钛-铝-锆金属氧化物
背景技术：
1.霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)是有机基质(例如，食物基质诸如谷物基质)中发现的高度危险的材料。即使在低浓度下，霉菌毒素也可能对人或非人动物有害或甚至致死。
2.美国专利7,731,837中描述了含有元素ti和o的混合金属吸附剂。
技术实现要素：
3.本发明提供了一种ti-al-zr-o金属氧化物，其可具有式ti
x
al
y
zr
z
o
n
，其中x独立地为2-10，y独立地为0.5-6，z独立地为2-10，并且n独立地为2x+3y/2+2z。
4.本发明还提供了一种将霉菌毒素与包含霉菌毒素的基质分离的方法，所述方法可包括使所述基质与选自短链醇以及水和短链醇的混合物的提取剂接触，以将所述霉菌毒素的一部分从所述基质提取到所述提取剂中，以形成上清液，其中所述上清液包含溶解或分散的霉菌毒素；然后可使上清液的至少一部分与ti-al-zr-o金属氧化物接触。
具体实施方式
5.在整个本公开中，为方便起见，常常使用单数形式诸如“一种”、“一个”和“该/所述”；然而，除非上下文明确规定或清楚指示仅为单数，否则单数形式意指包括复数。当单独称为单数时，通常使用术语“仅仅一个”。
6.本公开中的一些术语定义如下。其它术语对于本领域的技术人员将是熟悉的，并且应当被赋予本领域的普通技术人员将赋予它们的含义。
7.术语“常见的”、“典型的”和“通常的”以及“常见地”、“典型地”和“通常”在本文中用于指本发明中经常采用的特征，并且除非明确地对照现有技术使用，否则并不旨在表示这些特征存在于现有技术中，远少于现有技术中那些常见的、通常的或典型的特征。
[0008]“短链醇”以及其复数形式是指直链、环状或支链的低级烷基或低级烯醇化合物。短链醇通常为低级直链或支链低级烷基醇。常见的低级烷基醇具有四个或更少的碳原子，诸如丁醇，例如正丁醇、仲丁醇、异丁醇和叔丁醇；丙醇，诸如正丙醇和异丙醇；乙醇和甲醇。甲醇和乙醇最常用于本公开中，其中甲醇在本公开中比乙醇更频繁地使用。
[0009]“ppb”为本领域已知的术语“份每十亿份”的缩写。
[0010]“ppm”是本领域已知的术语“份每一百万份”的缩写。
[0011]
在本公开中，除非另外指明，否则无论是用词语“百分比”、百分比符号(％)还是其它形式指定，所有百分比均为重量百分比。
[0012]
在本公开中，除非另外指明，否则所有液体比率均为体积比。
[0013]
出于许多原因，检测并特别定量有机基质(例如，食物基质诸如谷物基质)中霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的量是具有挑战性的。一个原因是存在数千、数万或甚至更多的霉菌毒素以外的有机化合物。当霉菌毒素为存在于分散体或溶液中的唯一化合物时，甚至或许能够检测或定量极低水平(诸如20ppb或更少、10ppb或更少、或甚至5ppb或更少)的霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的分析技术也难以应用于有机基质，例如，食物基质诸如谷物基质。
[0014]
因此，在进行进一步分析之前除去霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)以外的一些化合物，且优选地大部分化合物是有利的，且在大多数情况下是必要的。这可通过将霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)与有机基质(例如，食物基质诸如谷物基质)分离来实现。
[0015]
存在进行此类分离的已知方法。例如，mycosep 226 aflazon+系统(可购自美国密苏里州的romer labs(romer labs,mo,usa))需要用溶剂乙腈(有时称为acn)提取食物基质，所述溶剂乙腈在分离后、任意分析进行前必须蒸发至干燥。类似地，puritox total myco-ms系统(可购自英国苏格兰格拉斯哥的r-biopharmltd(r-biopharmltd,glasgow,scotland,uk))需要使用乙腈和冰乙酸两者来制备样品，而且必须在样品通过色谱柱后向样品添加附加稀乙酸和乙腈。
[0016]
