一种去掉猪大肠异味的清洗方法与流程

本发明属于食品加工领域，具体涉及一种去掉猪大肠异味的清洗方法。

背景技术：

猪肠是用于输送和消化食物的猪内脏器官，有很强的韧性，并不像猪肚那样厚，还有适量的脂肪，猪大肠也叫肥肠，是一种常见的猪内脏副食品；根据猪肠的功能可分为大肠、小肠和肠头，它们的脂肪含量是不同的，小肠最瘦，肠头最肥，日产生活中，猪大肠爆炒最为口味，湘菜一般喜欢爆炒做法，趁热食用非常美味；随着食品加工业的快速发展，猪大肠加工也越来越频繁，猪大肠加工呈熟食或者半成品保存时间更长、口味丰富且携带便捷。但是由于猪大肠是用于输送和消化食物的，因此，在加工之前需要对内表面进行全面清洗。清洗的目的一方面是去除原料肉表面污物，或者浸泡去除其中的血污，提高原料肉的光洁度；另一方面是通过清洗降低原料肉表面的微生物，提高产品的卫生程度。但是传统的浸泡清洗方法多用水池静态浸泡，用水量大，清洗效果较差，且手工清洗劳动强度大、生产效率低。而且浸泡清洗时间长，难以实现连续化生产。

现有技术如公开号为cn107950635a的中国发明专利，公开了一种猪头肉的清洗方法，它包括以下步骤，1)选料；2)宰杀；3)拔毛；4)解剖；5)除血色斑点，用温度为2-10℃,质量浓度为1％-5％的食盐溶液，对有血色斑点的猪头进行浸泡20-40min处理；6)分离；7)浸泡，将猪头肉用淘米水浸泡20～30分钟，再用高温杀菌处理过的水进行清洗干净。该猪头肉的清洗方法，采用食盐溶液浸泡的方式，有效地清除猪头表皮出现血色斑点，提高了鲜品猪头肉的卖相，而且通过淘米水浸泡猪头肉的方式，淘米水，是一种洗过米后的水，这种水呈碱性、有油污的功效，而且带有去除腥味的作用，延长的猪头肉的保鲜期。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种去掉猪大肠异味的清洗方法，该方法能够高效去除猪大肠异味以及残留抗生素，并能有效降低猪大肠中胆固醇含量，制得的猪大肠产品具有感官品质高，胆固醇较低、营养健康的优点。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

提供一种去掉猪大肠异味的清洗方法，包括：

1)预处理：对大肠进行预洗后，加入含盐和白醋的水溶液中进行浸泡25-30min；

2)内表面清洗：把大肠内表面翻转到外部，清除沾在内表面的脏东西和淋巴，用剪刀修去多余的油脂，用水清洗干净；

3)深度清洗：重新把大肠内表面翻转到内部，把大肠放入滚揉机，加入白醋、面粉、迷迭香提取物(含有5wt％迷迭香酸)和蓝莓提取物(含有15wt％蓝莓花青素)，然后顺时针转12-18min，逆时针转12-18min，转速45-55r/min，滚揉25-35min，将滚揉好的大肠浸泡在30-40℃水中，超声波处理15-20min，再高压脉冲电场处理15-25s，取出后用水冲洗干净。本发明通过使用白醋、面粉吸附大肠表面粘性液体，进行清洗时能够有效去除异味、清洁肠体，并采用超声波结合高压脉冲电场冲洗，能够进一步提高清洗效果，有效清除大肠绒毛孔洞等隐蔽处的污垢，大大提高大肠异味的去除效果。一定量的迷迭香提取物和蓝莓提取物能够促进面粉中的活性官能团与抗生素恩诺沙星和环丙沙星，异味化合物粪臭素和吲哚物质中的极性基团发生络合，产生吸附，从而促进对抗生素和异味化合物的去除，提高猪大肠产品的感官品质和安全性。

