一种富硒胶红酵母、富硒胶红酵母饲料添加剂及其制备方法和应用

1.本发明属于微生物工程技术领域，具体涉及一种富硒胶红酵母、富硒胶红酵母饲料添加剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.随着社会的发展，人口的不断增长，人体对必需营养蛋白质需求越来也大，而相对应的是作为主要来源的牲畜或者家禽生产力水平较为低下，尤其是猪业、牛业和羊业生产。
3.硒(se)是维持牲畜或者家禽健康所必需的微量元素，可分为无机类和有机类两大类，有机矿物元素利用率比无机形式的高，是目前研究开发的热点。硒缺乏时对母猪的繁殖性能影响很大，可导致母猪分娩后发情紊乱，不孕或新生仔猪虚弱等。硒能促进乳腺细胞数增加，乳腺组织发达，分娩后产奶量增加，从而改善乳质。并且是提高公猪生殖性能的重要物质，缺硒可导致精细胞受损，降低精子活力，从而影响受精能力和胚胎发育。富集硒元素酵母即是有机形式的一种。酵母硒具有结合率高、生物活性强、利用率高和安全性好等特点。
4.鉴于富硒胶红酵母的以上优势，提供一种富硒胶红酵母对提高牲畜或者家禽生产力水平显得尤为迫切。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种富硒胶红酵母及其制备方法和应用，富含硒，促进动物生长发育、提高动物繁育能力。
6.本发明提供了一种富硒胶红酵母的制备方法，包括如下步骤：
7.利用液体发酵培养基对胶红酵母jaasry1进行第一液态发酵，得到中间培养液；
8.将所述中间培养液与无机硒混合进行第二液态发酵，得到胶红酵母液态发酵液；每升所述胶红酵母液态发酵液中含有15g～30g所述富硒胶红酵母；
9.所述中间培养液与无机硒混合溶液中无机硒的浓度为25～100mg/l；
10.所述胶红酵母jaasry1的保藏编号为cgmcc no.22900。
11.优选的，所述液体发酵培养基包括：葡萄糖2wt.％～6wt.％、蛋白胨0.4wt.％～0.9wt.％、酵母粉0.6wt.％～0.8wt.％，大豆油0.04wt.％～0.09wt.％和余量的水；所述液体发酵培养基的ph值为5.0～6.5。
12.优选的，第一液态发酵的时间为6～18h；所述第二液态发酵的时间为12～42h，所述第一液态发酵和第二液态发酵的温度分别为30～34℃。
13.本发明还提供了上述制备方法得到的富硒胶红酵母。
14.本发明还提供了一种富硒胶红酵母饲料添加剂的制备方法，包括如下步骤：
15.对上述技术方案所述的胶红酵母液态发酵液进行固态发酵，得到所述胶红酵母饲料添加剂。
16.优选的，所述固态发酵的培养基包括：麸皮45wt.％～65wt.％，玉米粉15wt.％～25wt.％，豆粕15wt.％～30wt.％，葡萄糖1wt.％～5wt.％和磷酸氢二钾0.01wt.％～0.08wt.％；
17.所述胶红酵母液态发酵液与所述固态发酵的培养基的体积比为1：4。
18.优选的，所述固态发酵的温度为25～32℃，时间为18～35h。
19.本发明还提供了上述制备方法得到的富硒胶红酵母饲料添加剂。
20.本发明还提供了上述富硒胶红酵母或富硒胶红酵母饲料添加剂在动物养殖中的应用。
21.本发明还提供了一种固态发酵饲料，其特征在于，包括上述技术方案所述的富硒胶红酵母饲料添加剂；所述富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为0.5％～5％。
22.本发明提供了一种富硒胶红酵母的制备方法，包括如下步骤：利用含有硒的发酵液对胶红酵母jaasry1进行液态发酵，得到胶红酵母液态发酵液；对所述胶红酵母液态发酵液进行固态发酵，得到胶红酵母固态发酵物；所述胶红酵母固态发酵物中含有所述富硒胶红酵母；所述胶红酵母jaasry1的保藏编号为cgmcc no.22900。本发明从吉林省公主岭市吉林省农业科学院西门处被食用油污染的土壤中采集分离到1株胶红酵母jaasry1，具有硒转化率、有机硒产率高的优点，对硒的转化率为90％～98％，每升所述胶红酵母液态发酵液中含有15g～30g所述富硒胶红酵母，所述富硒胶红酵母中含硒量为2000～3000μg/g。
