该发明涉及一种复配精油，更具体地更具体地涉及一种由香茅精油，鼠尾草精油，马鞭草精油组成的复配精油，该复配精油的制备方法以及该复配精油在猪饲料中的应用。
背景技术：
猪肉作为日常生活中的主要副食品，具有补虚强身、滋阴润燥、丰肌泽肤的功效，含有丰富的蛋白质及脂肪、碳水化合物、钙、铁、磷等营养成分。随着我国人民生活水平的提高，我国对于猪肉的需求也在逐年增长，在猪的养殖过程中，人们使用了含有安全健康的添加剂的饲料可以满足现在猪肉市场的不同需求。在养殖业飞速发展的社会背景下，安全高效，绿色健康，环境友好型的猪饲料研究如火如荼，植物精油作为一种绿色健康的添加剂，添加到动物饲料中具有积极作用。精油具有促进肠胃运动，抑菌，抗病毒等多种功能，将其应用到猪饲料中，可以提高饲料转化率，能促进家猪生长，抑制发病率，是一种安全、绿色、健康、高效的饲料添加剂。
但是，目前植物精油活性成分提取效率低下、稳定性差、易挥发等问题成为阻碍精油饲料添加剂发展推广的最主要因素。本发明基于以上问题，通过优化提取工艺以及采用微囊包被精油，并将其添加到饲料中，较好的解决了植物复配精油提取率低、稳定性差的问题。
香茅为常见的香草之一，是一种禾本科多年生密丛型具香味草本。秆高达2米，粗壮，节下被白色蜡粉。叶鞘无毛，不向外反卷，内面浅绿色；叶舌质厚，长约1毫米；叶片长30-90厘米，宽5-15毫米，顶端长渐尖，平滑或边缘粗糙。其气味可以驱除蚊子、跳蚤，减少病房中的细菌。多分布在中国的广东、辽宁、河北、山东等地，香茅原产东南亚热带地区，喜高温多雨的气候，在无霜或少霜的地区都生长良好。香茅精油可以调节皮肤，对毛孔粗大颇有效，清除粉刺和平衡油性肤质，对香港脚及其它霉菌感染也十分有益。香茅最重要的特性就是驱虫，最适合在夏天用来喷洒或熏香，也可以帮助猫狗摆脱跳蚤的纠缠。
鼠尾草是唇形科植物，属一年生草本植物。原产于欧洲南部与地中海沿岸地区。中国主要分布于浙江，安徽南部，江苏，江西多地，生于山坡、路旁、荫蔽草丛，水边及林荫下。鼠尾草精油和雌激素类似，对女性生殖系统极有益处，可以调节月经周期，还可以改善便秘，促进淋巴液的流动，对皮肤疮痛、湿疹、干癣与溃疡等有一定作用。
马鞭草为多年生直立草本植物，高可达120厘米，基部木质化，单叶对生，卵形至长卵形，两面被硬毛，下面脉上的毛尤密。喜干燥、阳光充足的环境。对土壤要求不严。全世界的温带至热带地区均有分布。马鞭草精油具有镇静催眠的效果，可以减轻支气管炎、鼻炎和消化不良等症状，同时还具有抗菌、抗痉挛、催情、利肝、杀虫等功效。
本发明人经过大量配方比例的研究实验，最后获得了本发明最佳比例的复配精油，并证明了其在饲料的积极作用，由此完成了本发明。本发明提供了一种复配精油，该复配精油用于饲料具有抑菌、增进食欲、促进动物增重和提高动物抗炎能力的作用。该复配精油安全有效，绿色健康，原料易得，制备工艺简单，可替代抗生素，具有广阔的经济前景。
技术实现要素：
本发明的第一个目的在于提供一种复配精油，该复配精油提取方法简单，功能明确，易于推广。
本发明第二个目的在于提供上述复配精油的制备方法。
本发明第三个目的在于提供上述复配精油在饲料中的应用。
本发明提供的一种复配精油，由香茅精油、鼠尾草精油、马鞭草精油按1-5:2-6:3-5的比例组成。
上述复配精油，其中香茅精油、鼠尾草精油、马鞭草精油用量比例是2:4:4。
优选地，上述复配精油中香茅精油的制备方法是：
取香茅全株，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入20倍量蒸馏水，用盐酸调节ph至5.0后向容器中加入0.5％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按2﹕1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解35min，转入微波提取器中，设置微波功率为850w，微波辐射40min，在微波提取器上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得香茅精油。
上述鼠尾草精油的制备方法是：
取鼠尾草全株，干燥，置于圆底烧瓶内，加入15倍量正己烷，置于电热套上80℃提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，置于旋转蒸发仪中在40℃条件下真空减压蒸馏回收石油醚，所得精油于40℃下真空干燥，即得鼠尾草精油。
上述马鞭草精油的制备方法是：
取马鞭草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚置于超声提取器中，超声功率设定在600w，在80℃下提取2次，每次各1.5h，过滤，合并滤液，置于旋转蒸发仪中在40℃条件下真空减压蒸馏回收石油醚，所得精油于40℃下真空干燥，即得马鞭草精油。