在某些实施方案中，上述步骤1)的水溶液中盐的含量为3-5wt％，白醋的含量为25-30wt％。

在某些实施方案中，上述步骤3)中白醋和面粉的质量比为1-2:3-5。

在某些实施方案中，上述步骤3)中大肠和面粉的质量比为30-50:1。

在某些实施方案中，上述步骤3)中蓝莓提取物和迷迭香提取物的质量比为2:3-5。

在某些实施方案中，上述步骤3)中蓝莓提取物与面粉的质量比为1:22-28。

在某些实施方案中，上述步骤3)中超声波功率为400-500w。

在某些实施方案中，上述步骤3)中高压脉冲电场处理中脉冲宽度为3-5μs，脉冲电场强度为25-40kv/cm，脉冲电场频率为350-450hz。

在某些实施方案中，上述步骤2)对猪大肠内表面清洗后还包括以下过程：将清洗后的大肠放入植物乳杆菌培养液中浸泡1-2h，用水清洗干净。

在某些实施方案中，上述植物乳杆菌培养液所用培养基为mrs液体培养基。

在某些实施方案中，上述mrs液体培养基中含有菟丝子提取物(含有菟丝子皂苷10wt％)。菟丝子提取物能够提高植物乳杆菌的产酸量，提高对异味化合物以及抗生素的吸附，同时能够提高乳杆菌的表面疏水性，提高对细胞粘附性，有利于对大肠中胆固醇的清除，制得的猪大肠加工食品具有感官品质高，胆固醇较低、营养健康的优点，拓展了消费群体范围。

在某些实施方案中，上述植物乳杆菌为植物乳杆菌c88。

提供一种去掉猪大肠异味的清洗方法在制备低胆固醇的猪大肠加工食品中的用途。

由于本发明采用了白醋、面粉及超声波结合高压脉冲电场方式清洗大肠，因而具有如下有益效果：使用白醋、面粉吸附大肠表面粘性液体，进行清洗时能够有效去除异味、清洁肠体，并采用超声波结合高压脉冲电场冲洗，能够进一步提高清洗效果，有效清除大肠绒毛孔洞等隐蔽处的污垢，大大提高大肠异味的去除效果。

由于本发明采用了质量比为2:3-5的迷迭香提取物和蓝莓提取物清洗大肠，因而具有如下有益效果：能够促进面粉中的活性官能团与抗生素恩诺沙星和环丙沙星，异味化合物粪臭素和吲哚物质中的极性基团发生络合，产生吸附，从而促进对抗生素和异味化合物的去除，提高猪大肠产品的感官品质和安全性。

由于本发明采用了植物乳杆菌培养液处理大肠，因而具有如下有益效果：能够促进对异味化合物粪臭素和吲哚物质，以及抗生素恩诺沙星和环丙沙星的去除，并能够降低大肠中胆固醇的含量，菟丝子提取物能够提高植物乳杆菌的产酸量，进一步提高对异味化合物粪臭素和吲哚物质，以及抗生素恩诺沙星和环丙沙星的吸附，同时能够提高乳杆菌的表面疏水性，提高对细胞粘附性，有利于对大肠中胆固醇的清除，制得的猪大肠加工食品具有感官品质高，胆固醇较低、营养健康的优点，拓展了消费群体范围。

附图说明

图1为本发明试验例1中粪臭素和吲哚物质去除率的测定结果；

图2为本发明试验例1中恩诺沙星和环丙沙星的去除率的测定结果；

图3为本发明试验例1中不同培养条件的植物乳杆菌的产酸曲线；

图4为本发明试验例1中植物乳杆菌黏附有机溶剂的百分率；

图5为本发明试验例1中植物乳杆菌的黏附率的测定结果；

图6为本发明试验例1中胆固醇的清除率的测定结果。

具体实施方式

除非另外说明，本文所提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献都以整体援引的方式并入本文中，如同将其全文进行阐述。

除非另外定义，本文所使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员通常所理解的相同含义。在相抵触的情况下，则以本说明书中的定义为准。

本文中在一种去掉猪大肠异味的清洗方法的上下文中描述了许多实施方案。本领域普通技术人员将认识到，以下实施方式的详细描述仅是示例性的，而非旨在以任何方式进行限制。在本公开内容的教导下，对于本领域技术人员而言提出其他实施方式是容易的。

