一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料及其制备方法和应用与流程

本发明属于饲料技术领域，涉及一种实验小鼠饲料，尤其是一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料及其制备方法和应用。

背景技术：

沙门氏菌是一种肠道致病菌，可以入侵宿主肠道上皮细胞导致严重的临床疾病，比如，呕吐、腹泻、肠道炎症等。据估计20％～30％的结肠癌是由肠道炎症引起的，出于这个原因研究饮食干预对缓解肠道的作用具有重要的意义。

抗性淀粉潜在的益生作用和功能特性使它得到了越来越多的关注，它大量存在于不易消化碳水化物的饮食原料中，是一种重要的膳食纤维，可以促进大肠健康、预防结肠炎和结肠癌。大量的研究证明抗性淀粉具有许多对人体有益的生理特性，同时抗性淀粉被越来越多的用于生产低热量高纤维含量的食物。抗性淀粉同时也被用于提高食物的膳食含量，同时具有降低血糖的潜力。抗性淀粉通过增加食物中总膳食纤维的含量、降低能量的途径提高肠道健康。最重要的是抗性淀粉可以显著提高肠道中短链脂肪酸的含量，短链脂肪酸不仅可以为肠道营造一个低ph坏境从而抑制大部分致病菌的生长繁殖，还可以促进肠上皮细胞增殖，修复肠道屏障并富集肠道益生菌。

目前我国防治实验鼠由致病菌引起的肠道炎症的主要手段是使用抗生素药物，这种药物会打乱小鼠自身肠道菌群的平衡并降低小鼠免疫力，饮食干预作为一种安全、绿色、无副作用的新型治疗手段却鲜有研究。本发明研制出了一种饲料可以作为饮食干预缓解感染鼠伤寒沙门氏菌引起的肠道炎症。

通过检索，发现如下两篇与本发明申请相关的专利公开文献：

1、一种用于防治鸡新城疫的鸡饲料及其制备方法，本发明提供一种用于防治鸡新城疫的鸡饲料及其制备方法，由以下重量份的原料组成玉米一份、松针粉一份、小麦一份、黄豆一份、菜籽饼一份、小麦鼓一份、豆饼一份、细米糠一份、首蓓草粉一份、贝壳粉一份、磷酸氢钙一份、食盐一份、复合微量元素一份、复合多种维生素一份、中草药添加剂一份。一种用于防治鸡新城疫的鸡饲料具有清热解毒、益气健脾、扶正祛邪、抗菌消炎、抗病毒的功效。通过喂养本种饲料，不但可以为鸡生长过程中提供充足的蛋白质、维生素、微量元素等营养成分，促进机体的生长发育，而且还可用于预防和治疗鸡新城疫问题的出现的作用。

2、一种提高肉牛免疫力的中草药复合饲料及其制备方法，本发明涉及一种提高肉牛免疫力的中草药复合饲料及其制备方法，由下列重量份的原料组成：玉米30～60份、豆粕5～15份、麦麸10～20份、棉籽饼5～15份、骨粉1～5份、中草药添加剂15～45份、食盐0.5～3.5份、预混料添加剂0.1～1份，其中，中草药添加剂由下述重量份的原料组成：饲料桑30～60份、八角0.5～3.5份、丹参1～6份、生姜1～6份、大蒜1～6份、杜仲1～6份、蒲公英1～6份。本发明的中草药复合饲料各种营养成分配比合理，生产成本较低，用于肉牛饲养，可有效提高釆食量、抗病促长、增强机体免疫力及提高抗氧化能力的作用，从而克服现有技术中营养成分缺乏、营养含量不足、耐药性及环境污染等问题，是一种绿色天然的复合饲料。

通过对比以上两种饲料配方，可以看出，本发明的小鼠饲料针对动物种类不同，配方成本低，营养更加全面，可操作性更强，有利于大规模推广，且本发明首次研发了一种可以防治由鼠伤寒沙门氏菌引起的小鼠肠道炎症的饲料。

技术实现要素：

本发明目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料及其制备方法和应用，该小鼠饲料具有燥湿止痢、抗菌消炎的功效，可以用于预防和治疗实验小鼠沙门氏菌病问题的出现，解决了目前过度滥用抗生素预防和治疗沙门氏菌病而造成耐药性菌株问题的出现。提供一种绿色安全的饮食疗法，本发明对设备要求简单、效果显著，安全、无副作用，适合大规模推广应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料，其原料组成g/kg如下：

