一种适用于生产无药物残留优质猪肉的饲料添加剂及方法
【专利摘要】本发明公开了一种适用于生产无抗生素残留优质猪肉的饲料添加剂，该饲料添加剂是由A和B两部分组成，A部分为微生态制剂，B部分由壳寡糖和杜仲提取物以及载体构成；微生态制剂由植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌以及解淀粉芽孢杆菌按活菌数目为(10～20)：(15～30)：(10～20)：(0～50)的配比组成；壳寡糖、杜仲提取物以及载体的重量比为(1?2)：(1.5?3)：(3?5)。本发明将不仅达到了促进动物肠道健康、提高动物的免疫力的目的，而且获得了生产无药物残留优质猪肉的效果。
【专利说明】
一种适用于生产无药物残留优质猪肉的饲料添加剂及方法
技术领域
[0001] 本发明属于饲料添加剂技术领域，具体而言，涉及一种生产无药物残留优质猪肉 的饲料添加剂及方法。
【背景技术】
[0002] 在过去的几十年中，抗生素作为饲料添加剂在饲料工业中大规模的应用，在预防 畜禽疾病，促进动物生长，提高饲料报酬方面发挥了不可磨灭的作用；同时极大的提高了畜 禽的数量及畜产品的产量，积极的推动了国内外畜牧业的发展，创造了较为可观的经济效 益。随着畜禽饲养集约化程度的提高，养殖过程中大量抗生素等促生长药物饲料添加剂的 使用，造成药物在畜禽产品中残留，严重影响了畜禽产品的品质，给食品安全问题带来了隐 患，成为制约畜牧业健康发展的关键因素之一。因此，欧盟从1999年开始禁止在饲料中添加 杆菌肽锌、螺旋霉素、维吉尼亚霉素、泰乐菌素4种抗生素;并在2006年开始全面禁止使用抗 生素做生长促进剂，日本于2008年全面禁止使用抗生素做生长促进剂，美国于2017年全面 禁止使用抗生素做生长促进剂，我国2015年9月禁止4种抗生素的使用，2016年6月删除了硫 酸黏菌素预混剂的促生长用途，不能再作为饲料添加剂使用。因此，全面禁止药物饲料添加 剂在饲料中使用是必然的趋势，无抗饲养研究需求迫切。在不降低生产性能的基础上，寻找 抗生素的替代品及替代技术保障畜禽健康从而获得优质肉产品是解决上述问题的关键。
[0003] 微生态制剂(Probiotics)又被称为益生菌或微生态调节剂，是一种进入寄主机体 后有益于寄主健康的活性微生物，具有无毒、无副作用、无残留的特点。微生态制剂是通过 向动物肠道中导入有益的活菌及其代谢产物，维持肠道内正常的微生态平衡，达到预防和 治疗疾病，增强动物机体的免疫力，提高生产性能等作用，并且不会产生耐药性，无抗生素 残留，成为目前抗生素替代品研究和应用的热点和焦点。早在20世纪初，人类就认识到乳酸 菌等多种微生物可对人体产生有利影响，我国农业部允许使用的饲料级微生物菌种包括乳 酸菌、酵母菌、双歧杆菌和芽抱杆菌等16种。一般而言，这些微生物多从动物肠道内分离出 来。微生态制剂主要通过调节肠道微生态平衡，而起到减少动物疾病发生、促进动物生长和 提高料肉比等作用。
[0004] 综上所述，通过研究开发一种以益生菌为主要活性成分，能改善生猪的肠道微生 态结构，对生猪具有一定的促生长作用，且能促进生猪对营养物质的消化吸收的饲料添加 剂，这显得尤为必要。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于通过大量的筛选试验和动物饲养试验，提供一种可有效替代抗 生素的促生长作用且能生产出无抗生素残留优质猪肉的饲料添加剂。
[0006] 本发明的目的是这样实现的：
[0007] -种适用于生产无抗生素残留优质猪肉的饲料添加剂，该饲料添加剂是由A和B两 部分组成，A部分为微生态制剂，B部分由壳寡糖和杜仲提取物以及载体构成；
[0008] 所述微生态制剂由植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌以及解淀粉芽孢杆菌按活 菌数目为（10~20): (15~30): (10~20):(0~50)的配比组成；
[0009] 所述的壳寡糖、杜仲提取物以及载体的重量比为(1-2): (1.5-3): (3-5)。
[0010] 发明人在试验中发现，饲料添加剂中A和B两部分具有相互促进的作用，如果只添 加 A部分不添加 B部分，或只添加 B部分不添加 A部分，则试验结果不够理想，比如仔猪腹泻率 升高，或生长速度不够理想。另外，B部分中的壳寡糖和杜仲提取物缺一不可，如果将杜仲提 取物换成其他植物提取物，则在母猪的应用中不能有效减少便秘发生率，也不利于提高哺 乳母猪采食量，最终影响了仔猪的健康状况。
