专利名称：新的作为药用配制品的血清素激动剂(5ht2)和拮抗剂(5ht6)复合剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及与5-HT2C和5-HT6受体相关的疾病的预防和治疗。另外，本发明提供了一种药用组合物，含有用于治疗用途的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂。
背景技术：
血清素(5-羟色胺或5-HT)是外周和中枢神经系统(PNS和CNS)的关键神经递质，涉及了多种感觉、运动和行为官能，诸如调节进食、睡眠、体温、血压、情绪和认识。至少14种不同的血清素受体亚型在哺乳动物PNS和CNS中表达并已经被正式分类；参见Glennon等人，Neurosci.Biobehav.Rev.1990，14，35-37；和D.Hoyer等人，Pharmacol.Rev. 1994，46，157-203。已经建议将血清素激动剂和拮抗剂用于治疗多种疾病，包括焦虑、抑郁、高血压、偏头痛、肥胖、药物滥用和成瘾、强迫性病症、精神分裂症、孤独症、神经变性病症(例如阿尔兹海默氏症、帕金森症和杭廷顿氏舞蹈病)和化疗引起的呕吐。
受体的5-HT2亚科有三种亚型受体组成5-HT2A、5-TH2B和5-HT2C。血清素5-HT2C受体在许多脑区中表达，并涉及进食调节(Dourish，C.T.Obes.Res.1995，3，Suppl.4，449S-462S；Bickerdike，M.J.，等人，Diabetes，Obes.Metab.1999，1，207-214)。已经证明非特异5-HT2C受体激动剂m-氯苯基哌嗪(m-CPP)对5-HT2C受体有些偏爱，减少了表达正常5-HT2C受体的小鼠的进食，而其对表达变态失活形式5-HT2C受体的小鼠缺乏活性(Tecott.L.H.，等人，Nature 1995，374，542-546)。
另外，已经报道了m-CPP和丫庚因并吲哚U-22394A在分别进行2周和9周治疗后减轻了人的体重，后者最近被确定为5-HT2C受体的激动剂(未见公开)(Walsh，A.E.S.，Psychopharmacology 1994，116，120-122；Sargent，P.A.，等人Psychopharmacology 1997，133，309-312和Gallant，D.M.，等人，Curr.Ther.Res.1967，9，579-581)。
近来，一系列的吡咯并[3，2，1-ij]喹啉衍生物已经被确定为对5-HT2A受体具有选择性的5-HT2C受体激动剂(Isaac M.，等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.2000，10，919-921)。据报道，这些化合物提供了治疗肥胖和癫痫的新尝试。
还已经提出，5-HT2C受体涉及了CNS疾病，诸如抑郁和焦虑(Jenck，F.，等人，Expert Opin.Invest.Drugs 1998，7，1587-1599；Leysen，D.C.M.IDrugs 1999，2，109-120)。还提出了5-HT2C受体亚型涉及了泌尿疾病，诸如尿失禁(Leysen，D.C.M.IDrugs 1999，2，109-120)。
还有5-HT6受体(确定于1993年，Monsma等人，Mol.Pharmacol.1993，43，320-327和Ruat，M.等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.1993，193，269-276)涉及了进食调节和CNS疾病。
因此，例如Bentley，J.C.等人，Br.J.Pharmacol.1999，126，66P描述了通过施以5-HT6拮抗剂降低了大鼠的进食。还有，一些抗抑郁剂和非典型的抗精神失调即表现出对5-HT6受体的高亲合力，这指出精神分裂症涉及到了5-HT6受体(Roth等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.1994，268，1403-1410；Sleight等人，Expert Opin.Ther.Patents 1998，8，1217-1224；Bourson等人，Br.J.Pharm.1998，125，1562-1566；Boess等人，Mol.Pharmacol.1988，54，577-583；Sleight等人，Br.J.pharmacol.1998，124，556-562)。另外，5-HT6受体与一般的应激反应和焦虑状态关联(Yoshioka等人，LifeSci.1998，17/18，1473-1477)。
发明概述根据本发明，现已出乎意料地发现将5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂联合给药减少了进食，效果比单独使用激动剂或拮抗剂更明显。与单独使用激动剂或拮抗剂相比，这种5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂联合给药可提供了治疗学上的益处。
因此本发明的一个方面是提供一种药物组合物，包括有效量的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的结合，以及任选的药学可接受的载体。
