一种微生物发酵饲料添加剂及其生产方法与流程

1.本发明属于饲料领域，尤其是涉及一种微生物发酵饲料添加剂及其生产方法。


背景技术：

2.目前随着生活水平的逐步提高，人类对畜产品的需求已不仅满足能提供足够数量的食品，也对其品质和安全提出了更多更高的要求。所以在上述问题中，如何解决药物残留，改善肉品品质及风味问题成为目前营养界研究的热点。
3.中药作为饲料添加剂，不仅具有改善机体代谢，促进生长发育，提高免疫功能及预防畜禽疾病的作用，而且能改善畜产品的品质和风味。中药源于自然界，并保持了其自然结构和活性，具有天然性、多功能性、无毒副作用、无抗药性和药物残留等特点，用其作为饲料添加剂来提高动物生产性能和饲料利用率，对确保人类健康和生态环境平衡具有重要意义。而目前，对于中药作用于饲料的研究还仅处于初级阶段，没有显著有效的产品出现。


技术实现要素：

4.有鉴于此，本发明旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种微生物发酵饲料添加剂及其生产方法。
5.为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
6.一种微生物发酵饲料添加剂的制备方法，包括如下步骤：
7.(1)将酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液；
8.(2)在所述的混合提取液中加入纤维素酶进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；
9.(3)将所述的混合培养基按体积等分为2份，一份培养基接种枯草芽孢杆菌，进行第一次发酵，得到第一发酵产物，另一份培养基接种黑曲霉，进行第二次发酵，得到第二发酵产物，将第一发酵产物与第二发酵产物混合、浓缩后即成。
10.进一步，所述的步骤(1)中的酸枣仁提取液由包括如下步骤的方法制成：将酸枣仁洗净干燥后粉碎，去除得到的酸枣仁粉末中的油脂后加入到10
‑
20倍量的乙醇溶液中，进行一次提取，过滤得到一次提取液，将滤渣加入到10
‑
20倍量的乙醇溶液中，进行二次提取，将一次提取液与二次提取液混合后得到所述的酸枣仁提取液。
11.进一步，所述的一次提取步骤的温度为20
‑
40℃，时间为1
‑
3小时；所述的二次提取步骤的温度为60
‑
80℃，时间为1
‑
3小时；所述的一次提取的乙醇溶液的浓度为60
‑
80％，所述的二次提取的乙醇溶液的浓度为60
‑
80％。
12.进一步，所述的步骤(1)中的火麻仁提取液由包括如下步骤的方法制成：将火麻仁洗净干燥后粉碎，去除得到的火麻仁粉末中的油脂后加入到30
‑
50倍量的碱液中，进行提取，提取完成后即得所述的火麻仁提取液。
13.进一步，所述的碱液的ph值为9
‑
13；所述的提取的温度为30
‑
50℃，时间为1
‑
3小时。
14.进一步，所述的步骤(1)中的黑茶藨提取物由包括如下步骤的方法制成：将黑茶藨
加入到10
‑
20倍量的水中，煎煮30
‑
120分钟然后过滤，将滤液加入到5
‑
10倍量的乙醇溶液中，提取1
‑
3小时，提取完成后过滤即得所述的黑茶藨提取物；所述的乙醇溶液的浓度为60
‑
80％；所述的提取的温度为40
‑
60℃，时间为1
‑
3小时。
15.进一步，所述的步骤(1)中酸枣仁、火麻仁与黑茶藨的质量比为1：1
‑
10：1
‑
30。
16.优选的，所述的步骤(1)中酸枣仁、火麻仁与黑茶藨的质量比为1：1
‑
8：15
‑
24。
17.更优选的，所述的步骤(1)中酸枣仁、火麻仁与黑茶藨的质量比为1：2
‑
8：18
‑
24。
18.进一步，所述的步骤(2)中的酶解步骤的温度为30
‑
40℃，时间为1
‑
5小时。
19.进一步，所述的步骤(3)中的第一次发酵的温度为28
‑
32℃，ph值为7.0
‑
7.2，时间为20
‑
24小时，转速为200
‑
220r/min；所述的步骤(3)中的第二次发酵的温度为30
‑
35℃，ph值为6.0
‑
7.0，时间为20
‑
24小时，转速为200
‑
220r/min。
20.一种微生物发酵饲料添加剂，该添加剂由所述的制备方法制备得到。
21.酸枣仁始载于《神农本草经》，列为上品，具有养心补肝、宁心安神、敛汗生津等功效，主要化学成分包括皂苷类、黄酮类、脂肪油等。皂苷类成分为酸枣仁的主要药效成分，具有镇静、催眠、安定等作用，用于治疗中枢神经系统、心血管系统等疾病。
22.火麻仁为桑科植物大麻的干燥成熟果实，在中国大部分地区有栽培。其主要成分有约30％脂肪油、25
‑
35％蛋白质与各种膳食纤维，有润肠通便、治疗肠燥便秘的功效，并且火麻仁中含有丰富的氨基酸，对人体有益：精氨酸对伤口复原、免疫防御方面有很重要的作用其味甘性平，有润燥通便、补虚功能。火麻仁有较好的降血压、利尿、镇痛、抗炎、抗血栓形成的作用，长期食用，对慢性神经炎、瘫痪、便秘、高血压、高血脂以及妇科疾病具有很好的补助疗效。