[0011]优选地，如上所述的饲料添加剂，其中的杜仲提取物按如下方法制备而成:称取干 燥杜仲叶，粉碎后置于多功能提取罐中，以50%-60%的乙醇溶液为溶剂，料液比1: 20-80， 在微波功率500-550W的条件下提取2-5min，过滤，将滤液进行减压浓缩，获得浓缩液，将过 滤后的残渣烘干作为载体，加入浓缩液中进行喷雾干燥，得到杜仲提取物。
[0012]优选地，如上所述的饲料添加剂，其中的植物乳杆菌为植物乳杆菌ACCC11016。 [0013]优选地，如上所述的饲料添加剂，其中的干酪乳杆菌为干酪乳杆菌CICC21814。 [0014]优选地，如上所述的饲料添加剂，其中的粪肠球菌为粪肠球菌CICC21869。
[0015] 优选地，如上所述的饲料添加剂，其中的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌 ACCC10619。
[0016] 优选地，如上所述的饲料添加剂，其中的载体是魔芋精粉或魔芋飞粉或两者混合 物。
[0017] 另外，根据对上述饲料添加剂的灵活应用，本发明第二个目的在于一种适用于生 产无抗生素残留优质猪肉的方法，该方法包括如下步骤：
[0018] (1)将植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌以及解淀粉芽孢杆菌在液态培养基中增 殖后，通过水线供猪饮水用；
[0019] (2)将壳寡糖和杜仲提取物与配合饲料混合均匀后供猪采食。
[0020] 再进一步优选地，上述的液态培养基由市售红糖、牛肉膏和水按重量份数（50_ 100): (30-50): (8000-10000)构成。
[0021] 与现有技术相比，本发明将微生态制剂，功能性寡糖以及植物提取物按照一定比 例复配成饲料添加剂，其不仅达到了促进动物肠道健康、提高动物的免疫力的目的，而且获 得了生产无药物残留优质猪肉的效果。具体地，通过试验研究表明，在仔猪的应用中可提高 仔猪采食量、生长速度，减小断奶应激，降低仔猪腹泻率;在母猪的应用中促进肠道健康，减 少便秘发生几率，提高哺乳母猪采食量，降低母猪失重，提高仔猪初生重、提高断奶仔猪窝 重;在生长育肥猪可完全替代饲料中抗生素等药物饲料添加剂，平均日增重达到820g以上， 整个育肥期料肉比2.6:1以下，详细记录育肥期间用药打针情况，对育肥期间从未用过药物 的育肥猪猪肉进行药物残留检测发现猪肉中没有任何药物残留。
【具体实施方式】
[0022]以下是本发明饲料添加剂的具体制备例，对本发明的技术方案做进一步作描述， 但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均 包括在本发明的保护范围之内。
[0023]需要说明的是，以下实施例涉及的微生态制剂中有效活菌总数为1.OX 101()~5.0 X 1〇1()个/g，其中的采用的菌株来源如下：
[0024]植物乳杆菌：购买于中国农业微生物菌种保藏管理中心，植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)编号为ACCC11016;
[0025] 干酪乳杆菌假植物亚种:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心，干酪乳杆菌 (Lactobacillus casei subsp.pseudoplantarum)编号为CICC21814;
[0026] 奠肠球菌:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心，奠肠球菌(Enterococcus faecalis)编号为 CICC21869;
[0027] 解淀粉芽孢杆菌：购买于中国农业微生物菌种保藏管理中心，解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)编号为ACCC10619。
[0028] 另外，以下实施例中所采用的植物提取物按如下方法制备而成:称取lkg干燥杜仲 叶，粉碎后置于多功能提取罐中，以55%的乙醇为溶剂，料液比1:40，微波功率520W的条件 下提取，提取时间3min，过滤，将滤液进行减压浓缩，获得浓缩液，将提取后的残渣烘干作为 载体，加入浓缩液中进行喷雾干燥，获得杜仲提取物。
[0029]实施例1:断奶仔猪试验
[0030]选取8Kg左右胎次相同、体重相近、健康的杜X长X大三元杂交断奶仔猪100头。试 验采用单因素完全随机试验设计，分为两个处理：基础日粮+抗生素组（含硫酸粘杆菌素 100mg/kg、杆菌肽锌50mg/kg)，基础日粮+0.1 %饲料添加剂组。饲料添加剂为微生态制剂： 壳寡糖:杜仲提取物:魔芋精粉按重量份数比为1:1: 3: 5组成，其中微生态制剂为植物乳杆 菌、干酪乳杆菌和粪肠球菌按活菌数目比在10:15:10左右。每个处理有5个重复，每个重复 10头断奶仔猪。
