用于富集和稳定牝马尿液中的结合雌激素的方法和设备的制作方法

专利名称：用于富集和稳定牝马尿液中的结合雌激素的方法和设备的制作方法
专利说明用于富集和稳定牝马尿液中的 结合雌激素的方法和设备 本发明涉及一种用于将妊娠的牝马的尿液中的结合雌激素富集和稳定在固体载体上，以获取制备含有这种结合雌激素的天然混合物作为有效组分的药物的合适的原料的方法和设备。
雌激素在医学上用于激素替代疗法中。雌激素混合物尤其应用于治疗和预防妇女在自然的或人工的绝经期后出现的更年期病症。例如存在于妊娠牝马的尿液中的，天然结合雌激素混合物对此具有特别好的疗效和良好的耐受性。
溶解于妊娠牝马尿液(＝妊娠牝马(pregnant mares′urine)尿液，以下简称为“PMU”)中的固态物质含量自然可以在很大的范围内变动，一般来说在40-90g干物质/升范围内。除尿素和其它常见的尿内含物质以外，在PMU的固态物质中所含有酚类成分的量约为干物质的2-5重量％。在这些酚类成分中有甲酚和称为HPMF的二氢-3，4-双[(3-羟基苯基)甲基]-2(3H)-呋喃酮。它们可以以游离的或结合的形式存在。在PMU中含有一种天然的雌激素混合物，它基本上是以结合的形式存在，例如作为硫酸单酯-钠盐(以下简称“硫酸盐”)。结合雌激素(＝conjugated estrogen，以下简称“CE”)的含量可以雌激素硫酸盐计算，为干物质的0.3-1重量％。
先有技术中介绍有不同种用于直接处理和获取PMU中含有的结合雌激素的工艺方法。通常用不可与水混溶或只可少量与水混溶的极性有机溶剂，例如醋酸乙酯，正丁醇或环己醇，经过萃取由PMU中获得含有结合雌激素的提取物。但在这种液-液萃取过程中会出现诸多问题，譬如大量泡沫形成、沉淀形成、乳液形成和相分离差。一般来说需要进行多个萃取步骤，这样就造成损失而只获得部分雌激素。因此，在先有技术中为避免这些缺点而提出一系列的固相萃取方法。
为了处理少量尿液和浆液以用气相色谱法分析测定雌激素，Heikkinnen等(临床化学(Clin.Chem.)27/7，(1981)，1186-1189)和Shackleton等(临床化学学报(Clinica Chimica Acta)107，(1980)，231-243)建议借助于一个装有含十八烷基硅烷残基的经过硅烷化的硅胶的柱(Sep-PakR C18柱，生产厂家Waters Ass.Inc.Milford，MA，美国)来固相萃取雌激素。在此过程中，雌激素用甲醇由柱中洗脱。
H.L.Bradlow在1968年(参见类固醇(Steroids)11(1968)，265-272)建议，为了由尿液中萃取结合雌激素，使用Rohm和Haas公司生产的一种中性非极性的疏水性聚苯乙烯树脂，Amberlite XAD-2R。规定的吸附容量很小。根据Bradlow建议，将一种可能稀释的尿液以低流速导流过一个含有这种树脂的柱。雌激素用甲醇或乙醇洗脱。
较新的专利申请介绍了一种通过使用例如RP硅胶(WO 98/08525)或非离子型半极性的聚合型吸附剂树脂(WO 98/08526)来从妊娠牝马尿液中固相萃取结合雌激素的混合物，从含牝马尿的提取物中获取天然的结合雌激素的混合物的方法。
除了上述优化直接完全的处理妊娠牝马尿(PMU)以获取天然结合雌激素(CE)的混合物以外，还有在处理前设置的步骤，对含雌激素的原料以及由其分离的天然结合雌激素的混合物的收率和质量具有特别意义的是例如确保在收集地点收集的尿液得到保护雌激素作用下的存放与利用。相关地，还力求优化将收集的含雌激素的原料由收集地点运输到真正处理和分离结合雌激素的地点的过程。
通过例如固相萃取法来完全处理PMU的工作需要经过化学-制药学方面培训的专业人员，以便能在可良好调控的条件下，使作为制药上的高效成分使用的物质或物质混合物保持高的纯度要求和质量。但是，尿液(PMU)的收集通常在妊娠牝马的一般生活环境中进行，即在养马场，农村环境和经常还在偏僻的地方进行。一般情况下，这里只存在简单的基本设施，尿液(PMU)的收集及其利用一般由简单、粗浅培训的人员来完成，对其在对收集尿液的操作方面不可能坚持高要求。
但是，结合雌激素(CE)，相应地如在妊娠牝马尿液中分离出的，是一种含有特别是雌酮硫酸钠(Natriumestronsulfat)，马烯雌酮硫酸钠(Natriumequilinsulfat)以及其它CE的复杂的混合物。对于分离CE很重要的是，将PMU尽可能快地在新鲜状态下处理。较长时间的存放过程中，尿液开始快速分解。尿液的颜色变深，发出氨味并且CE的含量剧烈下降。分解速度取决于存放条件和纯度标准。因此，收集的尿液(PMU)，这里涉及大量液体，目前必须每天由收集地点运输到中央处理场所，以保证尽可能快的处理。
因此，迫切需要直接在尿(PMU)的收集地点尽可能保护产品地，并且可简单操作地富集并且稳定妊娠牝马尿液中含有的结合雌激素(CE)，以及尽可能有效地从收集地点运输到处理和分离地点的合适的方法和设备。
借此本发明的主题是，在避免上述缺点的条件下提出一种对获取天然结合雌激素的混合物合适的工艺方法以及一种由收集的妊娠牝马尿液(PMU)中富集和稳定结合雌激素(CE)的合适的设备。特别是这种方法和设备可以在尿液的收集地点保护产品地、可简单操作地富集和稳定PMU中的结合雌激素，并且可以尽可能有效地将这种制备的含雌激素的原料由收集地点运输到真正的处理与分离天然结合雌激素的混合物的地点。
惊奇地发现，在固态载体(＝吸附剂)上结合雌激素(CE)结合得很稳定，经过较长时间没有任何一点分解的迹象，可持久保存。
因此，本发明涉及一种针对实际地，分散地，即特别是在马厩和/或牧场附近富集与稳定妊娠牝马尿液(PMU)中的结合雌激素(CE)的混合物的方法，其特征为， —将妊娠牝马尿液(PMU)中含有的天然结合雌激素(CE)的混合物富集和稳定在固态载体(＝吸附剂)上，其中 —将设定最大总量的收集的，也可能事先过滤的尿液由贮存容器中连续地或以间歇部分量地以设定的流速，泵送通过直立安装的筒，舍弃流出的尿液，这里 —筒用一种(持续)由液体围绕、适用于吸附给定量的在尿液中含有的结合雌激素(CE)的混合物的吸附剂填充，且其中 —作为终点的控制，对吸附剂的负载设定，使最大的泵送通过筒的尿液总量与吸附剂的对尿液中含有的结合雌激素(CE)而言最大的负载容量匹配。
概念“针对实际”这里是指，此方法适应现场的收集实际条件，即可简单地，可靠地由粗浅培训的人员操作；即不复杂，可以在基本上排除可能的错误操作的条件下进行。
概念“分散”这里是指，此方法可以在没有特定的化学制药设备的尿液收集操作的每个地点，即特别是在马厩和/或牧场附近进行。作为“筒”这里是指各种具有可关闭的流入口和流出口以及连接单元，例如快速离合器的封闭柱。概念“筒”在本发明范围内也包括如通常用于实验室、工业或化学企业中的那些柱，其如前面提到的那样装配以用于本发明的应用。
按照本发明的方法，有利的是，制备了一种用于制备含有由PMU中得到的天然结合雌激素的混合物作为有效组分的药物的原料或起始材料，其中，PMU的天然雌激素混合物含量实际上完全富集在吸附剂(载体)上，可经过较长时间在各收集地点的一般的环境条件下稳定化。在完全(最大)负载后，筒可以容易地替换，用装有未负载的吸附剂的筒代替。有负载过的吸附剂的筒还可以长时间在现场在室温或希望的情况下也可冷却到约4℃，在某种前提条件下也可深冷至-20℃存放，例如直到有一定数目的筒要收集运输至中央处理地点。运输可以在室温，或如对于存放所述的，在冷却或深冷却条件进行。天然结合雌激素(CE)的混合物的真正的处理和分离过程可以在中央处理地点，以对相应吸附剂常用的方式，例如将CE由吸附剂清洗并洗脱，按习惯的方法进一步处理洗脱液。例如，洗脱液可以按已知方法进一步浓缩，以得到一种除去大部分或全部有机溶剂，适于制药的进一步加工的浓缩物。希望的情况下还可以通过其它种合适的干燥方法，例如通过喷雾干燥，流化床干燥，冻干或真空干燥，制备一种无洗脱溶剂的固态物质混合物。不仅含雌激素混合物的洗脱液，还有由其制备的浓缩物或喷雾干燥的固态物质产物都可以按已知方法加工为固态或液态的药物制剂，例如药片，糖衣药丸，胶囊或乳液。
除了按本发明的方法以外，本发明还涉及一种在此方法中可使用的设备，其考虑按目的在使用地点的简单条件，保证方法以可靠、保护产品地实施。这种按本发明的设备适于针对实际，分散地，即特别是在马厩或牧场附近进行富集与稳定过程。下面一般性地阐述一些其它对方法的实施来说很重要的工艺参数。关于设备的适于按本发明的方法的实施的特定的结构或装置设计，进一步在下面参阅按本发明设备的详细说明，其也可能为考虑下面对方法实施的一般性说明而引作补充。
对于按本发明的方法而言，这种收集的PMU可以以其本身的形式使用，日收集量的PMU首先预存放在贮存容器中。也可能合适的是，例如借助简单的粗网眼筛，在将新收集的PMU向存放容器中装填时预先分离掉粗的机械杂质，如麦杆，干草等。希望的情况下，为减少病菌和病毒数量，向存放容器中的收集尿液中添加保腐剂，消毒剂，杀菌剂和/或驱虫剂。
PMU根据尿液的产量有规律地，例如每日一次至二次，借助一台泵，例如借助一台软管泵(Schlauchpumpe)，从存放容器中抽至含有吸附剂的筒中。这个筒通常具有允许由有一般力气的人员手工操作的尺寸和重量。就本方法来说推荐，用于接纳吸附剂床的筒的内部尺寸设计为，它可以容纳30至50l吸附剂，PMU由流入至流出优选必须经过80至120cm的一段距离。按本发明，通过PMU与吸附剂的接触将结合雌激素吸附在吸附剂上，其中尿液选择从例如顶端或底部输入含有吸附剂的、竖直安装的筒中，其中在流经过程中，保持与吸附剂接触的时间足够雌激素含量的吸附，直到残余尿液最后在相反一侧离开筒。这里，PMU这样，例如从顶端或底部输入筒，以便保证吸附剂持续地由液体围绕，以尽可能排除筒出现的不希望的干燥过程。
