一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，包括取田间三七，将休眠芽切下，清洗，并去除表面已经开裂的组织，然后用70％的乙醇浸泡1?2min，用无菌水清洗，再用10％次氯酸钠溶液浸泡8?10min，用无菌水冲洗，将处理后的休眠芽定植于含有赤霉素的MS培养基上，光照培养，6?7天内出苗，再转入含有细胞分裂素6?BA及生长素IAA的MS培养基中，所生长出的三七小苗在3周内分化生根，移植到大田中进行移栽种植。本发明采用离体繁殖培育的三七苗植株健壮不易感染病虫害，克服了三七种子育苗萌发率低且种子难保存等问题，打破了三七种植的季节性依赖，促进三七全年的生产，具有很好的经济效益和推广应用价值。
【专利说明】
一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法
技术领域
[0001]本发明涉及三七种植技术领域，具体涉及一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出 苗的方法。
【背景技术】
[0002] 三七属五加科多年生草本植物，其茎叶花均可入药，性温、味苦，具有散瘀止血，消 肿止痛的功效，可用于治疗各种出血病症和肿痛病症，三七中的黄酮类化合物具有改善心 肌供血，增加血管弹性、扩张冠状动脉的功效，三七具有降血脂，对冠心病、心绞痛有预防和 治疗作用，为此，医药领域对于三七的需求量越来越大，而三七的市场供应越来越慢，这主 要原因是三七生长周期长，大都采用种子育苗，现有技术中的栽培管理技术较差，一方面常 因种子贮藏不当造成严重的经济损失，另一方面三七种子的萌发率和存活率也较低。
[0003] 近年来，也有人尝试利用三七休眠芽进行育苗，但由于三七为缩根植物，块根有明 显的休眠性，三七种苗从休眠芽发育至完全萌发，约需要90天的休眠时间，且需要一定低温 (<10°C)才能打破，从而实际生产中应用休眠芽进行育苗的相关报道较少。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供了一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，出苗 快且出苗率高。
[0005] 为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
[0006] 一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，包括以下步骤：
[0007] 1)取田间三七，将休眠芽切下，清洗，并去除表面已经开裂的组织；
[0008] 2)将步骤1)处理后的休眠芽用70 %的乙醇浸泡l-2min，用无菌水清洗3-4遍，再用 10 %次氯酸钠溶液浸泡8-10min，用无菌水冲洗3-4次；
[0009] 3)将步骤2)处理后的休眠芽定植于含有赤霉素的MS培养基上，光照培养，6-7天内 出苗，得三七种苗；
[0010] 4)将步骤3)的三七种苗转入含有lmg/L-5mg/L细胞分裂素6-BA及0 · 5mg/L-l · 5mg/ L生长素 IAA的MS培养基中，所生长出的三七小苗在3周内分化生根；
[0011 ] 5)将步骤4)生根后的三七小苗移植到大田中进行移栽种植。
[0012] 优选地，所述步骤1)中三七为一年生或二年生三七。
[0013] 优选地，所述步骤3)中光照培养温度为20-25°C，光照时间12h/d，光照强度2500-2800Lx〇
[0014] 优选地，所述步骤3)中赤霉素的浓度为0. lmg/L-100mg/LD
[0015]本发明有益效果:本发明利用赤霉素诱导离体的三七休眠芽一周内快速出苗，克 服了三七在冬天由于休眠而不出苗的难题，出苗快，且出苗率为98%以上，缩短了育种周 期，减少农药化肥的使用，节约人工成本并减轻环境污染。本发明采用离体繁殖培育的三七 苗植株健壮不易感染病虫害，克服了三七种子育苗萌发率低且种子难保存等问题，打破了 三七种植的季节性依赖，促进三七全年的生产，具有很好的经济效益和推广应用价值。
【附图说明】
[0016] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以 根据这些附图获得其他的附图。
[0017] 图1:三七离体休眠芽在含不同赤霉素浓度的MS培养基中生长情况(其中，A:不含 赤霉素，B:0. lmg/L，C: 10mg/L;D:3〇mg/L;E:5〇mg/L;F: 100mg/L)。
【具体实施方式】
