用于转染和免疫刺激的核酸与二硫化物交联的阳离子成分的复合体的制作方法

专利名称：用于转染和免疫刺激的核酸与二硫化物交联的阳离子成分的复合体的制作方法
用于转染和免疫刺激的核酸与二硫化物交联的阳离子成分的复合体本发明涉及聚合物载体运载物(cargo)复合物，其包括至少一种核酸(分子)作为运载物和二硫化物交联的阳离子成分作为(优选非毒性和非免疫原性的)聚合物载体。本发明的聚合物载体运载物复合物允许体内和体外二者的核酸进入细胞的有效转染，和/或允许(先天的和/或适应性)免疫反应的诱导，优选取决于被作为运载物转运的核酸。本发明还提供包括本发明的聚合物载体运载物复合物和任选的抗原的药物组合物，尤其是疫苗；以及本发明的聚合物载体运载物复合物和任选的抗原为如本文公开的(基因)治疗目的用于转染细胞、组织或有机体的用途，和/或作为免疫刺激剂或佐剂，例如用于诱导对上面提及的疾病的治疗或预防的免疫反应。最后，本发明涉及试剂盒，它包括本发明的聚合物载体运载物复合物、本发明的药物组合物和/或本发明的疫苗或者在试剂盒的一个或更多个部分中的任意成分。
目前很多疾病需要施用佐剂来提供固有免疫反应，且任选地支持适应性免疫反应，尤其在疫苗接种方面。这些疾病中的一些但不必是全部附加地或作为选择地需要施用基于肽、蛋白质和核酸的药物，例如核酸进入细胞或组织的转染。这些要求通常代表治疗这些疾病的不同方面，并且典型地难以在一个方法中解决。结果是，现有技术通常经由不同的方法处理这些方面。上下文中，一般认为疫苗接种是一个最有效和最经济的方式来预防或治疗疾病。不过，疫苗开发中的几个问题已经证实是难以解决的疫苗通常对于非常年轻和非常年老的群体来说是无效的；很多疫苗需要接种多次，而且疫苗给予的保护随着时间衰退，需要大量施用，对于一些疾病例如HIV，急需开发有效的疫苗。普遍接受的是，如果这些疫苗可以引起更强和更持久的免疫反应，则很多这些疫苗会是能够实现或改进的。由此，主要存在的难题是开发用于疫苗接种目的的新的有效和安全的佐剂，其支持通过引发或推进平行的固有免疫反应来诱导或维持适应性免疫反应。佐剂通常被定义为可以降低和/或调节抗原的固有免疫原性的化合物。为了减少不利的副作用，与之前的全细胞疫苗或基于病毒的疫苗相比，新的疫苗具有通常导致较低免疫原性的更多定义的组成。佐剂因此需要辅助新的疫苗来引起强有力的和持久的免疫反应，附加的益处是需要较少的抗原和较少的注射。目前清楚的是，适应性免疫反应主要取决于感染或接种疫苗后由固有免疫细胞收到的初始危险信号的水平和特异性(Guy，B. (2007)，Nat Rev Microbiol5 (7) :505-17)。尤其对于新一代的疫苗候选，它们会越来越多地包括高度纯化的重组蛋白，并且尽管非常安全，但是免疫原性极低，越来越需要有效的佐剂。遗憾的是，至今只能得到少数几种许可的佐剂。最主要的是明矾，公知它是安全的，但只是代表非常弱的佐剂。已经开发了很多其他佐剂，例如包括病原体、CpG-核苷酸的施加等。但是大多数这些新的或“已建立的”佐剂仍然不能满足前面的需求，因为必须考虑和解决很多新的和出现的问题。这些问题尤其包括新的和再次出现的传染病、重复施用、爆发流行性感冒的危险等。
此外，新的疫苗目标通常更难开发，并且由于它们特殊形成的免疫反应而需要更强有力的佐剂才能成功。并且，仍然存在大量重要的病原体，对它们目前甚至还没有有效的疫苗。这代表了非常具有挑战性的未来目标。为了能够针对这些目标开发疫苗，必需更强有力的佐剂。这样的新佐剂需要提供下列优势，包括更异源性的抗体反应、覆盖病原体多样性、诱导强有力的功能性抗体反应、确保杀死病原体或中和作用，以及诱导更有效的T细胞反应，用于直接和间接的杀死病原体，尤其是诱导作为Thl免疫反应一部分的细胞毒性T细胞。另外，可能必需佐剂来实现更实际的效应，包括抗原剂量降低和克服组合疫苗中的抗原竞争性。此外，针对对传染病越来越易感的老化人群的背景，必需有新的佐剂来克服免疫反应随着年龄的自然变性(O' Hagan, D. T.和E. De Gregorio (2009)，Drug DiscovTodayl4(11-12) :541-51.)。0’ Hagan(2009 ；supra)的综述总结了一些急需新的有效佐剂的原因，例如疫苗中需要较低的抗原剂量，增加免疫反应宽度和异源活性的必要性，以便得到复合的组合疫苗和克服抗原竞争性，从而克服一些群体组例如老年人、幼童和婴儿、慢性疾病和免疫功能不全的患者中受限的免疫反应，以增加效应子T细胞反应和抗体滴度来更快速地诱导保护性 反应,还通过增强记忆B和T细胞反应来延长反应持续时间。综上所述，需要新的有效的和安全的免疫刺激剂或佐剂，它们优选有效诱导固有免疫反应，尤其是有效诱导抗病毒细胞因子IFN-a ;优选还有效地支持适应性免疫反应；安全，即不与任何长期作用相关联；耐受良好，经由简单的合成路径获得；具有低成本的储存条件(尤其可以冻干)；需要简单和廉价的成分；可生物降解；与很多不同类型的疫苗抗原兼容；能够共同递送抗原和免疫增强剂等。如前面已经解释的，佐剂或免疫刺激剂通常经由它们诱导固有免疫反应的能力来起作用。固有免疫系统形成大多数有机体中宿主防御的主要系统，且包括屏障例如体液屏障和化学屏障包括例如炎症、补体系统和细胞屏障。固有免疫系统典型地基于大量受体，称为模式识别受体。它们识别将外来有机体例如病毒、细菌、真菌和寄生虫与宿主细胞区别开来的保守分子模式。该病原体相关的分子模式(PAMP)包括病毒核酸、细菌和真菌壁的成分、鞭毛蛋白质等。详细研究的模式识别受体(PAMP受体)的第一家族是Toll-样受体(TLR)家族。TLR是跨膜蛋白质，它识别细胞外环境的配体或内体的腔的配体。配体-结合之后，它们将信号经由细胞质适配器蛋白质进行转换，这导致宿主防御反应的引发和承担抗微生物肽、促炎趋化因子和细胞因子、抗病毒细胞因子等的生产(例如参见Meylan，E.，J. Tschopp等人(2006)，Nature442 (7098) :39-44)。免疫系统的其他相关成分包括例如内体TLR、细胞质受体、I型干扰素和细胞质受体。所以，免疫刺激剂或佐剂本文定义为优选作为固有免疫反应的诱导物，其激活模式识别受体(PAMP受体)。以此方式引起信号的级联反应，其例如可以导致支持固有免疫反应的细胞因子的释放(例如IFN-a)。由此，优选将免疫刺激剂或佐剂的特征结合至该受体并激活该PAMP受体。理想的是，例如剂或佐剂附加地支持适应性免疫反应，通过例如免疫反应的位移从而激活Th细胞的优选类型。取决于待治疗的疾病或病症，可以优选转变成基于Thl的免疫反应，或者在其他情况下，可以优选转变成Th2的免疫反应。在现有技术中，有一些有希望满足至少一些但不是全部如上定义的需要特征的佐剂候选。
作为实例，上述开发的新佐剂中，一些核酸样CpG DNA寡聚核苷酸或isRNA(免疫刺激RNA)证明是免疫刺激剂或佐剂的有希望的候选，这是由于它们允许固有免疫反应的治疗诱导或预防诱导。容易理解地，该基于核酸的佐剂通常必须有效地递送至作用位点，以允许诱导有效的固有免疫反应而没有佐剂活性的不必要的损失，在一些情况下，没有将施用体积增加至全身耐受水平之上的必要。解决这个问题的一种方法可以是用作为PAMP受体的配体(例如Toll-样受体(TLR))的免疫刺激核酸转染作为固有免疫系统一部分的细胞(例如树突细胞、浆细胞样树突细胞(PDC))，并因此可以导致通过核酸配体的免疫刺激。另一种方法可以是基于核酸的佐剂的直接转染。但是，所有这些方法典型地受到核酸的低效递送的损害并由此减弱佐剂活性，尤其是当局部施用时。然而，至今为止该基于核酸的佐剂方法的一个主要缺点在于，它们穿过哺乳动物细胞的质膜的有限能力，这导致差的细胞进入和不充分的治疗功效。至今为止，这个障碍代表基于核酸转染的应用例如生物医药开发和由此的很多生物医药的商业成功的主要挑战(例如参见 Foerg, C. &Merkle, H. P.，JPharm Sci97,144-62 (2008))。 核酸或基因进入细胞或组织的转染最新已经在体外转染目的的背景和基因治疗方法的背景下进行研究。然而，至今没有可用的佐剂基于该基因递送技术并且是有效和安全的，尤其是没有得到许可的佐剂。这大概是由于一般来说在解决基于核酸的佐剂情况下一般与待解决的稳定性问题相结合的对佐剂的复杂要求。不过，核酸或基因转染进入细胞或组织用于引起(固有和/或适应性)免疫反应似乎提供了有希望的方法来提供新的佐剂。然而，很多这些方法利用核酸或基因进入细胞或组织的转染，而没有诱导固有免疫反应。甚至一些基因治疗必须严格地避免诱导固有免疫反应。甚至在极少情况下，在进行疫苗接种的位点利用核酸的施用来诱导适应性抗原特异性免疫反应，例如使用DNA或mRNA编码的抗原的肿瘤疫苗接种，典型地进行适应性免疫反应的诱导作为抗编码的抗原的活性免疫，而不是作为伴随性佐剂治疗并因此需要附加地施用独立的佐剂来诱导固有免疫反应。即使大量转染方法在本领域是公知的，目前将核酸或基因转移或插入个体细胞中仍然是主要的挑战，并且还没有令人满意地解决。为了解决这个复杂的问题，过去十年中开发了多种方法。这些方法包括通过磷酸钙、阳离子脂类、阳离子聚合物和脂质体来转染。其他用于转染的方法是电穿孔和病毒转导。然而，本领域技术人员公知的是，用于转移或插入核酸或基因的系统必须满足几个体内应用的要求，包括有效的核酸递送进入个体细胞内并且具有高功能性、抗无所不在的核酸酶的核酸保护、核酸在细胞中的释放、没有安全担忧、能够扩大和在低成本条件下储存稳定(例如容易冻干)的商业可接受形式的可行的制造。如果是前面列出的核酸形式，尤其要将这些要求加入对佐剂的复杂要求中。目前可用的将转移或插入核酸或基因的一些成功策略依赖病毒载体的使用，例如腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒和疱疹病毒。病毒载体能够高效地调节基因转移和长期基因表达的可能性。然而，基因治疗临床试验中没有覆盖的急性免疫反应(“细胞因子风暴”)、免疫原性和插入突变已经带来与一些常用病毒载体相关的严重的安全问题。
在非病毒载体的使用中可以发现核酸或基因的转移或插入问题的其他解决方法。尽管非病毒载体不如病毒载体有效，但是已经开发了很多非病毒载体用于提供安全的选择。已经利用物理(无载体核酸递送)和化学方法(合成的基于载体的核酸递送)探索了非病毒核酸递送的方法。物理方法通常包括针注射、电穿孔、基因枪、超声和流体力学递送，使用物理力透过细胞膜并促进细胞内的基因转移。化学方法通常使用合成或天然存在的化合物(例如阳离子脂类、阳离子聚合物、脂质-聚合物混合系统)作为载体将核酸递送进入细胞。尽管已经在各种非病毒核酸递送体系的基础科学和应用中有了显著进步，但多数非病毒方法仍然比病毒载体的效率低很多，尤其对于体内基因递送(例如参见Gao，X.，Kim,K. &Liu, D.，AAPSJ9，E92-104 (2007))。如上定义的这些转染剂典型地已经成功单独用于体外反应中。然而，对于核酸体内应用还需要满足其他要求。例如，核酸和转染剂之间的复合物必须在生理盐溶液中对凝聚稳定。此外，该复合物典型地必须不与宿主的补体系统部分相互作用，因此自身必须不能是免疫原性的，如同载体自身应该不诱导个体的适应性免疫反应。附加地，该复合物应保护核酸免受无处不在的核酸酶的早期细胞外降解。在现有技术中可得到很多转染剂，尤其是阳离子脂类，它在细胞培养中显示出极好的转染活性。然而，大多数这些转染剂在血清存在下表现不好，并且只有少数是体内活性的。当脂质体复合物暴露于存在于血液、黏液、上皮表层液体或组织基质中的大量带负电荷的且通常是两性的蛋白质和多糖时，大小、表面电荷和脂质组成出现剧烈改变。一旦体内施用，脂质体复合物趋向于与带负电荷的血液成分相互作用，并形成可以吸附到循环红细胞表面上、陷入厚的黏液层或在微血管系统中形成栓塞的凝聚体，阻止了它们到达远端位置的目标靶细胞。一些甚至在引入血液循环之后经过了分解(例如参见Gao，X.，Kim，K. &Liu,D. , AAP SJ9，E92-104(2007)))。一种更有前途的方法利用阳离子聚合物。阳离子聚合物已经证实在核酸的转染上是有效的，这是因为它们可以与带负电荷的核酸紧密地复合并缩合。因此，已经探索大量阳离子聚合物做为体外和体内基因递送的载体。这些包括聚乙烯亚胺(PEI)、聚酰胺胺和聚丙胺树枝状大分子、聚丙烯胺、阳离子葡聚糖、壳聚糖、阳离子蛋白质和阳离子肽。尽管大多数阳离子聚合物分享将DNA缩合到小颗粒中的功能并通过与细胞表面上的阴离子位点的电荷-电荷相互作用经由内吞作用促进细胞吸收，它们的转染活性和毒性大大不同。仅仅在现有技术中的一种方法中，通过Fotin-Mleczek等人(W02009/030481)证实了复合至短的阳离子肽的RNA的免疫刺激效应。这些制剂似乎有效地诱导了免疫活性细胞中细胞因子的生产。遗憾的是，Fotin-Mleczek等人没有评价通过这些复合物对优选的抗病毒细胞因子IFN-a的诱导。附加地，这些复合物被证明在冻干期间不稳定。在上文中，阳离子聚合物显示了随着分子量的增加而更好的转染效率。然而，增加分子量也导致阳离子聚合物的毒性的增加。在上文中，(高分子量)PEI或许是关于核酸转染最多研究的和最具活性的聚合物，尤其是用于基因递送目的。遗憾的是，由于其不可生物降解的性质和毒性，它展示了相同的缺点。此外，尽管由高分子量聚合物形成的多聚物复合物(polyplexes)在生理条件下显示出改进的稳定性,数据还是表明该聚合物可能阻碍载体打开。为了克服该负面影响，Read等人(见Read, M. L.等人，J Gene Med. 5,232-245(2003);和 Read，M. L 等人，Nucleic Acids Res33, e86 (2005))开发了新型的合成载体，它基于通过肽Cys-Lysic1-Cys的氧化缩聚制备的线性可还原的多阳离子(RPC)。该肽Cys-Lysltl-Cys可以通过细胞内介质切割，以促进核酸的释放。在上下文中，Read等人(2003，同上)可以显示由这些RPC形成的多聚物复合物通过使DNA和mRNA有效释放的还原条件而失稳。然而，通过对体内转染效率的检验，Read等人(2003，同上)还观察到，N/P (氮原子与磷原子)比率为2不令人满意，必须更高的N/P比率来改进转染效率。附加地，Read等人(2003，同上)观察到，还必需氯喹或阳离子脂质DOTAP以将转染效率增强至充分水平。结果是，Read等人(2005，同上)将公知具有胞内缓冲能力的组氨酸残基包括到RPC中，并显示出这种富含组氨酸的RPC可以通过细胞内还原介质切割。该方法能够实现宽范围的核酸包括质粒DNA、mRNA和siRNA分子的有效细胞质递送，而不需要胞内剂氯喹。令人遗憾的是，Read等人(2003，同上)和Read等人(2005，同上)都没有评价RPC是否可以直接用于体内应用。在他们2005年的研究中，在不存在血清的条件下实施转染，以避免遮盖组氨酸残基增强基因转移的能力，其可能由限制细胞吸收的血清蛋白与多聚体复合物的结合导致。然而，初步实验表明，富含组氨酸的RPC多聚体复合物的转染特性可以受到血清蛋白存在的影响，在10% FCS中观察到GFP阳性细胞减少50%。用于体内应用， Read等人(2005，同上)提出用亲水聚合物聚_[N_(2羟基-丙基)甲基丙烯酰酰胺]来修饰。令人遗憾的是，他们不能阻止多聚体复合物的凝聚和多阳离子复合物与血清蛋白质的结合。此外，在核酸复合时，由于特征为高的N/P比的阳离子聚合物的过量，形成了强阳离子荷电的复合物(正的;(zeta)电位)。