一种预防樱桃花期冻害的方法
【专利摘要】本发明涉及一种预防樱桃花期冻害的方法，包括对在低温条件下处于花期的樱桃树喷施NaHS溶液，所述NaHS溶液的浓度优选为0.075mmo1/L。本发明方法缓解了低温对樱桃花器官的伤害，并通过详细的实验设计和分析，明确了最佳喷施时期和喷施浓度，这对准确缓解涝害，减少损失具有巨大的实际应用意义。
【专利说明】
一种预防樱桃花期冻害的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及农业领域，具体涉及一种预防樱桃花期低温冻害的方法。
【背景技术】
[0002] 甜樱桃不耐低温，花期极易遭受低温伤害，花期一旦遇低温轻者减产，重者绝收， 经济损失严重。近年发现H 2S同N0和C0-样，可作为气体信号分子调节植物生长发育和对环 境的适应，比如，外施适量H2S硫化氢可促进植物生长和种子萌发，显著提高干旱条件下拟 南芥幼苗的存活率，降低渗透胁迫下甘薯叶片的失绿程度，提高热胁迫下烟草悬浮细胞的 存活率和再生能力，减少植物体内Cu、Cd、Cr和A1等多种重金属的积累，缓解重金属胁迫对 植物根系生长的抑制，抑制光诱导的气孔张开，延长草莓的货架期等。有关H 2S对低温条件 下樱桃的影响尚未见报道。
【发明内容】
[0003] 本发明针对目前的问题，提供一种预防樱桃花期冻害的方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：一种预防樱桃花期冻害的 方法，包括对在低温条件下处于花期的樱桃树喷施NaHS溶液。
[0005] 优选地，喷施时期为发生低温前0-18小时。
[0006] 优选地，喷施时期为优选为发生低温前0-6小时。
[0007] 所述NaHS溶液的配制方法为先后称取1700mg KH2P〇4、19000mg KN03、200mg甘氨 酸、50mg 6-BA，分别置于4个500ml烧杯中，除6-BA需要先用少量0. lmol/L的HCL溶液溶解 外，其他均加适量蒸馏水后玻璃棒搅拌促溶，最后分别用蒸馏水定溶至1000ml、1000ml、 5001111、5001111容量瓶中，8口为170011^/11〇12?04、1900011^/1謂03、20011^/1甘氨酸、5011^/16-BA母液，分别保存于小口瓶中，贴标签注明名称、浓度、日期。取500ml烧杯，加入二分之一蒸 馏水，分别吸取l〇〇ml KH2P〇4、l〇〇ml KN03、10ml甘氨酸、10ml 6-BA母液，依次加入烧杯中， 搅拌混匀，最后定溶于l〇〇〇ml容量瓶中，即为溶液M，称适量NaHS，用溶液Μ溶解并定溶至1L， 混匀、密封，即为NaHS溶液。
[0008] 优选地，所述NaHS溶液中NaHS的浓度为0.025-0.2mmol/L。
[0009] 优选地，所述NaHS溶液中NaHS的浓度为0.07 5mmo 1 /L。
[0010]本发明的有益效果是:本发明首次发现，低温条件下喷施一定浓度的H2S能起到缓 解樱桃花器官伤害的作用。H2S是一种气体，本发明在处理时采用H2S供体NaHS进行配制，并 且采用特定的溶剂进行配置得到最合适的硫化氢溶液，本发明通过详细的实验设计和分 析，明确了最佳喷施时期和喷施浓度，以及最合适的溶剂，这对准确缓解花期冻害，提高低 温冻害下的坐果率，减少损失具有巨大的实际应用意义，特别是将NaHS溶于特定溶剂后，取 得了预料不到的增效的技术效果。
【具体实施方式】
[0011] 下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被 本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
[0012] 本发明实施例包括：
[0013] 以5年生盆栽甜樱桃品种'早大果'为试验材料，在花期开展低温冻害试验。当甜樱 桃'早大果'处于盛花期时，将其置于人工气候室内模拟花期冻害，设置人工气候室的温度 为_2°C，低温处理时间为4h。
[0014] 所述NaHS溶液的配制方法为先后称取1700mg KH2P〇4、19000mg KN03、200mg甘氨 酸、50mg 6-BA，分别置于4个500ml烧杯中，除6-BA需要先用少量0. lmol/L的HCL溶液溶解 外，其他均加适量蒸馏水后玻璃棒搅拌促溶，最后分别用蒸馏水定溶至1000ml、1000ml、 5001111、5001111容量瓶中，8口为170011^/11〇12?04、1900011^/1謂03、20011^/1甘氨酸、5011^/16-BA母液，分别保存于小口瓶中，贴标签注明名称、浓度、日期。取500ml烧杯，加入二分之一蒸 馏水，分别吸取l〇〇ml KH2P〇4、100ml KN03、10ml甘氨酸、10ml 6-BA母液，依次加入烧杯中， 搅拌混匀，最后定溶于l〇〇〇ml容量瓶中，即为溶液M，称适量NaHS，用溶液Μ溶解并定溶至1L， 混匀、密封，得到0-0.2mmol/L的NaHS溶液。