接触时间或流经速度取决于相应吸附剂而加以调节，在对本方法合适的吸附剂(＝负载速度)来说，为3-10吸附剂-床体积/h，优选4-6吸附剂-床体积/h。例如合适的负载速度为例如4.5至5.5吸附剂-床体积/h。
对于特别优选的吸附剂来说，特定的接触时间和流经速度进一步在下面说明这种吸附剂时给出。
可流经筒的尿液的最大总量取决于每种吸附剂的吸附容量，对于本方法合适的吸附剂为20至60吸附剂-床体积，优选为30至40吸附剂-床体积。通常，可流经筒来负载的尿液的最大总量，按照吸附剂和筒的尺寸在900至2000l之间。各流经量的终值，对各筒类型而言为收集地点的操作人员而固定设定。因此，为测定经过筒泵送的尿液的量，可以使用一种简单的流量仪，优选例如水表。当达到最大负载量后，可转接平行设置的第二个筒，继续此吸附过程。
如果达到了对筒设定的终止值，在中止液体供应之前，需要的话将具有吸附的CE的筒还例如用水和/或其它合适的含水的洗液冲洗。之后关闭液体的流出口和液体的流入口，然后打开通向筒的液体流入口的连接装置，例如快速离合器。负载的筒可以就此取出，存放在合适的地点直到运输至中央处理场所，将一个新的、未负载过的筒连接到液体输入口。
此筒在用PMU负载后，例如在交换一个完全用PMU负载的筒之前，或也在任意各分负载步骤之后达到总负载容量之前，在希望的情况下还用水和/或其它合适的含水洗液，例如碱性洗液，如特别是稀氢氧化钠水溶液(例如含水的0.5-2N NaOH)冲洗，以去除筒中残余的尿液。洗液的量不严格限定，优选选择该量以足以排出筒中的残余尿液，而没有值得注意的量的结合雌激素洗出。已证实，例如每床体积的吸附剂宜使用1-3，优选约2床体积的洗液。这里，冲洗水或洗液宜以3-10，优选5-7体积份数的冲洗水/体积份数的吸附剂/小时的流速导流过含吸附剂的筒。在筒中负载有CE的吸附剂可以作为用于分离纯的CE，以制备含天然雌激素的混合物的药物的原料。
在本发明的一方案中，在筒由设备中启出，由一个新的代替之前，筒在用水和/或洗液冲洗后为稳定吸附的CE，结束时还用一种防腐的溶液，例如含有防腐剂的溶液，调节pH值的水溶液和/或盐水溶液冲洗。为防止柱滋生病菌，特别是在未冷却下存放或运输时可使用通用的防腐剂，例如还有消毒剂，杀菌剂和/或驱虫剂。冲洗水的pH调节取决于各种应用的吸附剂。作为盐溶液可以使用不同浓度的无机盐水溶液，表III.1中的实施例对其加以说明。推荐使用盐溶液，尤其当用CE负载的筒冷却或特别深冷却下存放。优选的盐溶液是盐浓度为约10-35重量％，优选25-33重量％的食盐溶液。
按本发明方法的优选设计中，收集的尿液在其由存放容器抽至筒之前，优选除去糊状和细粒部分固态物质。因此有利的是，在尿液泵送至筒之前，尿液由存放容器中首先导流经过一个或多个预过滤器。这样PMU可以例如导流经过至少一个已知的分离设备，例如经过具有至少一个深过滤器或沉积过滤器(Anschwemmfilter)的过滤设施。作为分离设备可用例如有砂床的深过滤器或商业上通用的筒过滤器，或可以使用商业上通用的沉积过滤器或板式过滤器，滤烛，滤袋或滤管。过滤器可以单独使用，或多个按任意组合，例如串联和/或并联安装使用。希望的情况下，尿液(PMU)中可以在过滤前还添加过滤助剂。合适的过滤助剂有例如那些结合碳酸钙和/或粘蛋白，以改善尿液过滤的物质。也可能给过滤器后面连接一个粒子沉积器，例如在砂床作为过滤器的情况下，后接的砂沉积器。
对专业人员来说，过滤的原理或实施方法是熟悉的。考虑到通过本发明要解决的主题，对本发明的使用来说考虑澄清过滤原理。澄清过滤致力于液相纯化，这样对其来说，滤液的纯度是达到工艺目标的基本评价值。分离工艺原则上通过过滤介质和悬浮液的相互作用来实现。这不仅要考虑过滤介质的选择，工艺模式，还要考虑过滤仪器的工艺技术设计。多数情况下，分离的固态物质决定性地影响工艺过程。这样在足够的固态物质组分和其成桥能力(粒子通过过滤介质支撑而不堵塞)的情况下，生成的和继续生长的过滤器滤饼承担了过滤介质的功能。在沉积过滤，滤饼过滤的情况下，过滤器滤饼的结构决定工艺过程，而真正的过滤介质在起始阶段后只还具有支撑功能。固态物质沉积的地点是区别过滤工艺的另一个基本特征。在表面过滤方面，过滤介质表面上的固态物质的沉积通过筛分作用，即基于固态物质粒子和过滤介质的孔之间的尺寸比例来进行。与之相反，在深过滤方面，固态物质粒子进入过滤介质中，沉积在其内部。
可在筒中使用的吸附剂可以是所有的无机或有机的具有对PMU中含有天然结合雌激素的混合物的足够的吸附能力的吸附剂。因此作为按本发明方法的吸附剂，有聚合型吸附树脂，硅胶，RP-硅胶或优选半极性的聚合型吸附树脂适于用在筒中。
可在筒中用作吸附剂的疏水性硅胶有例如已知的反相硅胶(＝Reverse-Phase-Kieselgele，简称为“RP-硅胶”)，其是化学改性的，带有疏水官能团或配体的硅胶。这里合适的例如有硅烷化的RP-硅胶，其含有疏水性官能团正十八烷基二甲基硅氧基，正辛基二甲基硅氧基或二甲基羟基硅氧基。合适的例如是具有平均粒子尺寸为15-500μm的硅烷化硅胶。尤其合适的已证明有平均粒径为0.05-0.3mm的含有二甲基羟基硅氧基的硅胶，例如Merck公司的“硅胶60/二甲基硅烷衍生物”。尿液宜以一种满足足够用于雌激素含量的吸附的接触时间的流经速度导流过含这种硅胶的筒。例如合适的流经速度相应于5-20体积份数PMU/体积份数硅胶/小时的流量。吸附优选在室温进行。尿液经过反应器的流经速度宜通过小的过压下(通过泵的功率调节)的操作来控制。使用的疏水硅胶的量可以按所用硅胶的类型和收集尿液中的固态物质含量来改变。在应用预过滤的情况下，即除掉了糊状和固态物质的的情况下，可以例如一体积份数的疏水硅胶用最多80体积份数预处理过的PMU负载，而在流出尿液中没有检测到显著量的雌激素。
可在筒中用作吸附剂的半极性聚合型吸附剂树脂优选为多孔性有机非离子型聚合物，其与非极性疏水型聚合型吸附剂树脂相比，具有一个中等的极性(＝例如树脂的活性表面的偶极矩为1.0至3.0，特别是1.5至2.0德拜)和一定的亲水性结构，例如聚碳酸酯树脂。宜使用具有优选的大网状结构和平均孔径为50至150，优选70至100埃，以及比表面积为300至900，优选400-500m2/g的大孔半极性树脂。特别合适的证明有大孔、横向交联的脂肪族聚碳酸酯树脂，特别是横向交联的聚丙烯酸酯树脂，例如Rohm和Haas公司的Amberlite XAD-7R。针对本发量的在妊娠牝马尿液中含有的结合雌激素(CE)的混合物合适的吸附剂装填，其中筒具有或者a)底部安装的液体流入口和顶部安装的液体流出口或b)顶部安装的液体流入口和底部安装的液体流出口， —以及在筒之前按说明的顺序安装并通过管线彼此连接的， —一个泵，一个流速仪和流量仪。
按本发明的设备针对用于实施上述方法，以针对实际地、分散地富集和稳定在PMU中含有的结合雌激素(CE)。在希望的情况下，此设备还可以含有两个平行安装的，串联或交替运行的筒。
在按本发明的设备中使用的筒的高度和直径可以在很大范围内变化。当然，为了不妨碍实际中的操作，应设计筒的尺寸和重量使得它可以由有一般力气的人，例如在用新的、未负载的筒替换已负载的筒时，仍能很好地手工操作，并可承担其重量。例如筒因此应该这样设计尺寸，使得筒具有为了吸附剂床而设计的允许容纳30至50l吸附剂的内部尺寸，其中内部高度特别约在80至120cm范围内。筒的内径一般为10-25cm。这里专业人员能够准确设计筒的尺寸，以保证运行时最适宜的流速比。
此外，按本发明的设备中使用的筒宜由结实的、耐用的、耐化学药品的材料构成，如它们通常用于制造用于化学工业的仪器那样，例如有抗冲强度的实验室玻璃，塑料和/或金属，例如薄钢板。
按本发明的设备中可以使用任意、简单、结实构造的泵，例如单泵，软管泵或隔膜泵。例如已证明，软管泵适合用作按本发明的设备的泵。
在按本发明的设备中，可以使用任意、简单并结实构造的流速仪，例如转子流速计、旋转翼流速仪或感应流速仪。例如已证明对本发明的设备而言作为流速仪合适的是带有浮子的转子流速计。
在按本发明的设备中，用于测量泵送经过筒的尿液的量可以使用任意的、简单且结实构造的流量仪，例如水表或感应流量仪。作为按本发明的设备使用的流量仪，已证明合适的例如有水表。
在按本发明的设备另一种有利方案中，在泵和流速仪之间额外中间连接有至少一个或多个预过滤器，例如深过滤器或沉积过滤器。这些过明目的，尿液可以以满足吸附雌激素含量的足够的接触时间的流经速度，导流过含有这种吸附剂树脂的筒。例如合适的流经速度相应于3-10，优选5-7体积份数PMU/体积份数吸附剂树脂/小时的流量。吸附优选在室温下进行。尿液通过反应器的流经速度宜通过在小的过压下(由泵的功率调节)的操作来控制。所用的半极性吸附树脂的量可以根据所用的吸附树脂的类型和收集尿液中的固态物质的含量而改变。在使用PMU时，可以例如将1体积份数的吸附剂树脂，例如横向交联的脂肪族聚碳酸酯吸附剂树脂，用最高80体积份数的预处理PMU装载，而在流出尿液中没有检测到显著量的雌激素。
除了优选提及的吸附剂外，还可能使用其它吸附剂树脂或硅胶类型。作为吸附剂树脂这里合适的有非极性、半极性、还有极性的吸附剂树脂。可以泵送通过吸附剂的尿液的量在此事先根据各种吸附剂容量来确定。可使用的吸附剂树脂的实例是商业上通用的类型如带有苯乙烯二乙烯基苯基本骨架(例如类型XAD-1180，XAD-2，XAD-4，XAD-16)，带有丙烯酸酯基本骨架(例如XAD-7)或那些带有含氮原子和氧原子的高极性基本骨架(例如XAD-12)的聚合型Amberlite吸附剂。其它的吸附剂树脂有Dowex-树脂(苯乙烯与二乙烯基苯的共聚物)，例如Dowex112，Dowex Optipore，Dowex Optipore V 493；Lewatite(交联聚苯乙烯)，例如Lewatit OC 1064，Lewatit OC 1066或Lewatit OC 1163，聚胺阴离子交换树脂，例如Dowex树脂。有利的吸附剂树脂特别是XAD-7，XAD-16(HP型)，XAD-118和Dowex Optipore，优选DowexOptipore V 493形式，以及Lewatite OC 1064，OC 1066和OC 1163。