为了清楚起见，本文中并未示出和描述本文所述实施或方法的全部常规特征。当然将理解，在研发任何这样的实际实施时，将作出许多实施特异性的决定以实现具体目标。此外，将理解，这样的开发工作可能是复杂且耗时的，但在本公开内容的教导下，这对于本领域普通技术人员而言不过是常规工作。

当以范围、优选范围或一系列上限优选值和下限优选值给出数量、浓度或其他数值或参数时，应理解其具体公开了由任何较大的范围限制或优选值和任何较小的范围限制或优选值的任何一对数值所形成的所有范围，而无论这些范围是否分别被公开。例如，当描述“1-5”的范围时，所描述的范围应解释为包括“1-4”、“1-3”、“1-2”、“1-2和4-5”、“1-3和5”等范围。除非另有说明，在本文描述数值范围之处，所述的范围意图包括范围端值和范围内的所有整数和分数。

本发明的实施方式，包括在发明内容部分中所述本发明的实施方式以及本文下述的任何其他的实施方式，均可任意地进行组合。

以下详述本发明。

提供一种去掉猪大肠异味的清洗方法，包括：

1)预处理：在水中将大肠反复揉搓清洗后取出，加入含有盐和白醋的水中浸泡25-35min，优选地，例如25min、28min、30min、31min、33min、35min等；

2)内表面清洗：把大肠内表面翻转到外部，清除沾在内表面的脏东西和淋巴，用剪刀修去多余的油脂，用水清洗干净；

3)深度清洗：重新把大肠内表面翻转到内部，把大肠放入滚揉机，加入白醋、面粉、迷迭香提取物(含有5wt％迷迭香酸)和蓝莓提取物(含有15wt％蓝莓花青素)，然后顺时针转12-18min(优选地，例如12min、14min、15min、18min等)，逆时针转12-18min(优选地，例如12min、14min、15min、18min等)，转速45-55r/min(优选地，例如45r/min、48r/min、50r/min、55r/min等)，滚揉25-35min(优选地，例如25min、28min、30min、32min等)，将滚揉好的大肠浸泡在30-40℃(优选地，例如30℃、32℃、35℃、38℃、40℃等)水中，超声波处理15-20min(优选地，例如15min、16min、18min、20min等)，再高压脉冲电场处理15-25s(优选地，例如15s、19s、20s、22s、25s等)，取出后用水冲洗干净。本发明通过使用白醋、面粉吸附大肠表面粘性液体，进行清洗时能够有效去除异味、清洁肠体，并采用超声波结合高压脉冲电场冲洗，能够进一步提高清洗效果，有效清除大肠绒毛孔洞等隐蔽处的污垢，大大提高大肠异味的去除效果。一定量的迷迭香提取物和蓝莓提取物能够促进面粉中的活性官能团与抗生素恩诺沙星和环丙沙星，异味化合物粪臭素和吲哚物质中的极性基团发生络合，产生吸附，从而促进对抗生素和异味化合物的去除，提高猪大肠产品的感官品质和安全性。

在某些实施方案中，上述步骤1)的水溶液中盐的含量为3-5wt％(优选地，例如3wt％、3.2wt％、4.5wt％、4.8wt％、5wt％等)，白醋的含量为25-30wt％(优选地，例如25wt％、26.7wt％、28wt％、28.5wt％、30wt％等)。

在某些实施方案中，上述步骤3)中白醋和面粉的质量比为1-2:3-5，优选地，例如1:3、1:4、2:3、2:5等。

在某些实施方案中，上述步骤3)中大肠和面粉的质量比为30-50:1，优选地，例如30:1、32:1、38:1、40:1、45:1、50:1等。

在某些实施方案中，上述步骤3)中蓝莓提取物和迷迭香提取物的质量比为2:3-5，优选地，例如2:3、2:4、2:5等。

在某些实施方案中，上述步骤3)中蓝莓提取物与面粉的质量比为1:22-28，优选地，例如1:22、1:24、1:25、1:28等。

在某些实施方案中，上述步骤3)中超声波功率为400-500w，优选地，例如400w、420w、440w、450w、480w、500w。

在某些实施方案中，上述步骤3)中高压脉冲电场处理中脉冲宽度为3-5μs(优选地，例如3μs、4μs、5μs)，脉冲电场强度为25-40kv/cm(优选地，例如25kv/cm、28kv/cm、30kv/cm、32kv/cm、35kv/cm、40kv/cm等)，脉冲电场频率为350-450hz，优选地，例如350hz、360hz、380hz、400hz、410hz、450hz等。

