专利名称：以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法
技术领域：
本发明涉及血肽的制备方法，具体涉及以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法。
背景技术：
动物血是一种宝贵的营养资源，富含200多种功能不同的蛋白质成分 (16. 4% -18. 9% )，包括人体必须的八种氨基酸(其中赖氨酸和亮氨酸含量尤其高)，还有钙、铁、镁、磷、钾等微量元素、维生素、无机盐、糖类和脂类。我国动物血资源极其丰富，估计每年在2. 3X IO6吨以上，其中部分被简单加工成血粉做饲料添加剂，另有大部分血被废弃，仅有少部分得到开发和食用。现有对动物血的开发大多是对动物血的红血球进行水解，以得到血肽等可利用的产品，如张晓鸣等采用催化酸水解猪血球研究，氨基酸产率达43. 8% (食品科学，1995，16 (10) 34)；汤凤霞等先将猪血球煮沸变性后用胰酶水解，水解率达50% (宁夏农学院学报，1996，17 O) 42)；张华山用Asl398中性蛋白酶对猪血球进行水解研究，底物浓度5%，酶解几，三氯乙酸可溶氮浓度 0. 54% (氨基酸和生物资源，1999，21 (3) :35-37)；于美娟等研究用Asl398和木瓜蛋白酶复合对破壁猪血球进行水解，底物浓度8%，水解他蛋白质酶解收率达58. 7% (肉类研究， 2005(5) 16)。从上述公开报道中可知，现有动物血红血球进行水解的收率不够理想，均不到60%。此外，由于动物血(特别是禽畜血)水解产品均有特殊的腥味，影响单独使用或添加在其他食品中应用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术中禽畜血酶解收率低的不足，提供一种酶解收率高的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法。为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，取畜禽血的红血球加水，搅拌破壁，然后加温进行热变性，所得混合物于40 60°C条件下调节其pH = 7. 5 9. 0，按1000 2500U/ (g蛋白)的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解4 他，灭酶，过滤，所得滤液浓缩，喷雾干燥，即得血肽。本申请中提到的血球水解专用酶1122为宁夏银川索然生物科技研究中心生产， 该血球水解专用酶1122用于各种动物血球水解，其酶活力为100000U/mg，其中砷含量 (0. 0003%，重金属含量< 0. 0005%。该酶的有效期为1年，可在常温条件下保存，常温条件下保存ι年时酶活力保存率不低于90%。更为具体的制备方法为取畜禽血的红血球加水，搅拌1 4h破壁，然后加温至 70 85°C保持15 60min以进行热变性，所得混合物于40 60°C条件下调节其pH = 7. 5 9. 0，按1000 2500U/ (g蛋白)的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解4 8h， 灭酶，过滤，所得滤液浓缩，喷雾干燥，即得血肽。上述的制备方法中
所述的水优选采用蒸馏水，其加入量一般为红血球重量的1 5倍。所述灭酶时的温度为85 100°C，时间为10 40min。所述滤液最好是先浓缩至其中固体含量为35 55%时再进行喷雾干燥。在进行pH值的调节时，一般是采用氢氧化钠、碳酸钠或碳酸氢钠的水溶液来调节。作为本发明所述方法的改进，上述方法在过滤步骤之后、浓缩步骤之前，还包括除腥的步骤。通过这一步骤去除由上述方法制得的血肽产品中的腥味。具体的除腥步骤为向过滤所得滤液中加入除腥剂，搅拌加热至60 90°C，加入活性炭脱色，过滤，所得脱色液进行浓缩。其中，所述除腥剂的加入量为滤液重量的0.1 1.0%。所述活性炭的加入量为滤液重量的0. 5 3. 0%，脱色的时间为25 50min。本申请中涉及的除腥剂可以从市场上直接购买，优选采用宁夏银川索然生物科技研究中心生产的除腥剂，该除腥剂为浅棕色液体，主要用于去除腥味(肉、鱼、血等动物腥膻味)。与现有技术相比，本发明所述方法的特点在于1、将红血球破壁并进行热变性，使红血球蛋白质的双螺旋结构变得疏松，从而使血球水解专用酶1122更容易进入红血球蛋白中氨基酸结合位点进行酶解，提高酶解率；另一个方面，采用血球水解专用酶1122进行水解，可以同时对红血球蛋白质的多个氨基酸结合位点进行酶解，进而提高酶解效率和收率，使整个水解过程的收率达到78%以上；2、作为本发明所述方法的改进，对酶解后的滤液进行除腥处理，有效去除禽畜血制品固有的腥味，使所得血肽产品更易被广大消费者所接受；3、方法简单易操作，生产成本低，易于工业化生产。
具体实施例方式
下面以实施例对本发明进行进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。以下各实施例中所述的红血球均为猪的红血球，其获得方法为先以常规方法从猪体内采集血液，并进行抗凝处理，然后进行离心，底部沉淀物即为红血球。经检测，上述方法获得的红血球固体(相当于蛋白质)含量在30 33%的范围内，平均值为31.5%。实施例1取红血球1kg，加蒸馏水2kg，搅拌1. 5h，在搅拌下升温至72°C，并保持20min热变性，然后降温至42°C，用NaOH(20%, w/w)调其pH = 7. 5，按1200U/g蛋白的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解4. 5h (整个酶解过程保持42°C )，升温至85°C灭酶15min，过滤， 得滤液2600g，向滤液中加入相当于其重量0. 15%的除腥剂，搅拌加热至65°C，加入相当于滤液重量1. 