除了上述按本发明的方法之外，本发明还涉及一种此方法中可使用的设备，其按目的考虑使用地点的简单条件，保证可靠地、保护产品地实施该方法。
按本发明的设备的特征是，其适合针对实际，分散地，即特别是在马厩或牧场附近，将妊娠牝马尿液(PMU)中含有的结合雌激素(CE)的混合物富集和稳定在固态载体(＝吸附剂)上，这里这种设备包括 —一个竖直安装的筒，其用一种(持续)由液体围绕、用于吸附预定义滤器可涉及带有砂床的深过滤器，或商业上通用的筒过滤器，或商业上通用的沉积过滤器或板式过滤器，滤烛，滤袋或还有滤管。预过滤器也可能还后接粒子沉积器，例如在砂床作为预过滤器的情况下，后接的砂沉积器。在此设备的各种方案中，过滤器可以单独或多个任意组合，例如以相互串联和/或并联。这些方案中有利的安排的特征是，预过滤器是两个平行连接的预过滤器的组件，它们交替地各自运行，还在设备的连续运行时可由一个新的预过滤器替换。这些方案中另一个有利的安排的特征是，过滤器设备包括串接的由预过滤器(例如滤袋)组成的预过滤器单元的组件，一个或两个深床过滤器，随后两个平行连接的绝对过滤器(例如膜式过滤器)，这里，绝对过滤器可交替地各自运行，还在设备的持续运行时可以由新过滤器替换。此外还可能有利的是，按本发明的设备用于控制预过滤器的按规定的功能，在泵和预过滤器之间连接压力表，以及在预过滤器后的范围内，优选仅在安装的流速仪之后连接一个压力表。


图1用于进一步阐述按本发明的设备的优选实施方式，图1图示了用于稳定和富集PMU中的CE的设备。一种过滤原尿的方案的工艺方法的图解描述在图2中。
按本发明的方法和按本发明的设备具有一系列优点，下面简短提及其中最重要的几点。CE的富集，即吸附剂柱的负载可以直接在收集地点进行。其省去了每日将大量尿液运输至中央处理地点。负载可以连续进行最多多周的较长时间，直到吸附剂柱饱和；例如就吸附剂柱树脂XAD-7而言，吸附尿液的量约35床体积。去除CE的残余尿保留在存在有对处理总归合适的装置的地点和场所。将负载的柱，即只约尿液的初重的1/35运走。运输可以较大时间间隔进行。运输还可以需要使用较长时间，例如最多几周。因为CE在吸附剂柱上的良好稳定性，不会分解。其舍弃了大量尿液通过分离器和超过滤设备的处理，因为由原尿中分离可能存在的糊状物质和沉积物是经过结实的、无保养的沉积过滤器或深过滤器(例如砂过滤器，筒过滤器，沉积过滤器，板式过滤器，滤烛，滤袋或滤管)来进行，且其可以在必要的情况下容易地替换。
下面的图和实施例进一步阐述本发明，但是不限定其范围。
图 图1 图解的用于稳定和富集PMU中的CE的有利设备；设备单元说明如下(1)＝尿液由存放容器出来的流入口；(2)＝泵，例如软管泵；(3)＝连接管线；(4)＝压力表；(5)＝三通旋塞；(6)＝快速离合器；(7)＝关闭阀门；(8)＝过滤器；(9)＝带有浮子的转子流速仪；(10)＝流量仪，例如水表；(11)＝筒，柱；(12)＝吸附剂床；(13)＝流出口 图2 用于过滤原尿的工艺方法的图解说明，其中，过滤器设备包括由预过滤器(例如滤袋)组成的串接过滤单元的组件以及一个或二个深床过滤器与随后两个平行连接的绝对过滤器(例如膜式过滤器)。
实施例 实施例1 将妊娠牝马尿液(PMU)中含有的结合雌激素(CE)直接在PMU的收集地点通过吸附在包含于筒中的吸附树脂上的富集与稳定过程的一般性操作规范。
为此，收集的PMU总是经过配有筛的漏斗装入存放容器。此筛具有粗网眼尺寸，只用于分离出粗的机械杂质，如麦杆，干草等。
下面使用装有半极性吸附剂树脂的吸附剂柱(作为筒)为例阐述此方法。如果筒使用另一种吸附剂树脂，则可根据各吸附剂的类型，调节此操作，特别是负载筒的处理。尿液收集地点的负载过程和最后筒的清洗基本上如A)和B)加以遵循，或者根据地点的特殊情况和相应的吸附剂稍微加以调整。
A)将PMU的雌激素含量吸附在吸附剂上 PMU的CE含量的吸附在例如图1中草拟的吸附设备中进行。基于筒或吸附剂柱容量设定的总量的PMU在室温下，也可能经过预先过筛和可能的过滤过程，整体或部分地以设定流速泵送经过装有吸附剂的柱或筒。作为吸附剂可以使用例如在水中溶涨的半极性聚丙烯酸酯吸附剂树脂(＝Rohm和Haas公司的Amberlite XAD-7，粒子尺寸为0.3至1.2mm，偶极矩为1.8德拜，平均孔径为80埃，比表面积约450m2/g干物质)或其它合适的吸附剂。当达到设定的最大的PMU的负载量之后，关闭柱或筒上的PMU的流入口，在希望的情况下，由负载的柱或筒泵送至平行连接的未负载的柱或筒。PMU的雌激素含量完全吸附到这样负载的吸附剂柱上。
B)冲洗负载的吸附剂柱 负载的吸附剂柱或筒在结束吸附过程后任选地用水或其它含水洗液，例如碱性洗液，如特别是稀的氢氧化钠溶液(例如0.5-2N NaOH)来冲洗。为此，冲洗水或洗液在室温下以设定的流速，例如约5.5床体积/小时，同样泵送经过柱或筒。流出的洗液舍弃。
C)存放与运输 为运走或中间存放负载的吸附剂柱或筒，它们在结束吸附过程后或优选地冲洗(例如用水或其它含水，也可能是碱性洗液，例如特别是稀的氢氧化钠溶液，例如0.5-2N NaOH)后，在侧面封闭水，从负载设备取出，存放到合适的地方。存放可以在室温，例如15至30℃，在一般的存放室内，或也可在低至4℃的冷藏室内进行。如果吸附剂柱内的液体耐冷冻，也可以在较低温度，例如约20℃深度冷却。负载的柱或筒按有规律的时间间隔，从几天至几周，从收集和存放地点运输到中央处理地点，在此保证以专业水平对结合雌激素进行化学处理和分离。
D)将结合雌激素从吸附剂柱或筒上解吸附 负载柱或筒的处理按对各种吸附剂来说用于分离伴随物质和分离CE的常用的方法进行。在应用Amberlite型，例如XAD 7的半极性吸附剂树脂时，这种处理可以如国际专利申请WO 98/08526中那样进行。为此，例如洗脱液以合适的流速导流过预热至45℃的柱或筒。流出的洗脱液按级分接收。第一级分(＝约1床体积)，剩余级分各约0.75床体积。各个级分借助HPLC检测其雌激素硫酸盐，甲酚和HPMF的含量。收集第一级分，直至洗脱液出现由无色变为浅黄。该级分一般只含有微量雌激素硫酸盐。
在第一床体积的洗脱液流出后，洗脱液的颜色改变为强的深棕色色调。在下面2至4个级分中一般含有在柱上吸附的结合雌激素总量的约80至98％。残余的级分只含有很少量的雌激素硫酸盐。这也可从颜色强度减弱来明显看出。也可能，将残余级分在蒸馏掉溶剂含量后同样还进一步处理，分离其余的CE。
含有结合雌激素的主要级分各具有高TS含量(TS＝干物质，由HPLC测定)的雌激素硫酸盐，并且已在某种程度上除掉甲酚和HPMF，以致于此级分已经是用于制药上进一步加工的合适的提取物。
E)再生吸附剂树脂柱 负载柱或筒的再生按对各吸附剂来说常用的方法进行。在使用Amberlite型半极性吸附剂树脂，例如XAD 7时，这种再生可以如在国际专利申请WO 98/08526中那样进行。为了再生，柱或筒例如首先用调节至pH值为12的含50重量％乙醇的乙醇/水混合物，然后用10重量％含水的柠檬酸钠溶液，再次用乙醇/水混合物，最后用蒸馏水冲洗。总体再生对举例说明的吸附剂树脂而言，在45℃进行，其中这里的再生液和清洗液也可以从顶端或底部导经此柱或筒。此柱或筒可以多次，例如最多40次负载，又再生。
实施例2 用负载的吸附剂柱进行稳定性试验以确定可解吸附的CE含量 为检测柱稳定性，即吸附的CE(结合雌激素)的稳定性，用原尿负载的吸附剂柱进行稳定性试验。通常，为此将吸附剂柱负载，然后取出柱的吸附剂树脂，在两种温度下存放不同时间。存放时间到了后，将吸附物洗脱，检测它们的CE含量和伴随物质。得到的结果与对照试样，即无存放时间的试样的洗脱结果作比较。
A)试验实施 吸附各在一个用XAD 7型半极性吸附剂树脂(半极性聚丙烯酸酯吸附剂树脂，即Rohm和Haas公司的Amberlite XAD-7，粒子尺寸为0.3至1.2mm，偶极矩为1.8德拜，平均孔径为80埃，比表面积约为450m2/g干物质)按已知方式装填的3l-柱中进行。对此，90l(＝30床体积)事先已超滤的牝马尿(来自波兰)在室温下以5床体积/小时的流速供给柱。PMU的雌激素含量完全吸附到这样负载的半极性吸附剂树脂柱上。当结束用牝马尿负载此柱后，再用3l水冲洗，负载的树脂由柱内取出，分为10个300ml的试样，并将其转送至较小的柱中。舍弃一个试样。
然后如下进一步进行 1.对照试样的即刻洗脱，即无存放。
2.各其余试样在4℃或25℃存放。
3.试样1(4℃)和2(25℃)在存放一周后洗脱。
4.试样3(4℃)和4(25℃)在存放二周后洗脱。
5.试样5(4℃)和6(25℃)在存放五周后洗脱。
6.试样7(4℃)和8(25℃)在存放八周后洗脱。
洗脱按已知方式进行，通过将负载的吸附剂树脂首先用含水的氢氧化钠溶液冲洗。冲洗后，各洗液借助HPLC检测其雌酮(硫酸盐形式)，马烯雌酮，甲酚和HPMF的含量。
作为洗脱液，使用通过加入氢氧化钠调节为碱性的水/乙醇混合物(30重量％，pH值12)，树脂的洗脱在45℃洗脱温度下进行。洗脱液按级分收集，各级分再借助HPLC检测其雌酮，甲酚和HPMF的含量。收集第一级分，直至洗脱液出现由无色变至浅黄色。这一级分只含有微量雌酮(雌激素硫酸盐)。在第一床体积洗脱液流出后，洗脱液的颜色变化至强的深棕色调。随后的2至4个级分中含有在柱上吸附的结合雌激素总量的约80至98％。其余用于树脂再生(各在45℃，按给定顺序，用50重量％的pH值为12的乙醇，10重量％柠檬酸钠和水)的级分只含有少量雌激素硫酸盐。这也可以从颜色强度明显减弱上面看出。
B)结果 对各试样的柱稳定性试验得到的结果在表I.0至I.9中说明，或总结在表I.10中，下面将进一步阐述。
