本发明涉及食品
技术领域：
，特别是涉及一种益生菌组合物、保健食品及其制备方法和应用。
背景技术：
：随着生活条件的提高，人们越来越重视自己的健康状况。免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)，处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。免疫力低下的身体极易招致细菌、病毒、真菌等感染，而产生体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等疾病症状，不但加重了机体的消耗，而且每次生病都要很长时间才能恢复，长此以往会诱发重大疾病。此外，饮食发生改变、使用抗生素药物、年龄的变化及肠道免疫功能障碍等，也会影响身体的健康，而导致肠道菌群紊乱，敏感肠菌被抑制，未被抑制的细菌而乘机繁殖，从而引起菌群失调，使人产生便秘的症状。技术实现要素：基于此，有必要提供一种能够改善肠道微生物平衡并提高免疫力的益生菌组合物。此外，还提供了一种益生菌组合物的制备方法和应用、保健食品及其制备方法。一种益生菌组合物，按重量份数计，包括：其中，所述复合益生菌中的活菌数为2.5×1010cfu/g～5.5×1010cfu/g。上述益生菌组合物中的复合益生菌能够补充肠道益生菌，低聚果糖作为益生元，有利于肠道有益菌的生长繁殖及肠道健康，富硒酵母能够补充体内的硒元素，植物酵素能够提高体内抗氧化能力。通过复合益生菌、低聚果糖、富硒酵母及植物酵素的协同作用，并控制复合益生菌中的活菌数量，上述益生菌组合物不仅能够改善肠道微生物平衡，而且还能够显著提高免疫力。在其中一个实施例中，所述复合益生菌中的活菌数为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g。在其中一个实施例中，所述复合益生菌包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌及长双歧杆菌中的至少一种。在其中一个实施例中，所述复合益生菌包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌及长双歧杆菌，其中，按菌落形成单位计，所述植物乳杆菌与所述瑞士乳杆菌、所述长双歧杆菌的活菌数比为1:4:6～1:6:9。在其中一个实施例中，还包括21份～27份的麦芽糊精。在其中一个实施例中，还包括7份～13份的香蕉粉。一种益生菌组合物的制备方法，按重量份数计，包括步骤：将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖混合，得到益生菌组合物，其中，所述复合益生菌中的活菌数为2.5×1010cfu/g～5.5×1010cfu/g。上述的益生菌组合物或上述的益生菌组合物的制备方法制得的益生菌组合物在制备保健食品中的应用。一种保健食品，包括上述的益生菌组合物或上述的益生菌组合物的制备方法制得的益生菌组合物和食品添加剂。一种保健食品的制备方法，包括步骤：将上述的益生菌组合物或上述的益生菌组合物的制备方法制得的益生菌组合物与食品添加剂混合，得到保健食品。具体实施方式本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的
技术领域：
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体地实施例的目的，不是旨在于限制本发明。一实施方式的益生菌组合物，按重量份数计，包括：其中，复合益生菌中的活菌数为2.5×1010cfu/g～5.5×1010cfu/g。进一步地，复合益生菌中的活菌数为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g。具体地，复合益生菌的质量份数为5.67份。具体地，复合益生菌为冻干粉。进一步地，复合益生菌包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌及长双歧杆菌中的至少一种。其中，植物乳杆菌为植物乳杆菌r-1012；瑞士乳杆菌为瑞士乳杆菌r-52；长双歧杆菌为长双歧杆菌r-175。更进一步地，复合益生菌包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌及长双歧杆菌，其中，按菌落形成单位计，植物乳杆菌与瑞士乳杆菌、长双歧杆菌的活菌数比为1:4:6～1:6:9。