由此，由于它们的盐诱导的凝聚和与血清含量的相互作用(调理作用)的强烈趋势，该复合物只具有有限的体内用途。另外，在用于基因治疗目的时，这些(带正电荷的)复合物可以激发补体激活。也已经证明，这些基于复合物的带正电荷的RPC在对局部施用于真皮之后显示出差的对核酸运载物的翻译。在类似于Read 等人的方法中，McKenzie 等人(McKenzie, D. L. , K. Y. Kwok,等人(2000) ,J Biol Chem275(14) :9970-7和McKenzie，D. L.，E. Smiley，等人(2000) ,BioconjugChemll (6) :901-9)通过将多个半胱氨酸插入短的合成肽中开发了交联的肽作为基因递送齐U。在他们的研究中，他们检验了 DNA的优化的复合物形成，结果是他们能够显示至少为2的N/P比率对完全形成肽DNA缩合物是必要的。所以，只有带正电荷的复合物似乎显示出优化的DNA缩合。与这些数据相反，他们提出开发带负电的复合物用于体内基因递送，这是因为在之前的研究中已经示出，电正性DNA缩合物的静脉施用导致快速的调理作用和非特异性地生物分布至肺和肝(Collard, ff. T.，Evers, D. L.，McKenzie, D. L.,和 Rice,K. G. (2000) ,Carbohydr. Res. 323，176-184)。所以，McKenzie 等人(2000;同上)提出用聚乙二醇和祀向配体进行载体的衍生。应注意，McKenzie等人(2000,同上)的方法是专利(US6, 770，740B1)的另外的主题，其尤其公开了编码核酸、反义核酸和核酶的转染。因此，核酸的体内应用似乎仍然是最具挑战的问题，因为血浆蛋白质与阴离子电荷可以非特异性地结合至带正电荷的复合物，并快速地清除它们例如经由网状内皮系统。通过阳离子复合物对补体系统的调理作用和激活是附加的生理现象，其可以参与降低体内施用的阳离子复合物的效率。这尤其应用于基于核酸的药物的施用，例如核酸转染进入细胞或组织，尤其是如果打算进行编码蛋白质或肽的表达或者转染的核酸的RNA的转录。综上所述，现有技术没有提供可行的手段或方法，一方面允许建立用于疫苗接种目的的有效和安全的佐剂，另一方面还适用于核酸的体内递送，尤其用于用于核酸体内转染目的的核酸的紧凑化和稳定化，而不显示出前面讨论的不利副作用。更准确的说，在这点上现有技术中没有方式和方法，一方面足够稳定地在代谢切割之前将核酸运载物携带入靶中，另一方面可以在它们积聚和达到有毒水平之前从组织中清除。另外没有公知的手段或方法，除了上述要求之外，诱导细胞因子的期望的模式，尤其是抗病毒细胞因子IFN-a。因此，本发明的目的是提供解决这些问题的手段或方法。基于本发明的目的通过本发明的主题来实现，优选通过所附的权利要求的主题来实现。根据第一实施方案，基于本发明的目的通过聚合物载体运载物复合物来实现，其包括
a)(作为载体)由二硫化物交联的阳离子成分形成的聚合物载体，和b)(作为运载物)至少一种核酸(分子)，优选用作药物，更优选用作免疫刺激剂或佐剂，例如在如本文定义的疾病的治疗中。作为选择，基于本发明的目的通过聚合物载体运载物复合物来实现，其由下列物质组成a)由二硫化物交联的阳离子成分形成的聚合物载体(作为载体)，和b)至少一种核酸(分子)(作为运载物)，优选用作药物，更优选用作免疫刺激剂或佐剂，例如在如本文定义的疾病的治疗中。术语“免疫刺激剂”典型地理解为不包括例如抗原(无论什么化学结构)的引起适应性/细胞毒性免疫反应例如“体液的”或“细胞的”免疫反应的剂，换句话说，引起免疫反应(并由自身赋予免疫力)，该免疫反应的特征是通过对被免疫活性细胞识别为外来物的抗原的结构特性的特异性反应。更确切地，“免疫刺激剂”典型地理解为，其表示不自身引起任何适应性/细胞毒性免疫反应，但可以以非特异性方式专门增强这种适应性/细胞毒性免疫反应的剂/化合物/复合物，例如通过活化“PAMP”受体并因此引起支持实际的适应性/细胞毒性免疫反应的细胞因子的释放。因此，自身引起适应性和/或细胞毒性免疫反应(自身直接或间接赋予免疫性)的剂的任何免疫刺激典型地都被术语“免疫刺激剂”排除在外。术语“佐剂”也理解为不包括由自身赋予免疫性的剂。因此，佐剂自身不赋予免疫性，而是以各种方式辅助免疫系统，以通过例如促进抗原对免疫系统的呈递来增强抗原特异性免疫反应。由此，佐剂可以优选例如调节抗原特异性免疫反应，通过例如将占优势的Thl-基抗原特异性反应改变成更大的Th2-基抗原特异性反应，反之亦然。因此，本发明上下文中的术语“免疫刺激剂”和“佐剂”典型地应理解为表示自身不赋予免疫性，但是通过某种效应以非特异性方式(与抗原特异性免疫反应成对比)专门地支持免疫反应的剂、化合物或复合物，所述效应通过非特异性措施调节抗原特异性(适应性细胞和/或体液免疫反应)，所述非特异性措施例如为细胞因子表达/分泌、改善的抗原呈递、改变免疫反应的臂(arm)的性质等。因此，自身引起免疫性的任何剂典型地都被术语“佐剂”或“免疫刺激剂”排除在外。本发明的聚合物载体运载物复合物允许提供高效和安全的用于疫苗接种目的的佐剂以及在疫苗接种、辅助治疗或基因治疗应用领域等中用于转染的载体。有利地，本发明的聚合物载体运载物复合物适用于核酸的体内递送，尤其用于压缩和稳定用于核酸转染的核酸，并且不显示前面讨论的高分子量聚合物的负面副作用，例如无生物降解能力或生物降解能力差，或甚至高毒性、凝聚、低体内转染活性等。本发明的聚合物载体运载物复合物还提供有效的体内核酸转移，尤其是通过真皮内或肌肉内路径，包括血清稳定性、盐稳定性、有效摄入、无补体激活、核酸释放等。当作为佐剂提供时，这种根据本发明的聚合物载体运载物复合物通过开始或推动平行的固有免疫反应来进一步支持适应性免疫反应的诱导和保持。另外，本发明的聚合物载体运载物复合物显示出优异的储存能力，尤其在冻干期间。如上定义的本发明的聚合物载体运载物复合物包括由二硫化物交联的阳离子成分形成的聚合物载体作为一种成分。术语“阳离子成分”典型地指带电的分子，在PH值为约I至9、优选pH值为9或低于9、优选pH值为8或低于8、 优选pH值为7或低于7、最优选在生理pH值下、例如约7. 3至7. 4时所述带电的分子带正电荷(阳离子)。因此，根据本发明的阳离子肽、蛋白质或聚合物在生理条件下带正电荷，尤其在体内细胞的生理盐条件下。“阳离子”的定义还可以指“多阳离子”成分。在上下文中，通过二硫化物交联形成本发明的聚合物载体运载物复合物的基础的阳离子成分典型地选自任意适合的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或者适用于此目的的聚合物，尤其是能够复合如根据本发明定义的核酸的任意阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物，从而优选地缩合核酸。所述阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物优选地是线性分子，但也可以使用支链的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物。所述聚合物载体的每种阳离子或多阳离子蛋白质、肽或聚合物包含至少一个-SH部分，最优选至少一个半胱氨酸残基或显示-SH部分的任意其他化学基团，能够在与至少一个另外的作为如本文所述聚合物载体的阳离子成分的阳离子或多阳离子蛋白质、肽或聚合物缩合时形成二硫键。聚合物载体的每种阳离子或多阳离子蛋白质、肽或聚合物或任意其他成分优选地经由二硫化物交联连接至其相邻的成分(阳离子蛋白质、肽、聚合物或其他成分)。优选地，二硫化物交联是至少一个阳离子或多阳离子蛋白质、肽或聚合物与至少一个其他的阳离子或多阳离子蛋白质、肽或聚合物或聚合物载体的其他成分之间的(可逆的)二硫键(-S-S-)。二硫化物交联典型地是通过聚合物载体的成分尤其是阳离子成分的-SH部分的缩合而形成的。这种-SH部分可以是在二硫化物交联之前聚合物载体的阳离子或多阳离子蛋白质、肽或聚合物或聚合物载体的任意其他成分的结构的一部分，或者可以是在二硫化物交联之前通过下面定义的修饰加入的。由此而论，邻近聚合物载体的一种成分的提供二硫键所必需的硫可以通过成分自身例如通过如本文定义的-SH部分来提供，或者可以通过对成分进行相应修饰使其显示-SH部分来提供。这些-SH部分典型地通过各种成分例如经由半胱氨酸或任意其他(经修饰的)携带-SH部分的氨基酸或化合物或成分的化合物来提供。在聚合物载体的阳离子成分或任意其他成分是肽或蛋白质的情况下，优选-SH部分通过至少一个半胱氨酸残基来提供。作为选择，聚合物载体的成分可以相应地用-SH部分来修饰，优选地经由与携带-SH部分的化合物的化学反应来修饰，使得聚合物载体的各个成分携带至少一个这种-SH部分。这种携带-SH部分的化合物可以是例如(附加的)半胱氨酸或任意其他携带-SH部分的(经修饰的)氨基酸或化合物或聚合物载体的成分的化合物。这种化合物还可以是包含或允许将-SH部分引入如本文定义的成分中的任意非氨基化合物或部分。这种非氨基化合物可以经由化学反应或化合物的结合连接至根据本发明的聚合物载体的成分，例如经由3-硫代丙酸或2-亚氨基硫烷(Traut’ s试剂)通过酰胺形成(例如羧酸、磺酸、胺等)，通过Michael加成(例如马来酰亚胺部分、a，^不饱和羰基等)，通过点击化学(例如叠氮化物或炔烃)，通过烯烃/炔烃复分解(例如烯烃或炔烃)，亚胺或腙(hydrozone)形成(醛或酮、肼、羟胺、胺)，复合反应(卵白素、生物素、蛋白质G)或允许Sn-型取代反应的成分(例如卤代烷、硫醇、醇、胺、肼、酰肼、磺酸酯、氧磷鎗盐)或可以用于其他成分连接的其他化学部分。在一些情况下，在化学连接至成分期间-SH部分可能被保护基团掩盖。这种保护基团在现有技术中是公知的，并可以在化学偶联之后除去。在不同情况下，-SH部分，例如半胱氨酸或任意其他(经修饰的)氨基酸或化合物的-SH部分可以存在于聚合物载体的成分的末端或内部任意位置。如本文定义的，聚合物载体的每种成分典型地显示出至少一个-SH部分，但是还可以包含两个、三个、四个、五个、或甚至更 多个-SH部分。除了阳离子成分的结合之外，-SH部分可以用于连接如本文定义的聚合物载体的其他成分，尤其是氨基酸成分，例如抗原表位、抗原、抗体、细胞穿透肽(例如TAT)、配体等。如上定义的，本发明的聚合物载体运载物分子的聚合物载体由二硫化物交联的阳离子(或多阳离子)成分形成。根据一个第一选择，聚合物载体的至少一种阳离子(或多阳离子)成分可以选自阳离子或多阳离子肽或蛋白质。该阳离子或多阳离子肽或蛋白质优选显示约3至100个氨基酸的长度，优选约3至50个氨基酸的长度，更优选3至25个氨基酸的长度，例如约3至10 ;5 至 20 ;5 至 15 ;8 至 15、16 或 17 ；10 至 15、16、17、18、19 或 20 ;或者 15 至 25 个氨基酸的长度。作为选择或附加地，该阳离子或多阳离子肽或蛋白质可以显示分子量为约0. OlkDa至约IOOkDa,包括分子量为约0. 5kDa至约IOOkDa,优选为约IOkDa至约50kDa，甚至更优选为约IOkDa至约30kDa。在特殊情况下，聚合物载体的阳离子成分包括阳离子或多阳离子肽或蛋白质，如果聚合物载体完全由阳离子或多阳离子肽或蛋白质构成，则阳离子或多阳离子肽或蛋白质的阳离子特性或整个聚合物载体的阳离子特性可以根据其阳离子氨基酸的含量来确定。优选地，阳离子或多阳离子肽或蛋白质和/或聚合物载体中阳离子氨基酸的含量为至少10 %、20 %或30 %，优选至少40 %，更优选至少50 %、60 %或70 %，但还优选至少80 %、90% 或甚至 95%、96%、97%、98%、99% 或 100%，最优选至少 30 %、40 %、50 %、60 %、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或 100%，或者可以在约 10%至 90% 的范围内，更优选在约15%至75%的范围内，甚至更优选在约20%至50%的范围内，例如20%、30 %、40 %或50 %，或者在由任意两个前面提到的值构成的范围内，如果聚合物载体完全由阳离子或多阳离子肽或蛋白质构成，则阳离子或多阳离子肽或蛋白质中，或者在整个聚合物载体中所有氨基酸(例如阳离子的、亲脂的、亲水的、芳香族的和其他氨基酸)的含量为100%。在上下文中，阳离子氨基酸优选是天然存在的氨基酸Arg(精氨酸)、Lys (赖氨酸)、His(组氨酸)和0rn(鸟氨酸)。然而，在更广意义上还可以设想，使用其侧链上携带阳离子电荷的任意(非天然的)氨基酸来实施本发明。但优选的是，在生理PH条件下其侧链上携带正电荷的那些阳离子氨基酸。在更优选的实施方案中，这些氨基酸是Arg、Lys和Orn0优选地，包括至少一个-SH部分或另外地修饰为包括至少一个-SH部分的聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质选自但不限于阳离子肽或蛋白质如鱼精蛋白、核仁蛋白、精胺、亚精胺、寡聚-L-赖氨酸或多聚-L-赖氨酸(PLL)、碱性多肽、寡聚-精氨酸或多聚-精氨酸、细胞穿透肽(CPP)，嵌合的CPP如Transportan或MPG肽、HIV-结合肽、Tat、HIV-lTat(HIV)、Tat-衍生肽，穿膜肽家族的成员如穿膜肽、黑腹果蝇触足肽衍生的肽(尤其来自黑腹果蚬(Drosophila antennapedia)的)、pAntp、pIsl等,抗微生物剂衍生的CPP如 Buforin-2, Bac715_24、SynB, SynB(I)、pVEC、hCT-衍生的肽、SAP、MAP、KALA, PpTG20、Loligomere、FGF、乳铁蛋白、组蛋白、VP22衍生肽或模拟肽、HSV、VP22(单纯性疱疹)、MAP、KALA或蛋白转导结构域(PTD)、PpT620、富含脯氨酸肽、富含精氨酸肽、富含赖氨酸肽、Pep-UL-寡聚物、降钙素肽等。