23.另外，本发明还提供了一种富硒胶红酵母饲料添加剂的制备方法，对所述的胶红酵母液态发酵液进行固态发酵得到，所述富硒胶红酵母饲料添加剂，本发明所述富硒胶红酵母饲料添加剂可直接喂养动物，无废弃物产生，产品还富含类胡萝卜素等营养因子，可改善生动物生长发育与繁殖发情情况。
附图说明
24.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
25.图1为1为胶红酵母jaasry1的系统进化树；
26.图2～3为胶红酵母jaasry1菌落形态；
27.图4为胶红酵母液态发酵液中胶红酵母生物量和含硒量随培养时间的变化情况。
28.生物保藏信息
29.胶红酵母(rhodotorula muciladinosa)jaasry1，于2021年7月14日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100080，保藏编号为cgmcc no.22900。
具体实施方式
30.本发明提供了一种富硒胶红酵母的制备方法，包括如下步骤：
31.利用液体发酵培养基对胶红酵母jaasry1进行第一液态发酵，得到中间培养液；
32.将所述中间培养液与无机硒混合进行第二液态发酵，得到胶红酵母液态发酵液；每升所述胶红酵母液态发酵液中含有15g～30g所述富硒胶红酵母；
33.所述中间培养液与无机硒混合溶液中无机硒的浓度为25～100mg/l；
34.所述胶红酵母jaasry1的保藏编号为cgmcc no.22900。
35.本发明所述胶红酵母jaasry1由申请人从吉林省公主岭市吉林省农业科学院西门处被食用油污染的土壤中采集分离得到。菌株形态鉴定结果表明，本发明所述胶红酵母jaasry1能够形成直径约为(1.9
±
0.1)cm的菌落(具体如图2)，菌落颜色由白色逐渐变为橙红色，表面光亮，质地软而呈黏状。培养前后培养基颜色未有明显变化，无渗出物形成。在麦芽汁培养基中30℃培养3～5d，细胞为短卵形，单个或者成对(具体图3)，细胞大小为3～6μm，能形成沉淀，菌体呈现粉红色；生理生化验证表明，该菌株能利用葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、甘露糖等16种糖，不能利用乳糖和可溶性淀粉，能利用甘油、甘露醇、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、氨基乙酸，不能利用对氨基苯甲酸、赤藓糖醇、核糖醇、肌醇、山梨醇和山梨酸，最适温度28～32℃，最高温度50℃；分子生物学验证表明其26srdnad1/d2基因序列优选如seq id no.1所示，通过使用blast进行比对，根据genbank提供的最高相似性序列构建如图1所示的系统发育树(如图1)，发现与rhodotorulamucilaginosa cbs 316的亲缘关系最近。本发明所述胶红酵母jaasry1已进行生物保藏，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.22900。本发明所述胶红酵母jaasry1具有抗致病菌的作用，能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌，高产类胡萝卜素，菌株无毒副作用，可用于畜禽类动物的饲料添加剂，增强免疫力，降低禽类腹泻率、死淘率，提高禽类产蛋率，加深禽类蛋黄颜色，有效改善禽类动物产品品质，具有广泛的市场应用前景。
36.本发明利用液体发酵培养基对胶红酵母jaasry1进行第一液态发酵前，优选依次对所述胶红酵母jaasry1进行种子培养和扩大培养。
