一种用于预防犬先兆性流产的犬粮及其制备方法与流程

本发明涉及宠物饲养管理技术领域，尤其涉及一种用于预防犬先兆性流产的犬粮及其制备方法。

背景技术：

犬妊娠期的各种不良因素可能引起胎儿发育障碍、胎儿死亡及母体生理机能障碍，从而导致流产的发生，甚至危及母体的生命。所以，流产的诊断、防治及相关保胎安胎产品的研发对保障犬正常的繁殖机能具有重要的科学意义。在该研究领域，国内外目前主要以激素疗法和抗生素疗法为主，但激素疗法存在毒副作用大，抗生素疗法存在疗效不确切的问题。目前尚未有防治犬流产的商品化犬粮投入生产和应用。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题是提供一种提高产子率、疗效确切、毒副作用小且质量可控的用于预防犬先兆性流产的犬粮。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法。

为解决上述问题，本发明所述的一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，其特征在于：该犬粮由下述重量份的原料制成：脱水鸡肉30~45份，玉米粉20~30份，蛋黄粉8~10份，鸡肝5~8份，炒亚麻籽10~20份，炒黄芩2~5份、炒白术2~5份、黄芪3~6份、杜仲1~4份、党参3~6份、当归1~4份、甘草2~4份。

该犬粮由下述重量份的原料制成：脱水鸡肉35~45份，玉米粉20~25份，蛋黄粉8~10份，鸡肝5~8份，炒亚麻籽10~15份，炒黄芩4~5份、炒白术4~5份、黄芪4~5份、杜仲3~4份、党参4~5份、当归3~4份、甘草2~4份。

该犬粮由下述重量份的原料制成：脱水鸡肉40份，玉米粉20份，蛋黄粉8~10份，鸡肝5~8份，炒亚麻籽12份，炒黄芩4份、炒白术4份、黄芪5份、杜仲3份、党参4份、当归3份、甘草4份。

如上所述的一种用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法，包括以下步骤：

⑴按配比称量；

⑵将炒黄芩、炒白术、黄芪、杜仲、党参、当归、甘草混合后，经水煎、离心过滤，即得中药液；

⑶所述中药液于60℃浓缩，即得相对密度为1.13~1.15的清膏；

⑷所述清膏中加入润湿剂和粘合剂，经制粒、喷雾干燥，即得水分含量为2%~4%的中药颗粒；所述清膏与所述润湿剂的质量比为1：0.05~0.1；所述清膏与所述粘合剂的质量比为1：0.1~0.3；

⑸将脱水鸡肉、玉米粉、蛋黄粉、鸡肝、亚麻籽粉经充分搅拌并混合均匀后，加入所述中药颗粒，搅拌混匀，所得混合物料经膨化处理后烘干，并喷涂成相应形状，即得用于预防犬先兆性流产的犬粮。

所述步骤⑵中水煎的条件是指料液比为1：8~12，煎煮次数为2次，每次20min。

所述步骤⑵中离心过滤的条件是指速率为1000r/min~2000r/min，时间为5~10min。

所述步骤⑷中喷雾干燥室进口温度为180~220℃，干燥温度为60~80℃，时间为5s。

所述步骤⑷中润湿剂是指无水乙醇。

所述步骤⑷中粘合剂是指糊精。

所述步骤⑸中烘干条件是指温度为65℃，时间为60~100min。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明方中的黄芩具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎的功效，为君药；白术具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效，为臣药；黄芪具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效，为臣药；杜仲具有补肝肾，强筋骨，安胎，为传统保胎用药，为臣药；党参具有健脾益肺，养血生津，对气血虚弱引起的先兆性流产有良好作用，为佐药；当归具有补血活血、调经止痛、润肠通便，对气血失调引起的胎动不安有良好的效果，为使药；甘草具有补脾、益气、调和作用，为使药。经药效学实验证明，可以有效提高产子率且疗效确切、毒副作用小、质量可控。

【急性毒性试验】

通过研究本发明中药颗粒对小鼠的急性毒性作用，考察其安全性。通过预试验无法得出本发明中药颗粒溶液一次灌胃引起小鼠死亡剂量，故无法测出ld50。正式试验采用测定一日最大耐受量方法，观察小鼠经口灌服本发明中药颗粒溶液的毒性反应和死亡情况（参见表1）。结果发现，试验进行7天后小鼠全部存活，体重及精神状态与对照组比较，无显著性差异，解剖后主要脏器无任何病理变化。结果表明，小鼠经口灌服本发明中药颗粒是安全的。

表1预实验处理方法及试验结果

【长期毒性试验】

取wistar系大鼠80只，随机分为4组，每组20只，雌、雄各半，分别为本发明中药颗粒溶液高、中、低剂量组和空白对照组。高、中、低剂量组给予大鼠灌服12g/kg、6g/kg、3g/kg的本发明中药颗粒溶液（约相当于原药材37.62g/kg、18.81g/kg、9.41g/kg体重的给药剂量），每天一次，连续给药30天；空白对照组灌服等剂量生理盐水。试验期间观察各组大鼠的精神、行为、采食量、二便和死亡等情况。给药前、给药期间每10天、停药后第15天称量体重变化。在试验期的第30天和第45天每组分别处死10只大鼠，进行血液学、血液生化、脏器指数测定。如表2、3、4所示，试验结果表明，试验组与对照组相比，未见有明显药物所致的毒性反应。结果表明，较大剂量和较长疗程服用本发明中药颗粒溶液是无毒的，表明本发明中药颗粒在实际使用上是安全的。