[0015]因为H2S易挥发，所以现配现用效果最好。喷施时，将液体倒入喷壶中，均匀喷洒至 樱桃树的树冠即可。
[0016] 1、不同NaHS浓度对甜樱桃花期低温冻害的缓解效果
[0017]研究喷施不同浓度的NaHS对甜樱桃花期低温冻害的缓解效果。将用溶剂Μ配置的 不同浓度NaHS均匀喷洒至处于花期的樱桃树的树冠，6h后移入人工气候室，设置温度为-2 °C，低温处理时间为4h，取样测定。
[0018] (1)不同NaHS浓度对低温下花粉活力和柱头可授性的影响
[0019]研究喷施0-0.2mmol/L的NaHS对低温冻害下甜樱桃花粉活力和柱头可授性的缓解 效果，NaHS配制采用溶液Μ做溶剂。CK为正常管理的幼苗。
[0020] 表1为不同NaHS浓度对低温冻害下甜樱桃花粉活力和柱头可授性的影响，结果表 明在0-0.075mmol/L范围内，随着NaHS浓度的增加，NaHS对增加甜樱桃花粉活力和柱头可授 性的效果逐渐增强，当NaHS浓度为0.075mmol/L时效果显著。当NaHS的浓度超过0.075mmol/ L，其效果逐渐降低，较高浓度的NaHS会起到抑制甜樱桃花粉活力和柱头可授性的负面效 应。
[0021] 表1不同NaHS浓度对低温下花粉活力和柱头可授性的影响
[0022]
[0023] (2)不同NaHS浓度对低温胁迫下花粉、柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电 导率的影响
[0024]表2、表3分别为不同NaHS浓度对低温下甜樱桃花粉和柱头超氧阴离子、过氧化氢、 丙二醛、相对电导率的影响。由表看出，与CK相比，低温处理显著增加了花粉和柱头超氧阴 离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率的含量，导致质膜过氧化，细胞膜透性增加。喷施〇-0.075mmol/L的NaHS均可不同程度的降低花粉和柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对 电导率的含量，以〇.〇75mmol/L的NaHS对降低花粉和柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相 对电导率效果最好，可明显缓解低温伤害。当NaHS的浓度超过0.075mmol/L时，其降低低温 胁迫下花粉和柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率的效果逐渐降低，且较高的 随着喷施时间的延长，对低温的缓解效果越差。
[0025] 表2 NaHS浓度对低温冻害下花粉超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率的影 响
[0026]
[0027] 表3 NaHS浓度对低温冻害下花柱超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率的影 响
[0028]
[0029] (3)不同NaHS浓度对低温胁迫下花粉、柱头抗氧化酶活性的影响 [0030]表4、表5为NaHS浓度对低温胁迫下甜樱桃花粉和柱头抗氧化酶活性的影响。由表 看出，与CK相比，低温处理显著降低了花粉和柱头的抗氧化酶活性。喷施0-0.075mmol/L的 NaHS均可不同程度的提高花粉和柱头中300、？00、0六1^?乂抗氧化酶的活性，但0.075111111〇1/1 的NaHS对提高花粉和柱头中500、？00、041^?乂抗氧化酶的活性效果最好。与单纯低温处理 相比，喷施0.075111111〇1/1^如把可使花粉的500、？00、041'、4?乂分别增加了295.44%、 5.77.56 % %、213.75% % 和91 .60 %，使柱头中的 SOD、POD、CAT、APX分别增加了 223 · 90 % %、201 · 55 %、104 · 96 % 和67 · 66 %。当NaHS浓度超过0 · 075mmol/L时，其对提高花 粉和柱头中SOD、POD、CAT、APX抗氧化酶的效果逐渐减弱，且较高浓度的NaHS甚至起到抑制 抗氧化酶的活性的副作用。
[0031] 表4不同NaHS浓度对低温冻害下甜樱桃花粉抗氧化酶活性的影响
[0032]
[0033] 表5不同NaHS浓度对低温冻害下甜樱桃柱头抗氧化酶活性的影响
[0034]
[0035] 2、最佳喷施时期的确定
[0036] 在低温处理的不同时期喷施0.075mmol/L的H2S供体NaHS，取样测定花粉活力、柱 头可授性及花器官中活性氧、脯氨酸、丙二醛含量及抗氧化酶活性(300、？00、041'^?乂)的含 量变化。NaHS配制采用溶液Μ做溶剂。
[0037]研究不同喷施时期对花期低温冻害的缓解效果，结果如下：