本发明的另一方面是提供一种预防或治疗与5-HT2C受体和5-HT6受体相关的疾病的方法，特别是肥胖，包括给需要的人或哺乳动物(同时或连续地)使用足以提供治疗效果量的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂。
本发明的另一个方面是提供5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂在生产治疗涉及5-HT2C受体和5-HT6受体的疾病的药物中的应用。
本发明的另一方面是提供一种制备药物组合物的方法，其中联合治疗量的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂与药学可接受的载体完全混合。
本发明的另一方面是提供一种含有5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的产品，其作为联合配制品用于同时、分别或相继地用于治疗与5-HT2C受体和5-HT6受体相关的疾病，特别是肥胖。
附图1表示了在ob/ob小鼠用5-HT2C受体激动剂(PNU-183933F；50mg/kg po)和5-HT6受体拮抗剂(PNU-186053A；50mg/kg sc)联合给药后在进食方面的效果，以及单独使用激动剂和拮抗剂的效果。
附图2表示了在ob/ob小鼠用5-HT2C受体激动剂(BVT.2938F；5mg/kg sc)和5-HT6受体拮抗剂(BVT.5182C；3mg/kg sc)联合给药后在进食方面的效果，以及单独使用激动剂和拮抗剂的效果。
发明详述如上所述，本发明基于一个出乎意料的发现，即，5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的联合给药比单独使用激动剂或拮抗剂更能减少进食。与单独使用激动剂或拮抗剂相比，这种5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的联合给药还可提供数种好处，例如在肥胖的治疗中。
首先，联合给药对于每种化合物需要的剂量更低，却得到了类似的或比单一治疗更好的减少进食效果。
其次，联合给药需要的剂量更低可降低不利情况发生的危险。
第三，联合给药需要的剂量更低可降低耐受和滥用倾向产生的危险。
第四，相对于基于一个靶的治疗，基于两个靶的治疗可增加个体疗效。同时也降低了无应答功效(无响应器)的风险。
本发明联合给药的有益效果是不但可用于调节进食行为，用于治疗体重过重和肥胖，而且可用于治疗CNS失调，诸如抑郁症、躁狂症、精神分裂症样疾病、焦虑、记忆障碍(诸如阿尔茨海默氏症)、偏头痛、药物成瘾、惊厥、人格疾病、外伤后应激反应综合征和睡眠障碍，以及用于治疗尿失禁(或更一般的活动过度的膀胱)、性机能不良、肠胃疾病和青光眼。
在此使用的术语“5-HT2C受体激动剂”是导致血清素5-HT2C受体活化的化合物。5-HT2C受体激动剂优选具有小于50nM的亲和常数Ki，优选小于20nM，用细胞内Ca2+水平度量的体外固有活性相对于5-HT(1μM)大于20％，优选大于50％。
在此使用的术语“5-HT6受体拮抗剂”是阻断血清素5-HT6受体调节反应的化合物。5-HT6受体拮抗剂优选具有小于50nM的亲和常数Ki，优选小于20nM，用细胞内cAMP水平度量的体外固有活性相对于5-HT(1μM)小于50％，优选小于20％。
可用于分别确定5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂亲合力和固有活性的体外试验是本领域已知的，在下面的实验部分也描述了它们，作为确定对5-HT2A和5-HT2B受体的亲合力的试验。
通常，5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂应具有足够的选择性，不会导致任何实质上的不利副反应。但是，在上下文中，术语“选择性”和“实质上”可广义地解释，其含义是本领域技术人员显而易见的。
分别相对于5-HT2A、5-HT2B和5-HT6受体，5-HT2C受体激动剂对5-HT2C受体的选择性优选至少为5，优选至少为10，更优选至少20(作为5-HT2A/5-HT2C、5-HT2B/5-HT2C和5-HT6/5-HT2C亲和比测定)。
分别相对于5-HT2A、5-HT2B和5-HT2C受体，5-HT6受体拮抗剂对5-HT6受体的选择性优选至少为5，优选至少为10，更优选至少20(作为5-HT2A/5-HT6、5-HT2B/5-HT6和5-HT2C/5-HT6亲和比测定)。
用于确定化合物是选择性的5-HT2C受体激动剂还是选择性的5-HT6受体拮抗剂的相关试验是本领域已知的，如上所述，也在下文的实验部分大致描述。