本发明人已识别出这些已知方法的若干技术问题。首先，已知方法非常耗力，需要在使样品通过分离柱洗脱之前和之后进行多个步骤。其次，已知方法需要使用对使用者而言昂贵或危险的溶剂和其它试剂，诸如乙酸、乙腈等。因此，可解决的一个技术问题是如何减少食物基质(通常为谷物基质)中残余化合物(即，霉菌毒素以外的化合物，通常为黄曲霉毒素、分析物)的数量，而无需昂贵或危险的溶剂，而是主要使用常见溶剂诸如水和短链醇。可解决的另一个技术问题是使霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)与食物基质(通常为谷物基质)的分离不太耗力。可解决的另一个相关技术问题是如何将霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)与基质(诸如食物基质)分离，而无需在样品通过色谱柱之后进行附加步骤。可解决的另一个技术问题是如何减少将霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)与食物基质(诸如谷物基质)分离所需的量，且特别是所需的稀释量。可解决的又一个相关技术问题在于如何将ti-al-zr-o氧化物用于霉菌毒素与食物基质的分离中。
[0017]
简而言之，这些技术问题以及其它问题可通过使用如本文所述的钛-铝-锆氧化物(ti-al-zr-o金属氧化物)吸附剂，且特别是通过将其用作色谱柱中的固定相来解决。当使用醇或水-醇混合物来提取时，使用该材料允许霉菌毒素或黄曲霉毒素与基质以良好的回收率分离。当使用ti-al-zr-o金属氧化物时，不需要提取物的高度稀释溶液，并且在使提取物通过柱洗脱后，洗脱液可直接用于进一步分析，诸如hplc分析，而无需进一步加工步骤。
[0018]
吸附剂为ti-al-zr-o金属氧化物。通常，其具有化学式ti
x
al
y
zr
z
o
n
，其中独立地为2-10，y独立地为0.5-6，z独立地为2-10，并且n独立地为2x+3y/2+2z。在一些情况下，x独立地为6-10，y独立地为0.5-4，z独立地为6-10，并且n独立地为2x+3y/2+2z。在该式中，x的特定值可为2或更大、2.5或更大、3或更大、3.5或更大、4或更大、4.5或更大、5或更大、5.5或更大、6或更大、6.5或更大、7或更大、7.5或更大、8或更大、8.5或更大、9或更大、9.5或更大。x的特定值也可为10或更小、9.5或更小、9或更小、8.5或更小、8或更小、7.5或更小、7或更小、6.5或更小、6或更小、5.5或更小、5或更小、4.5或更小、4.0或更小、3.5或更小、3.0或更小、或2.5或更小。y的特定值可为0.5或更大、1或更大、1.5或更大、2或更大、2.5或更大、3或更大、3.5或更大、4.0或更大、4.5或更大、5.0或更大、或5.5或更大。y的特定值可为6或更小、5.5或更小、5或更小、4.5或更小、4或更小、3.5或更小、3或更小、2.5或更小、2或更小、1.5或更小、或1或更小。在该式中，z的特定值可为2或更大、2.5或更大、3或更大、3.5或更大、4或更大、4.5或更大、5或更大、5.5或更大、6或更大、6.5或更大、7或更大、7.5或更大、8或更大、8.5或更大、9或更大、9.5或更大。x的特定值也可为10或更小、9.5或更小、9或更小、8.5或更小、8或更小、7.5或更小、7或更小、6.5或更小、6或更小、5.5或更小、5或更小、4.5或更小、
4.0或更小、3.5或更小、3.0或更小、或2.5或更小。最常见地，x为3-5，并且在特定情况下为4-5。最常见地，y为0.75-3，并且甚至更常见地0.75-2.5。最常见地，z为2至5，并且甚至更常见地2至4。在某些情况下，所述ti-al-zr-o金属氧化物具有化学式ti8al2zr8o
35
。在某些情况下，所述ti-al-zr-o金属氧化物具有化学式ti
4.7
alzr
2.5
o
15.9
。
[0019]
所述ti-al-zr-o金属氧化物吸附剂可通过任意合适方法来制备。通常，在溶液中，诸如在水性溶液中，通过ti、al和zr的盐的反应来制备所述吸附剂。在许多情况下，还使用了还原剂。尿素是典型的还原剂，但在一些情况下也可使用其它还原剂，诸如，氢化物源诸如lalh、硼氢化钠或林德拉催化剂、氨、二硼烷、连二硫酸盐、硫代硫酸盐、肼、dibal-h、还原糖、亚磷酸盐诸如次磷酸盐、二硫苏糖醇、氰化物和三-2-羰基乙基膦盐酸盐(tcep)。最常见地，使用水溶性还原剂，使得可通过用水洗涤产物来除去任何残余的还原剂。尿素最常用作还原剂。
[0020]