23.黑茶藨为人类提供了受欢迎的水果，并含有多种适于治疗循环紊乱的物质。其叶含有一种挥发油、一些萜烯碳化物及少量鞣质,还发现含有奎宁酸。黑茶藨的叶，尤以抗风湿、抗痛风和利尿而著称。黑茶藨的叶还具有降压作用。特性为抗风湿、利尿、净化剂。
24.相对于现有技术，本发明具有以下优势：
25.本发明所述的微生物发酵饲料添加剂采用酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合后进行酶解及发酵，制备得到的添加剂具有显著的诱食效果，提高动物对饲料的吸收效率，改善动物的消化功能。
26.本发明所述的微生物发酵饲料添加剂采用枯草芽孢杆菌与黑曲霉对混合培养基进行发酵，发酵过程中产生多种酶，对混合培养基进行酶解，使添加剂中含有多种小分子物质，提高了动物对饲料的吸收，改善肠道环境。
具体实施方式
27.除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
28.下面结合实施例来详细说明本发明。
29.本发明实施例中所述的枯草芽孢杆菌与黑曲霉均采用市售产品。
30.实施例1
31.准确称量100g酸枣仁洗净干燥后粉碎，去除得到的酸枣仁粉末中的油脂后加入到
15倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，35℃下进行一次提取2小时，过滤得到一次提取液，将滤渣加入到15倍量的浓度为80％的乙醇溶液中，75℃下进行二次提取2小时，将一次提取液与二次提取液混合后得到酸枣仁提取液。
32.准确称量500g火麻仁洗净干燥后粉碎，去除得到的火麻仁粉末中的油脂后加入到35倍量的ph值为12左右的氢氧化钠溶液中，45℃下次提取2小时，提取完成后即得所述的火麻仁提取液。
33.准确称量2000g黑茶藨加入到15倍量的水中，煎煮60分钟然后过滤，将滤液加入到10倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，55℃下提取2小时，提取完成后过滤即得所述的黑茶藨提取物。
34.将酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶(酶活10万u/g)进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；将所述的混合培养基按体积等分为2份，一份培养基无菌接种枯草芽孢杆菌，30℃、220r/min条件下第一次发酵24小时，得到第一发酵产物，另一份培养基无菌接种黑曲霉，33℃、220r/min条件下第二次发酵，得到第二发酵产物，将第一发酵产物与第二发酵产物混合、浓缩后得到添加剂。
35.实施例2
36.与实施例1区别之处仅在于黑茶藨的量为100g。
37.实施例3
38.与实施例1区别之处仅在于黑茶藨的量为100g、火麻仁的量为100g。
39.实施例4
40.与实施例1区别之处仅在于黑茶藨的量为50g、火麻仁的量为50g。
41.实施例5
42.与实施例1区别之处仅在于：将酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶(酶活10万u/g)进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；将所述的混合培养无菌接种枯草芽孢杆菌，30℃、220r/min条件下发酵24小时，得到添加剂。
43.实施例6
44.与实施例1区别之处仅在于：将酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶(酶活10万u/g)进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；将所述的混合培养无菌接种黑曲霉，33℃、220r/min条件下发酵，得到添加剂。
45.实施例7
46.与实施例1区别之处仅在于：将酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶、α
‑
淀粉酶进行酶解后得到添加剂。
47.实施例8
48.与实施例1区别之处仅在于：
49.准确称量100g酸枣仁洗净干燥后粉碎，去除得到的酸枣仁粉末中的油脂后加入到15倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，35℃下进行提取2小时，过滤得到酸枣仁提取液。
50.准确称量500g火麻仁洗净干燥后粉碎，去除得到的火麻仁粉末中的油脂后加入到15倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，35℃下进行提取2小时，提取完成后即得所述的火麻仁提取液。
51.实施例9
52.准确称量100g酸枣仁洗净干燥后粉碎，去除得到的酸枣仁粉末中的油脂后加入到15倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，35℃下进行一次提取2小时，过滤得到一次提取液，将滤渣加入到15倍量的浓度为80％的乙醇溶液中，75℃下进行二次提取2小时，将一次提取液与二次提取液混合后得到酸枣仁提取液。
