专利名称：一种猪精液的保存液的制作方法
技术领域：
本发明属于猪的繁殖技术领域，具体地说涉及猪的精液保存与稀释液的制备。
背景技术：
从上个世纪60年代以来，中国从国外引进了大量的优良猪种，为中国养猪业的发展起到了积极的促进作用。随着养猪生产的发展，人们要求优良种猪具有繁殖性能好、生长速度快、瘦肉率高、适应性强以及良好的健康状况等特征。由于猪病对种猪的影响越来越明显，使得一些优秀种公猪因此得不到充分利用，造成良种覆盖率的提高速度较为缓慢。采用人工授精技术可以大大提高优秀种公猪的利用率，减少疾病传播机会，降低生产成本。目前，猪的冷冻精液技术尚在研究阶段，生产中主要是应用常温保存下的鲜精输精。应用鲜精进行猪的人工授精的一个重要问题就是如何延长精子的存活时间，以尽量扩大供精范围。鉴于猪精子对冷休克极度敏感，所以冷冻精液对于猪的繁殖来说是非常不可能的。有资料显示15℃以上保存的猪精液能够达到给母猪授精的要求。然而在这一温度范围内，降低精子的新陈代谢和抑制微生物的生长都比较困准(张忠明.长效稀释液在猪人工授精中的应用。国外畜牧学猪与禽.1990(6).-30-33；霍秀香.猪精液稀释液配方筛选与保存方法试验。辽宁畜牧兽医.1994(2).-15-15)。在熟练准确的精液处理技术的基础上，稀释液的质量直接影响到精子存活时间。目前公猪精液液态保存稀释液种类很多，其应用效果报导不一(马晓龙等.四种稀释液对猪精液保存效果试验.养猪.1991(2).-11-12；陈大芳等，猪精液常温保存稀释液配方比较试验.贵州畜牧兽医.1998，22(4).-8-9；董载勇，裴庆元.猪精液常温保存稀释液配方筛选试验.贵州农学院学报.1995，14(2).-12-15等)；存在着因精液保存时间较短而导致精液大量浪费、种公猪频繁采精与精液品质下降间的恶性循环及种猪使用年限缩短等实际问题。同时，进口国外的精液稀释粉价格昂贵，不能在中国广大农村和牧区推广应用。为此申请人根据猪精液的生理生化特点，进行了一系列猪精液保存和稀释液配方的筛选试验，旨在筛选出一种较为理想的猪精液保存与稀释液。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，制备一种既能够有效地保存猪的精液，防止精子失活，又能明显保持该精液的授精效果并降低猪的繁殖成本的猪精液保存和稀释液。
本发明通过以下技术方案实现一种猪精液的保存液，按重量计的配比为一种猪精液的保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖37-60g/l；牛血清白蛋白0-1.5g/l；柠檬酸钠3.7-6g/l；乙二胺四乙酸(EDTA)1.3-3.7g/l；碳酸氢钠1.2-1.3g/l；氯化钾0-0.4g/l；青霉素50-100万国际单位；链霉素50-100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
优化配方之一是，按重量计的组分配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白0.5g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 1.g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
优化配方之二是，按重量计的组分配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白1g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
优化配方之三是，按重量计的组分配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白1.5g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
经济型的配方是葡萄糖60g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4克；青霉素50万国际单位；链霉素50万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
本发明的积极效果是本发明生产的猪精液稀释液经过检测其精子的活力达到0.5-0.7，精子顶体完整率超过90％，超过目前人工授精的要求。同时本发明的保存液兼有保存和稀释作用，所配制的稀释精液使用和贮藏都比较方便，人工授精时可以即开即用，方便快捷，可以在中国广大农村和专业猪场推广应用。实施效果显示，本发明保存液保存的精液比其它同类稀释液的效果显著。本发明的不同配方配制猪精液保存液制备的精液的效果如表1和表2所示表1稀释液配方间精液保存7天后活力、pH和顶体完整率
注BTS为美国公司推荐的精液保存液配方，是目前通用的精液保存液配方。
申清人分别用编号为002配方配制的保存液和编号为004配方配制的保存液给母猪输精，它们的受胎率、产仔数与自然交配等主要技术指标与美国BTS稀释液在人工授精方面的效果对比如表2所示。从表2可以看出，应用本发明的保存液进行人工授精分别比BTS保存液以及自然交配的情期受胎率高1.7％和2.3％，窝产活仔数分别多0.8和1.1头。
表2 本发明的精液保存液与BTS精液保存液对人工授精与自然交配效果比较
具体实施方式
实施例1猪常温精液保存液的制备(1)分别计量称取葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白0.5g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 1.3g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位；(2)将步骤(1)的组分置入容器内，加入蒸馏水溶解至1升，摇匀；(3)将步骤(2)得到的溶液过滤，得到保存液，调pH7.2-7.4；(4)将步骤(3)得到的保存液按1份精液加2份保存液的比例，缓慢加入到精液中，得到稀释的猪精液；(5)将上述稀释精液在16-20℃条件下，保藏4-7天以内使用方法为取上述有效期内的稀释精液80毫升，输入发情母猪的子宫内，即完成常规人工授精。