可在室温下制备金属盐与还原剂(最常见的是尿素)的含水分散体。金属盐通常以适当的化学计量包含具有以下氧化态的金属：ti(iv)、al(iii)和zr(iv)。然而，可以使用这些金属的其它氧化态，在这种情况下，金属可被原位氧化或还原以形成最终产物。可将所述分散体加热到足以支持试剂之间的化学反应的温度。通常将所述分散体加热到介于75℃与水的沸点之间的温度(由于溶解的材料，该温度可大于100℃)。最常见地，该温度将介于90℃与100℃之间。可将所述分散体保持足以完成反应的时间，通常介于1与6小时之间，但是根据所用的特定盐、盐的浓度、水的离子强度和其它因素，可能需要更长或更短的时间段。在反应完成后，可将所述分散体冷却到室温，并且例如通过滗析或通过过滤来收集所得粉末。然后可例如用有机溶剂、环境温度的去离子水或这两者来洗涤所述粉末，以除去杂质。最后，通常可将所述粉末在介于200℃与800℃之间的温度下煅烧1至8小时，以便获得所述ti-al-zr-o金属氧化物。
[0021]
所述ti-al-zr-o金属氧化物可用于将霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)与基质(例如，食物基质诸如谷物基质)分离的方法中。当食物基质为谷物基质时，所述基质通常包括下列中的一种或多种：玉米基质、小麦基质、大麦基质、斯佩耳特小麦基质、稻基质、黑麦基质、燕麦基质等。虽然所述方法可与这些或其它食物基质一起使用，但是由于玉米基质作为动物饲料的工业重要性，故其是最常用的。
[0022]
霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的分离不需要将霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)以外的所有化合物都保留在吸附剂上，也不需要霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)具有任何特定纯度。相反，如果霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)足够纯，使得其可被可靠地检测和分析，并且优选地被定量，而不会有不适当的机会将其误认为是另一种化合物，则认为分离成功。
[0023]
为了实现分离，可任选地将基质研磨成小颗粒。使可任选地研磨的基质团块(最常见地，已知团块)与短链醇，或更常见地水和短链醇的混合物接触。水和短链醇的混合物可为适于从基质可靠地提取霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的任意混合物。合适的混合物最常具有20％至80％的短链醇。示例性混合物可具有20％或更多、25％或更多、30％或更多、35％或更多、40％或更多、45％或更多、50％或更多、55％或更多、60％或更多、65％或更多、70％或更多、或甚至75％或更多的短链醇。示例性混合物可具有80％或更少、75％或更少、70％或更少、65％或更少、60％或更少、55％或更少、50％或更少、45％或更少、40％或更少、35％或更少、30％或更少、或甚至25％或更少的短链醇。典型的混合物具有30％至70％的短链
醇，r，并且甚至更典型地40％至60％，诸如45％至55％或甚至50％的短链醇。
[0024]
可使用任意合适的短链醇。通常选择短链醇使得其与水在短链醇/水混合物中形成溶液。通常，使用甲醇或乙醇。甲醇是最常见的。
[0025]
所述水和短链醇的混合物中可能存在少量其它化学物质或溶剂。例如，将变性乙醇或摩擦醇(两者通常包含少量其它溶剂，诸如，芳族溶剂如苯或甲苯，酮溶剂诸如丙酮或甲基乙基酮，或酯溶剂诸如乙酸乙酯或乙酸丁酯)用作短链醇，则在使用前不必将此类附加溶剂从所述变性乙醇或摩擦醇中除去。因此，当需要短链醇或者水和短链醇的混合物时，应当理解，也可存在通常不超过痕量的一些其它溶剂，通常是由于它们作为短链醇中的杂质存在。
[0026]
使基质与短链醇或者水和短链醇的混合物接触通常包括将短链醇或者水和短链醇的混合物以及基质置于容器中并搅拌容器。搅拌可经由摇动(诸如手动摇动或在自动摇动器上摇动)、超声处理、搅动等方式进行。短链醇或者水和短链醇的混合物的量可为任意合适的量。最合适的量将可靠地从基质中提取全部或基本上全部霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)。可采用多次提取，也可采用索氏提取以及分离领域中用于从固体中提取材料的其它技术。
[0027]
可通过任意合适的方式将来自基质的固体与上清液分离。在一些情况下，可使用滗析或过滤。当使用滗析时，通常在离心或超速离心之前进行。
[0028]