在某些实施方案中，上述步骤2)对猪大肠内表面清洗后还包括以下过程：将清洗后的大肠放入植物乳杆菌培养液中浸泡1-2h，优选地，例如1h、1.2h、1.5h、1.6h、2h等，用水清洗干净。

在某些实施方案中，上述植物乳杆菌培养液所用培养基为mrs液体培养基。

优选地，每升mrs液体培养基的组分及含量包括：大豆蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖20.0g、吐温801.0g、磷酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸钠5.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.054g、水1l，调节ph至6.0-6.8。

在某些实施方案中，上述mrs液体培养基中含有菟丝子提取物(含有菟丝子皂苷10wt％)，优选地，上述mrs液体培养基中菟丝子提取物的含量为0.2-0.8g/l，更为优选地，例如0.2g/l、0.4g/l、0.5g/l、0.6g/l、0.7g/l、0.8g/l等。菟丝子提取物能够提高植物乳杆菌的产酸量，提高对异味化合物以及抗生素的吸附，同时能够提高乳杆菌的表面疏水性，提高对细胞粘附性，有利于对大肠中胆固醇的清除，制得的猪大肠加工食品具有感官品质高，胆固醇较低、营养健康的优点，拓展了消费群体范围。

优选地，上述植物乳杆菌为植物乳杆菌c88。

优选地，上述植物乳杆菌培养液的制备方法为：将植物乳杆菌活化后接种至上述mrs液体培养基中，35-38℃(优选地，例如35℃、36℃、37℃、38℃等)下厌氧培养36-50h(优选地，例如36h、38h、40h、45h、46h、48h、50h等)。

提供一种去掉猪大肠异味的清洗方法在制备低胆固醇的猪大肠加工食品中的用途。

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述：

实施例1：

1、一种去掉猪大肠异味的清洗方法，包括：

1.1试验材料：新鲜猪大肠1kg；迷迭香提取物，含有5wt％迷迭香酸，购自西安瑞尔丽生物工程有限公司；蓝莓提取物，含有15wt％蓝莓花青素,购自陕西萃雅佳生物科技有限公司。

1.2预处理：在水中将1kg猪大肠反复揉搓清洗后取出，加入含有3wt％盐和28wt％白醋的水中浸泡30min。

1.3内表面清洗：把大肠内表面翻转到外部，清除沾在内表面的脏东西和淋巴，用剪刀修去多余的油脂，用水清洗干净。

1.4深度清洗：重新把大肠内表面翻转到内部，把大肠放入滚揉机，加入10g白醋、25g面粉、2g迷迭香提取物和1g蓝莓提取物，然后顺时针转15min，逆时针转15min，转速50r/min，滚揉30min，将滚揉好的大肠浸泡在35℃水中，450w超声波处理18min，再高压脉冲电场处理20s，脉冲宽度为4μs，脉冲电场强度为35kv/cm，脉冲电场频率为400hz，取出后用水冲洗干净。

实施例2：

1.1试验材料：新鲜猪大肠1kg；植物乳杆菌c88；迷迭香提取物，含有5wt％迷迭香酸，购自西安瑞尔丽生物工程有限公司；蓝莓提取物，含有15wt％蓝莓花青素，购自陕西萃雅佳生物科技有限公司。培养基的配制如下：

1.1.1mrs固体培养基的配制：大豆蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖20.0g、吐温801.0g、磷酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸钠5.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.054g、琼脂20g、水1l，调节ph至6.8。

1.1.2mrs液体培养基的配制：大豆蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖20.0g、吐温801.0g、磷酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸钠5.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.054g、水1l，调节ph至6.8。

1.1.3高密度培养基的培制：同上述mrs液体培养基的配制。

1.2植物乳杆菌培养液的制备方法为：将植物乳杆菌c88接种至mrs固体培养基上37℃厌氧条件培养20h，接种至mrs液体培养基中，37℃下厌氧培养20h，转接3次活化后，按照3v/v％接种量接种于高密度培养基中，37℃下厌氧培养40h，得到植物乳杆菌培养液。