[0031]试验前驱虫，饮水器提供充足清洁饮水，每日分别于8:00和14:30饲喂。其他免疫、 消毒、卫生等饲养管理按猪场常规进行。供试前观察生长猪的健康状况，试验期为28天。 [0032]在正式试验开始前和试验结束第二天8:00空腹12h称重，准确记录每天的饲料消 耗量，计算平均日增重和料重比。
[0033]平均日增重=各重复组总增重/试验天数/各重复组头数 [0034] 料重比=饲料总消耗量/总增重
[0035] 平均日采食量=各重复组总耗料量/试验天数/各重复组头数
[0036] 腹泻率=试验期每天腹泻头数的总和/(试验猪头数X天数）X 100%。
[0037] 表1不同试验处理对断奶仔猪生长性能的影响
[0038]
[0039]
[0040] 结果表明：试验组较对照组末重、平均日增重、平均日采食量分别较对照组提高了 6.00%、10.25%和4.80%，料肉比和腹泻率分别降低了4.93%和37.25%。
[0041] 实施例2:母猪、仔猪试验
[0042]选择84天左右怀孕母猪20头，根据胎次、怀孕时间随机分为两组，每组10头，每头1 个重复。对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂试验日粮，试验日粮配方在对照组日粮配方基础 上按照500g/T添加本发明的饲料添加剂B部分，具体组成按重量份数比壳寡糖：杜仲提取 物:魔芋精粉为2:5:3。饮水方面对照组饮用自来水，试验组则饮用含有本发明A部分饲料添 加剂的纯化水，添加剂中植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌以及枯草芽孢杆菌按活菌数目 为10:15:20:45的配比组成。
[0043] 每日分别于8:00和14:30饲喂试验动物，按试验设计由饮水器提供充足清洁饮水。 其他免疫、消毒、卫生等饲养管理按猪场常规进行。供试前观察母猪的健康状况，试验期为 56天，仔猪在21天断奶。
[0044] 从试验开始准确记录母猪的便秘次数，待母猪产完仔后的当天，记录产仔头数并 称量出生窝重，开始准确记录母猪每天的饲料消耗量，待断奶后计算哺乳期平均日采食量； 待仔猪断奶时记录窝断奶仔猪头数并称量断奶窝重。
[0045] 哺乳期平均日采食量=各重复组总耗料量/试验天数/各重复组头数
[0046] 腹泻率=试验期每天腹泻头数的总和/(试验猪头数X天数）X 100%
[0047]出生窝均重=出生窝重/出生头数
[0048]断奶窝均重=断奶窝重/断奶头数。
[0049] 表2不同试验处理对母猪生产性能的影响
[0050]
[0051]试验结果表明：试验组较对照组哺乳期平均采食量提高了3.23%，便秘发生率显 著降低了51.48%，断奶窝均重及21日龄仔猪成活率分别提高了9.48%和3.30%，差异显 著。
[0052]实施例3:生长育肥猪试验
[0053]选择30kg左右生长育肥猪800头，根据日龄相近、体重相同的原则随机分为2组，每 组4个重复，每个重复100头猪。对照组饲喂基础日粮（含硫酸粘杆菌素60mg/kg、杆菌肽锌 30mg/kg)，试验组饲喂试验日粮，试验日粮配方在基础日粮配方基础上添加本发明饲料添 加剂替代硫酸粘杆菌素和杆菌肽锌，添加量为lkg/T。该饲料添加剂由壳寡糖:杜仲提取物： 魔芋精粉按重量份数比为1:3:4组成。饮水方面，对照组饮用自来水，试验组饮用本发明A部 分微生态制剂增殖后的自来水。微生态制剂A具体组成为植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球 菌按活菌数目为15:25:20的配比组成。试验组做好用药和打针记录，饲养周期为100天。
[0054] 试验前驱虫，饮水器提供充足清洁饮水，每日分别于8:00和14:30饲喂。其他免疫、 消毒、卫生等饲养管理按猪场常规进行。在正式试验开始前和试验结束空腹12h第二天上午 8:00称重，准确记录每天的饲料消耗量，计算平均日增重和料重比。
[0055] 平均日增重=各重复组总增重/试验天数/各重复组头数 [0056] 料重比=饲料总消耗量/总增重
[0057]平均日采食量=各重复组总耗料量/试验天数/各重复组头数 [0058] 在育肥猪体重达到100kg左右，试验结束。试验组随机挑选10头没有用过药物和打 过针的育肥猪进行屠宰试验，进行药物残留、肉质的氨基酸组成以及肌肉肌苷酸及其代谢 物含量的影响。
[0059] 表3不同试验处理对生长肥育猪生长性能的影响
[0060]
[0062]表4对育肥猪肉质氨基酸组成的影响
[0063]
[0064] 表5对育肥猪肌肉肌苷酸及其代谢物含量的影响
[0065]
