专利名称：白玉簪组织培养方法
技术领域：
本发明涉及玉簪花组织培养方法，属于植物组织培养技术领域。
背景技术：
玉簪花原产于东方，作为园林观赏植物和药用植物在世界各地被广泛应用。原产于我国的玉簪(Hosta plantiginea Ascherson)，又名玉春棒、白鹤仙、白萼，是玉簪属植物中唯一开白花而且具有浓郁香气的类型。全株有微毒、花具有清热润肺之功效。但白玉簪在自然界采用分株方法繁殖，生长和繁殖速度非常缓慢，制约了其广泛应用。若能通过组织培养的方法繁殖，则有望在短时间内生产大量性状一致的白玉簪试管苗。
目前，在欧美及日本等地区对玉簪属植物的分类、栽培及育种等方面有较为系统深入的研究，而我国对玉簪属种质资源的利用开发力度尚显不足。在国内各类文献资料中只有少量关于玉簪属种质资源及园林应用、观赏用玉簪品种的组织培养等方面的报道，而关于白花玉簪的组织培养技术则未见报道。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的在于提供一种玉簪组织培养方法，操作简单，繁殖率高，可以大量生产白玉簪试管苗。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现， 提供一种白玉簪组织培养方法，具体步骤如下 1)外植体的选择和消毒 选用当年新发的，长度1厘米左右的腋芽，用洗衣粉水漂洗5～8分钟后流水冲洗30分钟，再超净工作台上用70％酒精处理10秒钟，再用0.1％升汞浸泡并振荡6～8分钟，无菌水清洗4～6次，用滤纸吸干水分备用。
2)初代培养 将消毒后的玉簪幼芽接种在MS+BA0.2～0.8mg/L+NAA0.01～0.1mg/L培养基上，培养温度20～25℃，光照强度2000Lux，每天光照14小时。
3)继代增殖 增殖培养基为MS+BA1～3mg/L+NAA0.05～0.5mg/L.将玉簪无菌苗剥去外部已展开的叶片接种于增殖培养基，25～35天即有腋芽萌发形成芽丛。
4)生根培养 将大而健壮的芽转接至生根培养基(MS+NAA0～0.05mg/L)中，进行生根培养，待20天左右有1～3条根发出后即可炼苗移栽。
本发明中6-BA，NAA均为植物激素。
本发明的有益效果是 本发明提供了一种玉簪花的组织培养方法，采用玉簪幼芽为外植体进行组织培养，操作简单，繁殖系数高，由于不利用愈伤组织直接诱导腋芽萌发降低了在扩繁过程中产生变异的几率，可用于工厂化生产。
具体实施例方式 实施例1 1、春季切取当年新发的长度1厘米左右的幼芽，用用洗衣粉水漂洗5分钟后流水冲洗30分钟，再超净工作台上用70％酒精处理10秒钟，再用0.1％升汞浸泡并振荡6分钟，无菌水清洗6次，用滤纸吸干水分，接入诱导培养基MS+BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L，附加琼脂粉0.6％、蔗糖3％。培养温度20℃，光照强度2000Lux，每天光照14小时。35天后，基本形成无菌苗。污染率28％，成苗率100％。
2、将试管苗剥去外部已展开的叶片接种于MS+BA2mg/L+NAA0.1mg/L的培养基上，15天左右从裸露的叶痕处开始萌发新的腋芽。35天以后多数腋芽长1厘米以上，即可再次分割转接。平均芽分化数3.34。
3、转接时选出大而健壮的芽接入MS培养基进行生根培养，20天后有根萌发，待根长0.5厘米时，开瓶炼苗后移栽至基质中驯化。生根率100％，驯化成活率93.3％。
实施例2 重复实施例1过程，诱导培养基中附加激素BA0.5mg/L、NAA0.05mg/L。成苗率100％。
增殖培养基为MS+BA3mg/L+NAA0.3mg/L，芽分化数3.67。
实施例3 重复实施例1过程，培养温度为白天23℃，夜间20℃。诱导培养基中附加激素BA0.8mg/L、NAA0.05mg/L，成苗率100％。
增殖培养基为MS+BA3mg/L+NAA0.5mg/L，30天即可转接一次，芽分化数3.58。
实施例4 重复实例3过程，生根培养基采用MS+NAA0.02mg/L，18天后有2-4条根萌发，生根率100％，驯化成活率89.7％。
权利要求
1、白玉簪组织培养方法，其特征在于该方法包括在MS培养基上进行初代培养，在MS培养基上进行继代增殖，获得玉簪无性系。
2、根据权利要求1所述的玉簪组织培养的方法，其特征是选取当年新发的，长度1厘米左右的腋芽，经消毒后接种在MS+BA0.2～0.8mg/L+NAA0.01～0.1mg/L培养基上。
3、根据权利要求1所述的玉簪组织培养的方法，其特征是培养温度20～25℃，光照强度2000Lux，每天光照14小时。
3、根据权利要求1所述的玉簪组织培养的方法，其特征是在MS培养基中附加植物生长激素BA1～3mg/L、NAA0.05～0.5mg/L，将玉簪无菌苗剥去外部已展开的叶片接种于上述增殖培养基，直接诱导腋芽萌发形成芽丛。
4、根据权利要求1所述的玉簪组织培养的方法，其特征是将大而健壮的芽转接至生根培养基(MS+NAA0～0.05mg/L)中，进行生根培养，有1～3条根发出后炼苗移栽。
全文摘要
本发明提供了白玉簪组织培养的方法。该方法是选取当年新发的玉簪腋芽，经初代培养形成无菌苗，不通过愈伤组织直接诱导腋芽萌发进行增殖，以及生根培养。采用组织培养方法繁殖白玉簪，操作简单，繁殖率高，可解决分株繁殖速度过慢的问题，大量生产性状一致的白玉簪试管苗，可用于工厂化生产。
文档编号C12N5/04GK1965643SQ20061004742
公开日2007年5月23日 申请日期2006年8月10日 优先权日2006年8月10日
发明者赵江雷, 潘菊, 张同臣, 卢文经, 马文宏, 张健, 朴凯伟, 甄广田, 张曼丽 申请人:沈阳市农业科学院