1.3预处理：在水中将1kg猪大肠反复揉搓清洗后取出，加入含有3wt％盐和28wt％白醋的水中浸泡30min。

1.4内表面清洗：把大肠内表面翻转到外部，清除沾在内表面的脏东西和淋巴，用剪刀修去多余的油脂，用水清洗干净，将清洗后的大肠放入植物乳杆菌培养液中浸泡1.5h，用水清洗干净。

1.5深度清洗：重新把大肠内表面翻转到内部，把大肠放入滚揉机，加入10g白醋、25g面粉、2g迷迭香提取物和1g蓝莓提取物，然后顺时针转15min，逆时针转15min，转速50r/min，滚揉30min，将滚揉好的大肠浸泡在35℃水中，450w超声波处理18min，再高压脉冲电场处理20s，脉冲宽度为4μs，脉冲电场强度为35kv/cm，脉冲电场频率为400hz，取出后用水冲洗干净。

实施例3：

1.4深度清洗步骤中迷迭香提取物的加入量为1g。其余部分和实施例1完全一致。

实施例4：

1.4深度清洗步骤中迷迭香提取物的加入量为3g。其余部分和实施例1完全一致。

实施例5：

1.4深度清洗步骤中没有加入迷迭香提取物和蓝莓提取物。其余部分和实施例1完全一致。

实施例6：

1.1试验材料还包括菟丝子提取物，含有菟丝子皂苷10wt％，购自陕西新天域生物科技有限公司。

1.1.3高密度培养基的配制：大豆蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖20.0g、吐温801.0g、磷酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸钠5.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.054g、菟丝子提取物的含量为0.5g/l、水1l，调节ph至6.8。其余部分和实施例2完全一致。

实施例7：

1.4深度清洗步骤中没有加入迷迭香提取物和蓝莓提取物。其余部分和实施例2完全一致。

实施例8：

1.4深度清洗步骤中没有加入迷迭香提取物和蓝莓提取物。其余部分和实施例6完全一致。

试验例1：

1.1粪臭素和吲哚物质去除率的测定：

1.1.1粪臭素和吲哚物质浓度的测定：分取上述实施例清洗前及清洗后的大肠2g置于10ml离心管中，加入4ml蒸馏水，匀浆混合1min，再取出该1ml混合液，加入2ml色谱级甲醇，涡旋混合，置于-20℃放置30min，以加速微粒物质沉淀，3000g离心10min，上清液1ml转入1.5ml离心管中，15000g再离心30min。上清液转至另一个离心管中，用1ml一次性注射器吸取最终得到的上清液，经0.45μm滤膜过滤至自动进样小瓶里，待hplc进样分析。hplc色谱条件为：色谱柱zorbaxeclipsexdb-c8、5μm、4.6×150mm不锈钢柱；流动相为40/60的乙腈/水(v/v)；柱箱温度30℃；荧光检测波长ex270nm，em350nm；流动相流速1ml/min；进样量20μl。

1.1.2标准曲线的绘制：准确称取粪臭素55.4mg、吲哚37.6mg，用甲醇溶解后分别定容于25ml棕色容量瓶中，此为粪臭素和吲哚标准储备液。各取储备液按3级稀释制备成粪臭素和吲哚浓度分别为27.7μg/l、55.4μg/l、110.8μg/l、221.6μg/l、332.4μg/l和11.3μg/l、22.6μg/l、45.2μg/l、90.4μg/l、135.6μg/l的混合标准系列工作溶液，作线性回归测定。在实际测定样品时，取粪臭素和吲哚浓度分别为110.8和45.2μg/l的混合标准工作液，作外标法定量。粪臭素的线性回归方程为y＝0.2746x-0.2152，r²＝0.9989。吲哚的线性回归方程为y＝1.2671x-0.5894，r²＝0.9993。粪臭素和吲哚物质去除率的测定结果见图1。

