一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺。主要解决了现有的接种工艺灭菌程度以及自动化程度都不高的问题。包括以下步骤：对无菌操作箱以及整个接种发酵装置进行空气排空且以蒸汽灭菌；把装有菌种的管体放入无菌操作箱内并灭菌；打开接种罐上的接种头并倒入菌种；菌种通过管道输送到发酵箱内。整个装置以及装有菌种的管体均进行了彻底的灭菌，不会残留任何杂菌，提高了发酵的有效性，工艺操作简单，不繁琐；对菌种的添加采用自动化输送，科学高效。
【专利说明】一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种工业发酵领域，具体涉及一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺。
【背景技术】
[0002]发酵有时也写作酸酵，其定义由使用场合的不同而不同。通常所说的发酵，多是指生物体对于有机物的某种分解过程。
[0003]发酵时需要在发酵箱内接入菌种(一般为人工接入)，且不能混入杂菌，这样就对灭菌效果有很高的要求。
[0004]通常在工业上的接种为人工点火式接种，在发酵箱上打开一个小口，在开口周围涂上酒精并点燃，一段时间后再倒入从实验室中取来的带有菌种的药剂。这种方式的接种虽然在一定程度上消灭了杂菌，但是还残留了少量杂菌，同时点火式接种难度较高，而且对于工作人员还有一定的危险性。
[0005]另外一种常用的接种方式是在发酵箱体侧面打开一个小口，再放一个无菌操作箱，工作人员通过无菌操作箱已经消毒，倒入药剂。这种方式虽然能保证灭菌的程度，但是操作很繁琐，没有实现自动 化，导致效率较低。
【发明内容】
[0006]为了克服【背景技术】的不足，本发明提供一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，主要解决了现有的接种工艺灭菌程度以及自动化程度都不高的问题。
[0007]本发明所采用的技术方案是:一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，包括以下步骤:
(1)灭菌，先进行管道灭菌，操作阀门使管道的两端分别与蒸汽源及外界相通，此时管道与发酵罐之间不通，管道内充入温度为130—145°C、压力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道内的原有空气，持续10 —15分钟；然后，进行接种罐以及经过管道系统的发酵罐灭菌，操作阀门使管道与外界关闭且管道与发酵罐相通，蒸汽对接种罐以及发酵罐内进行灭菌持续10 —15分钟；最后，进行无菌操作箱灭菌，关闭无菌操作箱的门，打开操作箱内的紫外线灯，对无菌操作箱内进行灭菌，持续10 —15分钟；
(2)从实验室中取出装有菌种的管体，打开四分之一无菌操作箱的侧开门，同时打开箱体内的正压无菌风口，把管体放在箱体内一侧，打开紫外线灯，关上玻璃门，持续10 —15分钟；
(3)关闭紫外线灯，打开无菌操作箱的玻璃门，再打开接种罐上的接种盖，将接种盖挂于旁边的支架上，远离操作箱底，然后把菌种倒入接种罐内，盖上接种盖，关闭玻璃门；
(4)打开接种罐上的增压装置，增压到0.3—0.35MPa，接种罐内的压力大于发酵罐内的压力，菌种就通过管道被输送到了发酵罐内。
[0008]步骤(1)中的无菌蒸汽为135°C，0.25MPa ;上述的灭菌持续时间为15分钟，步骤(4)中增压到0.3MPa。
[0009]步骤(2 )中的菌种3% — 5%的液体菌种。
[0010]所述的菌种为5%的液体菌种。
[0011]本发明的有益效果是:由于采取上述技术方案，整个装置以及装有菌种的管体均进行了彻底的灭菌，不会残留任何杂菌，提高了发酵的有效性，工艺操作简单，不繁琐；对菌种的添加采用自动化输送，科学高效，增加了接种的成功率。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1为本发明涉及装置的结构示意图。
[0013]图中1、接种罐；2、无菌操作箱；3、发酵罐；4、管道；5、阀门；6、增压装置。
【具体实施方式】
[0014]下面结合附图对本发明实施例作进一步说明:
一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，包括以下步骤:
(I)灭菌，先进行管道灭菌，操作阀门使管道的两端分别与蒸汽源及外界相通，此时管道与发酵罐3之间不通，管道4内充入温度为130— 145°C、压力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道4内的原有空气，持续10 —15分钟；然后，进行接种罐I以及经过管道系统的发酵罐3灭菌，操作阀门使管道与外界关闭且管道与发酵罐3相通，蒸汽对接种罐I以及发酵罐3内进行灭菌持续10 —15分钟；最后，进行无菌操作箱灭菌，关闭无菌操作箱的门，打开操作箱内的紫外线灯，对无菌操作箱内进行灭菌，持续10 —15分钟；
整个接种发酵装置包括内设有接种罐I的无菌操作箱2以及发酵罐3，无菌操作箱2与外部的发酵罐3通过管道4连接，且管道4上设有控制开关以及控制换向的阀门5，无菌操作箱2采用侧开玻璃门密闭结构;无菌操作箱体2上部设有紫外线灯，箱体内设有正压无菌风口。
[0015](2)从实验室中取出装有菌种的管体，打开四分之一无菌操作箱的侧开门，同时打开箱体内的正压无菌风口，把管体放在箱体内一侧，打开紫外线灯，关上玻璃门，持续10—15分钟；在打开箱体的同时，打开正压吹风口，这样可以保证杂物不会随着门的打开而进入。
[0016](3)关闭紫外线灯，打开无菌操作箱的玻璃门，再打开接种罐I上的接种盖，将接种盖挂于旁边的支架上，远离操作箱底，然后把菌种倒入接种罐I内，盖上接种盖，关闭玻璃门；接种盖为上下两层把手式的锁控，这样设计可以避免接种盖感染杂菌从而影响接种。
[0017](4)打开接种罐I上的增压装置，增压到0.3—0.35MPa，接种罐I内的压力大于发酵罐3内的压力，菌种就通过管道被输送到了发酵罐内。
[0018]优选方案为:步骤(1)中的无菌蒸汽为135°C，0.25MPa ;上述的灭菌持续时间为15分钟，步骤(4)中增压到0.3MPa。
[0019]步骤(2)中的菌种3% — 5%的液体菌种。经实验验证，优选方案为:所述的菌种为5%的液体菌种。`
[0020]各位技术人员须知:虽然本发明已按照上述【具体实施方式】做了描述，但是本发明的发明思想并不仅限于此发明，任何运用本发明思想的改装，都将纳入本专利专利权保护范围内。
【权利要求】
1.一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于:包括以下步骤: (1)灭菌，先进行管道灭菌，操作阀门使管道的两端分别与蒸汽源及外界相通，此时管道与发酵罐之间不通，管道内充入温度为130— 145°C、压力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道内的原有空气，持续10 —15分钟；然后，进行接种罐以及经过管道系统的发酵罐灭菌，操作阀门使管道与外界关闭且管道与发酵罐相通，蒸汽对接种罐以及发酵罐内进行灭菌持续10 —15分钟；最后，进行无菌操作箱灭菌，关闭无菌操作箱的门，打开操作箱内的紫外线灯，对无菌操作箱内进行灭菌，持续10 —15分钟； (2)从实验室中取出装有菌种的管体，打开四分之一无菌操作箱的侧开门，同时打开箱体内的正压无菌风口，把管体放在箱体内一侧，打开紫外线灯，关上玻璃门，持续10 —15分钟； (3)关闭紫外线灯，打开无菌操作箱的玻璃门，再打开接种罐上的接种盖，将接种盖挂于旁边的支架上，远离操作箱底，然后把菌种倒入接种罐内，盖上接种盖，关闭玻璃门； (4)打开接种罐上的增压装置，增压到0.3—0.35MPa，接种罐内的压力大于发酵罐内的压力，菌种就通过管道被输送到了发酵罐内。
2.根据权利要求1所述的一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于:步骤Cl)中的无菌蒸汽为135°C，0.25MPa;上述的灭菌持续时间为15分钟，步骤(4)中增压到0.3MPa。
3.根据权利要求1所述的一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于:步骤(2)中的菌种3% — 5%的液体菌种。
4.根据权利要求3所述的一种以无菌操作箱的方式改良接种工艺，其特征在于:所述的菌种为5%的液体菌种。
【文档编号】C12N1/00GK103571750SQ201310292058
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2013年7月10日 优先权日:2013年7月10日
【发明者】章方国 申请人:温州兆曜机械科技有限公司