5%的活性炭，继续搅拌30min，过滤，所得脱色液经旋转蒸发浓缩至固体含量为35 %，进行喷雾干燥，得血肽粉M8. 5g，收率78. 9 %。实施例2取红血球100kg，加蒸馏水300kg，搅拌2h，在搅拌下升温至78°C，保持30min进行热变性，然后降温至45°C，用NaOH(20%, w/w)调其pH = 8.0，按1600U/g蛋白的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解5. 5h (整个酶解过程保持45°C )，升温至90°C灭酶20min， 过滤，得滤液265. 4kg，向滤液中加入相当于其重量0. 17%的除腥剂，搅拌加热至70°C，加入相当于滤液重量1 %的活性炭，继续搅拌40min，过滤，所得脱色液经减压蒸发浓缩至固体含量为45 %，进行喷雾干燥，得血肽粉25. 64kg，收率81. 4%。实施例3取红血球1000kg，加蒸馏水4000kg，搅拌2h，在搅拌下升温至82°C，保持40min 进行热变性，然后降温至50°C，用Na2C03(20%，w/w)调其pH = 8. 5，按1900U/g蛋白的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解6. 5h (整个酶解过程保持50°C )，升温至95°C灭酶30min，过滤，得滤液4680kg，向滤液中加入相当于其重量0. 2%的除腥剂，搅拌加热至 75°C，加入相当于滤液重量1. 5%的活性炭，继续搅拌50min，过滤，所得脱色液经减压蒸发浓缩至固体含量为50%，进行喷雾干燥，得血肽粉254. ^cg,收率80. 92%。实施例4取红血球1kg，加蒸馏水3kg，搅拌池，在搅拌下升温至80°C，保持IOmin进行热变性，然后降温至55°C，用Na2HCO3 (20%, w/w)调其pH = 9. 0，按2300U/g蛋白的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解5h(整个酶解过程保持55°C )，升温至100°C灭酶lOmin，过滤，得滤液2. 65kg，所得滤液经旋转蒸发浓缩至固体含量为30%，进行喷雾干燥，得血肽粉 0. 251kg，收率 79. 68%。
权利要求
1.以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于取畜禽血的红血球加水，搅拌破壁，然后加温进行热变性，所得混合物于40 60°C条件下调节其pH = 7. 5 9. 0，按 1000 2500U/(g蛋白)的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解4 8h，灭酶，过滤，所得滤液浓缩，喷雾干燥，即得血肽。
2.根据权利要求1所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于取畜禽血的红血球加水，搅拌1 4h破壁，然后加温至70 85°C保持15 60min以进行热变性，所得混合物于40 60°C条件下调节其pH = 7. 5 9. 0，按1000 2500U/ (g蛋白)的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解4 他，灭酶，过滤，所得滤液浓缩，喷雾干燥，即得血肽。
3.根据权利要求1所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于所述水的加入量为红血球重量的1 5倍。
4.根据权利要求1所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于所述灭酶的温度为85 100°C，时间为10 40min。
5.根据权利要求1所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于所述滤液浓缩至其中固体含量为35 55%时进行喷雾干燥。
6.根据权利要求1 5中任一项所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于在过滤步骤之后、浓缩步骤之前，还包括除腥的步骤。
7.根据权利要求6所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于所述除腥的步骤为向过滤所得滤液中加入除腥剂，搅拌加热至60 90°C，加入活性炭脱色，过滤，所得脱色液进行浓缩。
8.根据权利要求7所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于所述除腥剂的加入量为滤液重量的0. 1 1. 0%。
9.根据权利要求7所述的以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，其特征在于所述活性炭的加入量为滤液重量的0. 5 3. 0%，脱色的时间为25 50min。
全文摘要
本发明公开了一种以畜禽血红血球为原料生产血肽的方法，它是取畜禽血的红血球加水，搅拌破壁，然后加温进行热变性，所得混合物于40～60℃条件下调节其pH＝7.5～9.0，按1000～2500U/(g蛋白)的比例加入血球水解专用酶1122，搅拌酶解4～8h，灭酶，过滤，滤液浓缩，喷雾干燥，即得血肽。本发明所述方法先将红血球破壁并进行热变性，使红血球蛋白质的双螺旋结构变得疏松，从而使血球水解专用酶1122更容易进入红血球蛋白中氨基酸结合位点进行酶解，提高酶解率；采用的血球水解专用酶1122可以同时对红血球蛋白质的多个氨基酸结合位点进行酶解，进一步提高酶解效率和收率，使整个水解过程的收率达到78％以上。
文档编号A23J1/06GK102342368SQ20111028636
公开日2012年2月8日 申请日期2011年9月24日 优先权日2011年9月24日
发明者赵运生 申请人:赵运生, 闫华, 闫菽芳, 黄磊