具体地，植物乳杆菌与瑞士乳杆菌、长双歧杆菌的活菌数比为1:4.7:7.3。其中，富硒酵母能够补充体内的硒元素。进一步地，富硒酵母的质量份数为3.33份。具体地，富硒酵母为富硒酵母粉。其中，植物酵素含有人体需要的各种酵素、寡糖及多种维他命和矿物质，又可产生丰富的sod抗氧化酶成分，提高体内抗氧化能力，进而增强免疫力。进一步地，植物酵素的质量份数为7份。具体地，植物酵素为蔬果植物酵素粉。其中，低聚果糖作为益生元，有利于肠道有益菌的生长繁殖及肠道健康。进一步地，低聚果糖的质量份数为50份。需要说明的是，上述益生菌组合物还包括21份～27份的麦芽糊精。麦芽糊精能够使益生菌组合物更易于吸收。进一步地，麦芽糊精的质量份数为24份。需要说明的是，上述益生菌组合物还包括7份～13份的香蕉粉。香蕉粉能够改善益生菌组合物的口感。进一步地，香蕉粉的质量份数为10份。上述益生菌组合物至少具有如下优点：1)上述益生菌组合物中的复合益生菌能够补充肠道益生菌，低聚果糖作为益生元，有利于肠道有益菌的生长繁殖及肠道健康，富硒酵母能够补充体内的硒元素，植物酵素能够提高体内抗氧化能力。通过复合益生菌、低聚果糖、富硒酵母及植物酵素的协同作用，并控制复合益生菌中的活菌数量，上述益生菌组合物不仅能够改善肠道微生物平衡，而且还能够显著提高免疫力。2)上述益生菌组合物中还添加了麦芽糊精和香蕉粉，而使益生菌组合物的口感好，营养成分易于吸收。一实施方式的益生菌组合物的制备方法，为上述益生菌组合物的其中一种制备方法，按重量份数计，包括以下步骤：将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖混合，得到益生菌组合物，其中，所述复合益生菌中的活菌数为2.5×1010cfu/g～5.5×1010cfu/g。其中，复合益生菌为冻干粉。进一步地，复合益生菌中的活菌数为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g。具体地，复合益生菌的质量份数为5.67份。进一步地，复合益生菌包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌及长双歧杆菌中的至少一种。其中，植物乳杆菌为植物乳杆菌r-1012；瑞士乳杆菌为瑞士乳杆菌r-52；长双歧杆菌为长双歧杆菌r-175。更进一步地，复合益生菌包括植物乳杆菌、瑞士乳杆菌及长双歧杆菌，其中，按菌落形成单位计，植物乳杆菌与瑞士乳杆菌、长双歧杆菌的活菌数比为1:4:6～1:6:9。具体地，植物乳杆菌与瑞士乳杆菌、长双歧杆菌的活菌数比为1:4.7:7.3。进一步地，富硒酵母的质量份数为3.33份。具体地，富硒酵母为富硒酵母粉。进一步地，植物酵素的质量份数为7份。具体地，植物酵素为蔬果植物酵素粉。进一步地，低聚果糖的质量份数为50份。进一步地，将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖混合的步骤之前，还包括将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖干燥、过筛的步骤。具体地，干燥的步骤为：在50℃～70℃的条件下，将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖干燥至水分含量低于3％。具体地，过筛的步骤中，筛网的目数为50目～70目。需要说明的是，将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖混合的步骤中，还包括加入了21份～27份的麦芽糊精。进一步地，麦芽糊精的质量份数为24份。需要说明的是，将4份～7份的复合益生菌、2份～5份的富硒酵母、5份～9份的植物酵素及45份～55份的低聚果糖混合的步骤中，还包括加入了7份～13份的香蕉粉。进一步地，香蕉粉的质量份数为10份。上述益生菌组合物的制备方法简单易操作，适于工业化生产。上述的益生菌组合物或上述的益生菌组合物的制备方法制得的益生菌组合物在制备保健食品中的应用。比如，在制备富硒食品中的应用。一实施方式的保健食品包括上述的益生菌组合物或上述的益生菌组合物的制备方法制得的益生菌组合物和食品添加剂。该保健食品可以为含片、咀嚼片或固体饮料，不但具有通便，提高免疫力的作用，而且口感好，营养成分易于吸收。