表2本发明中药颗粒给药30天及停药15天各组血液学指标（）

表3本发明中药颗粒给药30天及停药15天各组血液生化指标（）

表4本发明中药颗粒对主要脏器系数的影响（）

【保胎试验】

动物分组及给药

大鼠雌雄分开适应性饲养一周以上，选择性成熟大鼠夜间19点以后1:1合笼，次日凌晨7点以前观察大鼠受精情况，记录出现阴栓的雌鼠为妊娠第0天。将妊娠大鼠随机分成a(正常妊娠组)、b(中药低剂量组)、c(中药中剂量组)、d(中药高剂量组)、e(黄体酮组)、f(先兆流产模型组)，每组10只，组间大鼠体重无明显差异。在妊娠第7天，b、c、d、e、f组分别用米非司酮8.3mg/kg和米索前列醇100g/kg灌胃造成先兆流产模型。在雌鼠阴道中放入小团棉球，通过潜血检测棉球中的bld（隐血）呈现阳性即为造模成功。

第一组：大鼠10只，自妊娠第一日连续灌服生理盐水，剂量与给药组等量；

第二组：大鼠10只，自妊娠第一日连续灌服复方中药，3g/kg/d，于第7天用米非司酮8.3mg/kg和米索前列醇100g/kg灌胃；

第三组：大鼠10只，自妊娠第一日连续灌服复方中药，6g/kg/d，于第7天用米非司酮8.3mg/kg和米索前列醇100g/kg灌胃；

第四组：大鼠10只，自妊娠第一日连续灌服复方中药，12g/kg/d，于第7天用米非司酮8.3mg/kg和米索前列醇100g/kg灌胃；

第五组：大鼠10只，自妊娠第一日连续灌服等效剂量的黄体酮2mg/kg/d，于第7天用米非司酮8.3mg/kg和米索前列醇100g/kg灌胃；

第六组：大鼠10只，自妊娠第一日连续灌服生理盐水，剂量与给药组等量；于第7天用米非司酮8.3mg/kg和米索前列醇100g/kg灌胃。

保胎实验结果

⑴本发明中药颗粒对大鼠保胎率的影响：

表5妊娠大鼠体重与活胎率

注：**为差异显著(p<0.05)，***为差异极显著(p<0.01)（下图同）。活胎率为该组出生胎儿数量占出生胎儿总数的比例。

如表5所示，统计结果显示，正常妊娠组大鼠造模后体重变化极显著高于先兆流产组，(p<0.01)，其他各剂量组均显著低于正常妊娠组(p<0.05)；模型组平均活胎数为1.37，显著低于其他各组(p<0.05)，灌服高剂量中药后，平均活胎数提高至8.87，与正常妊娠组平均活胎数12.12差异不显著(p>0.05)，显著高于其他各组平均活胎数(p<0.05)。

⑵本发明中药颗粒对大鼠血清ppap-a的影响：

如图1所示，统计结果显示，空白组papp的含量相比较中药高剂量组具有显著差异（p<0.05），而中药高剂量papp的含量显著高于西药组（p<0.05），极显著高于先兆流产组的papp的含量（p<0.01）。

⑶本发明中药颗粒对大鼠血清pgf2α的影响：

如图2所示，统计结果显示，空白组pgf2α的含量相比较中药低剂量组具有显著差异（p<0.01），同样和中药中剂量具有相同差异（p<0.01），同时，中药低剂量组pgf2α的含量与先兆流产组的差异极显著（p<0.01），这种极显著差异的关系也体现在中药高剂量组与西药组之间（p<0.01），而中药低剂量pgf2α的含量显著高于中药中剂量组（p<0.05）。

⑷本发明中药颗粒对大鼠子宫组织的影响：

如图3所示，200倍镜下可见模型组子宫黏膜上皮有明显出血现象，400倍镜下可见子宫黏膜固有层以及胚胎血管中有中性粒细胞，且模型组中性粒细胞比例明显高于其他组。黄体酮组与模型组比较，出血量明显减少，但仍然存在大量白细胞；中药组与模型组对比，出血量以及中性粒细胞数量有明显降低。结果表明，灌服流产药物能够导致大鼠子宫和胚胎不同程度的炎症反应，使得局部组织中性粒细胞增多，子宫腔内可见局部黏膜出血。