[0038] (1)不同喷施时期对低温下冻害花粉活力和柱头可授性的影响
[0039] 表6为不同喷施时期对低温下冻害花粉活力和柱头可授率的影响。由表看出，与CK 相比，低温处理显著降低了甜樱桃花粉活力和柱头有可授率。低温处理前〇_18h喷施 0.075mmol/L的NaHS均可不同程度的提高甜樱桃花粉活力和柱头有可授性，但以低温处理 前0-6h内喷施0.075mmol/L的NaHS对低温的缓解效果最好。低温处理开始后再喷施 0.075mmol/L的NaHS对提高低温胁迫下花粉活力和柱头有可授性无显著影响，且随着喷施 时间的延长，对低温的缓解效果越差，超过6hNaHS便失去效果，原因可能是长时间的低温处 理易导致花器官永久性伤害，即使补救也不能恢复到原来状态。
[0040] 表6不同喷施时期对低温下花粉活力和柱头可授性的影响
[0041]
[0042] (2)不同喷施时期对低温冻害下花粉、柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电 导率的影响。
[0043] 表7、表8分别为不同喷施时期对低温下花粉和柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二 醛、相对电导率的影响。由表看出，与CK相比，低温处理显著增加了花粉和柱头超氧阴离子、 过氧化氢、丙二醛、相对电导率的含量，导致质膜过氧化，细胞膜透性增加。低温处理前〇-18h喷施0.075mmol/L的NaHS均可不同程度的降低花粉和柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二 醛、相对电导率的含量，但以低温处理前〇_6h内喷施0.075mmol/L的NaHS对低温的缓解效果 最好。低温处理开始后再喷施〇.〇75mmol/L的NaHS对降低超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相 对电导率无显著影响，且随着喷施时间的延长，对低温的缓解效果越差，超过6h再喷施 0.075mmol/L的NaHS便失去效果，原因可能是长时间的低温处理易导致花器官永久性伤害， 即使补救也不能恢复到原来状态。
[0044] 表7不同喷施时期对低温冻害下花粉超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率 的影响
[0045]
[0046] 表8不同喷施时期对低温冻害下柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率 的影响
[0047]
[0048] (3)不同喷施时期对低温胁迫下甜樱桃花粉、柱头抗氧化酶活性的影响
[0049] 表9、表10为不同喷施时期对低温胁迫下甜樱桃花粉、柱头抗氧化酶活性的影响。 由表看出，与CK相比，低温处理显著降低了花粉和柱头的抗氧化酶活性。低温处理前0_18h 喷施0.075mmol/L的NaHS均可不同程度的提高花粉和柱头中300、？00、041\4?乂抗氧化酶的 活性，但以低温处理前〇_6h内喷施0.075mmol/L的NaHS对提高花粉和柱头中S0D、P0D、CAT、 APX抗氧化酶的活性效果最好。与单纯低温处理相比，低温处理前6h喷施0.075mmol/L NaHS 可使花粉的 300、？00、041^?乂分别增加了336.34%、504.98%、222.57%和81.29%，使柱头 中的 300、？00、0厶1^?乂分别增加了290.03%、523.13%、244.66%和120.79%。低温处理开 始后再喷施〇. 〇75mmo 1/L的NaHS对提高花粉和柱头中SOD、POD、CAT、APX抗氧化酶的活性无 显著影响，且随着喷施时间的延长，对低温的缓解效果越差，低温处理后超过6h再喷施 0.075mmol/L的NaHS效果不明显，原因可能是长时间的低温处理易导致花器官永久性伤害， 即使补救也不能恢复到原来状态。
[0050] 表9不同喷施时期对低温胁迫下甜樱桃花粉抗氧化酶活性的影响
[0051]
[0052] 表10不同喷施时期对低温胁迫下甜樱桃柱头抗氧化酶活性的影响
[0053]
[0054] 3、NaHS配置方法对甜樱桃花期低温冻害的缓解效果
[0055] 比较NaHS用蒸馏水配制和用添加 KH2P〇4、KN〇3、甘氨酸、6-BA的Μ溶液配置的喷施效 果
[0056] 溶液Μ:(见前面）
[0057] 溶液Α:称4.2mgNaHS，溶于蒸馏水中，并定溶至1L，混匀、密封。
[0058] 溶液B:称4.2mgNaHS，用溶液Μ溶解并定溶至1L，混勾、密封。
[0059] 研究NaHS配置方法对花期低温冻害的缓解效果，结果如下：
[0060] (1 )NaHS配置方法对低温冻害下花粉活力和柱头可授性的影响