用尿负载柱或筒，参见表I.0，以及洗脱对照柱，表I.1，表示了一种一般的吸附和解吸附过程。虽然发现洗脱液中甲酚和HPMF的值升高，但这要在很大程度上归因于柱中的非完全性层流或用了几乎1000mg/l的很高甲酚值的原尿。
表I.2至I.9说明了在1，2，5或8周存放后的洗脱的结果。原则上确定，吸附的激素(CE)一般定量地解吸附。偶尔，例如特别是在只在25℃一周存放时间后，定量的解吸附仅在50％乙醇再生时确定，但其中只涉及残余量的CE解吸附，大部分可能已经预先在真正的解吸附时分离。解吸附对存放时间和温度的依赖性好象未或总是只有条件出现，例如如果可能并非最优化的流速情况在小柱中起很大的作用。但是洗脱液在任何情况下都基本上上无甲酚和HPMF。为达到最好的结果，与存放时间无关，而应重视最佳的柱穿流。因此，柱或筒应持续在液体中，即避免干过程。
存放5周后的结果，表I.6至I.7，说明对于4℃来说，洗脱过程好，对于25℃来说，当然还出现再生物中有激素组分。洗脱液中HPMF和甲酚含量在两种情况下都很小。
惊奇地是，存放很长时间后仍达到良好的结果，如对于存放8周具有的优异的结果在表I.8至I.9中加以说明。雌酮和马烯雌酮的洗脱峰很陡或尖，即CE洗脱液的体积很小。甲酚和HPMF的值接近0。
表I.10一目了然地说明了所有的试验。例如洗脱液和再生物中雌酮含量的合计在各种情况下均在约1055mg±4％以内，对应于期望的结果。
因此概括地记录，负载的XAD-7树脂在4℃和25℃进行1至8周的存放虽然出现不同的洗脱行为和不同的激素峰高和宽度，但是所有洗脱的激素的总和没有区别，其就雌酮含量而言统统在1055mg±4％。由此得出结论，观察到的定性的差别在很大程度上只基于所用的相对小的柱中的非均匀流速情况，在应用针对实际设计尺寸的柱或筒时可很容易避免。
表I.0 测定柱材料的稳定性的柱试验 柱用来自波兰经超滤的天然尿负载 吸附剂XAD 7，体积＝3l 当在对柱供料后，取出树脂，用3l水冲洗。树脂划分为同样的多份，为300ml一份，进行柱稳定性测试。一个树脂包立即洗脱，其余在室温和冰箱中存放。a)试样 体积 l 雌酮 mg/lHPMFmg/l 甲酚 mg/l 马烯雌酮 mg/l起始溶液(＝超滤后)对照溶液1 30 85,467,2 908,0 50,1对照溶液2 30 117,796,9 990,4 70,0对照溶液3 30 137,6105 997,5 80,2 90 113,56789,7 965,3 66,8 ＝30BV ＝平均b)试样 体积 l 时间 h 流量 l/h 流量 BV/h 雌酮 mg/l 马烯雌酮 mg/l HPMF mg/l HPMF mg甲酚mg/l 甲酚 mg流出口1 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 142,6 1426,02,7 27,0流出口2 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 0,0 0,02,2 22,0流出口3 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 0,0 0,00,8 8,0流出口4 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 148,5 1485,01,4 14,0流出口5 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 150,6 1506,05,2 52,0流出口6 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 153,7 1537,027,3 273,0流出口7 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 153,8 1538,081,9 819,0流出口8 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 155,7 1557,0322,4 3224,0流出口9 10 0,7 15 5,0 0,0 0,0 154,2 1542,0770,5 7705,0 表I.1 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 无存放的洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样 体积 ml时间min流量ml/min流量BV/hpH TS ％ 雌酮 mg/l 雌酮 mgHPMFmg/lHPMFmg 甲酚 mg/l 甲酚 mg 马烯雌酮 mg/l 马烯雌酮 mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6874,789,7690,7965,37432,868,8514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 1225 5,0 9,4102,630,837,2 11,2 1423,1426,953,616,1冲洗2 300 1225 5,0 13,129,58,9216,0 64,8 50001500,048,814,6冲洗3 300 1225 5,0 13,112,83,8110,8 33,2 50001500,030,59,2冲洗4 300 1225 5,0 13,29,82,945,7 13,7 2000600,09,82,9冲洗5 300 1225 5,0 13,28,42,554,1 16,2 1023,3307,05,01,5 洗脱乙醇30％，45℃ pH12洗脱液1 300 1225 5,0 13,1 3,6109,232,8585,1175,5585,8169,756,316,9洗脱液2 300 1225 5,0 13,0 1,92099,2829,80,00,0394,8118,41209,8362,9洗脱液3 300 1225 5,0 12,7 0,6815,6244,71,00,3119,936,0466,9140,1洗脱液4 300 1225 5,0 12,5 0,2268,880,60,00,050,815,2150,245,1洗脱液5 300 1225 5,0 12,3 0,187,226,20,00,021,66,544,813,4 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,239,123,50,00,012,07,218,811,3 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 600 242511,72,90,05,91,1再生液3 600 242511,31,40,03,80,0 表I.2 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 4℃下存放7天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/h pH TS ％ 雌酮 mg/l 雌酮 mg HPMF mg/l HPMF mg 甲酚 mg/l甲酚mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6 874,7 89,7 690,7 965,3 7432,866,8514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 12 25 5,0 9,589,626,9 88,626,62604,6 781,442,212,7冲洗2 300 12 25 5,0 13,133,710,1 343,7103,15396,9 1619,158,317,5冲洗3 300 12 25 5,0 13,19,02,7 32,49,71343,0 402,94,71,4冲洗4 300 12 25 5,0 13,19,12,7 0,00,0611,3 183,44,71,4冲洗5 300 12 25 5,0 13,19,32,8 4,31,3184,0 55,24,61,4 洗脱乙醇30％，45℃，pH12洗脱液1 300 12 25 5,0 13,1 3,4 174,2 52,3 4,81,4129,038,7 92,1 27,6洗脱液2 300 12 25 5,0 13,0 1,7 1362,7 408,8 0,00,0167,250,2 801,0 240,3洗脱液3 300 12 25 5,0 12,6 0,6 887,8 266,3 0,00,099,529,9 512,8 153,8洗脱液4 300 12 25 5,0 12,4 0,4 433,6 130,1 0,00,052,915,9 250,0 75,0洗脱液5 300 12 25 5,0 12,4 0,2 231,0 69,3 0,00,030,79,2 133,4 40,0 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,4171,6 103,00,00,027,8 16,7 96,1 57,7 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 600 24 25 12,118,811,3 0,00,00,00,00,00,0再生液3 600 24 25 11,20,00,0 0,00,00,00,00,00,0 表I.3 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 