0011] (3)果荚的消毒与播种：剪取果荚后用自来水洗净，经中性洗涤剂冲洗，酒精搽 拭，流水冲洗15min后转入超净工作台内，再用75%酒精消毒30s，1 %次氯酸钠溶液浸泡 12min，之后再用无菌水冲洗6次，切开果荚将种子均匀撒于萌发培养基表面进行培养；
[0012](4)种子萌发形成原球茎并分化成小苗：播种后在正常条件下培养，10d后种子开 始膨大形成无色透明或白色的原球茎，20d达到萌发高峰，原球茎在萌发培养基上再经分化 形成小苗；
[0013] (5)壮苗培养：将原球茎分化形成的小苗转接到壮苗生根培养基上培养，在温度 25-28°C、光照强度30 y mol ? m 2 ? s \光照时间12h ? d1的条件下，20-30d转接1次，培养 两个周期40-60d形成健壮的植株；
[0014] (6)炼苗移栽：将根系生长良好、叶片长3-7cm的植株转移到自然光下炼苗10d，然 后将其从壮苗生根培养基中取出，洗净根部的培养基，移栽至基质中培养；
[0015] (7)苗期栽培管理：不同的苗龄采用不同的栽培管理措施。
[0016] 作为优选，本发明的技术方案中，步骤⑷中所述的种子萌发培养基含： 1/2-1/8MS、椰子汁 50-300ml ? L \ 活性炭 0? 5-2. 0g ? L \ 蔗糖 20-30g ? L 1和琼脂 3. 5-6. 0g ? L \ 其 pH 为 5. 0-5. 5。
[0017] 作为优选，本发明的技术方案中，所述的椰子汁用1. 0-3. 0g ? L 1蛋白胨替代。
[0018] 作为优选，本发明的技术方案中，步骤（4)中播种后正常条件下进行培养：光照强 度30-40umol ? m2 ? s \光照周期12h ? d \培养温度为25±2°C。
[0019] 作为优选，本发明的技术方案中，步骤（5)中所述的壮苗生根培养基含： 1/2-1/8MS、花宝 1 号 0? 5-2. 0g ? L \花宝 2 号 0? 5-2. 0g ? L \蛋白胨 1. 0-3. 0g ? L \香蕉 20-100g ? L \土豆 50-150g ? L 1和 IBA0. 1-2. 0g ? L 工。
[0020] 作为优选，本发明的技术方案中，所述的花宝1号N:P:K含量比为7:6:19 ;花宝2 号N:P:K含量比为20:20:20。
[0021] 作为优选，本发明的技术方案中，步骤（6)中所述的基质分为小苗基质、中苗基质 和大苗基质；所述的小苗基质为：3-5mm粒径的兰石：3-6mm树皮：5-8mm椰子壳的体积比 为3 :2 :1;所述的中苗基质为：6-9mm粒径的兰石：6-9mm树皮：8-12mm椰子壳的体积比为 3 :2 :1;所述的大苗基质为：l〇-15mm粒径的兰石：9-12mm树皮：8-12mm椰子壳的体积比为 3:2:1〇
[0022] 作为优选，本发明的技术方案中，步骤（7)中所述的栽培管理方法分为小苗、中苗 和大苗栽培管理方法。
[0023] 作为优选，本发明的技术方案中，所述的小苗栽培管理方法为：按照基质配比要求 种植后立即充分淋水，加强通风，栽植后第1周光照控制在4500-55001X，以后慢慢增强光 照，3个月后强度控制在11000-130001x;温度控制在22-28°C;相对湿度维持在80%以上， 栽植后1个月内每天在叶面喷洒清水2-3次；施肥以叶面喷洒为主，在栽植5天后可开始喷 肥，选择水溶性促根肥2000-3000倍浓度喷洒叶面，以叶面稍有水珠形成为度；栽植1-3个 月内，与水溶性均衡肥轮流喷洒2次/周，喷肥需在晴天午后实施；所述中苗栽培管理方法 为：换杯后立即以清水充分浇灌，光照维持在10000-120001x ;夜间温度不超过22°C，最高 温度不超过28°C，空气相对湿度80% ;中苗期兜兰生长迅速，需保持栽培基质湿润；换杯1 个月后可开始施肥，以水溶性均衡肥、水溶性高氮肥及微量元素肥3种肥料轮流使用，施肥 方式以2000-3000倍浓度浇灌，每浇2次清水后施肥1次；所述的大苗栽培管理方法同中 苗。
[0024] 作为优选，本发明的技术方案中，所述的水溶性促根肥的N:P:K含量比为 9:45:15 ;所述的水溶性均衡肥的N:P:K含量比为20:20:20 ;所述的水溶性高氮肥的N:P:K 含量比为30:10:10。
[0025] 与现有技术相比，本发明具有的有益效果为：
[0026] (1)本发明的方法具有杂交结实率高、杂交种子萌发率高、成苗快、种苗品质好的 优点，本发明又可显著抑制原球茎褐化率。
[0027] (2)本发明的方法系统地研究了肉饼类兜兰种苗生产的全过程，本方法可操作性 强，应用价值高。
[0028] (3)本发明的方法能有效缩短育种和生产周期、降低成本，对丰富兜兰品种、提高 兜兰品质具有非常积极的意义。
【具体实施方式】
[0029] 下面结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。实施例中涉及的概念如下： 由瓶苗刚移栽出来的为小苗；小苗生长12个月后叶片长约10-15cm为中苗；中苗生长10个 月后叶片长约16-33cm为大苗。
[0030] 实施例1:
[0031] -种肉饼类兜兰杂交育种及其种苗快速繁殖的方法，包括以下步骤：
[0032] (1)人工授粉：选肉饼类兜兰（Paphiopedilum hybrid)作为母本，自交、同一品种 内不同株系间杂交或不同种内种间杂交，在花朵开放4d后进行人工授粉，授粉后生长得到 萌果；
[0033] (2)种子成熟度的选择：选择生长300d的充分膨大蒴果作为种子；
[0034] (3)果荚的消毒与播种：剪取果荚后用自来水洗净，经中性洗涤剂冲洗，酒精搽 拭，流水冲洗15min后转入超净工作台内，再用75%酒精消毒30s，1 %次氯酸钠溶液浸泡 12min，之后再用无菌水冲洗6次，切开果荚将种子均匀撒于萌发培养基表面进行培养；
[0035] (4)种子萌发形成原球茎并分化成小苗：播种后在正常条件下培养，10d后种子 开始膨大形成无色透明或白色的原球茎，20d达到萌发高峰，原球茎在萌发培养基上再经 分化形成小苗；所述的种子萌发培养基含：1/2MS、椰子汁50