作为选择或附加地，包括至少一个-SH部分或另外修饰为包括至少一个-SH部分的聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质选自但不限于具有下面的和式(I)的下列阳离子肽{(Arg)! ； (Lys)m ； (Hi s) n ； (Orn)。； (Xaa) J ；其中1+m+n+o+x = 3-100,和1、m、n 或 o 互相独立地是选自 O、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21 至 30,31 至 40,41 至 50,51 至 60,61 至 70,71至80、81至90和91至100的任意数值,条件是Arg (精氨酸)、Lys (赖氨酸)、His (组氨酸)和Orn(鸟氨酸)的总含量代表寡肽的所有氨基酸的至少10%;且Xaa是选自除了 Arg、Lys、His或Orn之外的天然(=天然存在的)氨基酸或非天然氨基酸的任意氨基酸jPx是选自 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21 至 30、31 至 40、41 至50,51至60、61至70、71至80、81至90的任意数值，条件是Xaa的总含量不超过寡肽的所有氨基酸的90%。氨基酸Arg、Lys、His、0rn和Xaa的任意一个可以位于肽的任意位置上。由此而论，尤其优选在7至30个氨基酸范围内的阳离子肽或蛋白质。甚至更优选的该式的肽是寡聚精氨酸例如 Arg7、Arg8、Arg9、Arg12、Hi S3Arg9、Arg9Hi S3、Hi S3Arg9Hi S3、Hi S6Arg9Hi s6、His3Arg4His3^ His6Arg4His6^ TyrSer2Arg9Ser2Tyr^ (ArgLysHis) 4> Tyr (ArgLysHis) 2Arg 等。根据尤其优选的实施方案，具有如上所示实验和式(I)的聚合物载体的这种阳离子或多阳离子肽或蛋白质可以包括但不限于下列式的亚组中的至少一个Arg7, Arg8, Arg9, Arg10, Arg11, Arg12, Arg13, Arg14, Arg15^30 ;Lys7, Lys8, Lys9, Lys10, Lys11, Lys12, Lys13, Lys14, Lys15^30 ;His7, His8, His9, His10, His11, His12, His13, His14, His15_30 ；Orn7, Orn8, Orn9, Orn10, Orn11, Orn12, Orn13, Orn14, Orn15_30 ；根据另一个尤其优选的实施方案，具有如上所示实验和式(I)并且包括至少一个-SH部分或另外地修饰为包括至少一个-SH部分的聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质可以优选选自但不限于下列式的亚组中的至少一个。下列式(与实验式(I) 一样)不指定任意氨基酸顺序，而是意在通过仅仅指定作为各种肽成分的氨基酸(数目)来反映实验式。由此，作为实例，实验式Arg(7_29)LySl意在表示落入该式的肽包含任意顺序的7至19个Arg残基和I个Lys残基。如果肽包含7个Arg残基和I个Lys残基，则包括具有7个Arg残基和I个Lys残基的所有变体。因此,Lys残基可以位于例如由7个Arg残基和I个Lys残基构成的8个氨基酸长的序列中的任意位置。亚组优选包括Arg(^29)Lys1, Arg(^29)His1, Arg^29Orn1, Lys(^29)His1, LyS(^29)Orn1, HiS(^29)Orn1,Arg(3-28)Lys2, Arg(3_28)His2, Arg(3_28)0rn2, Lys(3_28)His2, Lys(3_28)0rn2, His(3_28)0rn2,Arg(2_27)Lys3, Arg(2_27)His3, Arg(2_27)0rn3, Lys(2_27)His3, Lys(2_27)Orn3, His(2_27)0rn3,Arg(1_26)Lys4, Arg(1_26)His4, Arg(1_26)0rn4, Lys(1_26)His4, Lys(1_26)Orn4, His(1_26)0rn4,Arg(P28)Lys1His1, Arg(3_28)Lys1Orn1, Arg(3_28)HiS1Orn1, Arg1LyS^20HiS1, Arg1Lys^28)Orn1, Lys(3_28)HiS1Orn1, Arg1Lys1His(3_28), Arg1His(3_28)Orn1, Lys1His^28)Orn1 ；Arg(^27)Lys2His1, Arg(^27)Lys1His2, Arg(^27)Lys2Orn1, Arg(^27)Lys1Orn2, Arg(2_27)HiS2Orn1, Arg(2_27)HiS1Orn2, Arg2Lys(2_27)His1, Arg1Lys(^27)His2, Arg2LyS(^27)Orn1, Arg1Lyste^27)Orn2, Lys(^27)His2Orn1, Lys(^27)His1Orn2, Arg2Lys1His^27), Arg1Lys2His^27), Arg2His(2_27)Orn1, Arg1HiS(^27)Orn2, Lys2His(^27)Orn1, Lys1Hisc^27) Orn2 ；Arg(^26)Lys3His1, Arg(1_26)Lys2His2, Arg(^6)Lys1His3, Arg(^6)Lys3Orn1, Arg(1_26)Lys2Orn2, Arg(^26)Lys1Orn3, Arg(^26)His3Orn1, Arg(1_26)HiS2Orn2, Arg(^26)His1Orn3,Arg3Lys(^26)His1, Arg2Lys(1_26)His2, Arg1Lys(U6)His3, Arg3Lys(卜^Orn1, Arg2Lys(1_26)Orn2,Arg1LyS(^26)Orn3, Lys(卜^His3Orn1, Lys(1_26)His20rn2, Lys(卜^His1Orn3, Arg3Lys1Hisa^26),Arg2Lys2His(1_26), Arg1Lys3Hisa^26), Arg3HiS(^26)Orn1, Arg2His(1_26)Orn2, Arg1HiS(^26)Orn3,Lys3His(^26)Orn1, Lys2Hi s(1_26) Orn2, Lys1His(^26)Orn3 ；Arg (2 _2 ^Lys1Hi S1Orn1, Arg1Lys (2_2 ^His1Orn1, Arg1Lys1Hi s(2_2 ^Orn1,Arg1Lys1Hi S1Orn (2_27)；Arg(^26)Lys2His1Orn1, Arg(^26)Lys1His2Orn1, Arg(^26)Lys1His1Orn2, Arg2Lys(1_26)His1Orn1, Arg1Lys(^26)His2Orn1, Arg1Lys (1_26) Hi S1Orn2, Arg2Lys1Hi s d-26)0rni>Arg1Lys2His(^26)Orn1, Arg1Lys1Hisa^26) O rn2, Arg2Lys1His1Orna^26), Arg1Lys2His1Orna^26),Arg1Lys1His2Orna^26)；根据另一个尤其优选的实施方案，具有如上所示实验和式(I)并且包括至少一个-SH部分或另外地修饰为包括至少一个-SH部分的聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质可以选自但不限于由通式Arg7 (也称为R7)、Arg9 (也称为R9)、Arg12 (也称为R12)构成的亚组。根据另一个尤其优选的实施方案，在如上所示根据式{(Arg)1; (Lys)m; (His)n;(Orn)0 ； (Xaa)J (式(I))定义并包括至少一个-SH部分或另外地修饰为包括至少一个-SH部分时，聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质可以选自但不限于式(Ia)((Arg)1 ; (Lys)m ; (His)n ; (Orn)。； (Xaa' )x (Cys) y}式(Ia)其中(Arg)1; (Lys)m ; (His)n ; (Orn)。；和 X 如本文所定义的,Xaa’是选自除了 Arg、Lys、His、0rn或Cys之外的天然(=天然存在的)氨基酸或非天然氨基酸的任意氨基酸；和y 是选自 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21 至 30,31 至 40、41至50、51至60、61至70、71至80、81至90的任意数值，条件是Arg(精氨酸)、Lys (赖氨酸)、His (组氨酸)和Orn (鸟氨酸)的总含量代表寡肽的所有氨基酸的至少10%。 该实施方案可以应用于下面的情况，其中例如如上所示根据实验式((Arg)1 ；(Lys)m; (His)n; (Orn)^(Xaa)jJ (式(I))定义时，聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质包括作为在上述意义上的-SH部分的至少一个半胱氨酸或已经用作为在上述意义上的-SH部分的至少一个半胱氨酸修饰，使得阳离子或多阳离子肽作为阳离子成分载带至少一个半胱氨酸，半胱氨酸能够与聚合物载体的其他成分形成二硫键。根据另一个尤其优选的实施方案，在如上所示根据式{(Arg)1; (Lys)m; (His)n;(Orn)“(Xaa),}(式(I))定义时，聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质可以选自但不限于式(Ib)CysJ(Arg)1 ； (Lys)m ； (H is)n ; (Orn)。；(Xaa) J Cys2 (式(Ib))其中实验式{(Arg)1； (Lys)m ； (His)n ； (Orn)。； (Xaa) J (式(I))如本文所定义的并形成根据(半实验)式(I)的氨基酸序列的核心，其中Cys1和Cys2是在(Arg) x ; (Lys)m ;(His)n ； (Orn)0 ； (Xaa)x近端或末端的半胱氨酸。示范性实例可以包括侧面与两个Cys和下列序列连接的上述序列中的任一个
Cys (Arg7)Cys, Cys(Arg8)Cys, Cys(Arg9)Cys, Cys (Arg10) Cys, Cys (Arg11)Cys,Cys(Arg12)Cys,Cys (Arg1 3)Cys, Cys(Arg14) Cys, Cys(Arg15) Cys, Cys(Arg16) Cys, Cys(Arg17) Cys,Cys (Arg18) Cys,Cys (Arg19) Cys, Cys (Arg20) Cys (SEQ ID NOs : 1-14)CysArg7Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg~Cys(sEQ ID NO.1)CysArg8Cys Cys-Arg-Ar g-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg~Cy s(SEQ ID NO-2)CysArg9Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(SEQ ID NO. 3)CysArg10Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(SEQ IDNO. 4)CysArg11Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg~Cys(SEQ IDNO. 5)CysArg12Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg~Cys (SEQ ID NO. 6)CysArg13Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ ID NO. 7)CysArg14Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg_Ar8-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys (SEQ IDN0.8)CysArg15Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(sEQ ID NO. 9) CysArg16Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(SEQ ID NO. 10)CysArg17Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(SEQ ID NO. 11)CysArg18Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(SEQ ID NO. 12)CysArg19Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Cys(SEQ ID NO. 13)CysArg20Cys Cys-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Ar g-Ar g-Ar g-Ar g-Ar gCy s(SEQ ID NO. 14)该实施方案可以应用于下面的情况，其中在例如如上所示根据实验式((Arg)1 ;(Lys)m; (His)n; (Orn)^(Xaa)jJ (式(I))定义时聚合物载体的阳离子或多阳离子肽或蛋白质已经用至少两个半胱氨酸作为在上述意义上的-SH部分进行修饰，使得本发明的聚合物载体运载物复合物的阳离子或多阳离子肽作为阳离子成分载带至少两个(末端)半胱氨酸，其能够与聚合物载体的其他成分形成二硫键。根据第二选择，聚合物载体的至少一个阳离子(或多阳离子)成分可以选自例如任意的关于此适合的(非肽的)阳离子或多阳离子聚合物，条件是该(非肽的)阳离子或 多阳离子聚合物显示出或修饰为显示出至少一个-SH部分，其提供二硫键将阳离子或多阳离子聚合物与如本文定义的聚合物载体的其他成分连接起来。因此，同样如本文定义的，该聚合物载体可以包括相同或不同的阳离子或多阳离子聚合物。在特殊情况下，聚合物载体的阳离子成分包括(非肽的)阳离子或多阳离子聚合物，(非肽的)阳离子或多阳离子聚合物的阳离子特性可以根据与阳离子聚合物的成分的全部电荷比较时其阳离子电荷的含量来确定。优选地，如本文定义的，在(生理)pH下阳离子聚合物中阳离子电荷的含量为至少10%、20%或30%，优选地至少40%，更优选地至少50%、60%或 70%，但还优选至少 80%、90%或者95%、96%、97%、98%、99%或 100%，最优选至少 30%,40%,50%,60%,70%,80%,90%,95%,96%,97%,98%,99%^； 100%,或者可以在约10%至90%的范围内，更优选在约30%至100%的范围内，甚至优选在约50%至100%的范围内，例如50%、60%、70%、80%、90%或100%，或者在由任意两个前面提到的值构成的范围内，条件是所有电荷例如正电荷和负电荷如本文所定义的在(生理)pH下在整个阳离子聚合物中的含量为100%。优选地，聚合物载体的(非肽的)阳离子成分代表阳离子或多阳离子聚合物，典型地显示出分子量为约0.1kDa或0. 5kDa至约IOOkDa,优选地为约IkDa至约75kDa，更优选地为约5kDa至约50kDa，甚至更优选地为约5kDa至约30kDa，或者分子量为约IOkDa至约50kDa，甚至更优选地为约IOkDa至约30kDa。附加地，(非肽的)阳离子或多阳离子聚合物典型地显示出至少一个-SH部分，其在与其他阳离子成分或如本文定义的聚合物载体的其他成分缩合时能够形成二硫连接。在上述情况下，聚合物载体的(非肽的)阳离子成分可以选自丙烯酸酯、经修饰的丙烯酸酯例如pDMAEMA(聚(甲基丙烯酸二甲基氨基乙基酯))，壳聚糖，氮丙啶或2-乙基-2-噁唑啉(形成寡聚乙烯亚胺或修饰的寡聚乙烯亚胺)，通过双丙烯酸酯与胺形成寡聚的@氨基酯或聚酰胺基胺的反应获得的聚合物，或者其他聚合物如聚酯、聚碳酸酯等。