专利名称：月季试管开花的方法
技术领域：
本发明涉及月季的栽培方法，具体来说是涉及迷你月季(/ o幼力y6ri血顶i/7J')试管开 花的方法。
技术背景花卉的试管内诱导开花是一种新型的生物技术。试管内开花的植株由于观赏时间长、观赏价 值高、管理简单而深受人们的喜爱，在欧洲花卉市场上十分畅销。迷你月季是有刺灌木，它 的花多而艳，连续开花能力强，是深受大众欢迎的盆栽植物之一。但在试管内开花的迷你月 季花色更为鲜艳、开花时间更长、运输方便、易栽培管理而成为一种新型的室内观赏花卉， 具有广阔的巿场前景。目前，国内未见对月季试管开花进行规模生产和专利申请的报道，国 夕卜文献(Wang G Y， Yuan M F' Hong Y. In vitro flower induction in roses. In Vitro Cellular Developmental Biology - Plant, 2002， 38:513-518.)报道采用的品种不同，所采用 的方法也较复杂。 发明内容本发明的目的在于提供一种简单的、开花诱导率较高的月季试管开花的方法。 我们通过在生长季节选取生长旺盛的月季的茎尖或带节茎段为外植体，采用成分独特培 养基进行组织培养，方法简单，开花诱导率较高，从而实现了本发明的目的。 本发明月季试管开花的方法，其特征包括以下的步骤-(1) 外植体诱导材料消毒和不定芽诱导在生长季节选取生长旺盛的迷你月季Wo幼 Ar力riA 的茎尖或带节茎段为外植体，用水冲洗干净后，先用70% 75%的酒精浸 泡10 30 s，再用0. 1% 0. 2%升汞溶液或1% 2%的次氯酸钠溶液消毒5 10 min，无菌水冲 洗后，接种到培养基中，在温度(28士2)。C，光照度1500 2000 lx，光照8 12 h/天， 培养形成不定芽，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0 2.0 mg,蔗糖20 30g和琼 脂5 7 g,其余为MS， pH 5. 5 5.8;(2) 不定芽的继代增殖将歩骤(l)诱导出的不定芽切割后再继代培养于培养基中，在温 度(28土2)。C，光照度1500 2000 lx，光照8~12 h/天进行不定芽的增殖，所述的培养 基每升中含有6-苄基嘌呤1.0 2.0mg，萘乙酸O. 1 0.2mg，蔗糖20 30 g和琼脂5~7 g， 其余为MS, pH 5. 5 5.8;(3) 试管开花诱导当步骤(2)芽高约2 3 cm时,切下接种到开花诱导培养基中，在 温度(28土2)T，光照度1500 2000 lx，光照8 12 h/天培养，所述的培养基每升中含 有6-苄基嘌呤0. 1 0.3 mg，萘乙酸O. 1 0.2mg，蔗糖20 40 g和琼脂5 7 g，其余为 MS， pH 5. 5 5. 8。步骤(l)所述的无菌水冲洗次数为4 5次，所述的茎尖和带节茎段最好切成长度为约 lcm，培养15 20天能在外植体上形成不定芽，消毒成功率80% 90%。步骤(2)中的一个继代增殖周期为30 35天，每一个继代增殖周期后的增殖倍数为3 5 倍，继代10代后仍能保持增殖率。步骤(3)中培养至开花时间一般是40 50天，45天左右开花率可达60%以上，苗高约7 8厘米。上述培养基中的MS为国际通用的培养基，其成分和配制方法参看文献(谭文澄、戴策刚 主编.观赏植物组织培养技术.北京中国林业出版社，1991.)。本发明月季试管开花的方法培育速度快，消毒方法简单、消毒成功率在80% 90%，培养 基成分独特且简单实惠，开花诱导率较高，花率可达60%以上，花色鲜艳。
具体实施方式
以下的实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。 实施例1:在生长季节选取生长旺盛的迷你月季Wosa力y6rjVa 的茎尖或带节茎段为外植 体，在自来水下冲洗干净后，先在70%酒精中浸泡10 3，再用0.2%升汞溶液消毒5分钟，无 菌水冲洗4次，切成lcm左右，接种到培养基(每升含有6-苄基嘌呤2.0mg，，蔗糖30g 和琼脂7 g，其余为MS， pH5.5)，在温度28。C，光照度1500 1x，光照12 h/天，消 毒成功率80%， 15天左右能在外植体上形成不定芽。将诱导出的不定芽切割后再继代培养在 培养基(每升含有6-苄基嘌呤l.Omg，萘乙酸0.2mg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS， pH 5.5),在温度28 °C，光照度1500 lx，光照12小时/天进行不定芽的增殖，30天为1 个继代增殖周期， 一个继代增殖周期后的增殖倍数为3倍，能多次继代，继续继代后增殖倍 数略有升高。当芽高约3 cm时，切下接种到开花培养基(每升含有6-苄基嘌呤0.1 mg， 萘乙酸O. lmg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS， pH 5. 5)，在温度28。C，光照度1500 1x， 光照12 h/天，培养48天时开花率达65%，苗高约7 8厘米。实施例2:在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(/to幼力/6ri^ ck肌'/7力的茎尖或带节茎段为外植 体，在自来水下冲洗干净后，先在75%酒精中浸泡30 s，再用0. 1%升汞溶液消毒10 min，无 菌水冲洗5次，切成长lcm左右，接种到培养基(每升含有6-苄基嘌呤l.Omg，蔗糖30g 和琼脂7 g，其余为MS， pH 5.5)，在温度26 。C,光照度2000 lx，光照8 h/天，消毒 成功率90%， 20天在外植体上形成不定芽。将诱导出的不定芽切割后再继代培养在培养基(每 升含有6-苄基噤呤2.0 mg,萘乙酸O. lmg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS， pH 5. 5)， 在温度26。C，光照度2000 lx，光照8h/天，进行不定芽的增殖，30天为1个继代增殖
