专利名称：复方丹参滴丸在制备治疗原发性高血压病药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属医药领域，具体涉及复方丹参滴丸在制备治疗原发性高血压病药物中的应用。
背景技术：
冠心病、心绞痛的临床表现属于中医学“胸痹”、“真心痛”等范畴，中医认为其发病机制有数种，有为“心虚邪干而痛者”；有为“阳气郁伏而痛者”；有为“血因邪泣在络不行而痛者”；有为“血虚而痛者，有为痰湿阻抑而痛者”；总之，都属于“血行不畅”所致。根据这一特点，前人研制了由丹参、三七、冰片等三味中药组成的复方丹参片。
丹参属于活血化淤类中药。其主要成分为丹参酮I、IIA、IIB(Tanshinone I、IIA、IIB)、异丹参酮I、II(Isotanshinone I、II)、丹参酸甲酯(Methyl tanshinanate)羟基丹参酮IIA(Hydroxytanshinone IIA)丹参新酮(Miltrirone)、隐丹参酮(Cryptotanshinone)、异隐丹参酮(Isocryptotanshinone)、左旋二氢丹参酮I、丹参酚(Salviol)以及维生素E(Vitamine E)等。现代药理研究证明丹参具有扩张冠状动脉、抗心肌缺血、抗凝、抗血栓形成、镇静止痛以及降血脂和抗动脉粥样硬化等作用。
三七属于止血类中药。中医学认为其具有散淤止血，消肿定痛的功能，既止血又活血。其有效成分主要为皂甙类，包括人参皂甙Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、F2，丝石竹甙IX、XVII，三七人参皂甙Fa、Fe、F1、F4，人参皂甙Re、Rg2、Rh1，三七人参皂甙R1、R2、R3、R4、R6、F8，竹节人参皂甙V、IV和阿托伯脱呋喃糖竹节人参皂甙IV等。倍半萜类化合物主要有2，8-二甲基-5-乙酸基-双环〔5、3、0〕癸二烯，1，8-δ-愈创烯和δ杜松烯。还含有三七素(化学名为β-N-乙二酸酰基-L-α-β-二氨基丙酸)、黄酮甙类、三七多糖A、β-谷甾醇、β-谷甾醇-D-葡萄糖甙等。现代药理研究证明三七既有止血作用又有抗凝血作用。止血作用包括缩短出凝血时间、增加血小板数量并使其出现伸展伪足、聚集、脱颗粒等现象，还能降低毛细血管通透性。显示抗凝血作用的是三七中的部分成分三七根总皂甙、三七人参二醇型皂甙和三醇型皂甙，它们均能抑制人和兔血小板的聚集。三七总皂甙可促进血管内皮细胞分泌组织型纤溶酶原(t-PA)，阻止血栓的形成。
冰片为龙脑香科植物龙脑香树脂的加工结晶品。菊科艾纳香属植物大风艾的叶经水蒸汽蒸馏提取加工而得的结晶称为艾片。由樟脑、松节油等用化学方法合成的加工制成品称为机制冰片。冰片辛散苦泄，芳香走串，能通诸窍，散郁火，有类似麝香的开窍醒神之功。
龙脑冰片主要含右旋龙脑；艾片主要含左旋龙脑。现代药理研究证明冰片具有抗心肌缺血的作用，能使冠脉流量明显增加；此外，冰片还能增加血脑屏障的通透性，加强药物跨屏障能力。
由上述三味中药组成的复方丹参片具有活血化淤、理气止痛的功能；其临床适应症为冠心病、心绞痛。复方丹参滴丸是在此基础上研制而成的滴丸剂，疗效优于复方丹参片。其特点为起效迅速(舌下含服)，尤其适用于心绞痛的急性发作，此外口服也同样有效。复方丹参滴丸批准文号为(95)卫药准字Z-01号，其获准的“功能与主治”为活血化淤、理气止痛，用于胸中憋闷、心绞痛。因其疗效显著，目前在临床上得到广泛应用。
复方丹参片和复方丹参滴丸之所以疗效显著，是因为其配方中的三味中药配伍合理。该方虽然是由三味药组合而成，但其作用却不能简单地用其组成药物的作用解释清楚，其作用大小也不仅是几种药物之和。该方是在中医活血祛瘀理论与经验基础上，按组方原则配方，充分发挥药物配合组方之长处，既能使其中的单味药失去某种生物活性，减轻毒副作用，又能加强原有药物的疗效，或衍化产生新的功用。正如清代徐灵胎《医学源流论·方药离合论》所云“此方之既成，能使药各全其性，亦能使药各失其性。操纵之法，有大权焉，此方之妙也。”经过近年来的临床与实验研究，复方丹参滴丸的应用范围得到了进一步的拓展，目前已证实其具有抗心绞痛、改善心肌缺血、降低血黏度、降低血小板聚集等多用。近年来的研究工作又发现复方丹参滴丸还具有抗动脉粥样硬化、降血脂及抗慢性肝病纤维化作用等，但至今未见治疗原发性高血压病的报导。