一实施方式的保健食品的制备方法，包括步骤：将上述的益生菌组合物或上述的益生菌组合物的制备方法制得的益生菌组合物与食品添加剂混合，得到保健食品。该保健食品的制备方法简单易操作，适于工业化生产。以下为具体实施例部分：实施例1本实施例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取0.43份植物乳杆菌r1012、2.02份瑞士乳杆菌r-52、3.22份长双歧杆菌r-175、3.33份富硒酵母粉、7份蔬果植物酵素粉、50份低聚果糖、24份麦芽糊精及10份香蕉粉等原料，其中，植物乳杆菌r-1012、瑞士乳杆菌r-52及长双歧杆菌r-175的活菌数均为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g；2)将上述原料在60℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为60目。实施例2本实施例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取0.43份植物乳杆菌r1012、2.02份瑞士乳杆菌r-52、3.22份长双歧杆菌r-175、2.5份富硒酵母粉、7份蔬果植物酵素粉、55份低聚果糖、19.83份麦芽糊精及10份香蕉粉等原料，其中，植物乳杆菌r-1012、瑞士乳杆菌r-52及长双歧杆菌r-175的活菌数均为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g；2)将上述原料在60℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为60目。实施例3本实施例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取0.3份植物乳杆菌r1012、1.7份瑞士乳杆菌r-52、2份长双歧杆菌r-175、2份富硒酵母粉、5份蔬果植物酵素粉、45份低聚果糖、21份麦芽糊精及7份香蕉粉等原料，其中，植物乳杆菌r-1012、瑞士乳杆菌r-52及长双歧杆菌r-175的活菌数均为2.5×1010cfu/g～5.5×1010cfu/g；2)将上述原料在50℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为50目。实施例4本实施例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取0.5份植物乳杆菌r1012、2.5份瑞士乳杆菌r-52、4份长双歧杆菌r-175、5份富硒酵母粉、9份蔬果植物酵素粉、55份低聚果糖、27份麦芽糊精及13份香蕉粉等原料，其中，植物乳杆菌r-1012、瑞士乳杆菌r-52及长双歧杆菌r-175的活菌数均为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g；2)将上述原料在70℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为70目。对比例1本对比例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取3.33份富硒酵母粉、7份蔬果植物酵素粉、50份低聚果糖、29.67份麦芽糊精及10份香蕉粉等原料；2)将上述原料在60℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为60目。对比例2本对比例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取0.43份植物乳杆菌r1012、2.02份瑞士乳杆菌r-52、3.22份长双歧杆菌r-175、7份蔬果植物酵素粉、50份低聚果糖、27.33份麦芽糊精及10份香蕉粉等原料，其中，植物乳杆菌r-1012、瑞士乳杆菌r-52及长双歧杆菌r-175的活菌数均为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g；2)将上述原料在60℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为60目。