53.准确称量2000g黑茶藨加入到15倍量的水中，煎煮60分钟然后过滤，将滤液加入到10倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，55℃下提取2小时，提取完成后过滤即得所述的黑茶藨提取物。
54.将酸枣仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶(酶活10万u/g)进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；将所述的混合培养基按体积等分为2份，一份培养基无菌接种枯草芽孢杆菌，30℃、220r/min条件下第一次发酵24小时，得到第一发酵产物，另一份培养基无菌接种黑曲霉，33℃、220r/min条件下第二次发酵，得到第二发酵产物，将第一发酵产物与第二发酵产物混合、浓缩后得到添加剂。
55.实施例10
56.准确称量100g酸枣仁洗净干燥后粉碎，去除得到的酸枣仁粉末中的油脂后加入到15倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，35℃下进行一次提取2小时，过滤得到一次提取液，将滤渣加入到15倍量的浓度为80％的乙醇溶液中，75℃下进行二次提取2小时，将一次提取液与二次提取液混合后得到酸枣仁提取液。
57.准确称量500g火麻仁洗净干燥后粉碎，去除得到的火麻仁粉末中的油脂后加入到35倍量的ph值为12左右的氢氧化钠溶液中，45℃下次提取2小时，提取完成后即得所述的火麻仁提取液。
58.将酸枣仁提取液、火麻仁提取液混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶(酶活10万u/g)进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；将所述的混合培养基按体积等分为2份，一份培养基无菌接种枯草芽孢杆菌，30℃、220r/min条件下第一次发酵24小时，得到第一发酵产物，另一份培养基无菌接种黑曲霉，33℃、220r/min条件下第二次发酵，得到第二发酵产物，将第一发酵产物与第二发酵产物混合、浓缩后得到添加剂。
59.实施例11
60.准确称量500g火麻仁洗净干燥后粉碎，去除得到的火麻仁粉末中的油脂后加入到35倍量的ph值为12左右的氢氧化钠溶液中，45℃下次提取2小时，提取完成后即得所述的火麻仁提取液。
61.准确称量2000g黑茶藨加入到15倍量的水中，煎煮60分钟然后过滤，将滤液加入到10倍量的浓度为60％的乙醇溶液中，55℃下提取2小时，提取完成后过滤即得所述的黑茶藨提取物。
62.将火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合均匀，得到混合提取液，在所述的混合提取液中加入纤维素酶(酶活10万u/g)进行酶解，然后灭菌，得到混合培养基；将所述的混合培养基按体积等分为2份，一份培养基无菌接种枯草芽孢杆菌，30℃、220r/min条件下第一次
发酵24小时，得到第一发酵产物，另一份培养基无菌接种黑曲霉，33℃、220r/min条件下第二次发酵，得到第二发酵产物，将第一发酵产物与第二发酵产物混合、浓缩后得到添加剂。
63.试验例1
64.选择体重100kg左右、健康状况良好的猪360头，随机分成12个处理组(对应实施例1
‑
11与对照组)，每组3个重复，12个处理组分别饲喂同种的普通饲粮，每组的饲粮中加入对应实施例1
‑
11得到的添加剂，最后一个处理组作为对照组不添加其他添加剂。所有猪只预饲2周后进行试验，试验期5周。
65.试验猪只按猪场正常养殖程序进行。试验期间，每天观察肥猪的生长情况、记录喂料量。试验结束时，称量每头猪只的体重，计算日增重和料肉比。宰前禁食24小时，自由饮水。采用常规放血屠宰，去头、蹄、尾和内脏，迅速分离左侧胴体用于测定胴体肉质性状，同时取背最长肌组织置于保鲜袋中，放入低温冰箱储存以作冷存分析，检测结果如表1所示。
66.表1各处理组猪只生长性能数据
[0067][0068][0069]
由表1中可以看出，由采用酸枣仁提取液、火麻仁提取液与黑茶藨提取物混合后进行酶解、发酵后得到的添加剂有效的提高了试验猪只的日采食量与日增重，同时提高了试验猪只的瘦肉率与肌肉蛋白质含量，降低了胆固醇含量，表明该添加剂对试验猪只的肉质起到了显著的改善作用，同时有助于试验猪只的生长，起到了有利的诱食作用。
[0070]
表2肠道消化数据
[0071][0072]
由表2可知，本发明所述的添加剂作用于试验猪只，使试验猪只的空肠绒毛高度与十二指肠绒毛高度显著提高、空肠隐窝深度与十二指肠隐窝深度显著下降，表明该添加剂有助于试验猪只消化能力的改善，提高动物对饲料的吸收效率。
[0073]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。