[0061]表11为NaHS配制方法对低温冻害下花粉活力和柱头可授性的影响，结果表明喷施 溶液B可以有效提高低温胁迫下花粉活力和柱头可授性，其次是溶液A的效果较好，不添加 NaHS的蒸馏水对缓解低温胁迫无明显效果。
[0062]表11 NaHS配置方法对低温下花粉活力和柱头可授性的影响
[0063]
[0064]
[0065] (2)NaHS配置方法对低温冻害下花粉、柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电 导率的影响
[0066] 表12为NaHS配置方法对低温冻害下花粉、柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相 对电导率的影响。结果表明，低温胁迫下花粉和柱头中超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对 电导率急剧增加，导致甜樱桃花器官遭受严重冻害，失去授粉受精能力。喷施溶液B后超氧 阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导率明显降低，说明溶液B能明显缓解低温对花器官的伤 害。溶液B效果明显优于单独使用NaHS和溶液M，喷施不含任何化学物质的清水对缓解低温 冻害无效果。
[0067]表12配置方法对低温冻害下花粉、柱头超氧阴离子、过氧化氢、丙二醛、相对电导 率的影响
[0068]
[0069] (3)NaHS配置方法对低温胁迫下甜樱桃花粉、柱头抗氧化酶活性的影响 [0070]表13为NaHS配置方法对低温胁迫下甜樱桃花粉、柱头抗氧化酶活性的影响，结果 表明，喷施溶液B后能明显增加低温胁迫下花粉、柱头中SOD、P0D、CAT和APX抗氧化酶的活 力，从而有效提高花粉和柱头抗低温胁迫能力，其效果明显优于单独使用NaHS和溶液M，喷 施不含任何化学物质的清水效果最差。
[0071] 表13 NaHS配置方法对低温冻害下平邑甜茶幼苗抗氧化酶活性的影响
[0072]
[0073]综上，溶液Μ与蒸馏水相比，缓解效果相差无几，但是当将其作为溶剂溶解NaHS后， 其出乎预料的表现出增效的效果，可以得出采用Μ溶液配制NaHS比采用蒸馏水配制NaHS对 缓解甜樱桃花器官低温胁迫的效果好。
[0074]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发 明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领 域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1. 一种预防樱桃花期冻害的方法，其特征在于， 对在低温条件下处于花期的樱桃树喷施NaHS溶液。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，喷施时期为低温前0-18小时。3. 如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，喷施时期优选为低温前0-6小时。4. 如权利要求1-2任一项所述的方法，其特征在于，所述NaHS溶液的配制方法为先后称 取 1700mg KH2P〇4、19000mg KN03、200mg甘氨酸、50mg 6-BA，分别置于4个500ml烧杯中，除6-BA需要先用少量0.1 m01/L的HCL溶液溶解外，其他均加适量蒸馏水后玻璃棒搅拌促溶，最后 分别用蒸馏水定溶至l〇〇〇ml、1000ml、500ml、500ml容量瓶中，即为1700mg/L KH2P〇4、 19000mg/L KN03、200mg//L甘氨酸、50mg/L 6-BA母液，分别保存于小口瓶中，贴标签注明名 称、浓度、日期，取500ml烧杯，加入二分之一蒸馏水，分别吸取100ml KH2P〇4、100ml KN〇3、 10ml甘氨酸、10ml 6-BA母液，依次加入烧杯中，搅拌混勾，最后定溶于1000ml容量瓶中，即 为溶液Μ，称适量NaHS，用溶液Μ溶解并定溶至1L，混匀、密封，即为NaHS溶液。5. 如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述N a H S溶液中N a H S的浓度为0.0 2 5 -0·2mmol/L〇6. 如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述NaHS溶液中NaHS的浓度为0075mmol/L。
【文档编号】A01N59/02GK105993725SQ201610076580
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年2月3日
【发明人】魏国芹, 孙玉刚, 焦启庆, 付全娟, 孙杨, 杨兴华
【申请人】山东省果树研究所