这些(非肽的)阳离子或多阳离子聚合物的每个分子典型地显示出至少一个-SH部分，其中这些至少一个-SH部分可以通过化学修饰引入(非肽的)阳离子或多阳离子聚合物中，例如使用亚氨基硫代环戊烷(imonothiolan)、3_硫代丙酸或引入包含氨基酸的-SH部分，例如半胱氨酸或任意其他的(经修饰的)氨基酸。该-SH部分优选是如上面已经定义的。就聚合物载体而论，通过二硫化物交联形成聚合物载体的基础的阳离子成分可以彼此相同或不同。还尤其优选的是，本发明的聚合物载体包括阳离子肽、蛋白质或聚合物的混合物，且任选地包括通过如本文定义的二硫键交联的如本文定义的其他成分。在上下文中，本发明的聚合物载体运载物复合物由于其可变的聚合物载体有利地允许将不同的(短)阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分的期望的特性组合起来。聚合物载体，例如允许有效地使得核酸紧凑化，用于核酸的有效转染的目的，用于辅助治疗，用于基因治疗目的，用于基因敲除或者其他策略而不损失活性，尤其显示出核酸有效地体外转染但尤其是体内转染进入不同的细胞系。另外，聚合物载体以及因此本发明的聚合物载体运载物复合物对细胞是无毒的，提供其核酸运载物的有效释放，在冻干期间是稳定的并能够用作免疫刺激剂或佐剂。优选地，聚合物载体运载物复合物可以诱导抗病毒细胞因子IFN-a。特别是，通过二硫化物连接的阳离子成分形成的聚合物载体允许显著改变其肽或聚合物含量，并由此非常简单和快速地调节其生物物理/生物化学特性，尤其是聚合物载体的阳离子特性，例如通过合并作为阳离子成分的相同或不同的阳离子肽或聚合物，和任选地将其他成分加入聚合物载体中。尽管由非常小的无毒的单体单元构成，聚合物载体形成长的阳离子结合序列，其提供核酸运载物的强缩合和复合物稳定性。在细胞溶胶(例如 细胞溶胶GSH)的还原条件下，复合物被快速降解成其(阳离子)成分，并进一步被降解(例如寡肽)。这支持核酸运载物在细胞溶胶中的释放。由于在细胞溶胶中降解成小的寡肽或聚合物，如对大分子寡肽或聚合物，例如从大分子多聚精氨酸如公知的没有观察到毒性。因此，本发明的聚合物载体运载物复合物的聚合物载体可以包括不同的(短的)阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物，选自如上定义的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或(非肽的)聚合物，任选地与如本文定义的其他成分一起。另外地，如上定义的本发明的聚合物载体运载物复合物的聚合物载体，更优选地经由二硫化物交联形成聚合物载体的基础的至少一个不同的(短的)阳离子或多阳离子肽或(非肽的)聚合物，优选在二硫化物交联之前可以用至少一种其他成分修饰。作为选择，这样的聚合物载体可以用至少一种其他成分修饰。还可以任选地包括至少一种其他成分，其典型地与如上定义的其他(短的)阳离子或多阳离子肽一起经由二硫化物交联形成聚合物载体二硫化物。为了允许如前面所述的阳离子或多阳离子肽或(非肽的)聚合物的修饰，聚合物载体的每种成分可以(优选在二硫化物交联之前已经)还包含至少一种其他的功能性部分，该功能性部分允许连接如本文定义的其他成分。该功能性部分可以选自允许其他成分例如本文定义的官能部分(functionalities)的连接的官能部分,例如通过酰胺形成(例如羧酸、磺酸、胺等)，通过Michael加成(例如马来酰亚胺部分、a，^不饱和羰基等)，通过点击化学(例如叠氮化物或炔烃)，通过烯烃/炔烃复分解(例如烯烃或炔烃)，亚胺或腙形成(醛或酮、肼、羟胺、胺)，复合反应(卵白素、生物素、蛋白质G)或允许Sn-型取代反应的成分(例如卤代烷、硫醇、醇、胺、肼、酰肼、磺酸酯、氧磷鎗盐)或可以用于其他成分连接的其他化学部分。根据尤其优选的实施方案，可以在聚合物载体中包含的或者可以用于修饰形成本发明的聚合物载体运载物复合物的聚合物载体的基础的不同(短的)阳离子或多阳离子肽或(非肽的)聚合物的其他成分是氨基酸成分(AA)，其可以例如修饰如本文定义的聚合物载体的生物物理/生物化学特性。根据本发明，氨基酸成分(AA)包括多个氨基酸，优选在约I至约100的范围内，优选在约I至约50的范围内，更优选选自包括1、2、3、4、5、6、7、8、
9、10、11、12、13、14或15至20的数值，或者可以选自由任意两个前面提到的值构成的范围。在上下文中，氨基酸成分(AA)的氨基酸可以互相独立地选择。例如，如果聚合物载体中存在两个或更多个(AA)成分，则它们可以是相同的或者互相不同。氨基酸成分(AA)可以包含或可以侧面(例如末端)连接有包含-SH的部分，其允许将成分(AA)经由二硫键引入如本文定义的聚合物载体中。在特殊情况下，包含-SH的部分代表半胱氨酸，氨基酸成分(AA)还可以为-Cys-(AA)-Cys-,其中Cys代表半胱氨酸并为二硫键提供必要的-SH部分。还可以使用如上所示的任意的修饰或反应将包含-SH的部分引入氨基酸成分(AA)中用于阳离子成分或任意其成分。另外，例如如果氨基酸成分(AA)被用作两个其他 成分之间的连接基团(例如作为两个阳离子聚合物之间的连接基团)，则氨基酸成分(AA)可以提供为具有两个-SH部分(或甚至更多个)，例如由式HS- (AA) -SH代表的形式，以允许经由二硫键连接到两个官能部分。在这种情况下，优选在第一步骤中使用本领域公知的保护基团保护一个-SH部分，得到式HS-(AA)-S保护基团的氨基酸成分(AA)。随后，氨基酸成分(AA)可以结合至聚合物载体的其他成分，以经由未保护的-SH部分形成第一个二硫键。随后典型地将保护的-SH部分去保护并结合至聚合物载体的其他成分的另一个游离-SH部分，以形成第二个二硫键。作为选择，氨基酸成分(AA)可以提供为具有如前面对聚合物载体的其他成分所述的其他官能部分的，其允许氨基酸成分(AA)与聚合物载体的任意成分结合。因此，根据本发明，氨基酸成分(AA)可以使用或不使用二硫化物连接结合至聚合物载体的其他成分。不使用二硫化物连接的结合可以通过前面描述的任意反应来实现，优选通过将氨基酸成分(AA)使用如本文定义的酰胺化学结合至聚合物载体的其他成分来实现。如果期望或必要的，氨基酸成分(AA)的其他末端，例如N-末端或C-末端可以用于偶联其他成分，例如配体L。为此目的，氨基酸成分(AA)的其他末端优选包括或修饰为包括其他官能部分，例如炔物质(见以上的)，它可以用于经由点击化学加入其他成分。如果配体经由酸敏感的键结合，该键优选在胞内断开，且聚合物载体代表其表面上的氨基酸成分(AA)。氨基酸成分(AA)可以作为如上定义的聚合物载体的其他成分存在，例如作为阳离子成分之间的连接基团，例如作为一种阳离子肽和其他阳离子肽之间的连接基团，作为一种阳离子聚合物和其他阳离子聚合物之间的连接基团，作为一种阳离子肽和阳离子聚合物之间的连接基团，全部优选如本文定义的，或者作为聚合物载体的附加成分，例如通过将氨基酸成分(AA)与聚合物载体或其成分的结合，例如经由侧链、SH-部分或经由如本文定义的其他部分，其中氨基酸成分(AA)优选相应地修饰。根据其他的并且尤其优选的替代方案，氨基酸成分(AA)可以用于修饰聚合物载体，尤其是如本文定义的聚合物载体中的阳离子成分的含量。在上下文中，聚合物载体中阳离子成分的含量优选为至少10%、20%或30%，优选至少40 %，更优选至少50 %、60 %或70 %，但是还优选至少80 %、90 %或甚至95 %、96 %、97 %,98 %,99 % 或 100 %，最优选至少 30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80 %、90 %、95 %、96%、97%、98%、99%或100%，或者可以在约30%至100 %的范围内，更优选在约50%至100%的范围内，甚至优选在约70%至100%的范围内，例如70%、80%、90%或100%，或者在由任意两个前面提到的数值构成的范围内，条件是聚合物载体中所有成分的含量为100%。在本发明范围内，氨基酸成分(AA)可以选自下面的选择。根据第一选择，氨基酸成分(AA)可以是芳香族氨基酸成分(AA)。将芳香族氨基酸或作为芳香族氨基酸成分(AA)的序列并入本发明的聚合物载体中，能够由于芳香族氨基酸与核酸运载物的碱基的相互作用使聚合物载体和核酸产生与聚合物载体分子的带阳离子的序列和磷酸盐骨架的结合不同的(第二)结合。该相互作用可以例如通过嵌插或者通过次要沟区结合或主要沟区结合出现。这种相互作用不倾向通过阴离子复合伙伴(例如肝素、透明质酸)消除紧凑性(decompaction),该阴离子复合伙伴主要在体内细胞外基质中发现并其较不易受到盐效应的影响。为此，芳香族氨基酸成分(AA)中的氨基酸可以选自相同或不同的芳香族氨基 酸，例如选自Trp、Tyr或Phe。作为选择，氨基酸(或整个芳香族氨基酸成分(AA))可以选自下列妝组合Trp_Tyr、Tyr-Trp> Trp-Trp> Tyr-Tyr> Trp-Tyr-Trp> Tyr-Trp-Tyr>
rrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirrirri
lrp-lrp-lrp、Iyr-1yr-1yr> irp-1yr-1rp-1yr> iyr-1rp-1yr-1rp> irp-1rp-1rp-1rp>Phe-Tyr >Tyr-Phe>Phe-Phe>Phe-Tyr-Phe>Tyr-Phe-Tyr>Phe-Phe-Phe、Phe-Tyr-Phe-Tyr>Tyr-Phe-Tyr~Phe> Phe-Phe-Phe-Phe、Phe-Trp > Trp-Phe、Phe-Phe > Phe-Trp-Phe、Trp-Phe-Trp > Phe-Trp-Phe-Trp > Trp-Phe-Trp-Phe 或 Tyr-Tyr-Tyr-Tyr 等(SEQ ID NO 15-42)。该肽组合可以重复例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。作为选择，芳香族氨基酸成分(AA)可以包含或在侧面连接有包含-SH的部分，这允许经由二硫键引入该组分作为如上定义的聚合物载体的另一部分，例如作为连接基团。该包含-SH的部分可以是如本文定义的任意部分，它适合将如本文定义的一种成分偶联至如本文定义的另一成分。作为实例，该包含-SH的部分可以是半胱氨酸。于是，例如芳香族氨基酸成分(AA)可以选自例如肽组合Cys-Tyr_Cys、Cys-Trp-Cys> Cys-Trp-Tyr-Cys>Cys-Tyr-Trp-Cys ^ Cys-Trp-Trp-Cys、Cys-Tyr-Tyr-Cys、Cys-Trp-Tyr-Trp-Cys、Cys-Tyr-Trp-Tyr-Cys、 Cys-Trp-Trp-Trp-Cys、 Cys-Tyr-Tyr-Tyr-Cys^
\rprPrPrP\rprPrPrP\rprPrPrP
Cys-1rp-1yr-1rp-1yr-CyS、 Cys-1yr-1rp-1yr-1rp-CyS、 Cys-1rp-1rp-1rp-1rp-CyS、Cys-Tyr-Tyr-Tyy-Tyr-Cys^ Cys-Phe-Cys^ Cys-Phe-Tyr-Cys、Cys-Tyr-Phe-Cys、Cys-Phe-Phe-Cys^ Cys-Tyr-Tyr-Cys^ Cys-Phe-Tyr-Phe-Cys^ Cys-Tyr-Phe-Tyr-Cys^Cys-Phe-Phe-Phe-Cys、 Cys-Tyr-Tyr-Tyr-Cys、 Cys-Phe-Tyr-Phe-Tyr-Cys、Cys-Tyr-Phe-Tyr-Phe-Cys^ 或 Cys-Phe-Phe-Phe-Phe-Cys、Cys-Phe-Trp-Cys、Cys-Trp-Phe-Cys^ Cys-Phe-Phe-Cys^ Cys-Phe-Trp-Phe-Cys^ Cys-Trp-Phe-Trp-Cys^Cys-Phe-Trp-Phe-Trp-Cys^Cys-Trp-Phe-Trp-Phe-Cys 等。上面的每一个 Cys 还可以由任意修饰的肽或携带如本文定义的游离-SH部分的化合物来代替(SEQ IDNO :43-75)。该肽组合可以重复例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。此外，芳香族氨基酸成分(AA)可以包含或代表至少一个脯氨酸，优选两个、三个或更多个脯氨酸，它可以作为芳香族氨基酸成分(AA)中Trp、Tyr和Phe的较长序列的结构断裂体(breaker)。根据第二选择，氨基酸成分(AA)可以是亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)。亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分或序列作为亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)引入本发明的聚合物载体中能够产生对核酸运载物的更灵活的结合。这导致核酸运载物更有效的紧凑化，并因此导致对核酸酶和不期望的消除紧凑的更好保护。如果期望或必需的话，这还允许提供在整个载体上表现出阳离子电荷降低的(长)聚合物载体，且在这点上得到更好的经调节的结合特性。为此，亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)中的氨基酸可以选自相同或不同的亲水(且优选不带电的极性)氨基酸，例如选自Thr、Ser、Asn或Gin。作为选择，氨基酸(或整个亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA))可以选自下列的肽组合Ser-Thr、Thr-Ser、Ser-Ser、Thr-Thr、Ser-Thr-Ser、Thr-Ser-Thr、Ser-Ser-Ser、Thr-Thr-Thr、Ser-Thr-Ser-Thr、Thr-Ser-Thr-Ser、Ser-Ser-Ser-Ser、Thr-Thr-Thr-Thr、Gln-Asn、Asn_Gln、Gln-Gln、Asn_Asn、Gln-Asn-Gln、Asn-Gln_Asn、Gln-Gln-Gln、Asn-Asn-Asn> Gln-Asn-Gln-Asn> Asn-Gln-Asn-Gln> Gln-Gln-Gln-Gln> Asn-Asn-Asn-Asn>Ser—Asn、Asn-Ser> Ser-Ser>Asn—Asn、Ser-Asn-Ser>Asn—Ser—Asn、Ser-Ser-Ser>Asn-Asn-Asn>Ser-Asn-Ser-Asn > Asn-Ser-Asn-Ser >Ser-Ser-Ser-Ser 或 Asn-Asn-Asn-Asn 等(SEQ ID NO :76-111)。该肽组合可以重复例如 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15 或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。另外，亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)可以包含或可以侧面连接有包含-SH的部分，这允许经由二硫键引入该成分作为以上通式(I)的另一部分，例如作为连接基团。该包含-SH的部分可以是如本文定义的任意部分，它适合将如本文定义的一种成分偶联至如本文定义的另一成分。