37.本发明对所述胶红酵母jaasry1进行种子培养，得到种子培养液。本发明所述种子培养的培养基优选包括葡萄糖2wt.％～6wt.％、蛋白胨0.4wt.％～0.9wt.％、酵母粉0.6wt.％～0.8wt.％和余量的水；所述葡萄糖的质量百分含量进一步优选为3wt.％～5wt.％，更优选为4wt.％；所述蛋白胨的质量百分含量进一步优选为0.5wt.％～0.8wt.％，更优选为0.6wt.％～0.7wt.％；所述酵母粉的质量百分含量进一步优选为0.7wt.％。本发明所述种子培养的温度优选为26～35℃，进一步优选为28～30℃；所述种子培养的时间优选为36～48h，进一步优选为38～45℃，更优选为40～42℃。本发明所述种子培养的方式优选为震荡培养，所述震荡培养的转速优选为180～300rpm/min，进一步优选为200～280rpm/min，更优选为250～260rpm/min。本发明所述种子发酵的培养基的ph优选为5.0～6.5，进一步优选为5.2～6.0，更优选为5.5～5.8。本发明对所述种子培养的接种量没有严格要求，用接种环挑一环菌体，放入种子培养液中常规培养即可。本发明所述种子发酵的培养基使用前优选在121℃的条件下高压灭菌20min。本发明所述种子培养能够实现胶红酵母jaasry1的活化。
38.得所述种子培养液后，本发明对所述种子培养液进行扩大培养，得扩大培养液。本发明优选按照5wt.％～15wt.％的接种量，将所述种子培养液接种到扩大培养的培养基中，进一步优选为8wt.％～12wt.％。本发明所述扩大培养的培养基的组成、培养条件优选与所述种子培养的培养基组成、培养条件一致，在此不作赘述。
39.得所述扩大培养液后，本发明对所述扩大培养液进行第一液态发酵，得中间培养液。本发明优选按照5wt.％～15wt.％的接种量，将所述扩大培养液接种到液体发酵培养基中，进一步优选为8wt.％～12wt.％，更优选为9wt.％～10wt.％。本发明所述液体发酵培养
基的组成与所述种子培养的培养基组成一致，在此不作赘述。本发明所述第一液态发酵的时间优选为6～18h，进一步优选为8～15h，更优选为8h；所述第一液态发酵的温度优选为30～34℃，进一步优选为31～32℃；所述第一液态发酵的时间优选为30～48h，进一步优选为35～45h，更优选为40～42h。本发明所述第一液态发酵的方式优选为振荡培养，所述振荡培养的转速优选为300～500rpm/min，进一步优选为350～450rpm/min，更优选为400～420rpm/min。本发明所述中间培养的培养基的ph优选为5.0～6.5，进一步优选为5.2～6.0，更优选为5.5～5.8。本发明所述中间培养的压力优选为0.06～0.12mpa，进一步优选为0.08～0.10mpa。
40.得所述中间培养液后，本发明将所述中间培养液与无机硒混合进行第二液态发酵，得到胶红酵母液态发酵液。本发明所述中间培养液与无机硒混合溶液中无机硒的浓度为25～100mg/l，优选为30～90mg/l，进一步优选为40～80mg/l。本发明所述第二液态发酵的时间优选为12～42h，进一步优选为20～40h，更优选为30～38h，最优选为36h；所述第二液态发酵的温度优选为30～34℃，进一步优选为32～33℃。本发明将所述中间培养液与无机硒混合进行第二液态发酵，能够将无机硒转入胶红酵母jaasry1，得到富硒胶红酵母。实施例结果表明，本发明对硒的转化率为90％～98％，胶红酵母jaasry1具有硒转化率、有机硒产率高的优点。
41.得胶红酵母液态发酵液后，本发明优选对所述胶红酵母液态发酵液进行分离，得到所述富硒胶红酵母。本发明对所述分离的方式没有严格要求，采用本领域常规方式即可，例如离心。采用上述制备方法得到的富硒胶红酵母也属于本发明的保护范围。本发明每升胶红酵母液态发酵液中含有15g～30g富硒胶红酵母，得到的富硒酵母中的硒含量为2000～3000μg/g。
42.本发明还提供了一种富硒胶红酵母饲料添加剂的制备方法，包括如下步骤：
43.对上述技术方案所述的胶红酵母液态发酵液进行固态发酵，得到所述胶红酵母饲料添加剂。