对比例3本对比例的益生菌组合物的制备方法如下：1)按重量份数计，称取0.43份植物乳杆菌r1012、2.02份瑞士乳杆菌r-52、3.22份长双歧杆菌r-175、3.33份富硒酵母粉、50份低聚果糖、24份麦芽糊精及10份香蕉粉等原料，其中，植物乳杆菌r-1012、瑞士乳杆菌r-52及长双歧杆菌r-175的活菌数均为3.5×1010cfu/g～4.5×1010cfu/g；2)将上述原料在60℃的条件下干燥至水分含量低于3％，然后过筛，混合均匀，得到益生菌组合物，其中，筛网的目数为60目。免疫功能测试：(1)实验动物分组和给药选取一定量的鼠龄2月左右，体重20±2g的昆明种小鼠。将小鼠随机分为空白组、试验组和对照组，其中，试验组分为五组，即试验组1、试验组2、试验组3、试验组4及试验组5，每组小鼠20只。空白组每日给37℃温开水灌胃3次；试验组1每日使用实施例1制得的益生菌组合物溶液灌胃3次，该组合物溶液浓度为100mg/kg，以37℃温开水中制备而成，每次灌胃0.5ml；试验组2每日使用实施例2制得的益生菌组合物溶液灌胃3次，该组合物溶液浓度为100mg/kg，以37℃温开水中制备而成，每次灌胃0.5ml；试验组3每日使用对比例1制得的益生菌组合物溶液灌胃3次，该组合物溶液浓度为100mg/kg，以37℃温开水中制备而成，每次灌胃0.5ml；试验组4每日使用对比例2制得的益生菌组合物溶液灌胃3次，该组合物溶液剂量为100mg/kg，以37℃温开水中制备而成，每次灌胃0.5ml；试验组5每日使用对比例3制得的益生菌组合物溶液灌胃3次，该组合物溶液剂量为100mg/kg，以37℃温开水中制备而成，每次灌胃0.5ml；据文献报道，维生素a及其活性衍生物在免疫调节中发挥重要作用，既影响细胞免疫又影响体液免疫，故对照组每日给小鼠维生素a100mg/kg，分3次灌胃。(2)小鼠外周血免疫细胞和腹腔巨噬细胞测定第18天，分别摘取空白组、试验组及对照组的小鼠眼球，采集全部外周血(以小鼠失血性休克为标准)，用tris-nh4ci溶液低渗破坏红细胞后，进行免疫细胞计数，结果如表1所示。随后在洁净工作台上解剖采血后的小鼠，取腹腔巨噬细胞进行计数，结果如表1所示。表1从表1可看出，试验组1和2的小鼠外周血免疫细胞、腹腔巨噬细胞的数量均比空白组和对照组显著增加(p＜0.05)，试验组3～5的小鼠外周血免疫细胞、腹腔巨噬细胞的数量均比空白组和对照组有所增加，但明显少于试验组1和2的小鼠外周血免疫细胞、腹腔巨噬细胞的数量。可见，与对比例1～3相比，实施例1和2制得的益生菌组合物能够更加有效的提高小鼠的免疫力。(3)小鼠脾淋巴细胞转化试验将上述解剖采血后的小鼠的脾脏，制成细胞浓度为1×107/ml的脾细胞悬液，加入白介素-2(il-2)使其终浓度为200iu/ml，加入刀豆蛋白a(cona)使其终浓度分别为5μg/ml，以200μl/孔量将细胞液铺于96孔中进行培养，48h后，用mtt法检测脾淋巴细胞激活情况。(4)小鼠自然杀伤细胞(nk细胞)活性测定取上述脾细胞悬液(效应细胞)传代后24hyac-1细胞，制成细胞浓度为1×105/ml溶液(靶细胞)，取效应细胞、靶细胞各100μl加入96孔培养板中，靶细胞自然释放孔加入靶细胞和培养液各100μl，最大释放孔加入靶细胞和1％np40各100μl，各项分别做3个平行。培养4h后，1500r/min离心5min。每孔吸取100μl上清液于96孔平底培养板中，同时加入100μlldh基质，反应3min，每孔加入30μl1mol/l的hcl，用酶标仪在490nm处测定光密度值(od值)。表2组别小鼠数量(只)脾淋巴细胞激活od570nk细胞活性od570空白组200.12±0.0242±5.3试验组1200.27±0.0154±3.5试验组2200.25±0.0551±4.6试验组3200.20±0.0348±3.7试验组4200.13±0.0443±4.1试验组5200.13±0.0345±4.0对照组200.10±0.0340±3.1从表2可以看出，试验组1和2的小鼠脾淋巴细胞激活数的数量均比空白组和对照组显著增加(p＜0.05)，nk细胞活性显著提高(p＜0.01)，试验组3～5的小鼠的脾淋巴细胞激活数的数量均比空白组和阳性对照组有所增加，nk细胞活性也有所提高，但效果明显不如试验组1～2。可见，与对比例1～3相比，实施例1和2制得的益生菌组合物能够更加有效的提高小鼠的免疫力。以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。当前第1页12