一种四角平甲轮虫（Platyias quadricornis）快速繁殖培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] -种四角平甲轮虫（/7ZaiiFia1S (JttaiZricorai1S)快速繁殖培养基，属于动物育种领 域，更具体地说是一种快速繁殖四角平甲轮虫（/ 7ZaiiFia1S (JttaiZricorai1S)的培养基。
【背景技术】
[0002] 轮虫（Rotifera)是全球性广泛分布的浮游动物，四角平甲轮虫（/iZai iFia1S (jttat/ricorais )是一种中污水系的淡水轮虫种类之一，隶属于轮虫动物门、单巢纲 (Monogononta)、游泳目（Ploima)、臂尾轮科（Brachionidae)，平甲轮属（/7ai_Fia5·)，其在 水生态系统的结构组成、物质循环和能量传递过程中具有重要的作用，在水产养殖和水环 境监测等方面也具有重要的应用价值。
[0003] 由于四角平甲轮虫对人工培养基要求严格，对食物条件要求苛刻，其在国内外常 用的轮虫培养液(如EPA和Gilbert培养液)中均不易生长，且其繁殖速率慢，卵产出后并不 附着在母体上，换水时容易遗漏卵粒，从而造成难以在实验室内对其批量培养，使得很多以 此物种为研究对象的科学研究和生产实践难以开展。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于，提供一种四角平甲轮虫的快速繁殖培养基及其制备方法。
[0005] 为达到上述目的，本发明是这样实现的： 一种四角平甲轮虫（/iZaiiFia1S (juat/ricorais)快速繁殖培养基，其特征在于，所述培 养基配方为：3ml轮虫Gilbert培养液+3〇μ?食物1 (低浓度的斜生栅藻藻液）+ 3〇μ?食物 2 (熟米饭滤液）+ 3〇μ?食物3 (鸡蛋黄滤液）； 所述 Gilbert 培养液的配方为：100 mg KNO3,40 mg K2HPO4,62 mg MgSO4. 7Η20,144 mg Ca(NO3)2. 4Η20 溶解在 1000 ml 的 NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液（0.002mol/L，pH 7.3)。
[0006] 所述培养基的食物1，其配方为：HB-4培养基培养的、处于指数增长期的斜生栅 藻，用上述灭菌过滤后的轮虫培养基稀释成浓度为4.0X10 8 cell/ml的低浓度藻液，使用 前打匀。
[0007] 所述培养基的食物2,其特征在于，其配方为：取2g新鲜熟米饭，置于50ml烧杯 中，加入30ml蒸馏水，煮沸2分钟，然后用25 μ m孔径的滤网过滤，取滤液，置于4°C冷藏，使 用前打匀。
[0008] 所述培养基的食物3,其特征在于，其配方为：取0. 5g煮熟的鸡蛋黄，置于50ml烧 杯中，加入30ml蒸馏水，煮沸2分钟，然后用25 μ m孔径的滤网过滤，取滤液，置于4°C冷藏， 使用前打匀。
[0009] 本发明的有益效果在于：可有效提高四角平甲轮虫的生长速率和产卵量。
[0010]
【具体实施方式】： 下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述。
[0011] 一、实施例I 采用群体累积培养法研究了食物种类对四角平甲轮虫种群动态的影响。实验开始前将 四角平甲轮虫置于人工培养箱中预培养一周。预培养期间，自然光照，温度为25±l°c，培养 基为Gilbert配方培养液，食物为HB-4培养基培养的处于指数增长期的斜生栅藻。实验开 始时，挑取龄长小于4小时的四角平甲轮虫幼体5只置于特制的5ml玻璃杯中进行培养，培 养液体积为3ml。实验设置了一个对照组（A组)和两个处理组（B组和C组)，每组3个重复 (A1、A2、A3、B1、B2、B3、C1、C2和C3)。对照组（A组）培养方法采用Gilbert培养液+斜生 栅藻，B组培养方法采用灭菌过滤后的轮虫培养基+食物1+食物2, C组培养方法采用灭菌 过滤后的轮虫培养基+食物1+食物2+食物3。实验过程中，每24小时对各组轮虫及其所 带卵粒进行计数，同时更换培养液并投喂食物，直至其中一个处理组的轮虫全部死亡为止。 实验数据如下(其中e表示轮虫所带的卵粒数）： 表1食物种类对四角平甲轮虫种群动态的影响
【主权项】
1. 一种四角平甲轮虫（/iZaiiFia1S (JttaiZricorai1S)快速繁殖培养基，其特征在于，所述 培养基配方为：3ml轮虫Gilbert培养液+3〇μ?食物1(低浓度的斜生栅藻藻液）+ 3〇μ? 食物2(熟米饭滤液）+ 3〇μ?食物3(鸡蛋黄滤液）；所述Gilbert培养液的配方为：100 mg KN03,40 mg K2HP04,62 mg MgS04.7H20，144 mg Ca(N03)2.4H20 溶解在 1000 ml 的 NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液（0· 002mol/L，pH 7. 3)。
2. -种制备权利要求I中培养基的Gilbert培养液，其特征在于，其配方为：100 mg KN03,40 mg K2HP04,62 mg MgS04.7H20，144 mg Ca(N03)2.4H20 溶解在 1000 ml 的 NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液（0· 002mol/L，pH 7. 3)。
3. -种制备权利要求I中培养基的食物1，其特征在于，其配方为：HB-4培养基培养 的、处于指数增长期的斜生栅藻，用上述灭菌过滤后的轮虫培养基稀释成浓度为4. OX IO8 cel Ι/ml的低浓度藻液，使用前打匀。
4. 一种制备权利要求1中培养基的食物2,其特征在于，其配方为：取2g新鲜熟米饭， 置于50ml烧杯中，加入30ml蒸馈水，煮沸2分钟，然后用25 μ m孔径的滤网过滤，取滤液， 置于4°C冷藏，使用前打匀。
5. -种制备权利要求1中培养基的食物3,其特征在于，其配方为：取0. 5g煮熟的鸡蛋 黄，置于50ml烧杯中，加入30ml蒸馈7jC，煮沸2分钟，然后用25 μ m孔径的滤网过滤，取滤 液，置于4°C冷藏,使用前打匀。
【专利摘要】本发明公开了一种四角平甲轮虫（Platyias quadricornis）快速繁殖培养基，其配方为：3ml轮虫Gilbert培养液+30μL食物1(低浓度的斜生栅藻藻液)+ 30μL食物2(熟米饭滤液)+ 30μL食物3(鸡蛋黄滤液)。使用上述培养基，可有效提高四角平甲轮虫的生长速率和产卵量。
【IPC分类】A23K1-14, A01K67-033, A23K1-18, A23K1-00
【公开号】CN104543586
【申请号】CN201510035481
【发明人】项贤领, 江瑞明, 陶媛媛, 夏梦宁
【申请人】安徽师范大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月26日