44.在本发明中，所述固态发酵的培养基优选包括麸皮45wt.％～65wt.％，玉米粉15wt.％～25wt.％，豆粕15wt.％～30wt.％，葡萄糖1wt.％～5wt.％和磷酸氢二钾0.01wt.％～0.08wt.％；所述麸皮的含量进一步优选为50wt.％～60wt.％，更优选为55wt.％；所述玉米粉的含量进一步优选为16wt.％～20wt.％，更优选为18wt.％；所述豆粕的含量进一步优选为20wt.％～25wt.％，更优选为25.％；所述葡萄糖的含量进一步优选为2wt.％～4wt.％，更优选为1.96wt.％；所述磷酸氢二钾的含量进一步优选为0.03wt.％～0.06wt.％，更优选为0.04wt.％。本发明所述固态发酵的培养基使用前优选在121℃的条件下高压灭菌20min。本发明所述胶红酵母液态发酵液与所述固态发酵的培养基的体积比优选为1：4。
45.在本发明中，所述固态发酵的温度优选为25～32℃，进一步优选为28～30℃；所述固态发酵的时间优选为18～35h，进一步优选为20～30h，更优选为25～28h。本发明在所述固态发酵过程中，优选保持所述胶红酵母液态发酵液的水分含量为52wt.％～75wt.％，进一步优选为55wt.％～70wt.％，更优选为60wt.％～65wt.％。本发明对保持水分含量的方式不做严格要求，优选采用通风的方式。本发明固态发酵产品含有胶红酵母(1.37～1.24)
×
109cfu/g，酵母中的硒含量为2000～3000μg/g，类胡萝卜素含量720～1100μg/g。
46.得所述胶红酵母饲料添加剂后，本发明优选对固态发酵物进行干燥处理和粉碎处理。本发明所述干燥处理的温度优选为40～55℃，进一步优选为45～50℃。本发明对所述干燥处理的时间没有严格要求，将所述胶红酵母饲料添加剂的含水量降至15wt.％～18wt.％即可。本发明对所述粉碎处理的方式没有严格要求，将固态发酵物的粒径降至80～100目即可，优选使用粉碎机粉碎。
47.本发明所述固态发酵的培养基使用的原料均为饲用禽类动物的常用原料，所述的胶红酵母液态发酵液进行固态发酵后，可大量生产富含硒的胶红酵母活体细胞，还富含类胡萝卜素等营养因子，可改善生猪生长发育与繁殖发情情况，可直接喂养动物，无废弃物产生。实施例结果表明，所述胶红酵母饲料添加剂中富硒胶红酵母活菌数1.37～1.24
×
109cfu/g，富硒酵母中的硒含量为2000～3000μg/g，类胡萝卜素含量720～1100μg/g。本发明发酵工艺便于操作，培养基成分简单，固态培养成本低廉。
48.根据本发明所述富硒胶红酵母饲料添加剂的特性，所述富硒胶红酵母饲料添加剂在动物养殖中的应用、所述富硒胶红酵母饲料添加剂在促进动物生长中的应用、所述富硒胶红酵母饲料添加剂在促进动物发情生殖中的应用以及利用所述富硒胶红酵母饲料添加剂制备得到的固态发酵饲料也属于本发明的保护范围。本发明所述动物优选包括猪、牛或羊。
49.本发明还提供了一种固态发酵饲料，包括所述的富硒胶红酵母饲料添加剂；所述富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为0.5％～5％，优选为1％～3％。
50.为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
51.实施例1
52.1.1菌株分离
53.(1)生理生化分析
54.从吉林省公主岭市吉林省农业科学院西门处被食用油污染的土壤采集10g土样，装入已灭过菌的牛皮纸袋内，封好袋口，并做好纪录。不需要冲洗直接放入装有90ml无菌水三角瓶，在振荡培养箱，室温振荡10min，取上清液接种于马铃薯葡萄糖培养液管中，放入恒温培养箱，温度28～30℃，培养1～2d，可见培养液变混浊。取菌液进行梯度稀释，用移液枪吸取上述稀释后的培养液0.lml，涂布于马铃薯葡萄糖培养基平板，置28～30℃，培养1～2d。根据菌落形态挑取典型单菌落(菌落呈圆形或卵圆形，粘稠状，颜色为粉红色，菌落大而厚，易于挑起，微光泽)，命名jaasry1，采用碳源同化实验(孔维宝,杨洋,陈冬,汪洋,达文燕,牛世全.1株类胡萝卜素产生菌的鉴定及其发酵培养基的优化[j].食品科学,2018,39(24):108-115和巴特尼a,佩恩rw,亚罗d.酵母菌的特征与鉴定手册[m」胡瑞卿,译青岛:青岛海洋大学出版社,1991.)，分析其生理生化特性，结果如表1。
[0055]