实施例2猪常温精液保存液的制备按照实施例1所述的步骤，本实施例的保存液的各组分的配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白1.5g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素50万国际单位；链霉素50万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
实施例3猪常温精液保存液的制备按照实施例1所述的步骤，本实施例的保存液的各组分的配比为葡萄糖60g/l；牛血清白蛋白1g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 1.3g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4克；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
实施例4猪常温精液保存液的制备按照实施例1所述的步骤，本实施例的保存液的各组分的配比为葡萄糖60g/l；牛血清白蛋白0.8g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 3.7g/l；氯化钾0.4g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4实施例5猪常温精液保存液的制备按照实施例1所述的步骤，本实施例的保存液的各组分的配比为葡萄糖60g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4g/l；青霉素50万国际单位；链霉素50万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
权利要求
1.一种猪精液的保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖37～60g/l；牛血清白蛋白0-1.5g/l；柠檬酸钠3.7～6g/l；乙二胺四乙酸(EDTA)1.3～3.7g/l；碳酸氢钠1.2～1.3g/l；氯化钾0～0.4g/l；青霉素50-100万国际单位；链霉素50-100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
2.根据权利要求1所述的猪精液保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白0.5g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 1.3g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
3.根据权利要求1所述的猪精液保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白1.5g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
4.根据权利要求1所述的猪精液保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖37g/l；牛血清白蛋白1g/l；柠檬酸钠3.7g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4g/l；青霉素100万国际单位；链霉素100万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
5.根据权利要求1所述的猪精液保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖60g/l；牛血清白蛋白0.8g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4g/l；青霉素50万国际单位；链霉素50万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
6.根据权利要求1所述的猪精液保存液，其特征在于，按重量计的组分配比为葡萄糖60g/l；柠檬酸钠6g/l；EDTA 3.7g/l；碳酸氢钠1.2g/l；氯化钾0.4g/l；青霉素50万国际单位；链霉素50万国际单位，加蒸馏水至1升，pH7.2-7.4。
全文摘要
本发明属于猪繁殖技术领域，具体涉及一种猪精液保存液的设计及应用。其特征在于，保存内含葡萄糖、加入或不加入牛血清白蛋白、加入或不加入氯化钾、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸、碳酸氢钠、抗生素和水。按每头份80～100ml，30亿活精子稀释和分装，在17℃下保存，7天后活力为0.53，pH 7.4左右，精子顶体完整率为85％。7天内输精纯种母猪情期受胎率达到80％以上，杂交母猪情期受胎率85％以上，窝产活仔猪数比自然配种提高0.5～1头，母猪年繁殖率提高5～10％。达到或超过目前中国各猪场自然配种水平。本发明可以显著提高优秀种公猪的精液利用率，减少疾病传播机会，降低生产成本；同时避免精液保存时间短造成的供精半径小，种猪使用年限缩短、种猪频繁采精与精液品质下降等恶性循环等问题。
文档编号C12N5/06GK1712519SQ20041001336
公开日2005年12月28日 申请日期2004年6月25日 优先权日2004年6月25日
发明者姜勋平, 李家连, 熊远著, 邓昌彦 申请人:华中农业大学