综上所述，给先兆流产模型wistar大鼠灌服本发明中药颗粒后可使大鼠血清中妊娠蛋白水平升高，同时降低pgf2a水平。通过组织学观察，发现模型组大鼠子宫和胚胎组织均有不同程度的出血和白细胞聚集的现象，这可能与大鼠最终发生流产有着密切关系。通过对比发现，中药组大鼠子宫和胚胎无明显异常，部分大鼠子宫有出血倾向和少量白细胞，从而减少了流产发生的可能，相比黄体酮组，其出血量较模型组少，但仍有白细胞大量聚集的表现，由此可知，中药组对子宫和胚胎的保护作用更加明显。

通过不同组先兆流产模型wistar大鼠的实验结果进行分析对比，差异有统计学意义，说明该本发明中药颗粒对米非司酮和米索前列醇造模的先兆流产wistar大鼠有保胎作用。

2、本发明中添加有脱水鸡肉具有提供优质蛋白和改善口感、口味的作用；所添加的玉米粉可提供充足的碳水化合物和一定是的膳食纤维；蛋黄粉能提供充足的卵磷脂、维生素等营养；所添加的鸡肝能提供维生素a和b族维生素以及蛋白质、钙、磷、铁、锌；亚麻籽富含纤维和奥米茄三脂肪酸、亚油酸，可改善皮肤脂肪含量、滋润皮毛，预防组织器官发炎，改善肾功能。

3、本发明可用于改善犬胎动不安症状，显著提高产子率、疗效确切、毒副作用小且质量可控。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。

图1为本发明中药颗粒对大鼠血清papp的影响。

图2为本发明中药颗粒对大鼠血清pgf2a的影响。

图3为本发明中药颗粒大鼠子宫（胚胎）切片。其中：a正常妊娠组子宫黏膜上皮（h.e.200×），b模型组子宫黏膜上皮（h.e.200×），c黄体酮组子宫黏膜上皮（h.e.200×），d正常妊娠组胚胎血管（h.e.400×），e黄体酮组胚胎血管（h.e.400×），f中药组胚胎血管（h.e.400×），g正常妊娠组子宫黏膜固有层（h.e.400×），h模型组子宫黏膜固有层（h.e.400×），i中药组子宫黏膜固有层（h.e.400×），j黄体酮组子宫黏膜固有层（h.e.400×）。

具体实施方式

实施例1一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉30份，玉米粉20份，蛋黄粉8份，鸡肝5份，炒亚麻籽10份，炒黄芩2份、炒白术2份、黄芪3份、杜仲1份、党参3份、当归1份、甘草2份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法，包括以下步骤：

⑴按配比称量；

⑵将炒黄芩、炒白术、黄芪、杜仲、党参、当归、甘草混合后，按1：8~12的料液比水煎2次，每次20min；合并煎液，以1000r/min~2000r/min的速率离心5~10min，过滤即得中药液；

⑶中药液于60℃浓缩，即得相对密度为1.13~1.15的清膏；

⑷清膏中按1kg加入0.05~0.1kg润湿剂和0.1~0.3kg粘合剂，经制粒后，在喷雾干燥室进口温度为180~220℃、干燥温度为60~80℃的条件下喷雾干燥5s，即得水分含量为2%~4%的中药颗粒；润湿剂是指无水乙醇；粘合剂是指糊精；

⑸将脱水鸡肉、玉米粉、蛋黄粉、鸡肝、亚麻籽粉经充分搅拌并混合均匀后，加入中药颗粒，搅拌混匀，所得混合物料经膨化处理后于65℃烘干60~100min，并喷涂成相应形状，即得用于预防犬先兆性流产的犬粮。

实施例2一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉45份，玉米粉30份，蛋黄粉10份，鸡肝8份，炒亚麻籽20份，炒黄芩5份、炒白术5份、黄芪6份、杜仲4份、党参6份、当归4份、甘草4份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法同实施例1。

实施例3一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉35份，玉米粉25份，蛋黄粉9份，鸡肝6份，炒亚麻籽15份，炒黄芩3份、炒白术3份、黄芪4份、杜仲2份、党参4份、当归2份、甘草3份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法同实施例1。

实施例4一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉40份，玉米粉22份，蛋黄粉9份，鸡肝7份，炒亚麻籽12份，炒黄芩4份、炒白术4份、黄芪4份、杜仲3份、党参5份、当归3份、甘草3份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法同实施例1。

实施例5一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉40份，玉米粉20份，蛋黄粉8份，鸡肝5份，炒亚麻籽12份，炒黄芩4份、炒白术4份、黄芪5份、杜仲3份、党参4份、当归3份、甘草4份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法同实施例1。

实施例6一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉40份，玉米粉20份，蛋黄粉10份，鸡肝8份，炒亚麻籽12份，炒黄芩4份、炒白术4份、黄芪5份、杜仲3份、党参4份、当归3份、甘草4份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法同实施例1。

实施例7一种用于预防犬先兆性流产的犬粮，该犬粮由下述重量份（kg）的原料制成：脱水鸡肉40份，玉米粉20份，蛋黄粉9份，鸡肝7份，炒亚麻籽12份，炒黄芩4份、炒白术4份、黄芪5份、杜仲3份、党参4份、当归3份、甘草4份。

该用于预防犬先兆性流产的犬粮的制备方法同实施例1。