表1胶红酵母jaasry1生理生化试验
[0056][0057]
由表1可知，该菌株能利用葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖、甘露糖等16种糖，不能利用乳糖和可溶性淀粉，能利用甘油、甘露醇、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、氨基乙酸，不能利用对氨基苯甲酸、赤藓糖醇、核糖醇、肌醇、山梨醇和山梨酸。
[0058]
(2)26srdnad1/d2区域序列分析
[0059]
对菌株jaasry1的26s rdna d1/d2区域序列进行分析，其26srdna d1/d2基因序列优选如seq id no.1所示，具体为5
’‑
ggaggaaaagaaactaacaaggattcccctagtagcggcgagcgaagcgggaagagctcaaatttataatctggcaccttcggtgtccgagttgtaatctctagaaatgttttccgcgttggaccgcacacaagtctgttggaatacagcggcatagtggtgagacccccgtatatggtgcggacgcccagcgctttgtgatacattttcgaagagtcgagttgtttgggaatgcagctcaaattgggtggtaaattccatctaaagctaaatattggcgagagaccgatagcgaacaagtaccgtgagggaaagatgaaaagcactttggaaagagagttaacagtacgtgaaattgttggaagggaaacgcttgaagtcagacttgcttgccgagcaatcggtttgcaggccagcatcagttttccgggatggataatggtagagagaaggtagcagtttcggctgtgttatagctctctgctggatacatcttgggggactgaggaacgcagtgtgcctttggcgggggtttcgacctcttcacacttagga-3’，通过使用blast进行比对，根据genbank提供的最高相似性序列构建如图1所示的系统发育树，发现与rhodotorulamucilaginosa cbs 316的亲缘关系最近，结合平皿上菌落特征、上述生理生化特性，将本发明分离菌株jaasry1鉴定为胶红酵母，命名为胶红酵母jaasry1，并于2021年7月14日保藏在中国典型培养物保藏中心(cgmcc)，保藏编号cgmcc no.22900。
[0060]
实施例2
[0061]
胶红酵母jaasry1抑菌能力检测
[0062]
将分离得到的胶红酵母jaasry1，恒温30℃培养36～48小时后，8000r/min离心10min，取上清液，将直径为0.8cm的滤纸片浸泡在分离得到的上清液中15min，以大肠杆菌(escherichiacoli)cmcc44825、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)cmcc26071、鼠伤寒沙门氏菌(salmonellatyphimurium)cmcc50、志贺氏菌(shigellaflexneri)
cmcc51061、单增李斯特菌(listeria monocytogenes)atcc19115为指示菌各取50μl，分别均匀涂布于营养琼脂平板上，静置20min，放上准备好的滤纸片，恒温37℃培养16h，观察抑菌情况。用游标卡尺测抑菌圈的直径，以抑菌圈的直径表示抑菌活性。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌购于广东微生物种质资源库。单增李斯特菌购于上海鲁微科技有限公司。胶红酵母jaasry1抑制致病菌能力如表2所示：
[0063]
表2胶红酵母jaasry1抑制致病菌能力试验
[0064][0065]
根据表2可以看出，本发明胶红酵母jaasry1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌均有抑制作用，对鼠伤寒沙门氏菌和志贺氏菌没有抑制作用。