1.2恩诺沙星和环丙沙星的去除效果：

1.2.1恩诺沙星和环丙沙星残留测定方法：准确称取上述实施例清洗前及清洗后的大肠5g(精确到0.01g)，依次加入30g无水硫酸钠(640℃灼烧4h后)和30ml酸化乙腈，用高速组织捣碎机匀浆。将匀浆样品置于带玻璃珠的三角瓶中，经摇床震荡15min(120r/min)，再转入离心管中，4500r/min离心15min，取上清液。往残渣中加入30ml酸化乙腈，重复上述操作一次，合并上清液。净化和浓缩：将上清液置于分液漏斗中，加入25ml正己烷，振荡5min，充分静置，取下层乙腈层移入烧瓶，55℃旋转蒸发至干。用1.0ml流动相充分溶解残渣，移入1.5ml离心管，4500r/min离心5min，取上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液供高效液相色谱仪测定。色谱条件：波长278nm，色谱柱ods-sp柱，柱温40℃，进样量20μl，流速0.8ml/min，流动相：准确称取4.8845g四丁基溴化铵，溶于900ml双蒸水中，加乙腈至1000ml，以85wt％磷酸调ph至3.5，过滤脱气而成。

1.2.2标准曲线的绘制：准确称取10.0mg盐酸环丙沙星，加5ml0.5mol/l的盐酸溶解，用双蒸水溶解并稀释定容100ml棕色容量瓶中，保存于2℃～8℃(保存期不超过3个月)，此储备液浓度为100μg/ml。准确称取10.0mg恩诺沙星，加5ml0.5mol/l的盐酸溶解，用重蒸水定容至100ml棕色容量瓶中，此储备液浓度为100μg/ml。吸取盐酸环丙沙星和恩诺沙星储备液用流动相稀释成混标中间液10.0μg/ml。用流动相将混标中间液稀释成浓度为5、10、15、20、25μg/ml的标准系列，各取20μl进样分析，根据峰面积与相应质量浓度进行线性回归，绘制标准曲线。恩诺沙星的线性回归方程为y＝129562x+20163，r²＝0.9991。盐酸环丙沙星的线性回归方程为y＝112254x+12098，r²＝0.9985。恩诺沙星和环丙沙星的去除率的测定结果见图2。

由图1、图2可以看出，实施例1中清洗后大肠的粪臭素和吲哚物质去除率，恩诺沙星和环丙沙星的去除率均明显高于实施例3、实施例4、实施例5，这说明，质量比为2:3-5的迷迭香提取物和蓝莓提取物能够促进面粉中的活性官能团与抗生素恩诺沙星和环丙沙星，异味化合物粪臭素和吲哚物质中的极性基团发生络合，产生吸附，从而促进对抗生素和异味化合物的去除，提高猪大肠产品的感官品质和安全性。

1.3产酸能力：对上述实施例中进行高密度培养的植物乳杆菌，每隔5个小时测定细菌ph值，直到稳定期为止。以培养时间为横坐标，对应的ph值为纵坐标绘制产酸曲线。不同培养条件的植物乳杆菌的产酸曲线见图3。

1.4疏水性测定：将上述实施例中进行高密度培养40h的植物乳杆菌菌液于5000×g离心15min，菌体用pbs溶液(ph7.2)洗两次，重悬于0.1mol/lkno3(ph6.2)中，调整菌悬液浓度为1×10⁸cfu/ml，同时测定菌悬液在600nm处的吸光度值(a0)。取上述3ml菌悬液分别与1ml二甲苯、氯仿和乙酸乙酯混合，室温放置10min后漩涡混合2min，再于室温下放置20min，测定600nm处水相的吸光度值(a1)。表面疏水性以植物乳杆菌黏附有机溶剂的百分率bats来表示，计算公式为：

bats(％)＝(1-a1/a0)×100％。植物乳杆菌黏附有机溶剂的百分率见图4。

1.5细胞黏附能力的测试：

1.5.1caco-2细胞培养：在培养瓶中加入含10wt％热灭活胎牛血清和sigma抗真菌溶液(青霉素100u/ml、链霉素100μg/ml、两性霉素b0.25μg/ml)的dmem完全培养液，于37℃、5v/v％co2、相对湿度rh90％的培养箱中培养，每天换1次培养液。待细胞贴壁生长为单层后，用质量体积分数为0.25％的胰酶消化，重悬于dmem完全培养液中，血球计数板测定细胞浓度，将细胞浓度调整为5×10⁵/ml。