25℃下存放14天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/h pHTS％雌酮mg/l雌酮mg HPMF mg/l HPMF mg 甲酚 mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6 874,789,7 690,7 965,3 7432,8 66,8 514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 1225 5,O 10,098,729,6168,750,6 4051,7 1215,566,019,8冲洗2 300 1225 5,0 13,026,17,8208,362,5 4701,1 1410,348,414,5冲洗3 300 1225 5,0 13,18,02,455,016,5 3122,5 936,86,62,0冲洗4 300 1226 5,0 13,18,32,530,69,2 1710,5 513,25,01,5冲洗5 300 1226 5,0 13,38,72,615,14,5 652,9 195,95,81,7 洗脱乙醇30％，45℃，pH12洗脱液1 300 1225 5,0 13,13,4182,6 54,811,23,4 323,0 96,9 96,1 28,8洗脱液2 300 1225 5,0 13,01,7904,3 271,80,00,0 216,5 65,0 521,3 156,4洗脱液3 300 1225 5,0 12,80,8949,0 284,70,00,0 138,6 41,6 552,1 165,6洗脱液4 300 1225 5,0 12,50,5611,1 183,30,00,0 82,7 24,8 347,3 104,2洗脱液5 300 1225 5,0 12,40,4343,3 103,00,00,0 46,9 14,1 192,4 57,7 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,5191,8 115,1 0,0 0,0 32,0 19,2 102,7 61,6 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 600 24 25 12,319,0 11,4 0,0 0,07,94,710,06,0再生液3 600 24 25 11,30,0 0,0 0,0 0,00,00,00,00,0 表I.4 用于检测柱材料的稳定的柱试验 4℃下存放14天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/h pH TS ％ 雌酮 mg/l 雌酮 mg HPMF mg/l HPMF mg 甲酚 mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6 874,7 89,7 690,7 965,3 7432,8 66,8 514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 12 25 5,0 9,3 77,323,242,612,8 1255,9376,855,916,8冲洗2 300 12 25 5,0 13,1 28,08,4454,6136,4 6000,01800,0139,341,8冲洗3 300 12 25 5,0 13,1 8,82,630,29,1 494,3148,39,42,8冲洗4 300 12 25 5,0 13,1 8,22,50,00,0 44,313,35,31,6冲洗5 300 12 25 5,0 13,2 8,02,40,00,0 14,54,44,71,4 洗脱乙醇30％，45℃，pH12洗脱液1 300 12 25 5,0 13,13,579,823,95,01,534,210,3 45,6 13,7洗脱液2 300 12 25 5,0 12,81,82528,0758,40,00,00,00,0 1625,8 487,7洗脱液3 300 12 25 5,0 12,60,4577,8173,30,00,056,817,0 335,6 100,7洗脱液4 300 12 25 5,0 12,60,1131,039,30,00,020,96,3 81,5 24,5洗脱液5 300 12 25 5,0 12,60,138,511,60,00,08,82,6 23,6 7,1 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,621,212,70,00,0 9,6 5,8 12,1 7,3 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃ ’c再生液2 600 24 25 12,44,02,4 0,00,02,41,42,31,4再生液3 600 24 25 11,40,00,0 0,00,00,00,00,00,0 表I.5 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 25℃下存放14天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/hpHTS％雌酮mg/l雌酮mg HPMF mg/l HPMF mg 甲酚 mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6 874,789,7 690,7 965,3 7432,8 66,8 514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 12 25 5,0 9,325,97,8502,5150,8 6000,0 1800,0130,039,0冲洗2 300 12 25 5,0 13,065,519,7130,139,0 2188,5 656,853,418,0冲洗3 300 12 25 5,0 13,18,62,626,88,0 707,3 212,210,03,0冲洗4 300 12 25 5,0 13,17,22,25,21,6 76,1 22,83,31,0冲洗5 300 12 25 5,0 13,17,62,30,00,0 32,2 9,74,51,4 洗脱乙醇30％，45℃，pH12洗脱液1 300 12 25 5,0 13,13,5170,551,23,71,155,816,7 97,3 29,2洗脱液2 300 12 25 5,0 13,01,61586,2475,93,71,10,00,0 927,0 278,1洗脱液3 300 12 25 5,0 12,50,6807,0242,100,00,00,0 499,3 149,8洗脱液4 300 12 25 5,0 12,50,3325,497,61,20,441,812,5 214,0 64,2洗脱液5 300 12 25 5,0 12,40,2175,952,80,50,222,76,8 106,6 32,0 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1600 24 25,0 5,0 12,4 163,6 98,21,10,7 25,4 15,2 99,1 59,5 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 600 2425 11,724,5 14,7 0,00,06,94,1 14,78,8再生液3 600 2425 10,00,0 0,0 0,00,00,00,0 0,00,0 表I.6 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 4℃下存放35天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样 体积 ml 时间 min 流量 ml/min 流量 BV/h pH TS ％ 雌酮 mg/l 雌酮 mg HPMF mg/lHPMFmg 甲酚 mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6 874,7 89,7 690,7 965,3 7432,866,8 514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 12 25 5,0 9,289,626,976,422,9 1687,2 506,264,019,2冲洗2 300 12 25 5,0 13,048,914,716,95,1 6157,1 1847,1176,252,9冲洗3 300 12 25 5,0 13,19,22,840,512,2 899,7 269,913,54,1冲洗4 300 12 25 5,0 13,18,92,73,00,9 96,8 29,06,92,1冲洗5 300 12 25 5,0 13,07,62,30,00,0 42,0 12,64,31,3 洗脱乙醇30％，45℃，pH12洗脱液1 300 12 25 5,0 13,03,6 73,3 22,05,41,6 62,1 18,6 38,9 11,7洗脱液2 300 12 25 5,0 12,72,0 2437,2 731,20,00,0 147,1 44,1 1386,8 416,0洗脱液3 300 12 25 5,0 12,30,5 769,5 230,90,00,0 69,0 20,7 438,8 131,6洗脱液4 300 12 25 5,0 12,60,3 223,5 67,11,30,4 52,6 15,8 