[0066]
实施例3
[0067]
小鼠致病性和毒性试验
[0068]
将30只体重23g左右的昆明小鼠随机分为3组，依次为空白对照组、试验1组和十堰组，每组10只，雌雄各已半。其中空白对照组常规喂食普通饲料，试验1组每只小鼠按1
×
109cfu/kg菌种剂量，连续7天灌服胶红酵母发酵液，试验2组一次性腹腔注射0.2ml菌悬液(1
×
109cfu/ml)。所有小鼠饲喂试验均在干燥、清洁、通风良好的室内完成，观察7天，记录各组小鼠的生长体重及死亡情况，如表3。
[0069]
表3小鼠试验生长体重变化结果
[0070]
分组试验开始体重(g)试验7天体重(g)空白对照组23.37
±
0.2428.15
±
0.97试验1组23.12
±
0.1330.21
±
1.07试验2组23.34
±
0.1929.37
±
0.62
[0071]
根据表3可以看出，喂养7天后，3组试验小鼠均无死亡病例，说明该菌株安全可靠无毒性。第3组腹腔组注射组第一天打针小鼠进食量减少，精神不振，第2天恢复正常，结果如表3所示。
[0072]
实施例4
[0073]
胶红酵母固态富硒培养
[0074]
(1)以胶红酵母jaasry1为出发菌种，菌种采用斜面活化传代，在无菌操作台中，挑取一单菌落，放入种子培养液，振荡培养，转速为250rpm/min，培养温度为30℃，培养时间为42h。将种子培养液按8％的质量百分含量转接种于10l扩大培养液中，按相同条件进行再次培养。将摇瓶扩大培养后的培养液按10％的质量百分含量接种入50l中间扩大培养液中，调节通气压力为0.06～0.12mpa，通气搅拌速度为350rpm、温度为30℃，通气培养42h，接着将培养液按10％的质量百分含量转接种于500l发酵罐培养液中，按上述相同条件进行再次培
养发酵。在此过程中培养8h时，添加质量浓度为12％的亚硒酸钠水溶液，使发酵液中无机硒盐浓度达到59mg/l，再通气培养36h，得到胶红酵母液态发酵液，胶红酵母液态发酵液中胶红酵母生物量量为25.94g/l。胶红酵母液态发酵液中通气培养过程中，不同培养时间胶红酵母生物量、含硒量、无机硒盐浓度和硒转化率情况如表4和图4。
[0075]
表4胶红酵母液态发酵液中胶红酵母生物量和含硒量
[0076][0077]
注：表4中时间为整个液态发酵的时间，0～8h未加入无机硒；
[0078]
硒转化率(％)＝(酵母含硒量
×
生物量)/培养液初始无机硒盐浓度
×
100％。
[0079]
根据表4和图4可以看出，随着时间的延长，胶红酵母液态发酵液中胶红酵母生物量和酵母有机硒含量先升高后降低，添加无机硒盐水溶液后培养36h(即总培养时间为44h时)，生物量和有机硒含量达到最大，胶红酵母液态发酵液中胶红酵母生物量高达25.94g/l，酵母有机硒含量高达2250μg/g，硒转化率最高，以培养44h所得胶红酵母液态发酵液进行后续试验。
[0080]
(2)将上述胶红酵母液态发酵液按25％的质量百分含量接种入固态发酵培养基(麸皮55wt.％，玉米粉18wt.％，豆粕25wt.％，葡萄糖1.96wt.％和磷酸氢二钾0.04wt.％)，放入发酵库内，温度保持为28℃，通风保持发酵物料水分为62％，培养时间为28h终止发酵。取出发酵完毕的物料，放入干燥室，进行通风干燥，室内温度保持在50℃，直至物料水分降至15％，终止干燥。将干燥好的发酵物料，经粉碎机粉碎，过90目筛子，得到胶红酵母固态发
酵产物(即富硒胶红酵母饲料添加剂)。
[0081]
实施例5
[0082]
富硒胶红酵母饲料添加剂在生猪养殖中的应用效果
[0083]
该试验在吉林省公主岭市实验猪场进行。从该猪场公猪群中随机选取80头健康断奶母猪和80头健康公猪，体重约80
±
2.1kg。试验过程中，猪只在封闭式猪舍内饲养，保持猪舍内通风良好。试验期间自由采食和饮水按猪场常规程序进行饲养管理；
[0084]