本发明还提供了该提取物组合物的优选的制备方法，包括：
(1)香茅精油的制备
取香茅全株，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入20倍量蒸馏水，用盐酸调节ph至5.0后向容器中加入0.5％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按2﹕1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解35min，转入微波提取器中，设置微波功率为850w，微波辐射40min，在微波提取器上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得香茅精油。
(2)鼠尾草精油的制备
取鼠尾草全株，干燥，置于圆底烧瓶内，加入15倍量正己烷，置于电热套上80℃提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，置于旋转蒸发仪中在40℃条件下真空减压蒸馏回收石油醚，所得精油于40℃下真空干燥，即得鼠尾草精油。
(3)马鞭草精油的制备
取马鞭草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚置于超声提取器中，超声功率设定在600w，在80℃下提取2次，每次各1.5h，过滤，合并滤液，置于旋转蒸发仪中在40℃条件下真空减压蒸馏回收石油醚，所得精油于40℃下真空干燥，即得马鞭草精油。
(4)按比例选取香茅精油、鼠尾草精油、马鞭草精油均匀混合，即得。
所述用于饲料的复配精油，按照复凝聚法制成含有20％复配精油的微囊，按0.05-0.1％添加到饲料中。
本发明还阐述了复配精油在猪饲料中的用途。
本发明复配精油在猪饲料中的有益效果如下：
1.本发明复配精油均来源于天然植物，工艺简单，功效稳定持久且无毒副作用，适合长期使用。
2.本发明人独创地将香茅精油、鼠尾草精油、马鞭草精油进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该复配精油具有明显的协同增效作用，添加到猪饲料中具有抑菌作用，提高猪的抗炎能力，增加食欲从而实现增重。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。
实施例1本发明复配精油及其制剂的制备
第一步：各种精油的制备
香茅精油的制备方法：
取香茅全株，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入20倍量蒸馏水，用盐酸调节ph至5.0后向容器中加入0.5％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按2﹕1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解35min，转入微波提取器中，设置微波功率为850w，微波辐射40min，在微波提取器上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得香茅精油。
鼠尾草精油的制备方法：
取鼠尾草全株，干燥，置于圆底烧瓶内，加入15倍量正己烷，置于电热套上80℃提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，置于旋转蒸发仪中在40℃条件下真空减压蒸馏回收石油醚，所得精油于40℃下真空干燥，即得鼠尾草精油。
马鞭草精油的制备方法：
取马鞭草，粉碎，过筛，置于圆底烧瓶中，加入15倍量石油醚置于超声提取器中，超声功率设定在600w，在80℃下提取2次，每次各1.5h，过滤，合并滤液，置于旋转蒸发仪中在40℃条件下真空减压蒸馏回收石油醚，所得精油于40℃下真空干燥，即得马鞭草精油。
第二步：制剂的制备
本发明复配精油微囊的制备：
首先，制备纯度为95％、分子量为161.16kda、脱乙酰度为95％的壳聚糖，再制备纯度为95％、分子量为242.16kda的羧甲基纤维素钠，乳化前1d制备壳聚糖与羧甲基纤维素钠混合比为1:1的囊材溶液，室温保存15h，将复配精油在高速搅拌器转速13000rpm时缓慢加入囊材溶液中约5min，此处复配精油与囊材溶液质量比为1:4，立即将该溶液在160w超声功率下超声5min，将超声后的溶液在-81℃条件下预冷冻24h，而后在真空冷冻干燥机中冷冻干燥48h，冷冻干燥压力为0±0.3pa，得到的粉末即为复配精油微囊。
第三步：将复配精油微囊添加到饲料中