周期， 一个继代增殖周期后的增殖倍数为5倍，能多次继代。当芽高约3 cm时,切下接种到 开花培养基(每升含有6-苄基嘌呤0.2 mg，萘乙酸0.2mg，蔗糖40g和琼脂7 g，其余 为MS， pH5.5)，在温度26。C，光照度2000 1x，光照8h/天，培养50天时开花率达70%， 苗高约7 8厘米。 实施例3:在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(^^a/^6rj'A 肌'/7力的茎尖或带节茎段为外植 体，在自来水下冲洗干净后，先在7(W酒精中浸泡30s，再用1.5%次氯酸钠溶液溶液消毒10 min,无菌水冲洗5次，切成长约lcm，接种到培养基(每升含有6-苄基嘌呤1.5mg，蔗糖 20g和琼脂5g，其余为MS， pH5.8)，在温度30 T，光照度1800 lx，光照10 h/天， 消毒成功率90%， 18天在外植体上形成不定芽。将诱导出的不定芽切割后再继代培养在培养 基(每升含有6-节基嘌呤1.5mg，萘乙酸0. 15mg，蔗糖20g和琼脂5g，其余为MS，pH5.8)， 在温度30。C，光照度1800 lx，光照10h/天，进行不定芽的增殖，35天为1个继代增殖 周期， 一个继代增殖周期后的增殖倍数为4倍，可进行多次继代。当芽高约2cm时，切下接 种到开花培养基(每升含有6-苄基嘌呤0.3 mg，萘乙酸0.2mg，蔗糖20g和琼脂5g，其 余为MS， pH 5.8)，在温度30 。C，光照度1800 lx，光照10 h/天，培养45天时开花率 达60%，苗高约7 8厘米。
权利要求
1.月季试管开花的方法，其特征包括以下的步骤(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosahybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，用水冲洗干净后，先用70％～75％的酒精浸泡10～30s，再用0.1％～0.2％升汞溶液或1％～2％的次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水冲洗后，接种到培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养形成不定芽，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8；(2)不定芽的继代增殖将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天进行不定芽的增殖，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，萘乙酸0.1～0.2mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8；(3)试管开花诱导当步骤(2)芽高约2～3cm时，切下接种到开花诱导培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天培养，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤0.1～0.3mg，萘乙酸0.1～0.2mg，蔗糖20～40g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8。
2. 根据权利要求1的月季试管开花的方法，其特征是步骤(l)所述的无菌水冲洗次数为 4 5次，培养15 20天在外植体上形成不定芽；步骤(2)中的一个继代增殖周期为30 35 天。
全文摘要
本发明涉及月季试管开花的方法，首先在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosahybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，经消毒后接种到每升含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg的MS培养基中至形成不定芽，然后将诱导出的不定芽切割后再继代培养于含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，萘乙酸0.1～0.2mg的MS培养基中进行不定芽的增殖，当芽高约2～3cm时，切下接种到每升含有6-苄基嘌呤0.1～0.3mg，萘乙酸0.1～0.2mg的MS培养基中进行试管开花诱导。本发明方法培育速度快，消毒方法简单、消毒成功率在80％～90％，培养基成分独特且简单实惠，开花诱导率较高，花率可达60％以上，花色鲜艳。
文档编号C12N5/04GK101129130SQ20071003059
公开日2008年2月27日 申请日期2007年9月28日 优先权日2007年9月28日
发明者吴坤林, 曾宋君, 硕 梁, 俊 段, 枫 郑, 陈之林 申请人:中国科学院华南植物园