可使上清液与ti-al-zr-o金属氧化物接触。这可按任意合适的方式完成。例如，可以将ti-al-zr-o金属氧化物的粉末与上清液混合，并例如通过摇动或超声处理来搅拌该混合物。然后可例如通过滗析或过滤从液体上清液中除去ti-al-zr-o。
[0029]
更常见地，使ti-al-zr-o金属氧化物与上清液接触的步骤通过由ti-al-zr-o金属氧化物制备柱并使上清液通过柱来实现。ti-al-zr-o材料的柱可通过任意合适的方法制备。通常，所述柱是干法填充的或溶剂填充的。当采用溶剂填充时，可采用的典型溶剂包括水或者水和乙酸乙酯的混合物、水和乙酸丁酯的混合物、或者水和乙腈的混合物。
[0030]
所述柱应具有足够质量的ti-al-zr-o金属氧化物，并且应具有足够长度以实现霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的良好分离，如本文所述。所述柱中ti-al-zr-o金属氧化物的质量可为足以分离霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的任意质量。ti-al-zr-o金属氧化物的质量将取决于霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)与其分离的基质的质量。在大多数情况下，ti-al-zr-o金属氧化物的质量是基质的质量的两倍或更多倍。当需要实现良好分离时，可使用更大质量的ti-al-zr-o金属氧化物，诸如基质质量的三倍或更多倍、四倍或更多倍、或甚至五倍或更多倍。在一些情况下，也可使用较少质量的ti-al-zr-o金属氧化物。所述柱的高度可变化，但通常为每ml待置于柱上的液体至少2mm高。在许多情况下，所述柱的高度可为5mm
–
7mm/ml待置于柱上的液体。
[0031]
用于柱分离的流动相可为足以通过柱洗脱霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的任意溶剂体系。然而，应优选地对溶剂进行选择使得其不会通过柱洗脱大数量或大量的其它化合物，使得不会实现霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的分离。然而，在一些情况下，从柱洗脱大数量或大量的其它化合物是可接受的，因为许多或大多数这些其它化合物仍可经由以下方式与霉菌毒素分离：收集在不同时间通过柱的洗脱液级分，并且仅保留含有霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的那些级分。另外，当不干扰霉菌毒素检测或不能误认为霉菌毒素的化合物的存
在将不干扰霉菌毒素的检测或定量时，可将这些化合物从柱上洗脱下来。此类化合物的种类和可接受量将取决于所用的检测方法。
[0032]
用于流动相的典型溶剂是水和极性有机溶剂的混合物。通常，将选择有机溶剂的种类和量以与水形成溶液。示例性有机溶剂包括丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙腈、二甲基亚砜、四氢呋喃、二乙醚等。最常见地，水和极性有机溶剂的混合物主要为水，诸如水含量为50％或更大、60％或更大、70％或更大、80％或更大、90％或更大、或甚至95％或更大的那些混合物。乙腈是最常用的极性有机溶剂。水乙腈混合物中的水量通常为80％至99％，最常见为85％至95％，并且在许多情况下为90％。
[0033]
可将附加吸附剂与柱中的ti-al-zr-o金属氧化物混合。当使用附加吸附剂时，其通常为其它金属化合物。可使用的示例性附加吸附剂包括美国专利7,731,837中公开的那些。当使用附加吸附剂时，其经选择以便例如不通过吸附、吸收、或其它物理或化学过程从上清液中除去霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)。当使用附加吸附剂时，其可以ti-al-zr-o金属氧化物和附加吸附剂的混合物的百分比形式以任意合适的量存在。当使用附加吸附剂时，其示例性量为基于ti-al-zr-o金属氧化物和附加吸附剂的总质量计0.5％或更大、1％或更大、2.5％或更大、5％或更大、10％或更大、15％或更大、20％或更大、或甚至25％或更大。当使用附加吸附剂时，其示例性量为基于ti-al-zr-o金属氧化物和附加吸附剂的总质量计30％或更少、25％或更少、20％或更少、15％或更少、10％或更少、5％或更少、2.5％或更少、1％或更少、或甚至0.5％或更少。