将80头母猪及80头公猪分别随机分为4个组，即1个对照组和3个试验组，每组20头母猪及20头公猪。试验周期为50d，预试期5d，正试期45d。对照组饲喂基础日粮，试验组1组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为0.5％，记为0.5％试验组)，试验组2组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1％，记为1％试验组)，试验组3组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1.5％，记为1.5％试验组)，试验结束后，统计母猪发情受胎情况和公猪精液品质，结果如下表5～6。
[0085]
表5富硒胶红酵母饲料添加剂对母猪发情受胎的影响
[0086][0087][0088]
表6富硒胶红酵母饲料添加剂对公猪精液品质的影响
[0089][0090]
根据表5～6可以看出，不同富硒胶红酵母饲料添加剂添加量下，母猪发情受胎程度有着不同程度的提高；对公猪的精液量、精子密度影响、精液ph差异不明显，其它方面有着明显差异。1.5％添加量相比较1％添加量饲喂效果没有明显提高。从生产经济效益考虑，1％添加量为优先选择添加使用量，饲喂后母猪断奶至发情间隔时间平均缩短1.2d。母猪断奶后发情率提高11.7％，断奶受胎率提高13.3％；公猪精子畸形率降低20.3％。本发明生物饲料提高了母猪发情受胎率，并直接影响公猪精液的质量。这表明富硒胶红酵母饲料添加剂对母猪及公猪的繁殖均起着重要的促进作用，增强了生猪的繁殖力，有利于生猪养殖产业持续健康发展。
[0091]
实施例6
[0092]
富硒胶红酵母饲料添加剂在肉羊养殖中的应用效果
[0093]
在长春养羊场，选择108只身体状况接近的6月龄体重为31.25
±
0.32kg的健康雌性肉羊。采用完全随机设计，随机分为4组，即1个对照组和3个试验组，每组27只。对照组饲喂基础全混合日粮，试验组日粮中分别添加为0.5％、1％、1.5％富硒酵母固态培养物的基础全混合日粮，试验组1组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为0.5％，记为0.5％试验组)，试验组2组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1％，记为1％试验组)，试验组3组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1.5％，记为1.5％试验组)。各组肉羊连续喂养65天，其中预试期5d，正试期60d。试验结束后，统计生长发育及繁殖发情情况，结果如下表6～8。
[0094]
表6富硒胶红酵母饲料添加剂对肉羊生长性能的影响
[0095][0096]
表7富硒胶红酵母饲料添加剂对肉羊发情受胎的影响
[0097][0098]
表8富硒胶红酵母饲料添加剂在肉羊发情期血清中的生殖激素促进效果
[0099][0100]
根据表6～8可以看出，试验羊初始体重相差不大，符合随机分组的原则，不同富硒胶红酵母饲料添加剂添加量下，试验组日增重和饲料转化率对比对照组有着明显的提高，富硒胶红酵母饲料添加剂的添加对育成羊增重效果显著好于单独喂养基础全混合日粮，但是添加固态发酵饲料1.5％组别与1wt.％组别饲喂效果没有明显提高，从生产经济效益考虑，1％为优先选择添加使用量；1％、1.5％组的育成羊发情率比对照组分别提高了27.73％、33.2％；初情日龄显著低于对照组；1％发酵饲料组的肉羊初情日龄最早(201.39d)，对照组最早(210.32d)，两者相比，缩短了8.93d，差异比较显著；日粮添加富硒胶红酵母饲料添加剂提高了饲喂肉羊发情周期生殖激素的分泌水平，但是1.5％组与1％组别饲喂效果没有明显提高，从生产经济效益考虑，1％添加量为优先选择添加使用量。这表明富硒胶红酵母饲料添加剂能够促进肉羊机体发育，促进肉羊的器官发育和性成熟。并且添加富硒饲料，可以提高肉羊发情期间生殖激素促黄体素、促卵泡素、孕酮、雌二醇、等在血液中的浓度，而这也说明饲喂富硒饲料，可以影响促动物个体性腺激素释放激素，使其分泌增加，影响动物的发情。而且，本发明富硒酵母培养物的制备方法简单，仅使用常规的液体和固体培养工艺，这些步骤都可以在工厂中实现大规模工业生产，易于实施。