本发明复方丹参滴丸经动物实验证实在一定的剂量下可明显降低清醒自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)的动脉血压。研究结果表明，原属于抗心肌缺血类药物的复方丹参滴丸具有抗原发性高血压的作用。
为了更好地理解本发明的实质，下面用复方丹参滴丸在高血压动物模型中的试验结果，说明其在制药领域中的新用途。SHR是目前公认的最能代表人类原发性高血压病的动物模型，麻醉又对动物血压及心率有明显影响，且可能发生麻醉药物与受试药物对血压的影响，本发明选用SHR作为高血压模型，在其清醒状态下连续观察复方丹参滴丸对大鼠血压和心率以及对心室乳头肌收缩力的影响。
一、复方丹参滴丸对大鼠血压和心率的影响1.实验材料(1)实验动物3-4月龄的清洁级SHR，雌雄不拘，由中国科学院上海实验动物中心提供，动物合格证号中科动管第0003号、第0005号。
(2)药物及试剂复方丹参滴丸，由天津天士力制药集团有限公司生产，批号20000306，溶于新鲜三蒸水中，0.22μm滤膜过滤除菌。肝素钠注射液，上海第一生化药业公司生产。生理盐水由上海长征富民药业有限公司生产。肝素生理盐水以每500ml生理盐水中加入6250单位肝素配制而成。水合氯醛，中国医药(集团)上海化学试剂公司生产。
(3)实验仪器PT14M2换能器，复旦大学电子工程系研制。
SMUP-PC型生物信号处理系统，复旦大学医学院生理学教研室研制。
2.实验方法(1)动脉、静脉插管取SHR随机分为治疗组和对照组，经水合氯醛腹腔内注射麻醉(每公斤体重给予6％水合氯醛水溶液0.5ml)后，经颈动脉及股静脉插管。SHR大鼠随机分为治疗组和对照组，水合氯醛腹腔内注射麻醉，分别置颈动脉插管(管口位置达胸主动脉)和股静脉插管(管口位置达下腔静脉)，二根插管的另一端分离经皮下穿至颈后部穿出，将插管内灌注含肝素的生理盐水后，封闭颈后部的插管开口。
(2)血压测定术后24小时，打开大鼠颈后部二根插管的封口，将动脉插管连接至动脉换能器上，经换能器转换后的动脉压信号输入SMUP-PC生物信号处理系统贮存和分析，得出收缩压、舒张压、平均动脉压和心率的数值。颈后部的静脉插管则连接到一注射器上，以便注射药物或对照溶液。
测定血压、心率时，大鼠可在笼内自由活动。待大鼠在笼内安静45分钟后，记录动脉血压及心率，然后经股静脉插管以25mg/kg体重的剂量给予12.5mg/ml的复方丹参滴丸水溶液或等体积的生理盐水，用3分钟时间缓慢注入。注射完毕后的第1、2、3、4、5、10、15、30、45、60分钟记录1次动脉血压及心率，以后每隔1小时记录1次动脉血压及心率，直至注射后第7小时。当天实验结束后，将动脉导管继续留置在大鼠体内，大鼠再送回动物房饲养至第2天，再将大鼠颈后部的动脉插管连接到换能器上，待大鼠安静45分钟后，测定注射后第24小时的动脉血压及心率。
3.数据统计两组动物的血压及心率数值以平均值±标准误表示。两组间比较采用t检验。
4.实验结果一次给药后2小时，复方丹参滴丸组的动脉压开始低于对照组，至给药后7小时，复方丹参滴丸组的血压仍低于对照组，给药后24小时，复方丹参滴丸组的血压与对照组相比无统计学意义上的差别。
表1是一次给予复方丹参滴丸后SHR收缩压的变化。
表1例数 1h2h3h4h 5h6h 7h 24h13 -3.2±-2.0±-2.8±-9.8±-12.8 -16.8 -10.8 -10.4生理盐水 2.2 3.7 4.8 3.9 ±2.5 ±3.5 ±4.7 ±10复方丹参滴 9 1.1±7 -27±5 -34.9 -31.9-29.1 -23.4 -27.1 -15.1丸 .5.8 ±5.7 ±5.5 ±6.6 ±6.5 ±7.7 ±11二、复方丹参滴丸对大鼠左心室乳头肌收缩力的作用1. 实验材料
(1)实验动物雄性清洁级Wistar大鼠，体重300±50g，由中国科学院上海实验动物中心提供，动物合格。