作为实例，该包含-SH的部分可以是半胱氨酸。于是，例如亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)可以选自例如妝组合Cys_Thr-Cys、Cys-Ser-Cys> Cys-Ser-Thr-Cys> Cys-Thr-Ser-Cys>Cys-Ser-Ser-Cys> Cys-Thr-Thr-Cys > Cys-Ser-Thr-Ser-Cys> Cys-Thr-Ser-Thr-Cys>Cys-Ser-Ser-Ser-Cys> Cys-Thr-Thr-Thr-Cys> Cys-Ser-Thr-Ser-Thr-Cys>Cys-Thr-Ser-Thr-Ser-Cys> Cys-Ser-Ser-Ser-Ser-Cys> Cys-Thr-Thr-Thr-Thr-Cys >Cys-Asn-Cys、Cys-Gln-Cys、Cys-Gln-Asn-Cys> Cys-Asn-Gln-Cys >Cys-Gln-Gln-Cys>Cys-Asn-Asn-Cys、Cys-Gln-Asn-Gln-Cys > Cys-Asn-Gln-Asn-Cys > Cys-Gln-Gln-Gln-Cys >Cys-Asn-Asn-Asn-Cys> Cys-GIn-Asn-GIn-Asn-Cys> Cys-Asn-Gln-Asn-Gln-Cys>Cys-GIn-Gln-Gln-GIn-Cys> Cys-Asn-Asn-Asn-Asn-Cys> Cys-Asn-Cys> Cys—Ser—Cys、Cys-Ser-Asn-Cys> Cys-Asn-Ser-Cys> Cys-Ser-Ser-Cys> Cys-Asn-Asn-Cys>Cys-Ser-Asn-Ser-Cys> Cys-Asn-Ser-Asn-Cys> Cys-Ser-Ser-Ser-Cys>Cys-Asn-Asn-Asn-Cys> Cys-Ser-Asn-Ser-Asn-Cys> Cys-Asn-Ser-Asn-Ser-Cys>Cys-Ser-Ser-Ser-Ser-Cys 或 Cys-Asn-Asn-Asn-Asn-Cys 等。上面的每一个 Cys 还可以由任意修饰的肽或携带如本文定义的游离-SH部分的化学化合物来代替(SEQ ID NO:112-153)。该肽组合可以重复例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。此外，亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)可以包含至少一个脯氨酸，优选两个、三个或更多个脯氨酸，它可以作为亲水(且优选不带电的极性)氨基酸成分(AA)中Trp、Tyr和Asn的较长序列的结构断裂体。
根据第三选择，氨基酸成分(AA)可以是亲脂的氨基酸成分(AA)。亲脂的氨基酸或序列作为亲脂氨基酸成分(AA)引入本发明的聚合物载体中，能够在形成复合物时使得核酸运载物和/或聚合物载体与其核酸运载物更强地紧凑化。这尤其是由于聚合物载体的一个或更多个聚合物链特别是亲脂氨基酸成分(AA)的亲脂部分的一个或更多个聚合物链和核酸运载物的相互作用。该相互作用会优选为聚合物载体和其核酸运载物之间的复合物增加了附加的稳定性。这种稳定化可以以某种方式与不同聚合物链之间非共价交联相比较。尤其在含水环境中，该相互作用典型地是强的并提供显著作用。为此目的，亲脂氨基酸成分(AA)中的氨基酸可以选自相同或不同的亲脂氨基酸，例如选自Leu、Val、Ile、Ala、Met。作为选择，氨基酸AA (或整个亲脂氨基酸成分(AA))可以选自下列的妝组合Leu_Val、Val-Leu、Leu-Leu> Val-Val> Leu-Val-Leu、Val-Leu-Val>Leu-Leu-Leu^ Val-Val-VaK Leu-Val-Leu-Val、Val-Leu-Val-Leu^ Leu_Leu-Leu_Leu、Val-Val-Val-Val、Ile_Ala、Ala_Ile、Ile_Ile、Ala_Ala、Ile_Ala_Ile、Ala_Ile_Ala、Ile_Ile_Ile、Ala_Ala_Ala、Ile_Ala-1le_Ala、Ala_Ile-Ala_Ile、Ile_Ile-1le_Ile、Ala-Ala-Ala-Ala^ Met-Ala、Ala-Met、Met-Met、Ala-Ala、Met-Ala-Met、Ala-Met-Ala、 Met-Met-Met、Ala-Ala-Ala、Met-Ala-Met-Ala、Ala-Met-Ala-Met 或 Met-Met-Met-Met 等(SEQ ID NO :154-188)。该肽组合可以重复例如 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15 或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。此外，亲脂氨基酸成分(AA)可以包含或可以侧面连接有包含-SH的部分，这允许经由二硫键引入该组分作为以上聚合物载体的另一部分，例如作为连接基团。该包含-SH的部分可以是如本文定义的任意部分，它适合将如本文定义的一种成分偶联至如本文定义的另一成分。作为实例，该包含-SH的部分可以是半胱氨酸。于是，例如亲脂氨基酸成分(AA)可以选自例如妝组合Cys-Val_Cys、Cys-Leu-Cys、Cys-Leu-Val-Cys、Cys-Val-Leu-Cys、Cys-Leu-Leu-Cys^ Cys-Val-Val-Cys^ Cys-Leu-Val-Leu-Cys^ Cys-Val-Leu-Val-Cys^Cys-Leu-Leu-Leu-Cys、 Cys-Val-Val-Val-Cys、 Cys-Leu-Val-Leu-Val-Cys、Cys-Val-Leu-Val-Leu-Cys、 Cys-Leu-Leu-Leu-Leu-Cys、 Cys-Val-Va1-Val-Va1-Cys、Cys-Ala-Cys^ Cys—Ile—Cys、Cys—Ile—Ala—Cys、Cys—Ala—Ile—Cys、Cys—Ile_Ile—Cys、Cys-Ala-Ala-Cys、Cys-1le-Ala-1le-Cys、Cys-Ala-1le-Ala-Cys、Cys-1le-1le-1le-Cys^Cys-Ala-Ala-Ala-Cys、Cys-1Ie-Ala-1Ie~AIa-Cys^ Cys-Ala-1Ie-Ala-1Ie-Cys^Cys-1le-1le-1le-1le-Cys^ 或 Cys-Ala-Ala-Ala-Ala-Cys、Cys-Met-Cys ^Cys-Met-Ala-Cys、 Cys-Ala-Met-Cys、 Cys-Met-Met-Cys^ Cys-Ala-Ala-Cys、Cys-Met-Ala-Met-Cys、 Cys-Ala-Met-Ala-Cys^ Cys-Met-Met-Met-Cys、Cys-Ala_Ala_Ala-Cys、Cys-Met-Ala-Met-Ala-Cys、Cys-Ala-Met-Ala-Met-Cys、Cys-Met-Met-Met-Met-Cys 或 Cys-Ala-Ala-Ala-Ala-Cys 等。上面的每一个 Cys 还可以由任意修饰的肽或携带如本文定义的游离-SH部分的化学化合物来代替(SEQ ID NO189-229) o该肽组合可以重复例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。此外，亲脂氨基酸成分(AA)可以包含至少一个脯氨酸，优选两个、三个或更多个脯氨酸，它可以作为亲脂氨基酸成分(AA)中Leu、VaU lie、Ala和Met的较长序列的结构断裂体。
最后，根据第四选择，氨基酸成分(AA)可以是弱碱性氨基酸成分(AA)。弱碱性氨基酸或序列作为弱碱性氨基酸成分(AA)并入本发明的聚合物载体中可以起到质子海绵的作用并促进内涵体逃逸(也称为内涵体释放)(质子海绵效应)。该弱碱性氨基酸成分(AA)的并入优选增强转染效率。为此，弱碱性氨基酸成分(AA)中的氨基酸可以选自相同或不同的弱氨基酸，例如选自组氨酸或天冬氨酸(天门冬氨酸)。作为选择，弱碱性氨基酸(或整个弱碱性氨基酸成分(AA))可以选自下列妝组合Asp_His、His-Asp、Asp-Asp、His-HiS、Asp-His_Asp、His-Asp-His、Asp-Asp-Asp、His_His_His、Asp-His-Asp-His^ His_Asp-His_Asp、Asp-Asp-Asp-Asp 或 His-His-His-His 等(SEQ ID NO :230-241) 该肽组合可以重复例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。此外，弱碱性氨基酸成分(AA)可以包含或可以侧面连接有包含-SH的部分，这允许经由二硫键引入该组分作为以上通式(I)的另一部分 ，例如作为连接基团。该包含-SH的部分可以是如本文定义的任意部分，它适合将如本文定义的一种成分偶联至如本文定义的另一成分。作为实例，该包含-SH的部分可以是半胱氨酸。于是，例如弱碱性氨基酸成分(AA)可以选自例如肽组合Cys-His_Cys、Cys-Asp-Cys> Cys-Asp-His-Cys、Cys-His-Asp-Cys> Cys-Asp-Asp-Cys> Cys-His-His-Cys> Cys-Asp-His-Asp-Cys>Cys_His_Asp_His_Cys、 Cys-Asp-Asp-Asp-Cys> Cys_His_His_His_Cys、Cys-Asp-Hi s-Asp-Hi s_Cys、Cys-Hi s-Asp-Hi s-Asp-Cys > Cys-Asp-Asp-Asp-Asp-Cys 或Cys-His-His-His-His-Cys等。上面的每一个Cys还可以由任意修饰的肽或携带如本文定义的游离-SH部分的化合物来代替(SEQ ID NO :242-255)。该肽组合可以重复例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、15或甚至更多次。这些肽组合还可以适当地互相组合。此外，弱碱性氨基酸成分(AA)可以包含至少一个脯氨酸，优选两个、三个或更多个脯氨酸，它可以作为弱碱性氨基酸成分(AA)中组氨酸或天冬氨酸(天门冬氨酸)的较长序列的结构断裂体。根据第五选择，氨基酸成分(AA)可以是信号肽或信号序列、定位信号或序列、核定位信号或序列(NLS)、抗体、细胞穿透肽(例如TAT)等。该氨基酸成分(AA)优选经由(可逆的)二硫键结合至聚合物载体或聚合物载体的另一成分。在上下文中，信号肽或信号序列、定位信号或序列、核定位信号或序列(NLS)、抗体、细胞穿透肽(例如TAT)等附加包含至少一个-SH部分。在上下文中，信号肽、定位信号或序列、或者核定位信号或序列(NLS)可以用于将本发明的聚合物载体运载物复合物导向特异性靶细胞(例如肝细胞或抗原呈递细胞)，并优选允许聚合物载体向特异性靶的易位，例如进入细胞、进入细胞核、进入内涵体区室，线粒体基质的序列，质膜的定位序列，高尔基(Golgi)体、细胞核、细胞质和细胞骨架的定位序列等。该信号肽、定位信号或序列或者核定位信号可以用于将任意如本文定义的核酸、优选RNA或DNA、更优选shRNA或pDNA输送进入细胞核。不限于此，该信号肽、定位信号或序列或者核定位信号可以包括例如内质网的定位序列。特殊的定位信号或序列或者核定位信号可以包括例如 KDEL (SEQ ID NO :256)、DDEL (SEQ ID NO :257)、DEEL (SEQ IDNO :258)、QEDL (SEQ ID NO :259)、RDEL (SEQ ID NO :260)和 GQNLSTSN(SEQ ID NO :261)，核定位序列包括 PKKKRKV (SEQ ID NO :262)、PQKKIKS (SEQ ID NO :263)、QPKKP (SEQ ID NO:264)、RKKR(SEQ ID NO :265)、RKKRRQRRRAHQ(SEQ ID NO :266)、RQARRNRRRRffRERQR(SEQID NO :267)、MPLTRRRPAASQALAPPTP (SEQ ID NO :268)、GAALTILV (SEQ ID NO :269)和GAALTLLG (SEQ ID NO :270)，内涵体区室的定位序列包括 MDDQRDLISNNEQLP (SEQ ID NO:271)，线粒体基质的定位序列包括MLFNLRXXLNNAAFRHGHNFMVRNFRCGQPLX(SEQ ID NO :272)，质膜的定位序列GCVCSSNP(SEQ ID NO :273)、GQTVITPL (SEQ ID NO :274)、GQELSQHE (SEQID NO :275)、GNSPSYNP(SEQ ID NO :276)、GVSGSKGQ(SEQID NO :277)、GQTITTPL(SEQ ID NO:278)、GQTLTTPL(SEQ ID NO :279)、GQIFSRSA(SEQ ID NO :280)、GQIHGLSP(SEQ ID NO :281)、GARASVLS(SEQID NO :282)和 GCTLSAEE(SEQ ID NO :283)，内质网和细胞核的定位序列包括 GAQVSSQK(SEQ ID NO :284)和 GAQLSRNT (SEQ ID NO :285)，高尔基体、细胞核、细胞质和细胞骨架的定位序列包括GNAAAAKK(SEQ ID NO :286)，细胞膜和细胞骨架的定位序列包括GNEASYPL(SEQ ID NO :287)，质膜和细胞骨架的定位序列包括 GSSKSKPK(SEQ ID NO :288)等。如本文定义的分泌信号肽序列的实例包括但不限于，经典或非经典MHC分子的信号序列(例如MHC I和II分子的信号序列，例如MHC I类分子HLA-A*0201的信号序列)，如本文定义的细胞因子或免疫球蛋白的信号序列，如本文定义的免疫球蛋白或抗体的恒定链的信号序列，Lampl、Tapasin、Erp57、|丐网蛋白、I丐联结蛋白和其他膜相关蛋白质的信号序列，或者内质网(ER)或核内质溶酶体区室的信号序列。尤其优选地，MHC I类分子HLA-A*0201 的信号序列可以根据本发明使用。该附加的成分可以结合至例如阳离子聚合物或如本文定义的聚合物载体的任意其他成分。优选地，该信号肽、定位信号或序列、或者核定位信号或序列(NLS)经由(可逆的)二硫键结合至聚合物载体或聚合物载体的其他成分。为此，(AA)成分附加地包括至少一个如本文定义的-SH部分。聚合物载体的任意成分的结合还可以利用酸敏感的键来完成，优选经由聚合物载体的任意成分的侧链，其允许在较低的PH值，例如本文定义的生理pH值下分离或释放附加的成分。此外，根据另一选择，氨基酸成分(AA)可以是功能性肽或蛋白质，它们可以相应地调节聚合物载体的功能。该功能性肽或蛋白质作为氨基酸成分(AA)优选包括如本文定义的任意肽或蛋白质，例如下面定义的治疗活性的蛋白质。根据一个选择，该其他的功能性肽或蛋白质可以包括所谓的细胞穿透肽(CPP)或用于转运的阳离子肽。尤其优选的是CPP，其诱导胞内PH介导的构象改变并导致改进的聚合物载体(与核算复合)通过插入脂质体的脂质层中从核内体的释放。