一种玉米谷蛋白的制备装置和制备方法

1.本发明涉及玉米谷蛋白提取技术领域，具体为一种玉米谷蛋白的制备装置和制备方法。


背景技术：

2.玉米为原料采用湿法生产淀粉时，可以分离出对玉米6％左右(干基)的副产物玉米黄粉(cornglutenmea，cgm，又称玉米蛋白粉)。玉米黄粉中约含62～71％(w/w)的蛋白质，其主要组分是玉米醇溶蛋白(zein，65-68％)和谷蛋白(glutelin，22-33％)。
3.玉米谷蛋白约有20种亚基，分子量范围为1000～127000，这些亚基通过分子内二硫键和分子间二硫键结合组成复杂的蛋白质分子。谷蛋白含大量门冬酰胺和谷氨酰胺氨基酸，其中谷胺酰胺含量约占总氨基酸的1/3，l-谷氨酰胺是蛋白质合成中的编码氨基酸，哺乳动物非必需氨基酸，在体内可以由葡萄糖转变而来，谷氨酰胺可为机体提供必需的氮源，促使肌细胞内蛋白质合成；通过细胞增容作用，促进肌细胞的生长和分化；刺激生长激素、胰岛素和睾酮的分泌，使机体处于合成状态。谷氨酰胺具有重要的免疫调节作用，它是淋巴细胞分泌、增殖及其功能维持所必需的，是核酸生物合成的前体和主要能源。谷氨酰胺是肠道粘膜细胞代谢必需的营养物质，对维持肠道粘膜上皮结构的完整性起着十分重要的作用。因此，谷蛋白可作为天然药物和保健食品的营养剂，或作为一种新型的食品添加剂添加到其它食品中，大大提高玉米黄粉蛋白的综合利用率。
4.由于玉米黄粉谷蛋白的几乎不溶于水，所以其利用困难，采用碱提酸沉法从挤压膨化的玉米黄粉中提取谷蛋白，研究其提取工艺条件，能够为玉米谷蛋白的性质研究和其功能性水解物的研究开发奠定原料制备的基础，但是现今玉米谷蛋白的提取过程中，由于淀粉，醇溶蛋白的阻碍作用，玉米谷蛋白的提取率比较低，为此，我们提出一种玉米谷蛋白的制备装置和制备方法。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种玉米谷蛋白的制备装置和制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种玉米谷蛋白的制备装置，包括工作台，所述工作台上安装有含水量调节箱和漏斗，所述含水量调节箱内部通过连接管和蒸汽机内相连通，所述含水量调节箱内安装有漏斗；
7.所述工作台表面安装有双螺杆膨化机，所述工作台的表面位于双螺杆膨化机的出料口处安装有收集筒，所述工作台的表面位于收集筒的一侧连接有安装架，所述安装架的表面连接有液压缸，所述液压缸上连接有粉碎锤；
8.所述工作台的表面还安装有离心机，所述工作台的表面安装有清洗池，所述清洗池的上方连接有水龙头。
9.一种玉米谷蛋白的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
10.步骤一：挤压膨化
11.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
12.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
13.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内进行膨化；
14.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
15.步骤二：去除淀粉
16.s2.1:用pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
17.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内进行反应；
18.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于离心机内进行离心，取沉淀滤饼；
19.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼后备用；
20.步骤三：去除醇溶蛋白
21.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用乙醇萃取；
22.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于离心机内进行离心，重复2次，取沉淀滤饼；
23.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
24.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化
25.s4.1:用naoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，并水浴震荡；
26.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于离心机内离心，取上清液；
27.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
28.s4.4:将两次离心得到的上清液，用hcl调ph至4.8；
29.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
30.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
31.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
32.优选的，所述步骤s1.3中须在160℃-180℃和1mpa条件下进行膨化。
33.优选的，所述步骤s2.1中的pbs缓冲液的ph值为6.5；
34.所述步骤s2.2中在ph6.5和60℃条件下反应2h；
35.所述步骤s2.3中在3000r/min的条件下离心20min；
36.所述步骤s2.4中洗涤3次。
37.优选的，所述步骤s3.1中乙醇浓度为70％；
38.所述步骤s3.1中在60℃环境下萃取2h；
39.所述步骤s3.1中料液比为1∶10(g/ml)；
40.所述步骤s3.2中在3000r/min的条件下离心20min。
41.优选的，所述步骤s4.1中naoh的浓度为用0.1mol/l；
42.所述步骤s4.1中料液比为1∶10(g/ml)；
43.所述步骤s4.1中在60℃水浴震荡2h。
44.优选的，所述步骤s4.2中在3000r/min的条件下离心20min。
45.优选的，所述步骤s4.4中hcl的浓度为4mol/l。
46.优选的，所述步骤s4.5中在3000r/min的条件下离心20min。
47.优选的，所述步骤s4.6中乙醇溶液的浓度为70％。
48.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本方案中综合考虑玉米谷蛋白制备过程
中存在的困难，利用含水量蒸汽调节技术、碱提酸沉法、双螺杆膨化机和离心机等设备，依次对玉米黄粉进行含水量调节、挤压膨化、去除淀粉、去除醇溶蛋白、玉米谷蛋白的提取纯化，有效的提高了玉米谷蛋白的提取率，简化了玉米谷蛋白的提取操作。
附图说明
49.图1为本发明结构示意图；
50.图2为本发明具体实施方式各组玉米谷蛋白的提取率的试验结果对比图。
51.图中：1、工作台；2、含水量调节箱；3、漏斗；4、蒸汽机；5、双螺杆膨化机；6、收集筒；7、安装架；8、液压缸；9、粉碎锤；110、离心机；11、清洗池；12、水龙头。
具体实施方式
52.实施例一
53.请参阅图1，本发明提供一种技术方案：
54.一种玉米谷蛋白的制备装置，工作台1上安装有含水量调节箱2和漏斗3，含水量调节箱2内部通过连接管和蒸汽机4内相连通，同时含水量调节箱2内安装有漏斗3，可以将玉米黄粉放置在漏斗3上，如何关闭含水量调节箱2使其内部密封，通过漏斗3运行调节含水量调节箱2内部的蒸汽湿度，进一步对玉米黄粉的含水量进行调节；
55.工作台1上还安装有双螺杆膨化机5，工作台1的表面位于双螺杆膨化机5的出料口处安装有收集筒6，通过双螺杆膨化机5可以将玉米黄粉进行膨化，而膨化后的玉米黄粉会直接进入收集筒6内，方便收集；
56.工作台1的表面位于收集筒6的一侧连接有安装架7，安装架7的表面连接有液压缸 8，液压缸8上连接有粉碎锤9，粉碎锤9的尺寸和收集筒6的内径相适配，使得液压缸8 开启后，液压缸8内的活塞杆可以驱动粉碎锤9在收集筒6上方上下滑动，进一步使得粉碎锤9可以插入收集筒6内，对膨化后的样品挤压粉碎；
57.工作台1的表面还安装有离心机10，通过离心机10可以对样品进行离心工艺；
58.同时工作台1的表面安装有清洗池11，清洗池11的上方连接有水龙头12，通过清洗池11可以对样品进行清洗等工作，同时可以对工作台1表面进行清理。
59.一种玉米谷蛋白的制备方法，包括如下步骤：
60.步骤一：挤压膨化
61.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
62.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
63.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
64.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
65.步骤二：去除淀粉
66.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
67.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
68.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
69.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
70.步骤三：去除醇溶蛋白
71.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
72.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
73.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
74.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
75.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
76.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
77.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
78.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
79.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
80.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
81.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
82.对比例一
83.步骤一：挤压膨化
84.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
85.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
86.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
87.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