[0018] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例 中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是 本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员 在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0019] 实施例：
[0020] 一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，包括以下步骤：
[0021] 1)取田间一年生或二年生三七，将休眠芽切下，清洗，并去除表面已经开裂的组 织；
[0022] 2)将步骤1)处理后的休眠芽用70%的乙醇浸泡l-2min，用无菌水清洗3-4遍，再用 10 %次氯酸钠溶液浸泡8-10min，用无菌水冲洗3-4次；
[0023] 3)将步骤2)处理后的休眠芽定植于含有O.lmg/L-lOOmg/1赤霉素的MS培养基上， 光照培养，培养温度为20-25°C，光照时间12h/d，光照强度2500-2800LX，6-7天内出苗，得三 七种苗；
[0024] 4)将步骤3)的三七种苗转入含有lmg/L-5mg/L细胞分裂素6-BA及0 · 5mg/L-l · 5mg/ L生长素 IAA的MS培养基中，所生长出的三七小苗在3周内分化生根；
[0025] 5)将步骤4)生根后的三七小苗移植到大田中进行移栽种植。
[0026]将按以上方法对三七休眠芽进行诱导出苗，将离体休眠芽用70%的乙醇浸泡90s 后，用无菌水清洗3-4遍，再用10 %次氯酸钠溶液浸泡lOmin，用无菌水冲洗3-4次，再将休眠 芽定植于含有0mg/L-100mg/L赤霉素的MS培养基上，光照培养，培养温度为20-25°C，光照时 间12h/d，光照强度2500-2800LX，保持育苗条件一致，从表1中可以看出，不含赤霉素的MS培 养基育苗时间需要15-20天，即使低浓度的赤霉素也大大缩短了休眠芽的出苗时间，且出苗 率也有所提高，高浓度的赤霉素中苗体健壮情况较低浓度的要好，出苗明显提高。从图1中 可以看出，当MS培养中赤霉素浓度为50mg/L时三七休眠芽出苗时间及健壮情况最佳。
[0027]表1赤霉素浓度对三七休眠芽出苗情况的影响
[0028]
[0029]以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例 对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施 例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者 替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
【主权项】
1. 一种利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 取田间三七，将休眠芽切下，清洗，并去除表面已经开裂的组织； 2) 将步骤1)处理后的休眠芽用70%的乙醇浸泡l-2min，用无菌水清洗3-4遍，再用10% 次氯酸钠溶液浸泡8-10min，用无菌水冲洗3-4次； 3) 将步骤2)处理后的休眠芽定植于含有赤霉素的MS培养基上，光照培养，6-7天内出 苗，得三七种苗； 4) 将步骤3)的三七种苗转入含有lmg/L-5mg//L细胞分裂素6-BA及O.Smg/L-l.Smg/l生 长素 IAA的MS培养基中，所生长出的三七小苗在3周内分化生根； 5) 将步骤4)生根后的三七小苗移植到大田中进行移栽种植。2. 如权利要求1所述的利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，其特征在于，所述 步骤1)中三七为一年生或二年生三七。3. 如权利要求1所述的利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，其特征在于，所述 步骤3)中光照培养温度为20-25°C，光照时间12h/d，光照强度2500-2800LX。4. 如权利要求1所述的利用赤霉素诱导离体三七休眠芽出苗的方法，其特征在于，所述 步骤3)中赤霉素的浓度为0· lmg/L-100mg/L。
【文档编号】A01H4/00GK105993938SQ201610321546
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年5月16日
【发明人】杜云龙, 何霞红, 杜丽思, 张靖, 万媛媛, 邓凯元, 彭春秀, 王鑫, 平翔蕊, 蒋丽, 韩丽, 李成云
【申请人】云南农业大学, 杜云龙