126,6 38,0洗脱液5 300 12 25 5,0 12,50,1 66,7 20,00,00,0 20,6 6,2 39,8 11,9 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,4 15,59,30,00,0 14,3 8,6 15,3 9,2 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 600 24 25 12,01,40,8 0,0 0,0 7,5 4,5 1,1 0,7再生液3 600 24 25 10,90,00,0 0,0 0,0 0,8 0,5 0,0 0,0 表I.7 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 25℃下存放35天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/h pH TS ％ 雌酮 mg/l 雌酮 mg HPMF mg/l HPMF mg 甲酚 mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700 113,6 874,7 89,7 690,7 965,3 7432,8 66,8 514,4 冲洗用pH13的NaOH水溶液(2％)冲洗1 300 1225 5,0 9,268,820,691,627,5 1595,4 478,6 34,510,4冲洗2 300 1225 5,0 13,046,614,017,05,1 6050,3 1815,1 151,645,5冲洗3 300 1225 5,0 13,18,82,63,61,1 1168,2 350,5 14,24,3冲洗4 300 1225 5,0 13,17,92,411,73,5 351,1 105,3 5,41,6冲洗5 300 1225 5,0 13,18,02,40,00,0 134,4 40,3 4,71,4 洗脱乙醇30％，45℃，pH12洗脱液1 300 1225 5,0 13,03,5 118,4 35,5 7,5 2,3 101,2 30,4 64,8 19,4洗脱液2 300 1225 5,0 12,91,6 1525,9 457,8 0,0 0,0 199,2 59,8 811,4 243,4洗脱液3 300 1225 5,0 12,60,7 987,7 296,3 0,0 0,0 139,1 41,7 512,4 153,7洗脱液4 300 1225 5,0 12,40,3 479,4 143,8 2,2 0,7 71,1 21,3 251,5 75,5洗脱液5 300 1225 5,0 12,30,3 241,0 72,3 0,0 0,0 22,5 6,8 125,7 37,7 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,3 110,966,51,50,915,99,558,335,0 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 600 24 25 11,99,65,80,00,06,74,05,63,4再生液3 600 24 25 10,00,00,00,00,00,00,00,00,0 表I.8 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 4℃下存放56天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿 试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/h pHTS％雌酮mg/l雌酮mg HPMF mg/l HPMF mg甲酚mg/l甲酚mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700113,6874,7 89,7 690,7 965,3 7432,866,8514,4 冲洗用pH 13的NaOH水溶液(2％) 冲洗1 300 12 25 5,0 9,285,825,744,513,4 1171,3351,444,613,4 冲洗2 300 12 25 5,0 13,074,822,4457,2137,2 5000,01500,0113,534,1 冲洗3 300 12 25 5,0 13,19,62,934,110,2 702,2210,77,52,3 冲洗4 300 12 25 5,0 13,28,92,74,31,3 63,519,14,01,2 冲洗5 300 12 25 5,0 13,18,92,70,00,0 23,97,23,71,1 洗脱乙醇30％，45℃，pH 12洗脱液1 300 12 25 5,0 13,1 3,8 53,115,93,31,041,712,5 27,68,3洗脱液2 300 12 25 5,0 12,8 2,0 2289,1686,75,81,70,00,0 1288,2386,5洗脱液3 300 12 25 5,0 12,4 0,5 869,4260,80,00,00,00,0 475,9142,8洗脱液4 300 12 25 5,0 12,3 0,2 228,268,52,40,70,00,0 122,036,6洗脱液5 300 12 25 5,0 12,3 0,1 83,425,00,00,00,00,0 45,213,6 再生50％乙醇，45℃，pH12 再生液1 600 24 25,0 5,0 12,2 42,4 25,43,01,80,00,022,913,7 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃ 再生液2 600 24 25 11,83,11,9 0,00,02,21,31,50,9 再生液3 600 24 25 10,81,10,7 0,90,50,20,10,70,4 表I.9 用于检测柱材料的稳定性的柱试验 4℃下存放56天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝300ml 起始溶液来自波兰的超滤过的天然尿 试样体积ml时间min流量ml/min流量BV/h pH TS ％ 雌酮 mg/l 雌酮 mg HPMF mg/l HPMF mg甲酚mg/l甲酚mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg 起始溶液90l负载到3L柱上(表I.1，树脂分为10份，300ml为一份)初含量7700113,6874,7 89,7 690,7 965,3 7432,866,8 514,4 冲洗用pH 13的NaOH水溶液(2％) 冲洗1 300 12 25 5,0 9,285,8 25,7 44,5 13,4 1171,3 351,444,613,4 冲洗2 300 12 25 5,0 13,074,8 22,4 457,2 137,2 5000,0 1500,0113,534,1 冲洗3 300 12 25 5,0 13,19,6 2,9 34,1 10,2 702,2 210,77,52,3 冲洗4 300 12 25 5,0 13,28,9 2,7 4,3 1,3 63,5 19,14,01,2 冲洗5 300 12 25 5,0 13,18,9 2,7 0,0 0,0 23,9 7,23,71,1 洗脱乙醇30％，45℃，pH 12 洗脱液1 300 12 25 5,0 13,1 3,8 53,1 15,9 3,31,041,712,527,6 8,3 洗脱液2 300 12 25 5,0 12,8 2,0 2289,1 686,7 5,81,70,00,01288,2 386,5 洗脱液3 300 12 25 5,0 12,4 0,5 869,4 260,8 0,00,00,00,0475,9 142,8 洗脱液4 300 12 25 5,0 12,3 0,2 228,2 68,5 2,40,70,00,0122,0 36,6 洗脱液5 300 12 25 5,0 12,3 0,1 83,4 25,0 0,00,00,00,045,2 13,6 再生50％乙醇，45℃，pH12再生液1 600 24 25,0 5,0 12,2 42,4 25,43,01,8 0,00,022,9 13,7 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2600 24 25 11,83,11,9 0,0 0,0 2,21,31,50,9再生液3600 24 25 10,81,10,7 0,9 0,5 0,20,10,70,4 表I.10 柱稳定性试验的结果总结负载 筒 试样1 试样2 试样3 试样4 试样5 试样6 试样7 试样8 负载 雌酮[mg]10221 874,7 874,7 874,7874,7 874,7 874,7 874,7 874,7 874,7 马烯雌酮[mg]6009 514,4 514,4 514,4514,4 514,4 514,4 514,4 514,4 514,4 存放 温度--- RT 25 425 4 25 4 25 4 时间[天]--- 7 714 14 35 35 56 56 冲洗 雌酮[mg]--- 48,9 44,9 45,234,6 39,1 42 49,4 49,9 56,4 马烯雌酮[mg]--- 44,3 39,5 34,460,4 64,4 63,2 79,6 44,5 52,1 洗脱份01为分划脂树的出取 雌酮[mg] 1014,1 897,1 926,8919,6 1006,5 1005,7 1071,2 1087 1056,9 马烯雌酮[mg] 578,4 512,7 536,7553,3 633,7 529,7 609,2 536,8 587,8 再生 雌酮[mg] 26,0 126,5 114,3112,9 15,1 72,3 10,1 10,2 28,0 马烯雌酮[mg] 13,8 67,6 57,768,8 8,7 38,4 9,9 6,0 15,0 洗脱和再 生的总和 雌酮 1040,1 1023,6 1041,11032,5 1021,6 1078,0 1081,3 1097,2 1084,9 马烯雌酮 592,2 580,3 594,45601,3 642,4 568,1 619,1 542,8 602,8 实施例3 用负载的吸附剂柱进行稳定性试验，以确定病菌数量 用于制备药物制剂的天然原料的微生物学质量和不可置疑性在最近引起的重视逐渐增加。因此按通用方法(Pharmacoepia......)进行了分析，以确定试样在5或8周柱存放后的病菌数量。