[0034]
在如本文所述进行分离后，可分析上清液(在使用ti-al-zr-o金属氧化物柱的情况下其可被描述为洗脱液)中霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的存在或量。在许多情况下，仅需要分析上清液的一部分；这将取决于上清液中霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的浓度和所采用的特定分析方法。
[0035]
霉菌毒素的量可为上清液中霉菌毒素的质量，但通常是上清液中霉菌毒素的浓度。当上清液是提取液体的已知级分并且基质的质量是已知的时，则一旦确定上清液中霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的量，就可通过量纲分析来确定基质中霉菌毒素(诸如黄曲霉毒素)的量。
[0036]
可采用任意合适的分析方法。常用液相色谱法，包括hplc。hplc可以柱和流动相的任意合适组合进行。通常使用疏水柱诸如c-18柱，并且流动相通常为水和乙腈的混合物。可使用其它柱和流动相，这取决于特定的霉菌毒素、保留在上清液中的其它化合物的性质以及其它相关因素。检测可通过任意合适的方式进行，最常见的是uv/vis吸光度，但可使用其它技术，诸如发光检测、折射率检测等。
[0037]
分析还可通过hplc以外的技术进行，诸如质谱(ms)、核磁共振光谱(nmr)、红外光谱(ir)、或联用技术诸如hplc-ms。
[0038]
呈现以下示例性实施方案以示出本公开的特定方面，并且这些实施方案不旨在进行限制。还公开了其它实施方案。
[0039]
1.一种ti-al-zr-o金属氧化物，其具有式ti
x
al
y
zr
z
o
n
，其中x独立地为2-10，y独立地为0.5-6，z独立地为2-10，并且n独立地为2x+3y/2+2z。
[0040]
2.根据实施方案1所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中x独立地为6-10，y独立地为0.5-4，z独立地为6-10，并且n独立地为2x+3y/2+2z。
[0041]
3.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中x为2或更大、2.5或更大、3或更大、3.5或更大、4或更大、4.5或更大、5或更大、5.5或更大、6或更大、6.5或更大、7或更大、7.5或更大、8或更大、8.5或更大、9或更大、9.5或更大。
[0042]
4.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中x为10或更小、9.5或更小、9或更小、8.5或更小、8或更小、7.5或更小、7或更小、6.5或更小、6或更小、5.5或更小、5或更小、4.5或更小、4.0或更小、3.5或更小、3.0或更小、或2.5或更小。
[0043]
5.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中y为0.5或更大、1或更大、1.5或更大、2或更大、2.5或更大、3或更大、3.5或更大、4.0或更大、4.5或更大、5.0或更大、或5.5或更大。
[0044]
6.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中y为6或更小、5.5或更小、5或更小、4.5或更小、4或更小、3.5或更小、3或更小、2.5或更小、2或更小、1.5或更小、或1或更小。
[0045]
7.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中z为2或更大、2.5或更大、3或更大、3.5或更大、4或更大、4.5或更大、5或更大、5.5或更大、6或更大、6.5或更大、7或更大、7.5或更大、8或更大、8.5或更大、9或更大、9.5或更大。
[0046]
8.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中z为10或更小、9.5或更小、9或更小、8.5或更小、8或更小、7.5或更小、7或更小、6.5或更小、6或更小、5.5或更小、5或更小、4.5或更小、4.0或更小、3.5或更小、3.0或更小、或2.5或更小。
[0047]
9.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中x为3-5，任选地4-5。