88.步骤二：去除淀粉
89.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
90.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
91.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
92.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
93.步骤三：去除醇溶蛋白
94.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
95.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
96.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
97.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
98.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
99.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
100.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
101.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
102.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
103.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
104.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
105.对比例二
106.步骤一：挤压膨化
107.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
108.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
109.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
110.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
111.步骤二：去除淀粉
112.s2.1:用ph6的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
113.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6和60℃条件下反应 2h；
114.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
115.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
116.步骤三：去除醇溶蛋白
117.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
118.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
119.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
120.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
121.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
122.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
123.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
124.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
125.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
126.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
127.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
128.对比例三
129.步骤一：挤压膨化
130.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
131.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
132.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
133.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
134.步骤二：去除淀粉
135.s2.1:用ph7的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
136.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph7和60℃条件下反应2h；
137.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
138.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
139.步骤三：去除醇溶蛋白
140.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
141.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
142.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
143.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
144.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
145.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
146.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
147.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
148.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
149.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
150.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
151.对比例四
152.步骤一：挤压膨化
153.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
154.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
155.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
156.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
157.步骤二：去除淀粉
158.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉
悬浮液；
159.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
160.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心15min，取沉淀滤饼；
161.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
162.步骤三：去除醇溶蛋白
163.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
164.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心15min，重复2次，取沉淀滤饼；
165.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
166.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
167.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
168.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心15min，取上清液；
169.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
170.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
171.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心15min，取沉淀滤饼；
172.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
173.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
174.对比例五
175.步骤一：挤压膨化
176.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
177.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
178.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
179.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
180.步骤二：去除淀粉
181.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
182.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
183.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心25min，取沉淀滤饼；
184.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
185.步骤三：去除醇溶蛋白
186.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
187.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心25min，重复2次，取沉淀滤饼；
