本发明属于生物工程领域，尤其是涉及牛饲料营养强化剂的制备方法。
背景技术：
血液蛋白质具有极高的生物效价，其组成平衡，为优质蛋白源。但是目前动物血液，特别是羊血大部分被以污水的形式排放或丢弃，导致大量宝贵营养资源流失，并且给环境造成了严重污染。在羊血液中，血红蛋白占其总蛋白质含量的60-70％。加工血红蛋白不但有助于环境的保护，而且可以充分利用血液中大量宝贵的蛋白质，开发为高附加值的功能产品。
技术实现要素：
本发明的目的是提供牛饲料营养强化剂的制备方法，其制备方法简单，所用的多肽分子量小，纯度高，可有效提升牛的生长性能和健康水平。
为了达到上述目的本发明提供的技术方案为：牛饲料营养强化剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为3-5/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
酶解液的制备：向2-5份血红蛋白中加入35-45份水，调ph至7-9，加热至90-95℃保持30-40min，接着降温至55-60℃，加入占血红蛋白质量3％-5％的巯基蛋白酶反应2-6h，然后再加入占血红蛋白质量2％-5％的木瓜蛋白酶，在45-55℃，ph为8的条件下水解7-10h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，该条件下，采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的活性多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对牛的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；
活性多肽的制备：将酶解液以9-10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以9-10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量7％-12％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得活性多肽，该条件下，所制备的活性多肽能够增强动物机体免疫力，且分子量小，纯度高，利于动物吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
作为优选，营养强化剂的制备方法为：取黄连生物碱2-4份、维生素a2-3份、维生素e2-5份以及活性多肽0.1-0.4份混合，得营养强化剂。其制备方法简单，所用的多肽分子量小，纯度高，可有效提升牛的生长性能和健康水平。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明所公开的制备方法简单，所用的多肽分子量小，纯度高，可有效提升牛的生长性能和健康水平；采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的活性多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对牛的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺。
具体实施方式
以下通过实施例进一步详细描述：
实施例1：牛饲料营养强化剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
1)血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为3/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
2)酶解液的制备：向2份血红蛋白中加入35份水，调ph至7，加热至90℃保持30min，接着降温至55℃，加入占血红蛋白质量3％的巯基蛋白酶反应2h，然后再加入占血红蛋白质量2％的木瓜蛋白酶，在45℃，ph为8的条件下水解7h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，该条件下，采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的活性多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对牛的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；
3)活性多肽的制备：将酶解液以9倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以9倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量7％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得活性多肽，该条件下，所制备的活性多肽能够增强动物机体免疫力，且分子量小，纯度高，利于动物吸收，可直接使用，具有显著的经济效益；
4)营养强化剂的制备：取黄连生物碱2份、维生素a2份、维生素e2份以及活性多肽0.1份混合，得营养强化剂，其制备方法简单，所用的多肽分子量小，纯度高，可有效提升牛的生长性能和健康水平。
实施例2：牛饲料营养强化剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
1)血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为5/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
2)酶解液的制备：向5份血红蛋白中加入45份水，调ph至9，加热至95℃保持40min，接着降温至60℃，加入占血红蛋白质量5％的巯基蛋白酶反应6h，然后再加入占血红蛋白质量5％的木瓜蛋白酶，在55℃，ph为8的条件下水解10h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，该条件下，采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的活性多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对牛的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；
3)活性多肽的制备：将酶解液以10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量12％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得活性多肽，该条件下，所制备的活性多肽能够增强动物机体免疫力，且分子量小，纯度高，利于动物吸收，可直接使用，具有显著的经济效益；
4)营养强化剂的制备：取黄连生物碱4份、维生素a3份、维生素e5份以及活性多肽0.4份混合，得营养强化剂，其制备方法简单，所用的多肽分子量小，纯度高，可有效提升牛的生长性能和健康水平。
实施例3：牛饲料营养强化剂的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
1)血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为4/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
2)酶解液的制备：向3份血红蛋白中加入37份水，调ph至8，加热至93℃保持34min，接着降温至57℃，加入占血红蛋白质量5％的巯基蛋白酶，再加入占血红蛋白质量1‰普鲁兰多糖的以及血红蛋白质量0.3‰的2,4-己二烯酸，反应3h，接着加入占血红蛋白质量2％的木瓜蛋白酶，在48℃，ph为8的条件下水解8h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，所加入的2,4-己二烯酸、普鲁兰多糖具有协同作用，增强了巯基蛋白酶所含有的半胱氨酸的活性，提高了其催化水解肽键的能力，降低了酶解所得的活性多肽的分子量，提高了其经济效益；
3)活性多肽的制备：将酶解液以9倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量12％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得活性多肽，该条件下，所制备的活性多肽能够增强动物机体免疫力，且分子量小，纯度高，利于动物吸收，可直接使用，具有显著的经济效益；
4)营养强化剂的制备：取黄连生物碱3份、维生素a2份、维生素e4份以及活性多肽0.2份混合，得营养强化剂，其制备方法简单，所用的多肽分子量小，纯度高，可有效提升牛的生长性能和健康水平。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。