而且，所述抗性淀粉为rs3型抗性淀粉。

而且，所述明胶为食品级明胶。

而且，所述复合矿物质预混料由奶粉和动物肝脏粉按照质量比3：4的比例组合而成。

而且，所述复合维生素预混料由高粱粉和大豆粉按照质量比1：1的比例组合而成。

一种如上所述的防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料的制备方法，步骤如下：

⑴按照配方称取所需的各种物料；

⑵混合称量好除明胶之外的所有物料；

⑶将混合好的物料过60-80目筛；

⑷将称量好的明胶溶到水中制成明胶水溶液，所述明胶：水的质量比为2～5：50，在70℃的条件下水浴30分钟；

⑸过筛后的物料倒入搅拌机，边搅拌边倒入水浴后的明胶水溶液；

⑹将和好的饲料面团搓成长度为3-5厘米，直径为1厘米的圆柱状；

⑺将步骤⑹制备好的饲料放入烘箱，65℃，直到小鼠饲料从内到外全部烘干，取出即得防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料。如上所述的防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料在作为饮食干预缓解感染鼠伤寒沙门氏菌引起的肠道炎症方面中的应用。

本发明取得的优点和积极效果为：

1、本发明小鼠饲料具有燥湿止痢、抗菌消炎的功效，可以用于预防和治疗实验小鼠沙门氏菌病问题的出现，解决了目前过度滥用抗生素预防和治疗沙门氏菌病而造成耐药性菌株问题的出现。提供一种绿色安全的饮食疗法，本发明对设备要求简单、效果显著，安全、无副作用，适合大规模推广应用；本发明饲料可以作为饮食干预缓解感染鼠伤寒沙门氏菌引起的肠道炎症。

2、本发明小鼠饲料与普通小鼠饲料配方相比添加了抗性淀粉，可以有效缓解由鼠伤寒沙门氏菌感染引起的肠道炎症，增加肠道中短链脂肪酸的含量，降低感染沙门造成的死亡率。

3、本发明饲料使用的复合矿物质预混料由奶粉和动物肝脏粉按照质量比3：4的比例组合而成，这保证了最终成品的全面营养和良好的口感。

4、本发明饲料使用的复合维生素预混料由高粱粉和大豆粉按照质量比1：1的比例组合而成，这保证了最终成品的全面营养和良好的生理功能。

5、本发明在制备时在混合所有配料时使用的是明胶水溶液，可以保证能够达到小鼠饲料所需的坚硬度，利于小鼠磨牙和适口性。

6、用本发明饲料做动物实验发现，本发明饲料确实对感染鼠伤寒沙门氏菌引起的小鼠肠道炎症具有预防和缓解作用。实验数据显示抗性淀粉饲料能够显著改善致病菌引起的小鼠肠道组织形态损坏，增加肠道中短链脂肪酸的含量，减轻炎症，调节肠道菌群，有效预防沙门氏菌造成的肠道炎症。

附图说明

图1为本发明中各组实验小鼠小肠组织形态对比图；

图2为本发明中各组实验小鼠血清中炎症因子的浓度图；其中，图2.1为炎症因子tnf-α含量图，图2.2为炎症因子il-1β含量图，图2.3为炎症因子il-6含量图，图2.4为no含量图；

图3为本发明中各组实验小鼠粪便中短链脂肪酸含量图；

图4为本发明中小鼠死亡率的测定图。

具体实施方式

下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。

实施例1

一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料，其原料组成g/kg如下：

玉米淀粉340g、rs3型抗性淀粉105g、鱼粉280g、蔗糖100g、大豆油50g、麦麸50g、复合矿物质预混料35g、复合维生素预混料10g、dl-蛋氨酸3g、l-胱氨酸3g、氯化胆碱2g、重酒石酸胆碱2g、明胶20g。

上述防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料的制备方法按照如下步骤进行：

⑴按照配方称取所需的各种物料；

⑵混合称量好除明胶之外的所有物料；

⑶将混合好的物料过60-80目筛；

⑷将称量好的食品级明胶溶到500ml水中制成明胶水溶液，在70℃的条件下水浴30分钟；

⑸过筛后的物料倒入搅拌机，边搅拌边倒入水浴后的明胶水溶液；

⑹将和好的饲料面团搓成长度为3-5厘米，直径为1厘米的圆柱状；

⑺将步骤⑹制备好的饲料放入烘箱，65℃，直到小鼠饲料从内到外全部烘干，取出即得防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料。

实施例2

一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料，其原料组成g/kg如下：

玉米淀粉390g、rs3型抗性淀粉55g、鱼粉280g、蔗糖100g、大豆油50g、麦麸50g、复合矿物质预混料35g、复合维生素预混料10g、dl-蛋氨酸3g、l-胱氨酸3g、氯化胆碱2g、重酒石酸胆碱2g、明胶20g。

上述防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料的制备方法按照如下步骤进行：

⑴按照配方称取所需的各种物料；

⑵混合称量好除明胶之外的所有物料；

⑶将混合好的物料过60-80目筛；

⑷将称量好的食品级明胶溶到500ml水中制成明胶水溶液，在70℃的条件下水浴30分钟；

⑸过筛后的物料倒入搅拌机，边搅拌边倒入水浴后的明胶水溶液；

⑹将和好的饲料面团搓成长度为3-5厘米，直径为1厘米的圆柱状；

⑺将步骤⑹制备好的饲料放入烘箱，65℃，直到小鼠饲料从内到外全部烘干，取出即得防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料。