[0048]
10.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中y为0.75-3，任选地0.75-2.5。
[0049]
11.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中，z为2至5，任选地2至4。
[0050]
12.根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物，其中所述ti-al-zr-o金属氧化物具有化学式ti4.7alzr
2.5
o
15.9
。
[0051]
13.一种将霉菌毒素与包含霉菌毒素的基质分离的方法，所述方法包括
[0052]
使所述基质与选自短链醇以及水和短链醇的混合物的提取剂接触，以将所述霉菌毒素的一部分从所述基质提取到所述提取剂中，以形成上清液，其中
[0053]
所述上清液包含溶解或分散的霉菌毒素；
[0054]
使上清液的至少一部分与根据前述实施方案中任一个所述的ti-al-zr-o金属氧化物接触。
[0055]
14.根据实施方案13所述的方法，还包括磨削所述基质的步骤，其中所述磨削步骤在所述使基质与提取剂接触的步骤之前进行。
[0056]
15.根据实施方案13至14中任一个所述的方法，其中所述基质为食物基质。
[0057]
16.根据实施方案15所述的方法，其中所述基质为谷物基质。
[0058]
17.根据实施方案16所述的方法，其中所述谷物基质包括下列中的一种或多种：玉米基质、小麦基质、大麦基质、斯佩耳特小麦基质、稻基质、黑麦基质、燕麦基质。
[0059]
18.根据实施方案17所述的方法，其中所述谷物基质包括玉米基质。
[0060]
19.根据实施方案17所述的方法，其中所述谷物基质包括小麦基质。
[0061]
20.根据实施方案17所述的方法，其中所述谷物基质包括大麦基质。
[0062]
21.根据实施方案17所述的方法，其中所述谷物基质包括斯佩耳特小麦基质。
[0063]
22.根据实施方案17所述的方法，其中所述谷物基质包括黑麦基质。
[0064]
23.根据实施方案17所述的方法，其中所述谷物基质包括燕麦基质。
[0065]
24.根据实施方案13至23中任一个所述的方法，其中所述霉菌毒素为黄曲霉毒素。
[0066]
25.根据实施方案24所述的方法，其中所述黄曲霉毒素为黄曲霉毒素b1。
[0067]
26.根据实施方案13至25中任一个所述的方法，其中所述霉菌毒素为脱氧瓜萎镰菌醇。
[0068]
27.根据实施方案13至26中任一个所述的方法，其中所述使上清液的至少一部分与ti-al-zr-o金属氧化物接触的步骤包括使所述上清液的至少一部分通过所述ti-al-zr-o金属氧化物的柱洗脱。
[0069]
28.根据实施方案13至27中任一个所述的方法，还包括分析所述上清液的至少一部分中霉菌毒素的存在或量的步骤，其中所分析的上清液的至少一部分是与所述ti-al-zr-o金属氧化物接触的上清液的至少一部分的全部或一部分；以及
[0070]
所述分析步骤在所述使上清液与ti-al-zr-o金属氧化物接触的步骤之后进行。
[0071]
29.根据实施方案28所述的方法，其中
[0072]
经历所述分析步骤的上清液的至少一部分的液体组分在所述分析步骤之前未蒸发。
[0073]
实施例
[0074]
制备例1
[0075]
在研磨机(可以商品名“romer series ii mill”购自奥地利的romer labs gmbh(romer labs gmbh,austria))中研磨干燥的大田玉米。将五克玉米粉添加至25ml的1:1甲醇水溶液，并且通过重复倒置来摇动5分钟。将等分试样以>5,000rpm离心，并且在使用前滗析上清液以除去固体。
[0076]
实施例1-4
[0077]
将尿素(60.0g)与足够的水一起添加至烧杯以制备600ml溶液。将化学计量量的tioso4·
2h2o、al(no3)3·
9h2o和zro(no3)2·
xh2o添加至烧杯，并且在搅动下将反应加热到94℃。94℃下2小时后，使反应混合物冷却到室温，并且固体通过过滤收集，用去离子水洗涤，并且干燥。然后将粉末在500℃下煅烧4小时以获得产物。产物中金属离子的化学计量比(基于反应混合物中金属的摩尔比)示于表1中。
[0078]
实施例编号tialzr1411241234144418
[0079]
实施例3的icp分析得到实际化学式ti
4.7
alzr
2.5