这些细胞穿透肽(CPP)或用于转运的阳离子肽可以包括但不限于鱼精蛋白、核仁蛋白、精胺或亚精胺、寡聚-L-赖氨酸或多聚-L-赖氨酸(PLL)、碱性多肽、寡聚-精氨酸或多聚-精氨酸、细胞穿透肽(CPP)、嵌合的CPP如Transportan或MPG肽、HIV-结合肽、Tat、HIV-1Tat (HIV)、Tat-衍生肽，穿膜肽家族的成员如穿膜肽、黑腹果蝇触足肽衍生的肽(尤其来自黑腹果蝇(Drosophila antennapedia) )、pAntp、plsl等,抗微生物剂衍生的 CPP 如 Buforin-2、Bac715-24、SynB, SynB (I)、pVEC、hCT-衍生的肽、SAP、MAP、KALA, PpTG20、Loligomere、FGF、乳铁蛋白、组蛋白、VP22衍生肽或模拟肽、HSV、VP22 (单纯性疱疹)、MAP、KALA或蛋白转导结构域(PTD)、PpT620、富含脯氨酸肽、富含精氨酸肽、富含赖氨酸肽、Pep-UL-寡聚物、降钙素肽等。该氨基酸成分(AA)还可以结合至如本文定义的聚合物载体的任意成分。优选地其经由(可逆的)二硫键结合至聚合物载体或聚合物载体的其他成分。为了上述目的，氨基酸成分(AA)优选包括至少一个如本文定义的-SH部分。聚合物载体的任意成分的结合还可以利用SH部分或酸敏感的键来完成，优选经由聚合物载体的任意成分的侧链，其允许在较低的PH值例如本文定义的生理pH值下脱离或释放附加的成分。根据最后的选择，氨基酸成分(AA)可以由可以执行细胞中任意有利功能的任意肽或蛋白质构成。尤其优选的肽或蛋白质选自治疗活性的蛋白质或肽，选自抗原例如肿瘤抗原、致病性抗原(动物抗原、病毒抗原、原生动物抗原、细菌抗原、过敏性抗原)、自身免疫抗原、或其他抗原，选自抗体，选自免疫刺激蛋白质或肽，选自抗原特异性T-细胞受体，或者选自适合下面定义的用于编码核酸的特异性(治疗性)应用的任意其他蛋白质或肽。尤其优选的是来自如本文定义的抗原的肽表位。聚合物载体可以包括至少一种上面提到的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分例如(AA)，其中任意上面的选择可以互相组合，并且可以通过在缩聚反应中经由它们的-SH部分聚合它们而形成。根据另一方面，本发明的聚合物载体运载物复合物的聚合物载体或其单一成分，例如上面提到的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分例如(AA)可以另外用配体修饰，优选糖类、更优选蔗糖，甚至更优选甘露糖。该配体优选经由(可逆的)二硫键 或经由迈克尔加成结合至聚合物载体或聚合物载体的成分。在配体通过二硫键结合的情况下，配体附加包括至少一个-SH部分。这些配体可以用于将本发明的聚合物载体运载物复合物导向至特异性靶细胞(例如肝细胞或抗原呈递细胞)。在上下文中，在树突细胞是特殊用于接种疫苗和佐剂目的的靶的情况下，甘露糖尤其优选作为配体。根据本发明的其他方面，本发明的聚合物载体运载物复合物可以包括上面定义的不包括-SH部分的(AA)成分。这些(AA)成分可以在至少一种核酸分子的复合反应之前或期间加入。由此，(AA)成分被(非共价)并入本发明的聚合物载体运载物复合物中，而不包括聚合物载体自身中通过(共价)聚合的(AA)成分。根据一个特殊的实施方案，整个本发明的聚合物载体运载物复合物可以通过(至少一种)上面提到的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分例如(AA)的缩聚形成，在第一步骤中经由它们的-SH部分和在第二步骤中将核酸复合至该聚合物载体。聚合物载体因此可以包含许多相同或不同的上面定义的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分例如(AA)的至少一种或甚至更多种，数目优选由上述范围确定。根据一个选择性具体实施方案，本发明的聚合物载体运载物复合物通过实施至少一种上面提到的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分例如(AA)经由它们的-SH部分的缩聚形成，同时将核酸运载物复合至(现场制备的)聚合物载体。同样，聚合物载体因此还可以包含大量至少一个或甚至更多个相同或不同的如上定义的阳离子或多阳离子肽、蛋白质或聚合物或其他成分例如(AA)，数目优选由前面的范围来确定。本发明的聚合物载体运载物复合物附加地包含至少一种核酸(分子)作为运载物。在本发明的上下文中，该核酸分子可以是任意适合的核酸，选自例如任意(单链或双链)DNA，优选但不限于例如基因组DNA、单链的DNA分子、双链的DNA分子、编码DNA、DNA引物、DNA探针、免疫刺激DNA、(短的)DNA寡聚核苷酸((短的)寡脱氧核糖核苷酸)，或者可以选自例如任意PNA(肽核酸)或可以选自例如任意(单链或双链)RNA，优选但不限于(短的)RNA寡聚核苷酸((短的)寡核糖核苷酸)、编码RNA、信使RNA(mRNA)、免疫刺激RNA、小的干扰RNA (siRNA)、反义RNA、小分子RNA、小核RNA (snRNA)、短发夹(sh) RNA或核糖开关、核糖酶或适配子等。本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子还可以是核糖体RNA (rRNA)、转移RNA (tRNA)、信使RNA (mRNA)或病毒RNA (vRNA)。优选地，本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子是RNA。更优选地，本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子是(线型)单链RNA，甚至更优选是mRNA或免疫刺激RNA。在本发明上下文中，mRNA典型地是RNA，其由几种机构元素构成，例如选择的5’ -CAP结构、选择的5’ -UTR区域、随后是编码区域的定位在上游的核糖体结合位点、选择的3’ -UTR区域，其随后可以是多聚腺苷酸(poly-A)尾(和/或多聚胞喃唳酸(poly-C)尾)。mRNA可以作为单顺反子、双顺反子或甚至多顺反子RNA存在，即RNA携带一个、两个或更多个蛋白质或肽的编码序列。双顺反子或甚至多顺反子mRNA中的该编码序列可以通过至少一个例如本文定义的IRES序列分离。此外，本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸可以是单链或双链核酸(分子)(由于两个单链核酸(分子)的非共价结合其还可以认作核酸(分子))或部分双链或部分单链的核酸，它们至少部分自身互补(这些部分双链的或部分单链的核酸分子都典型地通 过较长的和较短的单链核酸分子或者通过两个长度基本相同的单链核酸分子形成，其中一个单链的核酸分子与另一个单链的核酸分子部分互补，并因此两个都在该区域形成双链核酸分子，即部分双链或部分单链的核酸(分子)。优选地，核酸(分子)可以是单链核酸分子。此外，核酸(分子)可以是环状或线性的核酸分子，优选线性的核酸分子。根据一个选择，本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子可以是编码核酸例如DNA或RNA。该编码DNA或RNA可以是如本文定义的任意DNA或RNA。优选地，该编码DNA或RNA可以是单链或双链的DNA或RNA，更优选单链的DNA或RNA，和/或环状或线性DNA或RNA，更优选线性DNA或RNA。更优选地，编码DNA或RNA可以是(线性)单链DNA或RNA。最优选地，根据本发明的核酸分子可以是((线性)单链)信使RNA (mRNA)。该mRNA可以作为单顺反子、双顺反子或甚至多顺反子RNA存在，即RNA携带一个、两个或更多个蛋白质或肽的编码序列。双顺反子或甚至多顺反子mRNA中的该编码序列可以通过至少一个例如本文定义的IRES序列分离。编码核酸:本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子可以编码蛋白质或肽，可以选自但不限于例如治疗活性的蛋白质或肽包括佐剂蛋白质，选自抗原例如肿瘤抗原、病原体抗原(例如选自动物抗原、选自病毒抗原、选自原生动物抗原、选自细菌抗原)、过敏性抗原、自身免疫抗原或其他抗原，选自过敏原，选自抗体，选自免疫刺激蛋白质或肽，选自抗原特异性T细胞受体，或者选自适合特异性(治疗)应用的任意其他蛋白质或肽，其中编码核酸可以转运进入细胞、组织或有机体，并且蛋白质可以随后在细胞、组织或有机体中表达。a)治疗活性蛋白质在本发明的上下文中，治疗活性的蛋白质或肽可以通过如本文定义的本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子来编码。治疗活性的蛋白质如本文定义的作为对治愈、预防性防止或治疗性处理优选如本文定义的疾病有效的蛋白质，或者是个体需要的蛋白质。这些可以选自任意天然的或合成设计的重组体或者来自现有技术的技术人员公知的分离的蛋白质。不被限制于其，治疗活性蛋白质可以包括能够刺激或抑制细胞中信号转导的蛋白质例如细胞因子、淋巴因子、单核因子、生长因子、受体、信号转导分子、转录因子等；抗凝剂；抗凝血酶；抗过敏蛋白质；凋亡因子或凋亡相关蛋白质、治疗活性的酶和与任意后天性疾病或任意遗传疾病相关的任意蛋白质。可以由如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的治疗活性的蛋白质还可以是佐剂蛋白质。在上下文中，佐剂蛋白质优选应理解为能够弓I起如本文定义的固有免疫反应的任意蛋白质。优选地，该固有免疫反应包括模式识别受体的激活，例如选自Toll-样受体(TLR)家族包括例如选自人TLRl至TLRlO或选自鼠科动物Toll-样受体TLRl至TLRl3的Toll-样受体。更优选地，该佐剂蛋白质选自人佐剂蛋白质或选自病原体佐剂蛋白质，选自但不限于细菌蛋白质、原生动物蛋白质、病毒蛋白质或真菌蛋白质、动物蛋白质，尤其选自细菌佐剂蛋白质。另外，还可以使用编码涉及佐剂效应的人蛋白质的核酸(例如模式识别受体的配体、模式识别受体、信号转导路径的蛋白质、转录因子或细胞因子)。b)杭原如本文定义的本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分 子作为选择可以编码抗原。根据本发明，术语“抗原”指的是由免疫系统识别的并能够引发抗原特异性免疫反应的物质，例如通过抗体的形成或作为适应性免疫反应一部分的抗原特异性T-细胞。在上下文中，适应性免疫反应的第一步是通过抗原-呈递细胞激活幼稚抗原特异性T细胞。这发生在幼稚T细胞持续通过的淋巴组织和器官中。可以起抗原-呈递细胞作用的三种细胞是树突细胞、巨噬细胞和B细胞。这些细胞的每一种都具有引起免疫反应的独特功能。组织树突细胞通过吞噬作用和大胞饮吸收抗原并通过感染来刺激以便迁移至局部淋巴组织，并在那里分化成成熟的树突细胞。巨噬细胞摄取微粒状抗原例如细菌并且通过致病因子诱导来表达MHC II类分子。B细胞经由它们的受体结合并使可溶性蛋白抗原内在化的独有能力可能对诱导T细胞是重要的。通过在MHC细胞上对抗原的呈递导致T细胞的激活，这诱导它们的增殖并分化成具有防护器官的效应器T细胞。效应器T细胞最重要的功能是通过CD8+细胞毒性T细胞杀死感染的细胞，和通过THl细胞激活巨噬细胞，它们一起组成细胞调节的免疫，和通过TH2和THl细胞激活B细胞来生产不同类别的抗体，由此驱动体液免疫反应。T细胞通过它们的T细胞受体识别抗原，该T细胞受体不直接识别和结合抗原，但是代替识别短的肽片段例如病原体蛋白质抗原，它们结合至其他细胞表面上的MHC分子。T细胞分为具有不同效应器功能的两个主要类别。两个类别的区别在于细胞表面蛋白质CD4和CD8的表达。这两类T细胞在它们识别的MHC分子的类型上不同。存在两个类别的MHC分子MHC I类和MHC II类分子，它们的结构不同且在机体的组织上的表达模式不同。CD4+T细胞结合至MHC II类分子，CD8+T细胞结合至MHC I类分子。MHC I类和MHCII类分子在细胞中具有区别性的分布，影响识别它们的T细胞的不同效应器功能。MHC I类分子代表来自病原体的肽，通常是对CD8+T细胞的病毒，分化成特异性杀死它们特异性识别的任意细胞的细胞毒性T细胞。几乎所有细胞都表达MHC I类分子，尽管组成型表达的水平从一个细胞类型到下一个细胞类型改变。但是，MHC I类分子不仅代表来自病毒的病原体肽，而且他们还代表自身抗原样肿瘤抗原。MHC I类分子结合来自在细胞溶胶中降解并转运至内质网的蛋白质的肽。从而，用病毒或其他细胞溶胶病原体转染的细胞表面上的MHCI类分子显示为来自这些病原体的肽。识别MHC I类肽复合物的CD8+T细胞是特异性杀死显示为外来肽的任意细胞，并因此摆脱被病毒和其他细胞溶胶病原体感染的细胞体。识别MHC II类分子的CD4+T细胞(CD4+辅助T细胞)的主要功能是激活免疫系统的其他效应器细胞。因此，MHC II类分子通常在B淋巴细胞、树突细胞和巨噬细胞、参与免疫反应的细胞中发现，但没有在其他组织细胞中发现。例如激活巨噬细胞来杀死它们藏匿的囊内病原体，以及B细胞来分泌抗外来分子的免疫球蛋白。MHC II类分子被阻止结合内质网中的肽，并因此MHC II类分子结合来自在胞内降解的蛋白质的肽。它们可以捕获来自进入巨噬细胞的囊系统的病原体的肽，或来自通过未成熟的树突细胞或B细胞的免疫球蛋白受体内在化的抗原的肽。在巨噬细胞和树突细胞囊内部大量积聚的病原体趋向于刺激THl细胞的分化，而细胞外抗原趋向于刺激TH2细胞的生产。THl细胞激活巨噬细胞的杀微生物特性和诱导B细胞产生IgG抗体，IgG抗体对通过病原细胞吸收的调理细胞外病原体非常有效，而TH2细胞通过激活幼稚B细胞分泌IgM来启动体液反应，并诱导弱调理抗体的生产例如IgGl和IgG3 (小鼠)以及IgG2和IgG4 (人)以及IgA和IgE (小鼠和人)。在本发明的上下文中，由如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗原典型地包括任意抗原、抗原表位或抗原肽，在上述定义范围内，更优选蛋白质和肽抗原例如肿瘤抗原、过敏性抗原、自身免疫性抗原、病原体抗原等。尤其是由如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗原可以是在细胞外产生的抗原， 更典型地，抗原不是来源于宿主有机体(例如人)自身(即非自身抗原)，而是来源于宿主有机体外部的宿主细胞，例如病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原、原生动物抗原、动物抗原、过敏性抗原等。过敏性抗原(过敏抗原)典型地是引起人类过敏和可以来源于人或其他来源的抗原。此外，由如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗原另外可以是细胞、组织或机体内部产生的抗原。该抗原包括来源于宿主有机体(例如人类)自身的抗原，例如肿瘤抗原、自身抗原或自免疫抗原(auto-antigens)例如自身免疫性自抗原等，还包括如本文定义的(非自身的)抗原，其最初来源于宿主有机体外部的宿主细胞，但在机体、组织或细胞内部片段化或降解，例如通过(蛋白酶)降解、代谢等。