本发明涉及一种酵素的制备方法，特别涉及一种缩短酵素发酵时间的制备方法。
背景技术：
：酵素(fermentnutrition)是指植物进行深层发酵，提取的一种含生物活性物质的低盐液体。上述生物活性成分至少包括酶、发酵参与菌。酵素中含有的生物活性成分，可影响服用者体内的活性酶，从细胞层面调节机体的生命活动。厌氧制作的益生酵素中，主要是益生菌及食材，两者的副作用都几乎为零。因此，益生酵素是具有生命活力的安全保健品。为使酵素食品更加符合现代人对营养的需要，研制一种全新的复合酵素制作工艺刻不容缓。技术实现要素：本发明解决的技术问题是，传统酵母菌的发酵时间需要180天以上，使得酵素的生产周期较长。本发明提供一种食用安全卫生、酵素活力高、促进人体吸收并且制作周期短的酵素及复合酵素的制备方法。本发明的技术方案是，提供一种酵素的制备方法，包括以下步骤：(1)在新鲜水果的果肉中添加汉逊德巴利酵母debaryomyceshensenii的菌液，密封并在15-26℃下一次发酵105-125天，得到酵素原汁；所述汉逊德巴利酵母debaryomyceshensenii已于2012年2月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmccno.5770；地址：北京市朝阳区中国科学院微生物研究所；(2)在酵素原汁中加入多元糖醇，密封并在15-26℃下二次发酵5-10天，然后灭菌，得到酵素。优选地，汉逊德巴利酵母debaryomyceshensenii的菌液的添加量为果肉重量的1-3％。优选地，所述多元糖醇为麦芽糖醇、甘露醇、木糖醇、山梨醇和/或乳糖醇。多元糖醇具有与蔗糖相类似的化学和物理性质但是热值低，多数情况下不致龋齿，作为蔗糖的代替品使用。优选地，所述多元糖醇的添加量为酵素原汁重量的2-4％。优选地，所述水果为苹果、木瓜、黄梨和/或葡萄。优选地，当水果为木瓜时，一次发酵时还加入陈醋，陈醋分别占木瓜果肉重量的4-6％和3-5％。醋不但是调味佳品，还可以促进新陈代谢，帮助机体休息，消除疲劳，预防动脉硬化和高血压。优选地，当水果为黄梨时，一次发酵时还加入占黄梨果肉重量4-6％的蜂蜜。优选地，当水果为葡萄时，一次发酵时还加入占葡萄果肉重量0.5-2％的蜂蜜。蜂蜜可以促进心脑血管功能，还能润肠通便。优选地，将苹果、木瓜、黄梨和葡萄的果肉分别发酵得到苹果酵素原汁、木瓜酵素原汁、黄梨酵素原汁和葡萄酵素原汁，再按3:2:1:1的体积比混合，加入多元糖醇后进行二次发酵。优选地，所述灭菌的条件为：在106-112℃下保温20-40min。汉逊德巴利酵母菌的菌液即发酵液，是由前述的汉逊德巴利酵母菌接种于pda液体培养基中培养得到。优选地，汉逊德巴利酵母菌的接种量为1～2wt％，前述培养时间为24～48h，培养温度为18～28℃。前述pda液体培养基包括：0.3～2wt％的乳清粉，0.1～1wt％的绿茶末，3～6wt％的盐，88～94.5wt％的水。pda液体培养基的ph为自然ph，将pda液体培养基置于90～100℃下灭菌15min后再用于汉逊德巴利酵母菌的培养。酵素加工工艺中，发酵时间一般为180天。与现有技术相比，本发明通过提供一种科学、安全的酵素制备方法，本发明选用汉逊德巴利酵母debaryomyceshensenii作为发酵菌，缩短酵素原汁生产周期，使酵素发酵更加彻底。本发明选取苹果、木瓜、黄梨和葡萄作为原料，并且四种酵素原汁混合比例科学搭配，使其营养成分更充足，食用安全卫生、酵素活力高、促进人体吸收。保藏信息保藏日期：2012年2月17日；保藏单位全称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位简称：cgmcc；保藏编号：cgmccno.5770。具体实施方式以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。实施例1：苹果酵素的制备方法制取苹果酵素原汁：选取新鲜苹果，取其果肉，将果肉切成片状后混合，加入重量比为苹果果肉2％的汉逊德巴利酵母(debaryomyceshensenii)菌液，密封120天，自然发酵(即一次发酵)成苹果酵素原汁；加入多元糖醇，在常温下进行密封自然发酵6天(即二次发酵)，将上述所得的酵素装入浓缩器中在温度110℃下进行30min杀菌，得到苹果酵素。实施例2：木瓜酵素的制备方法制取木瓜酵素原汁：选取新鲜木瓜，取其果肉，将果肉切成片状后混合，加入重量比为木瓜果肉2％的汉逊德巴利酵母(debaryomyceshensenii)菌液、5％的陈醋，常温密封110天自然发酵(即一次发酵)成木瓜酵素原汁；加入多元糖醇，在常温下进行密封二次自然发酵6天(即二次发酵)，将上述所得的酵素装入浓缩器中在温度110℃下进行30min杀菌，得到木瓜酵素。实施例3：黄梨酵素的制备方法制取黄梨酵素原汁：选取新鲜黄梨，切片混合，加入重量比为黄梨果肉5％的蜂蜜和1％的汉逊德巴利酵母(debaryomyceshensenii)菌液，常温密封105天自然发酵(即一次发酵)成黄梨酵素原汁；加入多元糖醇，在常温下进行密封二次自然发酵6天(即二次发酵)，将上述所得的酵素装入浓缩器中在温度110℃下进行30min杀菌，得到黄梨酵素。实施例4：葡萄酵素的制备方法制取葡萄酵素原汁：新鲜葡萄去皮，加入重量比为葡萄果肉1％的蜂蜜和1％的汉逊德巴利酵母(debaryomyceshensenii)菌液，常温密封122天自然发酵(即一次发酵)成葡萄酵素原汁；加入多元糖醇，在常温下进行密封自然发酵6天(即二次发酵)，将上述所得的酵素装入浓缩器中在温度110℃下进行30min杀菌，得到葡萄酵素。实施例5：一种复合酵素的制备方法，包括以下步骤：(1)按实施例1-4的方法制备四种酵素原汁；(2)将所得的四种酵素原汁按照重量比3:2:1:1混合，并加入多元糖醇，在常温下进行密封二次自然发酵6天；(3)将上述所得的混合酵素装入浓缩器中在温度110℃下进行30min杀菌，得到复合酵素。对比例：制备方法与实施例1-5基本相同，区别在于采用普通市售酵母菌代替汉逊德巴利酵母(debaryomyceshensenii)，进行发酵，分别制备上述四种单一酵素(对比例1-4)与复合酵素(对比例5)。发现采用市售酵母菌需要较长的发酵时间(见表1)。表1实施例1-4和对比例1-4所得的酵素的发酵时间对比表样品/制备一次发酵时间实施例1120天实施例2110天实施例3105天实施例4122天对比例1180天对比例2186天对比例3183天对比例4189天通过以上方式，与现有技术相比，本发明通过提供一种科学的、安全的酵素制备方法，选用汉逊德巴利酵母(debaryomyceshensenii)作为发酵菌，缩短酵素原汁生产周期，使酵素发酵更加彻底。选取苹果、木瓜、黄梨和葡萄作为原料，并且四种酵素原汁混合比例科学搭配，使其营养成分更充足，食用安全卫生、酵素活力高、促进人体吸收。当前第1页12