o
15.9
。
[0080]
实施例5
[0081]
通过以下方式制备ti-al-zr-o金属氧化物柱：取5.5mm聚丙烯管，用含有粉末的聚
丙烯膜密封一端，并且干燥添加100mg实施例3的产物。通过添加1ml去离子水，以>2,000rpm离心5分钟，添加1ml 50％甲醇，并且以>2,000rpm离心5分钟来洗涤柱。在使用前将柱干燥。
[0082]
将得自制备例1的玉米提取物的1ml等分试样掺以10ppm脱氧瓜萎镰菌醇并添加至ti-al-zr-o金属氧化物柱。将柱置于接收管中并以>5,000rpm离心直至所有液体通过床。然后使用以下条件通过hplc分析洗脱液：
[0083]
流量：0.600ml/min
[0084]
注入体积：35微升
[0085]
柱：c 18 3
×
150mm 3.5微米(可以商品名zorbax eclipse plus购得)
[0086]
柱温：25℃
[0087]
检测器：uv(218nm)
[0088]
流动相：9:1水:乙腈
[0089]
运行时间：7分钟
[0090]
洗脱图显示4.1分钟处的清晰峰，其对应于脱氧瓜萎镰菌醇。峰是基线至基线可见的，在峰的前端或尾端与洗脱图中的任意其它峰之间没有重叠。所分析的等分试样中的脱氧瓜萎镰菌醇浓度为10.391，这相当于在分析技术的误差内完全回收脱氧瓜萎镰菌醇(105％计算的回收)。
[0091]
比较例1
[0092]
在romer series ii mill研磨机中研磨干燥的大田玉米。将五克玉米粉添加至25ml的sds提取溶液(描述于maragos,c.m.，2008年，“使用十二烷基硫酸钠(sds)水性溶液从玉米中提取黄曲霉毒素b1和g1”，《官方分析化学家国际杂志》，第91卷，第4期，第762-767页(maragos,c.m.,2008extraction of aflatoxin b1 and g1 from maize using aqueous sodium didecylsulfate(sds),journal of association of official analytical chemists international,91(4):762-767))。通过重复倒置来将混合物摇动5分钟，并且掺以10ppm脱氧瓜萎镰菌醇。将提取物的等分试样以>5,000rpm离心并且滗析上清液以除去任何固体。将上清液的1ml部分添加至1ml hplc级乙腈。一旦将ml的所得混合物施加至可以商品名“mycosep”以目录号cocmy2230购自romer的柱。将柱置于接收管中并以>5,000g离心直至所有液体通过柱。洗脱液用1:1的50％甲醇稀释，然后使用如相对于实施例2所述的相同条件通过hplc进行分析。
[0093]
洗脱图示出4.1分钟处与前沿峰强烈重叠的脱氧瓜萎镰菌醇峰。由于这种重叠，未进行脱氧瓜萎镰菌醇浓度的定量。
[0094]
实施例6
[0095]
ti-al-zr-o柱基本上如实施例2所述来制备，但使用240mg而不是100mg实施例4的产物。
[0096]
将制备例1的玉米提取物掺以500ppb黄曲霉毒素b1。将所得溶液的1ml部分添加至ti-al-zr-o柱。将柱置于接收管中并以>5,000rpm离心直至所有液体通过柱。在以下条件下通过hplc分析洗脱液：
[0097]
流量：0.500ml/min
[0098]
注入体积：20微升
[0099]
柱：c 18 3
×
150mm 3.5微米(可以商品名zorbax eclipse plus购得)
[0100]
柱温：25℃
[0101]
检测器：荧光(365nm激发；435nm检测)
[0102]
流动相：1:1:2甲醇:乙腈:水
[0103]
运行时间：10分钟
[0104]
所得洗脱图示出7分钟处与黄曲霉毒素b1相对应的清晰可检测的峰。峰是基线至基线可见的，在峰的前端或尾端与洗脱图中的任意其它峰之间没有重叠。所分析的等分试样中的黄曲霉毒素b1浓度为掺料提取物的原始浓度的97％。
[0105]
比较例2
[0106]
基本上如比较例1所述制备、提取、处理干燥的玉米基质并使其通过柱，不同的是柱以商品名mycosep 226afalzon+获得。将洗脱液如比较例1所述进行稀释，并且在依实施例3所述条件下通过hplc进行分析。
[0107]
所得洗脱图示出7分钟处与黄曲霉毒素b1相对应的清晰可检测的峰。峰是基线至基线可见的，在峰的前端或尾端与洗脱图中的任意其它峰之间没有重叠。所分析的等分试样中的黄曲霉毒素b1浓度为掺料提取物的原始浓度的100％。