病菌数量确定的结果说明列在表II中。存放温度为4℃的总病菌数量很少。存放温度为25℃时，柱冲洗水有1.2至4.6·106病菌，洗脱液中有80-170病菌。当然已表明，存放的柱吸附剂预先既不冲洗，也不防腐，那么从一开始就有提高了的病菌生成的危险。因此在未冷却的存放时，建议至少用水，但优选还用额外的稳定化或防腐的洗液，例如食盐溶液彻底冲洗负载的柱。
表II 用于测定病菌数量的稳定性试验 存放时间为5周 存放时间为8周存放时间在℃4℃25℃4℃25℃洗柱水2004,6*1061501,2*106碱性冲洗水＜118314乙醇洗脱液20803,5170 *用KBE/ml说明(菌落生成单位) 实施例4 用深冷的负载吸附剂柱进行的稳定性试验 季节和/或地域上决定了，在负载柱或筒的存放或运输过程中，温度可能低于冰点，带来的不希望的结果是，柱或筒中含水的物质凝固。相应的试验得出结论，冻结过程可能会对重新解冻的柱或筒的洗脱起负面作用。只要不能采取柱的保温措施，或只要存放在低温进行，那么为防止冻结就值得建议，最后一次冲洗不用水而用合适的冷冻混合物来进行。
A)试验的实施 从大量可能的冷冻混合物中，其中用于阐述有一些在表III.1中举例说明，选择示范性的食盐溶液用于进一步的试验。当每100g水中加入23g NaCl时，冰点为-21℃。
柱的负载按通常方式进行。在结束用尿负载后，用3床体积水，然后用2床体积33重量％NaCl溶液冲洗。随后，柱在-19℃下，在深冷箱中存放9天。
表III.1 液态，盐水或冷冻混合物的示例 可达温度℃ 物质A [g A/100g 冷冻剂 物质B -3,4 NH4Cl 23 水 -5,3 NaNO3 43 水 -7,8 BaCl2 22 冰 -10 NaCl 26 水 -12 CaCl2·6 H2O 71 水 -16 NH4SCN 57 水 -19 (NH4)2SO4 38 冰 -21 NaCl 23 冰 -22 CaCl2·6 H2O 45 冰 -28 NaBr 39 冰 -33 MgCl2 22 冰 -37 66,1％ H2SO4 48 雪 -40 CaCl2·6 H2O 55 冰 -55 CaCl2·6 H2O 59 冰 B)结果 在-19℃下存放9天后仍保持柱内物料为液态，即没有可能部分凝固的迹象。柱的处理，即碱性的冲洗，洗脱和再生运行正常。每份干物质中激素总量为约22重量％。结果在表III.2中说明。
未察觉到高的NaCl含量对CE含量及甲酚与HPMF的分离的负面影响。因此，可概括地记录为，用液态冷冻混合物，例如用食盐水溶液稳定用尿负载的柱或筒，以及在冷冻下，例如低至约-20℃，甚至在存放1.5至2周后效果很好。柱或筒内含物保持液态，通过冲洗，洗脱和再生来处理柱或筒，以分离CE的过程正常进行。甚至在高NaCl含量的情况下也未测得负面结果。
表III.2 用于柱材料稳定性检测的柱试验 -19.1℃下存放9天后洗脱 吸附剂XAD7，体积＝200ml 试样体积l时间min流量ml/min流量BV/h pH TS ％甲酚mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/ml马烯雌酮mg mg/ml雌酮mg HPMF mg/ml HPMF mg 雌酮 TS％ 起始溶液7l负载到3L柱上＝35床体积 流出口1 1 62 16,1 4,8 61 61 0 0 0 流出口2 1 61 16,4 4,9 96 96 0 0 0 流出口3 1 62 16,1 4,8 111 111 0 0 0 流出口4 1 61 16,4 4,9 111 111 0 0 6 流出口5 1 61 16,4 4,9 275 275 0 0 28 流出口6 1 61 16,4 4,9 267 267 0 0 27 流出口7 1 61 16,4 4,9 392 392 0 0 32 冲洗水和33％NaCl溶液，用于-19.1℃下存放用水 0,6 36 16,7 5,0 646 388 0 0 88用盐溶液 0,4 25 16,0 4,8 465 186 0 0 5 冲洗NaOH水溶液(2％)，pH 13 冲洗1 0,2 12 18,7 5,0 70 1400 0 0 冲洗2 0,2 11 18,2 5,5 20038 400807014 348 1898 冲洗3 0,2 11 18,2 5,5 4009 80232153 114 622 冲洗4 0,2 11 18,2 5,5 287 5710 200 31 冲洗5 0,2 11 18,2 5,5 89 189 200 11 洗脱乙醇30％，45℃，pH 12 洗脱液1 0,2 12 16,7 5,0 12,1 4,1 8116 13 3 825250,02 洗脱液2 0,2 12 16,7 5,0 13,3 2,5 26653 1135 227 2036407008,14 洗脱液3 0,2 11 18,2 5,5 12,6 0,5 11423 493 99 8541710017,08 洗脱液4 0,2 11 18,2 5,5 12,4 0,1 6212 32 6 85174228,50 洗脱液5 0,2 12 16,7 5,0 12,4 0,1 245 8 2 1732101,70 再生50％乙醇，45℃，pH 12再生液1 0,424 16,7 5,0 14,0 n.b. n.b. n.b. 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 0,4 24 16,7 5,0 13,0 n.b. n.b. n.b.再生液3 0,4 24 16,7 5,0 n.b. n.b. n.b. n.b. 实施例5 实际试验中尿液的富集与稳定 A)普遍性 实际试验中表明，在尿液中有足够的激素含量的情况下，不仅在实验室中，而且在生产条件下都可达到很好的结果。试验的实施如其可以在收集季节中在任意地点进行。
B)试验的实施 足够质量的新鲜尿液在养马场收集。在三匹马及15至20l尿/天的条件下，10天共产生约150至200。因此选择5l的吸附柱用于吸附。除了周末外，每天用尿负载，试验中按下列计划进行 周末开始尿液的收集 周一供给周六、周日和周一的尿 周二至周五供给每天的尿液 周一供给周六、周日和周一的尿 周二洗脱 尿液的供给以约4.5床体积/小时的负载速度直接给柱，只是用一个分离极限为20μm的棉花塞(Baumwollkerze)作为预过滤器。各次供给之间，为使条件困难化，不进行水冲洗。在预试验中，可以无压力损失地将450l尿经过棉花塞供给。在该实际的试验中证实，基于存在未预料到的高含量的碳酸钙沉积物和/或粘蛋白，过滤过程当然困难。当各40至50l后，出现压力高至约4巴的堵塞，这使得有必要进行过滤器替换。根据碳酸钙和/或粘蛋白的含量建议必要时加入过滤助剂。
尽管过滤塞允许通过＞20μm的沉积物组分，但不会损耗吸附剂柱。
C)结果 激素含量 该实际试验的结果在表IV中加以说明。
原尿的雌酮和马烯雌酮的含量令人高兴地分别有123mg/l或74mg/l的高浓度，相当于中等至良好质量。但是，新鲜尿液中的甲酚值却未料及地大，为531mg/l，至今还未观察到。这里归结为喂养问题，需要注意。虽然基本上，例如较高的甲酚含量被控制，但是个别情况下还可能引起困难。因此可能有必要在处理时延长碱性冲洗工艺，以使乙醇洗脱液中的甲酚值最小。其它方面，吸附和解吸附如惯常地进行。洗脱液中提供了对雌酮和马烯雌酮而言很明显的过程。在洗脱液2和3中，回收多于95％的雌酮/马烯雌酮。基于干物质量，总激素含量约30重量％。由此满足了试验中设定的期望值，在困难的试验条件下实现了优异的富集，即＞15重量％的激素含量/干物质。
表IV.1 用于稳定和富集CE的实际试验 试验天数1-10，柱负载(在7个工作日) 吸附剂XAD7，体积＝5l， 原始溶液天然尿，未处理 柱由下向上运行。
试样体积l时间min流量ml/min流量BV/h pHTS％雌酮mg/l雌酮mg 甲酚 mg/l 甲酚 mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mg HPMF mg/l雌酮/TS％ 起始溶液140l负载到5L柱上，＝28床体积，(7个单负载的总量)初含量 140 9,06 112,5 531,1 37,4 42,5 负载用pH 13的NaOH水溶液(2％)流出口1 10 26 384,6 4,60 0,0 000流出口2 10 27 370,4 4,40 249 249000流出口3 10 27 370,4 4,40 245 245000流出口4 10 28 357,1 4,30 408 408000流出口5 10 27 370,4 4,40 358 358000流出口6 10 23 434,8 5,20 537 537000流出口7 10 29 344,8 4,10 901 901000流出口8 10 29 344,8 4,1 8,70 836 836000流出口9 10 29 344,8 4,10 581 581000流出口10 10 24 416,7 5,00 605 605000流出口11 10 25 400,0 4,80 621 621000流出口12 10 27 370,4 4,40 509 509000流出口13 10 27 370,4 4,40 668 668000流出口14 10 24 416,7 5,00 655 655000 表IV.2 用于稳定和富集CE的实际试验 在第11个试验日处理柱 吸附剂XAD7，体积＝5l， 原始溶液天然尿，未处理 柱由下向上运行。