188.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
189.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
190.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
191.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心25min，取上清液；
192.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
193.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
194.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心25min，取沉淀滤饼；
195.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
196.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
197.对比例六
198.步骤一：挤压膨化
199.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
200.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
201.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
202.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
203.步骤二：去除淀粉
204.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
205.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
206.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
207.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
208.步骤三：去除醇溶蛋白
209.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶8 (g/ml)；
210.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
211.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
212.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
213.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶8 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
214.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
215.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
216.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
217.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
218.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
219.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
220.对比例七
221.步骤一：挤压膨化
222.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
223.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
224.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
225.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
226.步骤二：去除淀粉
227.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
228.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
229.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
230.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
231.步骤三：去除醇溶蛋白
232.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶13 (g/ml)；
233.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
234.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
235.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
236.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶13 (g/ml)，在60℃水浴震荡2h；
237.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
238.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
239.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
240.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
241.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
242.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
243.对比例八
244.步骤一：挤压膨化
245.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
246.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
247.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
248.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
249.步骤二：去除淀粉
250.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
251.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
252.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
253.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
254.步骤三：去除醇溶蛋白
255.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
256.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
257.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
258.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
259.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在70℃水浴震荡2h；
260.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
261.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
262.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
263.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
264.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
265.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
266.对比例九步骤一：挤压膨化
267.s1.1:将玉米黄粉的含水量调节为16％；
268.s1.2:将上述步骤中调节过含水量的玉米黄粉放置过夜；
269.s1.3:将上述步骤中放置过夜后的玉米黄粉加入双螺杆膨化机内，并在160℃-180℃和 1mpa条件下进行膨化；
270.s1.3:将上述步骤中膨化后的样品粉碎后备用；
271.步骤二：去除淀粉
272.s2.1:用ph6.5的pbs缓冲液和步骤一中备用样品配制浓度为10％的膨化玉米黄粉悬浮液；
273.s2.2:加入α-淀粉酶(30u/g)于上述步骤中的悬浮液内，在ph6.5和60℃条件下反应2h；
274.s2.3:取出上述步骤中反应后的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
275.s2.4:用与pbs缓冲液等量的水洗涤沉淀滤饼3次后备用；
276.步骤三：去除醇溶蛋白
277.s3.1:将去除淀粉后的玉米黄粉沉淀滤饼用70％乙醇60℃萃取2h，料液比为1∶10 (g/ml)；
278.s3.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，重复2次，取沉淀滤饼；
279.s3.3:将上述步骤中的沉淀滤饼晾干后得到粗的玉米谷蛋白备用；
280.步骤四：玉米谷蛋白的提取纯化(碱提酸沉法)
281.s4.1:用0.1mol/lnaoh和步骤三中粗的玉米谷蛋白进行混合并提取，料液比为1∶10 (g/ml)，在50℃水浴震荡2h；
282.s4.2:取出上述步骤中的悬浮液于3000r/min的离心机内离心20min，取上清液；
283.s4.3:重复s4.1和4.2，继续反应1h；
284.s4.4:将两次离心得到的上清液，用4mol/lhcl调ph至4.8(谷蛋白等电点)；
285.s4.5:将上述步骤中的混合液于3000r/min的离心机内离心20min，取沉淀滤饼；
286.s4.6:将上述步骤中的沉淀滤饼用70％乙醇溶液洗涤两遍，再用蒸馏水洗涤两遍；
287.s4.6:将上述步骤中所得滤饼冷冻干燥即可。
288.由图2可以看出，本技术提供了一种玉米谷蛋白的制备方法，综合考虑玉米谷蛋白制备过程中存在的困难，通过蒸汽调节含水量、膨化机、离心机等设备用于玉米谷蛋白的加工制备中，有效的提高了玉米谷蛋白的提取率。