由如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗原的一个类别包括肿瘤抗原。“肿瘤抗原”优选位于(肿瘤)细胞的表面上。肿瘤抗原还可以选自在与正常细胞相比在肿瘤细胞中超表达的蛋白质。此外，肿瘤抗原还包括在细胞中表达的抗原，该细胞自身不是(或最初自身不是)变性的但与假定的肿瘤相关联。本文还包括与肿瘤-供给血管(tumour-supplying vessel)或其(再)形成相关的抗原,尤其是那些与新血管形成相关的抗原，例如生长因子如VEGF、bFGF等。与肿瘤相关的抗原还包括来自细胞或组织的抗原，典型地嵌入肿瘤中。另外，一些物质(通常是蛋白质或肽)在(已知或未知)患有癌症的患者中表达，并且在所述患者的体液中以增加的浓度出现。这些物质也称为“肿瘤抗原”，但是它们不是严格意义上诱导免疫反应的物质的抗原。肿瘤抗原的类别可以另外分为肿瘤特异性抗原(TSA)和肿瘤相关抗原(TAA)。TSA只能由肿瘤细胞呈递，从不由正常“健康的”细胞呈递。它们典型地来自肿瘤特异性突变。更普遍的TAA通常由肿瘤和健康细胞呈递。识别这些抗原并可以通过细胞毒性T细胞破坏抗原呈递细胞。此外，肿瘤抗原还可以出现在肿瘤表面上，例如以突变受体的形式。在这种情况下，可以通过抗体识别他们。尤其优选的肿瘤抗原选自5T4、707-AP、9D7、AFP、AlbZIP HPGU a-5-￠-1-整合素、a -5-0 -6-整合素、a -辅肌动蛋白_4/m、a -甲基丙烯酰基-辅酶A消旋酶、ART_4、ARTC1/m、B7H4、BAGE-1、BCL-2、bcr/abl、^ -连环蛋白 /m、BING-4, BRCAl/m、BRCA2/m、CA15-3/CA27-29、CA19-9、CA72-4、CA125、钙网蛋白、CAMEL、CASP_8/m、组织蛋白酶 B、组织蛋白酶 L、CD19、CD20、CD22、CD25、CDE30、CD33、CD4、CD52、CD55、CD56、CD80、CDC27/m、CDK4/m、CDKN2A/m、CEA、CLCA2、CML28、CML66、COA-l/m、毛状蛋白-样蛋白质、胶原 XXII1、C0X-2、CT-9/BRD6、Cten、周期蛋白 B1、周期蛋白 Dl、cyp_B、CYPBU DAM-10, DAM-6, DEK-CAN、EFTUD2/m、EGFR、ELF2/m、EMMPRIN、EpCam、EphA2、EphA3、ErbB3、ETV6-AML1、EZH2、FGF-5、FN、Frau-1、G250、GAGE-1、GAGE-2、GAGE-3, GAGE-4, GAGE-5, GAGE-6, GAGE7b、GAGE-8,⑶EP、GnT-V、gplOO、GPC3、GPNMB/m、HAGE, HAST-2、h印sm、Her2/neu、HERV-K-MEL, HLA_A*0201-R171、HLA-A11/m、HLA-A2/m、HNE,同源框 NKX3.1、HOM-TES-14/SCP-U HOM-TES-85、HPV-E6、HPV-E7、HSP70-2M、HST-2、hTERT、iCE、IGF-1R、IL_13Ra2、IL-2R、IL-5、未成熟的层粘连蛋白受体、激肽释放酶 _2、激肽释放酶-4、Ki67、KIAA0205、KIAA0205/m、KK-LC-l、K-Ras/m、LAGE-Al、LDLR-FUT、MAGE-A1、MAGE-A2、MAGE—A3、MAGE—A4、MAGE—A6、MAGE—A9、MAGE-AlO, MAGE-Al2,MAGE-B1、MAGE-B2、MAGE-B3、MAGE-B4、MAGE-B5、MAGE-B6、MAGE-BIO, MAGE-B16, MAGE-B17、MAGE-Cl、MAGE-C2、MAGE-C3、MAGE-DU MAGE-D2、MAGE-D4、MAGE-EU MAGE-E2、MAGE-FUMAGE-Hl、MAGEL2、乳腺球蛋白 A、MART-l/melan-A、MART-2、MART_2/m、基质蛋白质 22、MC1R、M-CSF, MEl/m、间皮素、MG50/PXDN、MMPlU MN/CA IX-抗原、MRP-3、MUC-1、MUC-2、MUM-l/m、MUM-2/m、MUM-3/m、肌球蛋白类 I/m、NA88-A、N-乙酰葡糖胺转移酶-V、Neo-PAP, Neo-PAP/ m、NFYC/m、NGEP, NMP22、NPM/ALK、N-Ras/m、NSE, NY-ESO-l、NY-ESO-B、0A1、OFA-1LRP、OGT,OGT/m、OS-9、0S_9/m、骨钙蛋白、骨桥蛋白、p15、pl90minor bcr-ab1、p53、p53/m、PAGE-4、PA1-1、PA1-2、PART-1、PATE、PDEF、Pim-1-激酶、Pin-1, Pml/PAR a、POTE, PRAME, PRDX5/m、prostein、蛋白酶-3、PSA、PSCA, PSGR、PSM、PSMA, PTPRK/m、RAGE-U RBAF600/m、RHAMM/CD 168、RU1、RU2、S-100、SAGE、SART-1、SART-2、SART-3、SCC、SIRT2/m、Sp 17、SSX-1、SSX-2/H0M-MEL-40、SSX-4、STAMP-1、STEAP、生存素、生存素-2B、SYT-SSX-U SYT-SSX-2、TA-90、TAG-72、TARP, TEL-AMLU TGFP、TGFP RH、TGM-4、TPI/m、TRAG-3、TRG, TRP-U TRP_2/6b、TRP/INT2、TRP-p8、酪氨酸酶、UPA, VEGF, VEGFR-2/FLK-1和WTl。该肿瘤抗体优选可以选自 MAGE-Al (例如根据编号 M77481 的 MAGE-A1)、MAGE-A2、MAGE-A3、MAGE-A6 (例如根据编号 NM_005363 的 MAGE-A6)、MAGE-Cl、MAGE-C2、melan-A (例如根据编号 NM_005511 的melan-A) ,GPlOO (例如根据编号M77348的GP100)、酪氨酸酶(例如根据编号NM_000372的酪氨酸酶)、生存素(例如根据编号AF077350的生存素)、CEA (例如根据编号NM_004363的CEA)、Her-2/neu (例如根据编号 M11730 的 Her-2/neu)、WTl (例如根据编号 NM_000378 的WTl)、PRAME (例如根据编号NM_006115的PRAME) ,EGFRI (表皮生长因子受体I)(例如根据编号AF288738的EGFRI (表皮生长因子受体I))、MUC1、粘蛋白I (mucin-1)(例如根据编号NM_002456 的 mucin-1)、SEC61G (例如根据编号 NM_014302 的 SEC61G)、hTERT (例如根据编号NM_198253的hTERT)、5T4(例如根据编号NM_006670的5T4)、NY-Eso-1 (例如根据编号NM_001327 的 NY-Esol)、TRP_2 (例如根据编号 NM_001922 的 TRP-2)、STEAP、PCA、PSA、PSMA
坐寸o 根据另一选择，通过如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗原的另一个类别包括过敏性抗原。该过敏性抗原可以选自来源于不同来源的抗原，例如来自动物、植物、真菌、细菌等。在上下文中过敏原包括例如草、花粉、霉菌、药物或各种环境触发物等。过敏性抗原典型地属于不同类别的化合物，例如核酸及其片段、蛋白质或肽及其片段、糖类、多糖类、蔗糖、脂类、磷脂类等。在本发明范围内尤其感兴趣的是可以由本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗原，即蛋白质或肽抗原及其片段或表位，或核酸及其片段，尤其是核酸及其片段，编码该蛋白质或肽抗原及其片段或表位。c)杭体根据另一选择，如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子可以编码抗体或抗体片段。根据本发明，该抗体可以选自任意抗体，例如本领域公知的任意重组产生的或天然存在的抗体，尤其适用于治疗、诊断或科研目的的抗体，或者已经确认为与特殊癌症有关的抗体。本文中，术语“抗体”以其最宽泛的含义使用并特别地覆盖单克隆和多克隆抗体(包括兴奋剂、拮抗剂和封闭抗体或中和抗体)以及具有多表位特异性的抗体种类。根据本发明，术语“抗体”典型地包括本领域公知的任意抗体(例如IgM、IgD、IgG、IgA和IgE抗体)，例如天然存在的抗体、通过宿主有机体中的免疫产生的抗体、从天然存在的抗体分离并确认的抗体、或通过宿主有机体中的免疫产生的抗体和通过本领域公知的分子生物学方法重组产生的抗体，以及嵌合抗体、人抗体、人源化抗体、双特异性抗体、胞内抗体，即在细胞中表达并任选地定位在特殊的细胞区室中的抗体，和前面提到的抗体的片段和变体。一般来说，抗体由具有可变结构域和恒定结构域的轻链和重链构成。轻链由N-末端可 变结构域\和C-末端恒定结构域Q构成。相反地，IgG抗体的重链例如由N-末端可变结构域Vh和3个恒定结构域CH1、Ch2和Ch3构成。在本发明的上下文中，通过如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码的抗体可以优选包括全长抗体，即如上所述抗体由全长重链和全长轻链构成。然而，抗体的衍生物例如抗体片段、变体或加合物也可以通过如本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子编码。抗体片段优选选自前面提到的(全长)抗体的Fab、Fab’、F(ab’)2、Fe、Facb, pFc’、Fd和Fv片段。一般来说，抗体片段在本领域是公知的。例如，Fab (“片段，抗原结合”)片段由每个重链和轻链的一个恒定结构域和一个可变结构域构成。两个可变结构域结合在特异性抗原的表位。两个链经由二硫键连接。scFv (“单链可变片段”)片段例如典型地由轻链和重链的可变结构域构成。结构域通过人工连接部分连接，一般是多肽连接例如由15至25个甘氨酸、脯氨酸和/或丝氨酸残基构成的肽。在本发明的上下文中，优选通过多顺反子核酸分子编码抗体或抗体片段的不同链。作为选择，通过几种单顺反子核酸(序列)编码抗体或抗体片段的不同链。siRNA 根据另一选择，本文定义的本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子可以是dsRNA形式的，优选siRNA。dsRNA或siRNA尤其与RNA干扰的现象相关地令人感兴趣。RNA干扰(RNAi)的体外技术基于双链RNA分子(dsRNA)，其引发基因表达的序列-特异性抑制(Zamore (2001) Nat. Struct. Biol. 9 :746-750 ；Sharp (2001) Genes Dev. 5 :485-490 Hannon(2002)Nature41 :244-251)。在用长的dsRNA对哺乳动物细胞转染中，蛋白质激酶R和RnaseL的活化带来非特异性效应,例如干扰素反应(Stark等人(1998) Annu. Rev.Biochem. 67 :227-264 ；He andKatze (2002) Viral Immunol. 15 :95-119)。使用较短的例如21至23聚体的所谓siRNA(小的干扰RNA)时，避免了这些非特异性效应，这是因为短于30bp 的 siRNA 不引发非特异性效应(Elbashir 等人(2001)Nature411 :494-498)。本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子因此可以是双链的RNA (dsRNA)，其具有17至29，优选19至25的长度，和优选至少90%，更优选95%和尤其是100% (dsRNA的核苷酸)的互补性，该互补性是与之前描述的(治疗相关)蛋白质或抗原(作为活性组分)或者本文描述的任意其他蛋白质的核酸分子的区段，或者是编码区段或者是非编码区段，优选是编码区段。该核酸分子的(区段)在本文中可以称为“靶序列”，并且可以是本文定义的任意核酸分子，优选基因组DNA、cDNA、RNA，例如mRNA等。90%互补性表示，例如20个核苷酸的本文描述的dsRNA的长度，dsRNA包含不超过2个核苷酸，没有显示与靶序列的对应区段的互补性。然而，根据本发明使用的双链RNA的序列优选在其通用结构上与靶序列的区段完全互补。在上下文中，本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子可以是具有通用结构5' _(N17_29)-3'的dsRNA，优选具有通用结构5' _(N19_25)_3'，更优选具有通用结构5' _(N19_24)-3'，或者还更优选具有通用结构5' _(N21_23)-3'，其中每个通用结构中每个N是靶序列的区段的(优选不同的)核苷酸，优选选自靶序列的区段的连续数目的17至29个核苷酸，并以其自然顺序存在于通用结构5' _(N17_29)-3'中。原则上说，靶序列中存在的具有17至29个、优选19至25个碱基对的长度的所有区段都可以用于制备如本文定义的dsRNA。同样地，用作本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子的dsRNA也可以有针对地抗不在编码区域的本文前面描述的(治疗相关)蛋白质或抗原的核苷酸序列(作为活性部分)，尤其在靶序列的5'-非编码区域中，所以，例如抗具有调节 功能的靶序列的非编码区域。用作本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子的dsRNA的靶序列因此可以位于靶序列的翻译和未翻译的区域中，和/或在前面描述的蛋白质或抗原的对照单元的区域中。用作本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子的dsRNA的靶序列还可以位于未翻译和翻译序列的重叠区域中；特别地，靶序列可以包括编码区域的起始三联体的至少ー个核苷酸上游，例如DNA、cDNA、RNA或mRNA等。免疫刺激核酸:a)免疫刺激CdG核酸:根据另ー个替代方案，本文定义的本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸分子可以是(免疫刺激)CpG核酸形式的，尤其是CpG-RNA或CpG-DNA形式，其优选诱导固有免疫反应。根据本发明使用的CpG-RNA或CpG-DNA可以是单链的CpG-DNA (ss CpG-DNA)、双链的 CpG-DNA (dsDNA)、单链的 CpG-RNA (ss CpG-RNA)或双链的 CpG-RNA (ds CpG-RNA)。根据本发明使用的CpG核酸优选是CpG-RNA形式的，更优选是单链的CpG-RNA (ss CpG-RNA)形式的。还优选该CpG核酸具有如上所述的长度。CpG基序优选是未甲基化的。b)免疫刺激 RNA(isRNA)同样，根据另ー替代方案，本发明的聚合物载体运载物复合物的(免疫刺激)核酸分子可以是优选引起固有免疫反应的免疫刺激RNA(isRNA)形式。该免疫刺激RNA可以是任意(双链或单链)RNA,例如本文定义的编码RNA。