[0101]
实施例7
[0102]
富硒胶红酵母饲料添加剂在肉牛养殖中的应用效果
[0103]
在长春市养牛场，选择64头18月龄、体况良好、体质量400
±
18.7kg的西门塔尔牛育成母牛。采用完全随机设计，随机分为4组，即1个对照组和3个试验组，每组16只。对照组饲喂基础全混合日粮，试验组日粮中分别添加为0.5％、1％、1.5％富硒酵母固态培养物的基础全混合日粮，试验组1组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为0.5％，记为0.5％试验组)，试验组2组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1％，记为1％试验组)，试验组3组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1.5％，记为1.5％试验组)。各组母牛连续喂养62天，试验结束后，统计牛生长性能、发情表现、接受配种及受胎情况，结果如下表9～11。
[0104]
表9富硒胶红酵母饲料添加剂对肉牛生长性能的影响
[0105][0106]
表10富硒胶红酵母饲料添加剂对肉牛养殖中的发情率及受胎率促进效果
[0107][0108]
表11富硒胶红酵母饲料添加剂对肉牛发情期血清中的生殖激素促进效果
[0109][0110]
根据表9～11可以看出，对比对照组，饲喂富硒胶红酵母饲料添加剂的饲料，生长性能指标、母牛发情率等指标、发情周期生殖激素的分泌水平均有着不同程度的提高。但1.5％组别与1％组别饲喂效果没有明显提高。从生产经济效益考虑，1％为优先选择添加使用量，1％组别肉牛在62天内，增长速度快，每日增重达到1.38kg以上，且料肉比低于6.13，肉牛酮体中含硒量达到0.47mg/kg，达到富硒牛肉标准；母牛的发情比例平均达到93.75％，处理牛受胎率达到56.25％，高于对照组发情比例25％和受胎率28.57％。这表明富硒胶红酵母饲料添加剂对肉牛有的促生长作用，能够缩短肉牛的育肥周期，饲料利用率高，且肉牛能够充分吸收饲料中的硒元素，能有效提高肉用母牛的发情比例与受胎率，营养转化完全，养殖效率高，安全可靠。
[0111]
实施例8
[0112]
富硒胶红酵母饲料添加剂在奶牛养殖中的应用效果
[0113]
在吉林省公主岭市某大型牧场内，选取临床健康，胎次接近的产后荷斯坦奶牛80头，分成四组，即1个对照组和3个试验组，每组20头。对照组饲喂基础全混合日粮，试验组日粮中分别添加为1％、3％、5％富硒酵母固态培养物的基础全混合日粮，试验组1组饲喂基础
日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为1％，记为1％试验组)，试验组2组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为3％，记为3％试验组)，试验组3组饲喂基础日粮+实施例4得到的富硒胶红酵母饲料添加剂(富硒胶红酵母饲料添加剂的质量百分含量为5％，记为5％试验组)。试验于2019年3月26日至2021年6月1日进行，试验期为相邻的2个胎次。整个试验期间，记录每头母牛发情率、排卵率、受胎率、配种间隔天数、两次产犊间隔及血清中生殖激素等繁殖性能数据，结果如下表12。
[0114]
表12富硒胶红酵母饲料添加剂对奶牛繁殖性能的影响
[0115][0116]
根据表12可以看出，对比对照组，试验组奶牛体内促黄体素、促卵泡素、雌二醇及孕酮的激素显著升高，并提高了奶牛的受胎率、发情率、排卵率，缩短了配种时间和产犊间隔时间，但5％组别与3％组别饲喂效果没有明显提高。从生产经济效益考虑，3％为优先选择添加使用量。这表明富硒胶红酵母饲料添加剂具有提高奶牛繁殖性能的作用。
[0117]
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。