实施例3

一种防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料，其原料组成g/kg如下：

较优地，所述抗性淀粉为rs3型抗性淀粉。

较优地，所述明胶为食品级明胶。

较优地，所述复合矿物质预混料由奶粉和动物肝脏粉按照质量比3：4的比例组合而成。

较优地，所述复合维生素预混料由高粱粉和大豆粉按照质量比1：1的比例组合而成。

一种如上所述的防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料的制备方法，步骤如下：

⑴按照配方称取所需的各种物料；

⑵混合称量好除明胶之外的所有物料；

⑶将混合好的物料过60-80目筛；

⑷将称量好的明胶溶到水中制成明胶水溶液，所述明胶：水的质量比为2～5：50，在70℃的条件下水浴30分钟；

⑸过筛后的物料倒入搅拌机，边搅拌边倒入水浴后的明胶水溶液；

⑹将和好的饲料面团搓成长度为3-5厘米，直径为1厘米的圆柱状；

⑺将步骤⑹制备好的饲料放入烘箱，65℃，直到小鼠饲料从内到外全部烘干，取出即得防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料。

本发明防治鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠饲料可以应用在作为饮食干预缓解感染鼠伤寒沙门氏菌引起的肠道炎症方面中。

本发明的相关检测：

动物实验：采取本发明饲料做以下实验：

试验选用无特定病原体(specificpathogensfree,spf)即spf级6周龄的balb/c雌性小鼠80只，实验小鼠分为四组，分别为正常饲料组、抗性淀粉组、正常饲料感染组、抗性淀粉感染组组，每组20只，4只小鼠一笼。饲养条件是：湿度60％-80％，温度维持在22±2℃，12h/12h黑夜，小鼠自由取食和饮水，抗性淀粉饲料每3天配一次，置4℃冰箱保存，随用随取。所有小鼠基础饲料喂养1周后，按照体重随机分成4组，正常饲料组和正常饲料感染组给予正常饲料，抗性淀粉饲料组和抗性淀粉饲料感染组给予本发明饲料。按照这种饲料模式喂养3周后，即实验开始4周后(之前还有1周的适应期)感染组(正常饲料感染组和抗性淀粉饲料感染组)开始灌胃鼠伤寒沙门氏菌，每只小鼠的单次灌胃量为2.0×10⁴cfu，菌悬液体积为0.1ml/只；而非感染组小鼠(正常饲料组和抗性淀粉饲料组)灌的是用来制作菌悬液的生理盐水，体积同样为0.1ml/只。连续灌胃6天，在灌胃的第0天、第3天和第6天称量小鼠体重并收集小鼠粪便保存在-80℃冰箱，保存待测。到灌胃第7天，眼球取血并解剖小鼠收集回肠、盲肠、结肠组织样品。

观察小鼠肠道组织形态变化，结果如图1所示。鼠伤寒沙门氏菌导致小肠结构破坏，具体表现在：小肠绒毛破裂甚至脱落，肠壁断裂。本发明饲料能够显著保护感染沙门氏菌后小肠结构的完整性。

测定各实验组小鼠血清中的炎症因子(tnf-α、il-1β、il-6、no)，结果如图2所示。鼠伤寒沙门氏菌感染导致炎症因子水平增加，而喂养本发明的饲料后，炎症因子水平显著下降。

测定各实验组小鼠粪便短链脂肪酸的含量，结果如图3所示，本发明饲料能够显著增加短链脂肪酸的含量，其中乙酸，丁酸尤为显著。同时，经检测发现，短链脂肪酸产生菌的丰度也得到一定程度的增加。进一步说明：本发明小鼠饲料能够通过增加短链脂肪酸产生菌的丰度，提高短链脂肪酸含量。短链脂肪酸是细菌代谢多糖的产物，且能过促进肠上皮细胞的增值，尤其是丁酸盐的产生，为肠上皮细胞功能，修复肠屏障，缓解沙门氏菌引起的肠道炎症。

测定感染组小鼠最终的死亡率，结果如图4所示，可以看出，本发明饲料显著降低了感染沙门氏菌后小鼠的死亡率。

由动物实验得出结论：本发明抗性淀粉饲料显著提高了小鼠粪便中短链脂肪酸的含量，其中乙酸，丁酸尤为显著。短链脂肪酸是细菌代谢多糖的产物，且能够促进肠上皮细胞的增值，尤其是丁酸盐的产生，加强了肠上皮细胞功能，修复肠屏障，缓解沙门氏菌引起的肠道炎症，降低了小鼠感染沙门氏菌造成的死亡率。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例和附图所公开的内容。