优选地，免疫刺激RNA可以是单链的、双链的或部分双链的RNA，更优选是单链的RNA，和/或环状或线性RNA，更优选线性RNA。更优选地，免疫刺激RNA可以是(线性)单链的RNA。甚至更优选地，免疫刺激RNA可以是(长的)(线性)单链非编码RNA。在上下文中，对于体外转录的RNA尤其优选isRNA在其5’ _e端携帯三磷酸盐。免疫刺激RNA还可以作为本文定义的短的RNA寡聚核苷酸存在。本文所用的免疫刺激RNA可以此外选自在自然中发现的或合成制备的任意类的RNA分子，并且可以诱导固有免疫反应和可以支持由抗原诱导的适应性免疫反应。在上下文中，免疫反应可以以各种方式出现。适当的(适应性)免疫反应的实质性因素是不同T-细胞亚群的刺激。T-淋巴细胞典型地被分成两个亚群，T-辅助性I (Thl)细胞和T-辅助性2 (Th2)细胞，利用它们免疫系统能够破坏细胞内(Thl)和细胞外(Th2)病原体(例如，抗原)。两个Th细胞群在由它们产生的效应蛋白(细胞因子)的模式上不同。因此，Thl细胞通过巨噬细胞和细胞毒性T-细胞的激活来辅助细胞免疫反应。另ー方面，Th2细胞通过转换进入浆细胞的B-细胞的刺激和通过抗体(例如抗抗原)的形成来促进体液免疫反应。Thl/Th2比率因此在适应性免疫反应的诱导和保持上非常重要。与本发明相关，(适应性)免疫反应的Thl/Th2比率优选朝着细胞反应(Thl反应)的方向位移，并由此诱导细胞免疫反应。根据ー个实例，可以支持适应性免疫反应的固有免疫系统可以通过Toll-样受体(TLR)的配体激活。TLR是高度保守的模式识别受体(PRR)多肽的家族，其识别病原体-相关的分子模式(PAMP)并对哺乳动物的固有免疫起决定性作用。目前已经确认了至少十三个家族成员，指定为 TLR1-TLR13 (Toll-样受体TLRU TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR10、TLRlU TLR12或TLR13)。此外，已经确认了特异性TLR配体的数目。例如发 现未甲基化的细菌DNA和其合成类似物(CpG DNA)是TLR9的配体(Hemmi H等人(2000)Nature408 :740-5 ；Bauer S等人(2001)Proc NatlAcadSci USA98，9237-42)。此外，已经报道了特定TLR的配体包括特定核酸分子，并且特定类型的RNA以序列-独立型或序列-依赖型方式免疫刺激，其中这些各种免疫刺激RNA可以例如刺激TLR3、TLR7或TLR8，或者细胞内受体例如RIG-1、MDA-5等。例如Lipford等人确定了特定的含G，U的寡核糖核苷酸作为经由TLR7和TLR8作用的免疫刺激(见W003/086280)。Lipford等人描述的免疫刺激的含G，U的寡核糖核苷酸被认为来源于RNA源，包括核糖体RNA、转运RNA、信使RNA和病毒RNA。用作本文定义的本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子的免疫刺激RNA(isRNA)因此可以包括已知免疫刺激的任意RNA序列，包括但不限于呈递(representing)和/或编码TLR的配体的RNA序列，优选地选自人类家族成员TLR1-TLR10或鼠科动物家族成员TLR1-TLR13，更优选选自(人类)家族成员TLR1-TLR10，甚至更优选选自TLR7和TLR8，RNA的细胞内受体的配体(例如RIG-1或MDA-5等)(例如见Meylan，E. , Tschopp,J. (2006). Toll-1ikereceptors and RNA heiicases :two parallel ways totrigger antiviral responses. Mol. Cell22, 561-569)，或者任意其他的免疫刺激 RNA 序列。此外，用作本发明聚合物载体运载物复合物的核酸分子的免疫刺激RNA分子(的类别)可以包括任意其它能够引起固有免疫反应的RNA。不限于此，这种免疫刺激RNA可以包括核糖体RNA (rRNA)、转运RNA (tRNA)、信使RNA (mRNA)和病毒RNA (vRNA)。该免疫刺激RNA可以包括长度为 1000 至 5000、500 至 5000、5 至 5000 或 5 至 1000、5 至 500、5 至 250、5 至 100、5至50或5至30的核苷酸。根据尤其优选的实施方案，这种免疫刺激核酸序列优选为优选由式(II)或(III)的核酸构成或包括式(II)或(III)的核酸的RNA:G1XmGn，(式(II))其中G是鸟苷、尿嘧啶、或者鸟苷或尿嘧啶的类似物；X鸟苷、尿嘧啶、腺苷、胸苷、胞嘧啶或者上述核苷酸的类似物；I是I至40的整数，
其中当I = I吋，G是鸟苷或其类似物，当I > I时，至少50%的核苷酸是鸟苷或其类似物；m是整数且至少是3 ；其中当m = 3吋，X是尿嘧啶或其类似物，
当m > 3时，存在至少3个连续的尿嘧啶或尿嘧啶的类似物；n是I至40的整数，其中当n = I时，G是鸟苷或其类似物，当n > I时，至少50%的核苷酸是鸟苷或其类似物。C1XmCn(式(III))其中C是胞嘧啶、尿嘧啶或者胞嘧啶或尿嘧啶的类似物；X是鸟苷、尿嘧啶、腺苷、胸苷、胞嘧啶或者上述核苷酸的类似物；I是I至40的整数，其中当I = I吋，C是胞嘧啶或其类似物，当I > I时，至少50%的核苷酸是胞嘧啶或其类似物；m是整数且至少是3 ；其中当m = 3时，X是尿嘧啶或其类似物，当m > 3时，存在至少3个连续的尿嘧啶或尿嘧啶的类似物；n是I至40的整数，其中当n = I时，C是胞嘧啶或其类似物，当n > I时，至少50%的核苷酸是胞嘧啶或其类似物。式(II)或(III)的核酸分子可以用作本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸运载物，式(II)或(III)的核酸分子是相对短的核酸分子，典型长度大约为5至100 (但在特殊实施方案中还可以大于100个核苷酸，例如多达200个核苷酸)、5至90或5至80个核苷酸，优选长度大约为5至70个核苷酸，更优选长度大约为8至60个核苷酸，和更优选长度大约为15至60个核苷酸，更优选为20至60个核苷酸，最优选为30至60个核苷酸。如果本发明的核酸运载物复合物的核酸的最大长度为例如100个核苷酸，则m典型地< =98。式(II)的核酸中核苷酸G的数目通过I或n来确定。I和n互相独立地分别是I至40的整数，其中当I或n = I吋，G是鸟苷或其类似物，且当I或n > I时，至少50%的核苷酸是鸟苷或其类似物。例如，在不表示为任何限制的情况下，当I或n = 4吋，G1或Gn可以例如是 GUGU、GGUU、UGUG、UUGG、GUUG、GGGU、GGUG、GUGG、UGGG 或 GGGG 等；当 I 或 n = 5时，G1 或 Gn 可以例如是 GGGUU、GGUGU、GUGGU、UGGGU、UGGUG、UGUGG、UUGGG、GUGUG、GGGGU、GGGUG、GGUGG、GUGGG、UGGGG或GGGGG等。根据本发明的式(II)的核酸中邻近Xm的核苷酸优选不是尿嘧啶。类似地，根据本发明的式(III)的核酸中核苷酸C的数目通过I或n来确定。I和n互相独立地分别是I至40的整数，其中当I或n = I吋，C是胞嘧啶或其类似物，且当I或n > I吋，至少50%的核苷酸是胞嘧啶或其类似物。例如，在不表示为任何限制的情况下，当 I 或 n = 4 时，C1 或 Cn 可以例如是 CUCU、CCUU、UCUC、UUCC、CUUC、CCCU、CCUC、CUCC、UCCC 或 CCCC 等；当 I 或 n = 5 时，C1 或 Cn 可以例如是 CCCUU、CCUCU、CUCCU、UCCCU、UCCUC、UCUCC、UUCCC, CUCUC、CCCCU、CCCUC、CCUCC、CUCCC、UCCCC 或 CCCCC 等。根据本发明的式(III)的核酸中邻近Xm的核苷酸优选不是尿嘧啶。优选地，对于式(II)，当I或n>I时，至少60%、70%、80%、90%或者甚至100%的核苷酸是鸟苷或其类似物，如上定义的。侧翼序列中剰余的核苷酸至100% (当鸟苷构成小于100%的核苷酸时)，G1和/或Gn是尿嘧啶或其类似物，如上定义的。还优选I和n互相独立地分别是2至30的整数，优选是2至20的整数且更优选是2至15的整数。如果需要的话，I或n的下限可以改变并至少是1，优选至少是2，更优选至少是3、4、5、6、7、8、9或10。该定义相应地应用到式(III)。根据尤其优选的实施方案，可以用作本发明的聚合物载体运载物复合物的核酸的根据前面任意的式(II)或(III)的核酸可以选自由任意以下序列组成的或包括任意以下序列的序列
权利要求
1.一种用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其包括 a)由二硫化物交联的阳离子成分形成的聚合物载体作为载体，和 b)至少一种核酸分子作为运载物。
2.根据权利要求1的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述至少一种核酸分子是RNA。
3.根据权利要求1或2的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述至少一种核酸分子是免疫刺激性核酸。
4.根据权利要求1至3中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述至少一种核酸分子是免疫刺激性RNA(isRNA)或mRNA。
5.根据权利要求1至4中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述阳离子成分与所述至少一种核酸分子的氮/磷酸盐(N/P)比率在O.1至20的范围内，或者在O.1至5的范围内，或者在O.1至I的范围内。
6.根据权利要求1至5中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述聚合物载体除了所述阳离子成分之外还包括功能性的肽或蛋白质。
7.根据权利要求6的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述功能性的肽或蛋白质是肽或蛋白质抗原或抗原表位。
8.根据权利要求1至7中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述聚合物载体另外包括配体。
9.根据权利要求8的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述配体是甘露糖。
10.根据权利要求1至9中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述阳离子成分是阳离子肽。
11.根据权利要求10的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述阳离子肽选自根据式(I)的肽(Arg)1；(Lys)m；(His)n；(Orn)0；(Xaa)x, 其中1+m+n+o+x = 3 至 100,和1、m、11或0 =互相独立地是选自 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21 至 30,31 至 40,41 至 50,51 至 60,61 至 70,71 至 80,81 至 90 和 91 至 100 的任意数，条件是Arg、Lys、His和Orn的总含量代表所述阳离子肽的所有氨基酸的至少10%;并且Xaa是选自除了 Arg、Lys、His或Orn之外的天然(=天然存在的)氨基酸或非天然氨基酸的任意氨基酸；和X =选自 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21 至 30,31 至40,41至50、51至60、61至70、71至80、81至90的任意数，条件是Xaa的总含量不超过所述阳离子肽的所有氨基酸的90%， 或者选自根据子式(Ia)的肽 {(Arg) I ； (Lys)m ； (His)n ； (Orn) 0 ； (Xaa，)x (Cys)yI 或者选自根据子式(Ib)的肽Cys1{(Arg)x ；(Lys)m；(His)n；(Orn)。；(Xaa)JCys2其中(Arg)1 ; (Lys)m ; (His)n ; (Orn)。；和 X 如上所定义的；Xaa’ 是选自除了 Arg、Lys>His、Orn或Cys之外的天然(=天然存在的)氨基酸或非天然氨基酸的任意氨基酸；并且y 是选自 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21 至 30,31 至 40、41至50、51至60、61至70、71至80和81至90的任意数,条件是Arg(精氨酸)、Lys (赖氨酸)、His(组氨酸)和0rn(鸟氨酸)的总含量代表寡肽的所有氨基酸的至少10%并且其中Cys1和Cys2是在(Arg)1 ； (Lys)m ； (His)n ； (Orn)。； (Xaa)x的近端或末端的半胱氨酸。
12.根据权利要求10至11中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述二硫化物键由包括在所述阳离子肽中的半胱氨酸残基形成。
13.根据权利要求12的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其中所述半胱氨酸残基在所述阳离子肽的近端，优选在阳离子肽的末端。
14.根据权利要求1至13中任一项的用作免疫刺激剂或佐剂的聚合物载体运载物复合物，其包括 a.由二硫化物交联的阳离子聚合物形成的聚合物载体作为载体，和 b.至少一种核酸(分子)作为运载物， 其用于治疗或预防选自肿瘤或癌症、心血管疾病、传染病、自身免疫疾病或过敏的疾病；或者用作治疗或预防选自肿瘤或癌症、心血管疾病、传染病、自身免疫疾病或过敏中的疾病的免疫刺激剂或佐剂。
15.一种疫苗，其包括根据权利要求1至13中任一项限定的聚合物载体运载物复合物和抗原。
全文摘要
本发明涉及聚合物载体运载物复合物，包括至少一种核酸(分子)作为运载物和二硫化物交联的阳离子成分作为(优选非毒性和非免疫原性的)聚合物载体。本发明的聚合物载体运载物复合物允许体内和体外二者的核酸进入细胞的有效转染，和/或允许(先天的和/或适应性)免疫反应的诱导，优选根据待作为运载物转运的核酸。本发明还提供药物组合物，尤其是疫苗和佐剂，包括本发明的聚合物载体运载物复合物和任选的抗原，以及本发明的聚合物载体运载物复合物和任选的抗原用于转染细胞、组织或有机体的用途，所述细胞、组织或有机体用于如本文公开的(基因)治疗目的，和/或作为免疫刺激剂或佐剂，例如用于引起对上面提及的疾病的治疗或预防的免疫反应。最后，本发明涉及试剂盒，它包括本发明的聚合物载体运载物复合物和/或本发明的在试剂盒的一个或更多个部分中的药物组合物、佐剂或疫苗。
文档编号C12N15/87GK103025876SQ201180035912
公开日2013年4月3日 申请日期2011年7月25日 优先权日2010年7月30日
发明者帕特里克·鲍姆霍夫, 泽恩克·福斯, 托马斯·克兰普斯, 卡尔-约瑟夫·卡伦 申请人:库瑞瓦格有限责任公司