本发明涉及耐高温枯草芽孢杆菌及其应用，属于微生物领域。
背景技术：
：枯草芽孢杆菌是我国农业部批准允许在饲料中直接添加的微生物菌种，广泛用于水产养殖动物生产。然而，在实际应用中，枯草芽孢杆菌的耐高温性能差，由于饲料加工制粒过程中温度（105℃）非常高，容易使枯草芽孢杆菌失活死亡，故枯草芽孢杆菌无法作为饲料添加剂原料直接添加进行饲料制粒，养殖户只能通过手动拌饲的方式应用枯草芽孢杆菌，从而严重影响枯草芽孢杆菌作为水产饲料添加剂在水产养殖中的应用。因此，如何提升枯草芽孢杆菌的耐高温性能具有重要意义。本领域的研究人员一直希望能够开发出可以耐高温（105℃）的同时，还能够促进水产动物生长的枯草芽孢杆菌菌种。技术实现要素：为解决上述技术问题，本发明应用了枯草芽孢杆菌rt105，该枯草芽孢杆菌rt105购于上海海洋大学水生动物病原库。本发明另一方面还提供了上述枯草芽孢杆菌rt105在水产养殖领域的应用。在本发明的一个优选实施方案中，所述枯草芽孢杆菌rt105在水产饲料中的应用。本发明应用了枯草芽孢杆菌rt105，其不仅具有很强的耐高温性能，更重要的是具有促进水产养殖动物生长的效果，可以应用于水产养殖领域或饲料添加剂领域。具体实施方式以下将结合下图所示的具体实施方式对本发明进行详细描述。但这些实施方式并不限制本发明，本领域的普通技术人员根据这些实施方式所做出的结构、方法、或功能上的变换均包含在本发明的保护范围内。现在将参考下图更全面地描述示例实施方式。然而，示例实施方式能够以多种形式实施，且不应被理解为限于在此阐述的实施方式；相反，提供这些实施方式使得本发明将全面和完整，并将示例实施方式的构思全面地传达给本领域的技术人员。下面实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件（例如参考周德庆等著的《微生物学教程》第三版，高等教育出版社）或按照产品说明书进行。一、下面介绍本申请发明人从上海海洋大学水生动物病原库获得本发明所述的枯草芽孢杆菌rt105的耐高温能力验证过程。1）枯草芽孢杆菌rt105的培养：将枯草芽孢杆菌rt105接种于100ml无菌普通营养肉汤培养基的250ml的三角烧瓶中，25℃震荡培养18-24小时后获得的培养液即为枯草芽孢杆菌rt105的培养液。2）枯草芽孢杆菌rt105的耐高温实验：将枯草芽孢杆菌rt105的培养液在105℃水域处理15min，然后接种于100ml无菌普通营养肉汤培养基的250ml的三角烧瓶中，25℃震荡培养18-24小时，观察枯草芽孢杆菌rt105的生长情况。如枯草芽孢杆菌rt105生长良好（培养基混浊），则认为枯草芽孢杆菌rt105具有良好的耐高温性能。二、本发明具有耐高温性能的枯草芽孢杆菌rt105的安全性测定和促进水产动物生长的效果的测定首先，测定枯草芽孢杆菌rt105的安全性：测定方法参照《水质物质对淡水鱼（斑马鱼）急性毒性测定方法》（gb/t13267—1991）进行，具体来说，在盛有100l自来水中进行，每缸放入健康草鱼10尾。试验前分别将菌浓度为1.0×1010cfu/ml的枯草芽孢杆菌rt105的培养液均匀喷洒在草鱼配合饲料上制成菌饵，使枯草芽孢杆菌rt105的终剂量分别为1010cfu/kg饲料、109cfu/kg饲料、108cfu/kg饲料、107cfu/kg饲料、106cfu/kg饲料、105cfu/kg饲料。试验组每天向各水族缸中投喂含枯草芽孢杆菌rt105终剂量为1010cfu/kg饲料、109cfu/kg饲料、108cfu/kg饲料、107cfu/kg饲料、106cfu/kg饲料、105cfu/kg饲料的菌饵，对照组仅投喂空白草鱼配合饲料。然后在连续投喂15天（每天投喂2次，投喂量为鱼体重的1.5%）后的1、2、3、4、5、6、7、8d对鱼体反应能力、游动能力、呼吸能力等指标进行观察，记录各组草鱼的死亡数目及任何不正常的行为，计算枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的lc50，每个浓度设3个平行，试验期间条件控制在24～26℃、do>4mg/l、ph7.2。实验结果参见下表1，枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的安全性测试结果。表1枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的安全性结果以剂量为105cfu/kg饲料-1010cfu/kg饲料连续投喂枯草芽孢杆菌rt10515天，试验组和对照组草鱼也未出现鱼体反应迟钝、侧翻、游动和呼吸能力减弱以及死亡等不正常现象，均生长良好，说明枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的lc50大于1010cfu/kg饲料。最后，在确定了枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的安全性之后，测定本发明的枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的促生长效果。具体来说，设置1个空白对照组、1个低剂量试验组和1个高剂量试验组，每个试验组放入健康草鱼30尾。空白对照组每日投喂草鱼空白配合饲料；低剂量试验组每日投喂草鱼含枯草芽孢杆菌rt105剂量为105cfu/kg饲料的菌饵；高剂量试验组每日投喂草鱼含枯草芽孢杆菌rt105剂量为107cfu/kg饲料的菌饵。每个组的草鱼均连续投喂75d（每天投喂3次，投喂量为鱼总体重的1.5%），试验期间分别测定各组草鱼的初重和末重，计算增重率（增重率（%）=（末重-初重）×100/初重）。试验期间连续曝气，不换水，水温控制在为28℃。实验结果见下表2，枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的促生长测试结果。表2枯草芽孢杆菌rt105对草鱼的促生长结果组别增重率（%）对照组73.65±4.85低剂量组78.36±2.52高剂量组86.38±6.27添加枯草芽孢杆菌rt105剂量为105cfu/kg饲料和107cfu/kg饲料的菌饵均能够提高草鱼的增重率，分别比未投喂枯草芽孢杆菌rt105的对照草鱼的增重率提高了6.40%和17.28%，说明枯草芽孢杆菌rt105的添加明显促进了草鱼的生长。综上，本发明的发明人应用的枯草芽孢杆菌rt105不仅具有很强的耐高温性能，更重要的是具有促进草鱼生长作用的效果。因此，本发明的枯草芽孢杆菌rt105可以应用于水产养殖领域。优选的，本发明的枯草芽孢杆菌rt105可以应用于饲料中促进水产养殖动物的生长。应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施方式中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。上文所列出的一系列的详细说明仅仅是针对本发明的可行性实施方式的具体说明，它们并非用以限制本发明的保护范围，凡未脱离本发明技艺精神所作的等效实施方式或变更均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12