(2)药物及试剂复方丹参滴丸，由天津天士力制药集团有限公司生产，批号20000306，溶于新鲜三蒸水中，0.22μm滤膜过滤除菌。
心得安，上海第二制药厂提供的原料粉剂。
心脏乳头肌营养液成分(mmol/L)NaCl(上海建鑫化工试剂厂)137.0KCl(上海振欣试剂厂) 5.4MgCl26H2O(太仓化工二厂) 1.05NaH2PO4H2O(上海新华化工厂) 0.43CaCl22H2O(泗联化工厂)1.8NaHCO3(上海虹光化工厂)12葡萄糖(上海来泽精细化学品厂) 10(3)实验仪器JJC-4电刺激仪，上海国泰仪器厂生产；台式自动平衡记录仪，上海大华仪表厂生产。
2.实验方法大鼠，体重300±50g，击头处死，迅速取出心脏并置于充有95％和5％CO2混合气体的营养液中，用手轻轻挤压心脏，洗净心腔内血液后，移到另一器皿中，剪开右心室，从室间隔正中打开左心室，暴露出左室乳头肌，用0号丝线结扎乳头肌腱索后将其剪下，迅速移入37℃含25ml营养液的恒温浴槽内，并通以混合气，将乳头肌一端固定于固定钩上，另一端与换能器相连；给予标本1g负荷，平衡30分钟，每隔15分钟换一次营养液。
实验时对乳头肌用的刺激电压为27V，波宽1ms，频率1次/s，记录仪量程为5mv或2mv，纸速30mm/分；先记录正常收缩曲线，然后用药并记录用药后5分内的收缩曲线；比较用药前后心肌收缩力的变化，以百分比表示用药后乳头肌相对收缩力＝用药后收缩幅度/用药前收缩幅度×100％表2为实验分组，药物浓度及标本数。表2标本 加入浴槽的药物浓 25ml浴槽内药物达组别 数 度和体积到的终浓度纯水 8 50μl心得安 8 0.4mg/50μl 0.016mg/ml小剂量复方丹参滴丸 8 1.25mg/50μl0.05mg/ml大剂量复方丹 8 12.5mg/μl 0.5mg/ml参滴丸3.数据统计各组标本心脏乳头肌收缩力数值以平均值±标准误表示。组间比较采用单因素方差分析(One Way ANOVA)。4.实验结果复方丹参滴丸在浴槽内药物终浓度为0.05mg/ml和0.5mg/ml时，对心脏乳头肌的收缩力无明显的影响。阳性对照药物心得安则可明显抑制心脏乳头肌的收缩。表3是药物对心脏乳头肌收缩力的影响表3用药前乳用药后5分钟组别 头肌收缩收缩幅度 相对收缩力幅度(mm)(mm) (％)空白对照43.13± 45.25± 100.43±13.7013.73 6.45小剂量丹参43.13± 45.13± 104.77±滴丸11.9212.82 5.78大剂量丹参45.63± 44.13± 97.86±滴丸13.7211.13 6.09心得安 41.00± 27.88± 67.86±8.11 7.47 10.72**与空白对照组相比，P＜0.001；各组n＝8通过上述实验，证实复方丹参滴丸可明显地使原发性高血压大鼠的血压下降，而对心肌收缩能力则无明显的抑制作用。说明复方丹参滴丸可用于抗高血压，并可治疗原发性高血压病，尤其适宜于在降压治疗中不希望心肌收缩力受到影响的群体中使用。本发明的新用途为传统中药复方丹参滴丸扩展了适应症。
图1是一次给予复方丹参滴丸后SHR收缩压变化的折线图其中*与对照组相比，p＜0.01；#与对照组相比，p＜0.05图2是药物对心脏乳头肌收缩力的影响其中*与空白对照组相比，P＜0.00权利要求
1.复方丹参滴丸在制备抗高血压药物中的应用。
2.复方丹参滴丸在制备治疗高血压病药物中的应用。
全文摘要
本发明属医药领域,具体涉及复方丹参滴丸在制药领域中的新用途。本发明选用人类原发性高血压病的动物模型SHR,在其清醒状态下连续观察复方滴丸对其血压和心率以及对心室乳头肌收缩力的影响,实验结果证实本发明可明显地使原发性高血压大鼠的血压下降,而对心肌收缩能力则无明显的抑制作用。本发明可用于抗高血压,并可治疗原发性高血压病,尤其适宜于在降压治疗中不希望心肌收缩力受到影响的群体中使用。本发明的新用途为传统中药复方丹参滴丸扩展了适应症。
文档编号A61P9/00GK1337256SQ01126819
公开日2002年2月27日 申请日期2001年9月20日 优先权日2001年9月20日
发明者朱依纯, 姚泰, 朱依谆 申请人:复旦大学