本发明还提供一种所述复配精油在制备猪饲料中的应用，优选所述复配精油在制备饲料中质量添加量为0.05-0.1％。
以下通过试验例进一步阐述本发明所述具有抑菌作用，能够调理猪肠胃，促进消化，增加食欲从而促进猪增重的作用。
试验例1
本发明复配精油对大肠杆菌的体外抑菌活性：
1.材料与方法
1.1试验材料
大肠杆菌；lb琼脂培养基：购自青岛高科技工业园海博生物技术有限公司；
香茅：购自青岛众生大药房，经鉴定为禾本科植物的草本；
鼠尾草：购自青岛众生大药房，经鉴定为唇形科科植物的草本；
马鞭草：购自青岛众生大药房，经鉴定为马鞭草科植物的草本；
按上述实施方案分别制备香茅精油、鼠尾草精油和马鞭草精油。按组方比例制成香茅精油和鼠尾草精油的复配精油(复配精油1)；香茅精油和马鞭草精油的复配精油(复配精油2)；鼠尾草精油和马鞭草精油(复配精油3)；本发明复配精油(复配精油4)。复配精油1、2和3中缺的那味精油分别用等量花生油替代。各复配精油均用花生油分别稀释成0.625、1.25、2.5、5、10mg/ml的溶液，备用。
1.2试验方法
(1)菌悬液的制备：无菌操作用烧红冷却的接种环挑取培养9-12h的大肠杆菌，置于无菌生理盐水中，摇匀制得大肠杆菌混悬液，并按照平板菌落计数法校正得出该混悬液浓度。
(2)含菌培养基平板的制备：将经高压蒸汽灭菌后的lb培养基冷却到45～50℃时，加入105-106cfu/ml大肠杆菌，充分震荡混匀，倒入灭菌后的培养皿中，稍微放冷后，即得含菌培养基平板。
(3)抑菌圈测量：待含有大肠杆菌的lb培养基凝固后，用直径为7mm的打孔器打孔，每个培养皿可以打四个孔，每一个孔加30μl各组合物，置于37℃的培养箱中培养12h后，测量抑菌圈直径。
2.结果与分析
以大肠杆菌菌为试验细菌，以本发明天然植物提取物组合物及其他四种组合物对照为供试药剂，测定不同组合物的抑菌活性与效果，结果如表1所示。
表1各复配精油对大肠杆菌的抑菌实验结果
从表1可以看出，各复配精油均对大肠杆菌有抑制作用，随着剂量增加其抑菌活性逐渐增强，且相同浓度的复配精油相比，复配精油4的抑菌圈直径最大，抑菌作用最好，说明香茅精油、鼠尾草精油和马鞭草精油组成的复配精油中，缺少任何一种，都会导致抑菌活性下降。
3.结论：本发明复配精油能够显著抑制大肠杆菌，具有良好的抑菌活性。
以下通过试验例进一步阐述本发明所述复配精油微囊饲料具有抗炎和增重功效。
试验例2
复配精油饲料对猪摄食量和体重的影响
1.1材料与方法
各复配精油的制备方法同试验例1。按照实施例中的方法制备复配精油微囊，并以0.05％的比例分别添加到猪饲料中制备五组饲料(a、b、c、d、e)，其中a组饲料不添加复配精油微囊，b组添加复配精油1微囊，c组饲料添加复配精油2微囊，d组饲料添加复配精油3微囊，e组饲料添加复配精油4(本发明复配精油)微囊。
1.2实验畜类与分组饲养
挑选100只生长和健康状况基本相同的15日龄小猪，称重，分成5组(标记为a、b、c、d和e组)，每组20只，分别投喂各组对应的饲料，每日投喂6次，投喂1个月。记录本月间猪的摄食量，称重，分别计算日均摄食量和日均增重。
2.结果与分析
投喂不同饲料1个月后，各组小猪的摄食量和体重如表2所示。
表2不同饲料投喂小猪的摄食量和体重
从表2可以看出，与a组(无复配精油微囊的饲料喂养组)相比，其他各含有复配精油微囊饲料喂养的小猪，其日均摄食量和日均增重均显著增加，其中以e组增重最显著，说明本发明复配精油微囊作为饲料添加剂，能显著促进小猪的食欲，增加摄食和体重，缺少其中任何一种精油微囊，都导致其作用下降。
3.结论：本发明的复配精油微囊添加到猪饲料中可显著增加猪的摄食量和体重。
试验例3
复配精油饲料对猪抗炎能力的影响
1.1材料与方法
五组饲料(a、b、c、d、e)的制备方法试验例2。
1.2实验畜类与分组饲养
猪的分组和饲料同试验例2.。分别在饲喂的15d、30d清晨，对各组小猪颈静脉采血，37℃静置2h，4℃静置4h，3500rpm离心8min，析出血清，-20℃保存，测定血清中致炎细胞因子il-1β、il-6、tnf-α浓度，考察该发明复配精油微囊饲料对猪抗炎能力的影响。其结果见表3和表4。
表3第15d猪血清细胞因子含量(ng/l)
表4第30d猪血清细胞因子含量(ng/l)
从表3和表4可以看出，与a组(无复配精油微囊的饲料喂养组)相比，其他各含有复配精油微囊饲料喂养的小猪，其15d和30d喂养时的血清中致炎细胞因子il-1β、il-6、tnf-α浓度均显著降低，其中以e组最低，说明本发明复配精油微囊作为饲料添加剂，能显著抑制小猪炎症发生，增强其抗病能力，缺少其中任何一种精油，都导致其作用下降。
3.结论：本发明的复配精油微囊添加到猪饲料中可显著增加猪的抗炎能力。