1.5.2乳杆菌黏附试验：将瓶中培养好的caco-2细胞解析下来制备成5×10⁵/ml的细胞悬液，接入到24孔细胞培养板中培养至长成单层细胞。将已长成单层的细胞用dmem清洗2次后，每孔中加入100μl的植物乳杆菌菌悬液(5×10⁷cfu/孔)和900μl新鲜的dmem培养液(不含抗生素)，置37℃、5v/v％co2、相对湿度rh90％的培养箱中培养90min。实验结束后用pbs清洗单层细胞5次，以除去未黏附的乳杆菌。加入0.5ml含有0.05v/v％曲拉通x-100的pbs溶液，于37℃裂解细胞20min。处理后的含有菌体的细胞裂解液经适当稀释后涂布于mrs琼脂平板，37℃培养48h后计数。每个实验做3个平行，并按照下式计算植物乳杆菌的黏附率。

黏附率(％)＝黏附的乳杆菌总数/每孔中添加的乳杆菌数×100％。植物乳杆菌的黏附率的测定结果见图5。

1.6胆固醇的清除率：

1.6.1胆固醇含量的测定：取上述实施例清洗前、清洗后的大肠2g置于10ml离心管中，加入4ml蒸馏水，匀浆混合1min，再取出该1ml混合液，加入3ml95wt％乙醇和2ml50w/v％氢氧化钾，涡旋振荡混匀。于60℃下恒温水浴10min，冷却后加入5ml正己烷，涡旋振荡萃取1min，加入2ml蒸馏水，振荡均匀，静置分层。取2ml上层正己烷，60℃水浴氮气吹干，加入4ml0.5mg/ml邻苯二甲醛溶液和2ml浓硫酸，显色反应20min，与553nm处测定吸光度值。

1.6.2标准曲线的绘制：准确称取0.1g胆固醇粉末，正己烷定容1mg/ml的溶液，然后分别取0.02ml、0.04ml、0.06ml、0.08ml、0.1ml、0.12ml、0.14ml到比色管中，60℃水浴氮气吹干后，加入4ml0.5mg/ml邻苯二甲醛溶液和2ml浓硫酸，显色反应20min，与553nm处测定吸光度值，以胆固醇含量为横轴，吸光度值为纵轴作标准曲线。胆固醇的标准曲线方程为y＝9.1382x+0.0011，r²＝0.9983。胆固醇的清除率的测定结果见图6。

由图1、图2可以看出，实施例2中清洗后大肠的粪臭素和吲哚物质去除率，恩诺沙星和环丙沙星的去除率均明显高于实施例1，实施例6明显高于实施例2，实施例8明显高于实施例7；由图3可以看出，实施例6中通过高密度培养得到的植物乳杆菌菌液的ph随着培养时间的增加与实施例2的ph相比越来越低；由图4可以看出，实施例6中通过高密度培养得到的植物乳杆菌粘附二甲苯、乙酸乙酯、氯仿的百分率均明显高于实施例2；由图5可以看出，实施例6、实施例8中通过高密度培养得到的植物乳杆菌对细胞的黏附率分别明显高于实施例2、实施例7；由图6可以看出，实施例2中清洗后大肠的胆固醇清除率明显高于实施例1，实施例6明显高于实施例2，实施例8明显高于实施例7，这说明，植物乳杆菌处理大肠能够促进对异味化合物粪臭素和吲哚物质，以及抗生素恩诺沙星和环丙沙星的去除，并能够降低大肠中胆固醇的含量，菟丝子提取物能够提高植物乳杆菌的产酸量，进一步提高对异味化合物粪臭素和吲哚物质，以及抗生素恩诺沙星和环丙沙星的吸附，同时能够提高乳杆菌的表面疏水性，提高对细胞粘附性，有利于对大肠中胆固醇的清除，制得的猪大肠加工食品具有感官品质高，胆固醇较低、营养健康的优点，拓展了消费群体范围。

上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。

以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。