试样体积时间min流量ml/min流量BV/hpHTS％雌酮mg/l雌酮mg甲酚mg/l甲酚mg马烯雌酮mg/l马烯雌酮mgHPMFmg/l雌酮％初含量140 9,0 6 112,5 531,1 37,4 42,5 冲洗用pH 13的NaOH水溶液(2％) 冲洗1 5 15 333,3 4,00 1104 5520040 冲洗2 5 15 333,3 4,00 4400 220000252 冲洗3 5 14 357,1 4,30 2355 11775060 冲洗4 5 14 357,1 4,30 40 20000 冲洗5 5 14 357,1 4,30 7 3500 洗脱乙醇30％，45℃pH 12 洗脱液1 5 8 625,0 7,5 3,8 23 115 12 60 9 45 0 0,1 洗脱液2 5 10 500,0 6,0 2,0 2797 13985 201 1005 1211 6055 0 14,0 洗脱液3 5 12 416,7 5,0 0,3 481 2405 0 0 193 965 0 16,0 洗脱液4 5 13 384,6 4,6 0,0 14 70 0 0 7 35 0 洗脱液5 5 13 384,6 4,6 0,0 0 0 0 0 0 0 0 再生50％乙醇，45℃，pH 12再生液1 10 24 0,40,0 12,2 0 0 0 0 再生10％柠檬酸钠/水，都在45℃再生液2 10 24 0,4 0,0 11,3 0 0 0 0再生液3 10 24 0,4 0,0 10,1 0 0 0 0再生液4 2 BV水由下向上冲洗 病菌数量 除了尿吸附以外，还检测柱内可能的细菌的病菌覆盖。在存在的条件下 1.供给污染的原尿(通过棉花塞过滤，未分离任何病菌) 2.在日供料后未进行冲洗 3.室温下进行试验 4.试验时间为10天 不排除柱内病菌繁殖和随后的病菌生长。不同吸附步骤时总病菌数的测定得到下列结果试样总病菌数/ml原尿1,1×10810天后的柱冲洗水1,1×108碱性冲洗水＜1主要洗脱液1,5 D)结果总结 10天试验时间内，每天将新鲜尿液供给5l的吸附剂柱。总的尿体积为140l，其中平均的雌酮和马烯雌酮含量分别为123mg/l或74mg/l。
有意放弃在每天进行的尿液吸附后用水冲洗柱。在两个很明显产生的主洗脱液中，再次出现约93％的雌酮或马烯雌酮。洗脱液中总的激素含量基于干物质为约30重量％。另一个惊奇的结果关于可想象的柱生病菌。这里，尽管供给高生病菌的原尿，但是柱的病菌繁殖甚至在10天后并未被观察到。产生的洗脱液为1.5病菌/ml，几乎无病菌。在困难的条件下，很大程度证明，在原尿中足够的激素含量条件下，可以用吸附剂柱很好地完成稳定和富集过程，达到激素含量/干物质大于15％。
实施例6 用滤烛的过滤试验 在进一步的实际试验中，用滤烛进行过滤试验，其结果可以总结如下 使用的材料新鲜尿液(来自德国养马场) 部分搅拌下的在桶中收集的妊娠牝马尿液，由桶中借助软管泵经过5μ筛(预过滤器)泵送至一个容器中。容器内保留约0.5重量％的沉积物。用于过滤原尿的工艺方法的图解说明在图2中加以描述。
1.试验 袋 5μ 滤烛5μ，3μ，1μ串接 绝对塞(Absolutkerze)2×1，2μ平行连接 柱负载 95l滤液 沉积物滤液 0.000％ 2.试验 袋 5μ 滤烛5μ，3μ，1μ串接 绝对塞 2×3μ平行连接 柱负载 142l滤液 沉积物滤液 0.001％ 3.试验 袋 5μ 滤烛3μ，1μ串接 绝对塞 2×1μ平行连接 柱负载 160l滤液 沉积物滤液 0.000％ 在绝对塞(膜式过滤器)后，每个试验取一个试样。每个100l，将一个试样由柱后的流出口取出。
总的柱负载397l滤液 处理后干物质含量(TS)为5.9重量％。
权利要求
1.一种针对实际地、分散地富集和稳定妊娠牝马尿液(PMU)中的结合雌激素的混合物的方法，其特征为，
—将妊娠牝马尿液(PMU)中含有的天然结合雌激素混合物(CE)富集和稳定在固态载体(＝吸附剂)上，其中
—将设定最大总量的收集的、任选地预先经过粗机械预纯化的尿液，以设定的流速从存放容器中连续或间歇分批地抽出，泵送通过一个竖直安装的筒，丢弃流出的尿液，这里
—该筒用一种由液体围绕的适用于吸附预定量的在尿液中含有的结合雌激素的混合物的吸附剂装填，且其中
—作为终点控制，将对于吸附剂的负载设定的、通过筒泵送的尿液的最大总量调节为用于尿液中含有的结合雌激素(CE)的吸附剂的最大负载容量。
2.权利要求1的方法，其特征为，用于吸附剂床的筒的内部尺寸设计为，筒可以容纳30至50l吸附剂，PMU从流入到流出必须流经80至120cm的一段距离。
3.权利要求1的方法，其特征为，方法中使用的筒由耐冲击的实验室玻璃，塑料和/或金属构成。
4.权利要求1的方法，其特征为，作为泵使用单泵，软管泵或隔膜泵。
5.权利要求1的方法，其特征为，作为流速仪使用带有浮子的转子流速仪，旋转翼流速仪或感应流速仪。
6.权利要求1的方法，其特征为，用于测量经过筒泵送的尿液量，使用流量仪，优选水表或感应流量仪。
7.权利要求1的方法，其特征为，流速(＝负载速度)为3至10吸附剂—床体积/小时，优选4-6吸附剂—床体积/小时。
8.权利要求1的方法，其特征为，作为吸附剂使用聚合型的吸附剂树脂，硅胶或RP-硅胶，特别是聚合型的吸附剂树脂，优选半极性的聚合型吸附剂树脂。
9.权利要求1的方法，其特征为，所述尿液的最大总量为20-60吸附剂—床体积，优选30-40吸附剂—床体积。
10.权利要求1的方法，其特征为，筒在用与吸附剂的总容量大致对应的PMU负载吸附剂后或者在任意各个分负载步骤后已经达到总负载容量之前，用水和/或其它合适的含水的洗液冲洗。
11.权利要求1的方法，其特征为，筒在吸附剂负载后，在希望的情况下，首先用水和/或其它合适的含水的洗液，最后为了进一步稳定化用防腐的溶液，例如含防腐剂的溶液、调节pH值的水溶液和/或含水的盐溶液冲洗。
12.权利要求1的方法，其特征为，在尿液泵送经过筒之前，尿液由存放容器中首先泵送经过一个或多个预过滤器，优选至少经过一个深过滤器或沉积过滤器。
13.权利要求12的方法，其特征为，预过滤器是带有砂床的深过滤器或滤筒(Filterpatrone)，板式过滤器，滤烛，滤袋或滤管。
14.权利要求12或13的方法，其特征为，过滤前向尿液中加入过滤助剂。
15.用于针对实际地、分散地将妊娠牝马尿液(PMU)中的结合雌激素(CE)的混合物富集和稳定在固态载体(吸附剂)上的设备，包括
—竖直安装的筒，其用一种(持续地)由液体围绕的、适用于吸附预定量的在妊娠牝马尿液中含有的结合雌激素(CE)的混合物的吸附剂装填，其中筒具有或者a)一个底部安装的液体流入口和一个顶部安装的液体流出口，或者b)一个顶部安装的液体流入口和一个底部安装的液体流出口，
—以及在筒之前按照给定的顺序安装的并通过管线彼此连接的
—泵，流速仪和流量仪。
16.权利要求15的设备，其特征为，在泵和流速仪之间还中间连接至少1个预过滤器，优选深过滤器或沉积过滤器。
17.权利要求16的设备，其特征为，预过滤器是一种由2个平行连接的预过滤器组成的组件，所述的两个预过滤器交替单独运行且也可以在设备的连续运行时替换。
18.权利要求16或17的设备，其特征为，为了控制前述滤器的按规定的功能，在泵和前述滤器之间连接一个压力表以及在预过滤器之后的范围内，优选在安装的流速仪之后连接一个压力表。
19.权利要求15的设备，其特征为，筒用于吸附剂床的内部尺寸为，内高约在80-120cm之间，内径约在10-25cm之间。
20.权利要求15的设备，其特征为，设备中包括的筒由耐冲击的实验室玻璃、塑料和/或金属制成。
21.权利要求15的设备，其特征为，设备中包括的泵是单泵，软管泵或隔膜泵。
22.权利要求15的设备，其特征为，设备中包括的流速仪是具有浮子的转子流速仪，旋转翼流速仪或感应流速仪。
23.权利要求15的设备，其特征为，设备中包括的用于测量泵送经过筒的尿液的量的流量仪是水表或感应流量仪。
全文摘要
介绍了一种用于将妊娠牝马尿液中的结合雌激素富集与稳定在固态载体上，以获取用于制备含有这种天然结合雌激素的混合物作为有效组分的药物的合适原料的方法和设备。按本发明的设备的特征为，其适于针对实际地、分散地，特别是在马厩或牧场附近，将妊娠牝马尿液(PMU)中含有的结合雌激素(CE)的混合物，富集与稳定在柱或筒中的固态载体(＝吸附剂)上。吸附剂柱的负载可以直接在尿液收集地点进行。由此省去了否则的话每日将大量尿液运输至中央处理场所的需要。负载可以经过最多多周的较长时间连续进行，直到吸附剂柱或筒饱和。流出的剩余尿液留在反正已有适于其废弃处理的设备的地方，只运走负载的柱或筒，运输可以以较长时间间隔进行，以及也可以需要较长时间，多至几周。由于在吸附剂上的CE的非常好的稳定性，没有任何分解。
文档编号A61K38/00GK1617734SQ01802258
公开日2005年5月18日 申请日期2001年7月26日 优先权日2000年8月1日
发明者J·安索吉, I·班, H-H·拉斯奇 申请人:索尔瓦药物有限公司