[0067] 从氨基酸和肌苷酸含量可以看到，试验组均由不同程度的提高，肉质得到了改善。
[0068] 实施例4:不同菌株对大肠杆菌K88的抑制试验
[0069] 将植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌采用MRS培养基进行活化，大肠杆菌K88采用 营养肉汤培养基进行活化，分别取活化好的植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌及大肠杆 菌，用无菌水稀释菌液至菌体浓度为IX l〇6cfu/ml的稀释液，其中菌体计数法采用的是显 微直接计数法。称取60g过1.5mm筛的由玉米:豆柏=1:3比例组成的基料于500ml的烧杯中 作为为培养过程中的培养基，按料水比1: 3.5加入37°C左右的温水。具体试验方案按下表6 进行，然后封口置37°C恒温培养箱中静置培养。每隔12h搅动一次，取样检测。在24h无菌操 作称取液态基料5g溶于45ml灭菌生理盐水中，然后用无菌水做10倍梯度稀释，选择合适的 稀释度分别用伊红美蓝培养基和MRS培养基检测物料中大肠杆菌K88和乳酸菌株的数量。
[0070] 表6试验设计组别
[0071]
[0072]根据表7的试验可以得出，复合菌株在24h时对大肠杆菌K88的抑制效果较对照组 降低了67.76%，单一的乳酸菌株较对照组大肠杆菌的数量分别降低了24.35%、15.67%、 15.07%;并且在24h时，复合菌株的乳酸菌数也明显优于对照组和单一乳酸菌株，较对照组 和单一乳酸菌株的乳酸菌数分别提高了81.64%、58.32%、34.03%和50.09%。
[0073]表7不同菌株对致病性大肠杆菌K88的抑制效果比较
【主权项】
1. 一种适用于生产无抗生素残留优质猪肉的饲料添加剂，其特征在于，该饲料添加剂 是由A和B两部分组成，A部分为微生态制剂，B部分由壳寡糖和杜仲提取物以及载体构成； 所述微生态制剂由植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌以及解淀粉芽孢杆菌按活菌数 目为（10~20): (15~30): (10~20):(0~50)的配比组成； 所述的壳寡糖、杜仲提取物以及载体的重量比为（1-2): (1.5-3): (3-5)。2. 根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，所述的植物乳杆菌为植物乳杆菌 ACCC11016。3. 根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，所述的干酪乳杆菌为干酪乳杆菌 CICC21814。4. 根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，所述的粪肠球菌为粪肠球菌 CICC21869。5. 根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，所述的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽 孢杆菌 ACCC10619。6. 根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于，所述的载体是魔芋精粉或魔芋飞粉 或两者混合物。7. -种适用于生产无抗生素残留优质猪肉的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤： (1) 将植物乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌以及解淀粉芽孢杆菌在液态培养基中增殖 后，通过水线供猪饮水用； (2) 将壳寡糖和杜仲提取物及载体与配合饲料混合均匀后供猪采食。8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的植物乳杆菌为植物乳杆菌 ACCC11016,所述的干酪乳杆菌为干酪乳杆菌CICC21814,所述的粪肠球菌为粪肠球菌 CICC21869,所述的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌ACCC10619。
【文档编号】A23K20/163GK106071233SQ201610452082
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月21日
【发明人】杨雪海, 赵娜, 陈芳, 郭万正, 张巍, 黄少文, 其他发明人请求不公开姓名
【申请人】湖北省农业科学院畜牧兽医研究所