布朗葡萄藻及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了保藏号为CGMCC?No.5149的布朗葡萄藻(Botryococcus?braunii)ENN41。本发明的布朗葡萄藻ENN41具有生物量高、含烃量高、生长速度快、培养密度高的优势，适合产业化应用。本发明还公开了布朗葡萄藻ENN41在生物燃料尤其是生物烃、生物柴油或生物煤油中的应用；在废水处理、废气处理、CO2减排中的应用；以及在生产色素、动物饲料中的应用。
【专利说明】布朗葡萄藻及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物工程领域，具体而言，本发明涉及一种布朗葡萄藻及其应用。
【背景技术】
[0002]随着全球化石能源的短缺和其带来的环境问题，寻找新型可替代能源势在必行，微藻具有生物量大、生长周期短及含油脂类物质高等特点，在CO2减排和生物燃料利用上都有广阔的开发前景。
[0003]目前利用微藻生产生物柴油主要有两种研发思路，一种是利用微藻合成的脂肪酸通过酯化生产生物燃料，因大多数微藻通过脂肪酸合成途径可积累大量油脂，目前开展的微藻能源研究大多采用此类研发思路来研发微藻生物燃料；另一种是利用微藻合成的烃类物质生产生物柴油，因烃类物质与石油性质相似，故可代替石油生产新的可再生能源。迄今所发现具有产烃能力的藻类有葡萄藻、盐藻、小球藻、小环藻、灰色念珠藻、倒囊藻、网翼藻等，但产烃量最高、最有希望 成为工业藻种的还是葡萄藻，故葡萄藻的研究受到世界的广泛关注。
[0004]葡萄藻又名丛粒藻，属绿藻门、四胞藻纲、葡萄藻科、葡萄藻属，是一种世界性分布的淡水或微咸水绿藻。烃性质也因藻株有所区别，基于合成烃的性质，可将葡萄藻分为三个化学种:A、B和L。A品系主要产奇数碳直链二烯烃和三烯烃，最高含烃量达到细胞干重的61% ；B品系主要产三萜类烃，由类异戊二烯单位构成，被称为“葡萄烃”和甲基化三十碳六烯(鲨烯)，其含烃量为细胞干重的27%~86%;L品系主要产存在苯环或杂环的四萜类烯烃，其含烃量为细胞干重的2%~8%。葡萄藻的含烃量大大高于其它微生物的含烃量，但其生长缓慢，室外养殖容易污染，很难得到大规模的推广应用，因此具有高生长速度的优良葡萄藻藻种的获得是葡萄藻工业应用的关键环节。
[0005]葛亚明等在标题为“Growth characteristics of Botryococcus braunii765under high CO2 concentration in photobioreactor，，的文献中用 Botryococcusbraunii 765藻株在BGll培养基中，持续光照和20% CO2浓度下，培养第25天时，达到的最大生物量为2.31g/L，总烃含量最高仅为24.45%。
[0006]现有技术中的葡萄藻具有生长速度慢、生物量低、总烃含量低等缺点，限制了其在产业化中的应用。
【发明内容】
[0007]为了克服上述技术问题，一方面，本发明通过自然界藻种分离纯化及筛选，提供了一株性能良好的布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)ENN41藻株，该藻株已于2011年8月17日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.5149。
[0008]本发明提供的藻株布朗葡萄藻ENN41的18S序列(SEQ ID NO:1)如序列I所示。
[0009]序列I为:
[0010]CAAGTATTATGCCATGCATGTCTAAGTATAAGCTGTTTATACTGTGAAACTGCGAATGGCTCATTCCCA
【权利要求】
1.一种保藏号为 CGMCC N0.5149 的布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)ENN41。
2.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其18S序列如SEQID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其ITS序列如SEQID NO:2所示。
4.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其形态特征为:细胞形状为椭圆形或楔形，呈串状集落生；细胞大小:长6μηι~8μηι,宽5μηι~7μηι,聚集群体达50 μ m以上；细胞颜色为绿色或黄褐色；细胞包被在不规则分枝或分叶的、半透明的胶群体胶被里；细胞分裂时常形成两个似亲孢子，群体常断裂为小群体。
5.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其特征在于，藻株的烃含量占藻株干重的20%~60%。
6.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其特征在于，藻株中的脂肪酸含量占藻株干重的4%~8%。
7.—种培养根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41的培养方法,其特征在于,培养条件为:温度为20~35°C ;光照条件为50~500 μ mol/m2.s, pH值控制在7~9，C源为含0.5%~10% CO2的气体。
8.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41在生产生物燃料中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述生物燃料为生物烃、生物柴油或生物煤油。
10.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41在废水处理、废气处理、CO2减排中的应用。
11.根据权利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41在生产色素、动物饲料中的应用。
【文档编号】C12N1/12GK103571752SQ201210270140
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2012年7月30日 优先权日:2012年7月30日
【发明者】陈传红, 吴洪, 尹顺吉, 马建源 申请人:新奥科技发展有限公司