已知是5-HT2C受体激动剂的化合物是例如EP-A-0863136中所述类型的氮杂环丁烷和吡咯烷衍生物；EP-A-0657426中所述类型的三环吡咯衍生物；EP-A-0655440中所述类型的1-氨基乙基吲哚；EP-A-0572863中所述类型的吡嗪并吲哚；US 4081542中所述类型的哌嗪基吡嗪；WO 00/12475中所述类型的二氢吲哚衍生物；WO 00/12510中所述类型的吡咯并吲哚、吡啶并吲哚和丫庚因并吲哚；WO 00/12482中所述的吲唑衍生物；WO 00/12502中所述类型的吡咯并喹啉；WO00/35922中所述类型的2，3，4，4a-四氢-1H-吡嗪并[1，2-a]喹喔啉-5(6H)酮；WO 00/12481中所述类型的吲唑基丙基胺；WO00/17170中所述类型的吲唑；WO 00/76984和2000年11约20日提交的瑞典专利申请No.0004244-0和0004245-7中所述类型的哌嗪基吡嗪；WO 00/77001、WO 00/77002和WO 00/77010中所述类型的杂环稠合的γ-carboline；WO 01/09111和WO 01/09123中所述类型的苯并呋喃基哌嗪；WO 01/09122中所述类型的苯并呋喃；WO 01/09126中所述类型的苯并噻吩；EP 370560中所述类型的吡啶基哌嗪；Bioorg.Med.Chem.Lett.2000，10，919-921中所述类型的吡咯并喹啉；WO 98/30548中所述类型的氨基烷基吲唑；WO 01/12602中所述类型的二氢吲哚；WO 01/12603中所述类型的吲哚；WO 00/44753中所述类型的吡嗪并(氮杂)吲哚；WO 98/56768中所述类型的三环吡咯或吡唑。
目前优选的5-HT2C受体激动剂是芳基哌嗪和哌嗪基吡嗪化合物，特别是WO 00/76984和2000年11约20日提交的瑞典专利申请No.0004244-0和0004245-7中所述类型的化合物。
已知是5-HT6受体拮抗剂的化合物是例如WO 99/37623中所述类型的哌嗪基苯磺酰胺；EP-A-0930302中所述类型的磺酰基苯衍生物；WO 99/02502中所述类型的磺酰胺衍生物；WO 99/42465中所述类型的磺酰胺衍生物；WO 98/27081中所述类型的磺酰胺衍生物；WO98/27058中所述类型的碳酰胺衍生物；EP-A-0815861中所述类型的磺酰胺衍生物；WO 99/47516中所述类型的吡咯烷酮甲基吲哚衍生物；WO 99/65906中所述类型的双环哌啶和哌嗪衍生物；EP-A-0941994中所述类型的吡唑并嘧啶和吡唑并三嗪衍生物；WO 01/05793中所述类型的芳基砜取代的六氢丫庚因并吲哚；WO 01/09142中所述类型的噁嗪并咔唑；WO 01/17963中所述类型的氨基烷氧基咔唑；2000年6月20日提交的PCT/US00/30177国际专利申请中所述类型的二苯基亚砜；和2000年10月20日提交的瑞典专利申请No.0003810-9中所述类型的芳基磺酰基吲哚。
目前优选的5-HT6受体拮抗剂是丫庚因并吲哚化合物，诸如WO01/05793中所述类型的芳基砜取代的六氢丫庚因并吲哚。其它优选的5-HT6受体拮抗剂包括芳基磺酰基吲哚化合物，诸如瑞典专利申请No.0003810-9中所述的化合物。
5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂可以是化合物本身，或在适当时是其药学可接受的盐(酸或碱加成盐)或其立体异构体形式(包括光学异构体，诸如对映体和外消旋体)。
上述药学可接受的加成盐包括化合物能够形成的治疗活性的非毒性酸和碱加成盐形式。碱性的化合物通过用适当的酸处理碱的形式可转化成它们的药学可接受的酸加成盐。酸的例子包括无机酸，诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸；有机酸，诸如乙酸、丙酸、羟乙酸、乳酸、丙酮酸、乙醇酸、马来酸、丙二酸、草酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、三氟乙酸、富马酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、水杨酸、对氨基水杨酸、扑酸、苯甲酸、抗坏血酸等。碱加成盐形式的例子是钠、钾、钙盐，以及与药学可接受的胺形成的盐，所述的胺是诸如氨、烷基胺、苯胺和氨基酸，诸如精氨酸和赖氨酸。在此使用的术语“加成盐”还包括溶剂化物，化合物以及其盐可形成诸如水合物、醇合物等。
5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂还可以是前药或可在体内代谢变化后释放出所述的活性成分的形式。在“Design of Prodrugs”ed.H.Bundgaard，Elsevier，1985中描述了选择和制备适合的前药衍生物的常规方法。
5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂可配制成各种药剂形式给药，它们可以在相同的药物剂量的形式中，诸如同一种片剂，或在独立的药剂形式中。但是，在后者的情况下，有利的是将5-HT2C受体激动剂的单位剂量形式和5-HT6受体拮抗剂的单位剂量形式装在同一个包装中，例如包装在同一个泡膜中。
游离的碱或盐形式的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂可根据公知的制药方法制成适当的药物剂型，诸如用于口服、注射、鼻内喷雾给药等用途的组合物。根据本发明的这类药物组合物包括有效量的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂以及适合的药学可接受的本领域公知的载体材料或稀释剂。载体可以是任何惰性材料，有机的或无机的，适用于经口、肠、直肠、皮肤、皮下或非肠道给药，诸如水、明胶、阿拉伯胶、乳糖、微晶纤维素、淀粉、淀粉羟乙酸钠、磷酸氢钙、硬脂酸镁、滑石、胶态二氧化硅等。这些组合物还可含有其它药学活性剂和常规添加剂，诸如稳定剂、湿润剂、乳化剂、香味剂、缓冲剂等。
根据本发明的组合物可制成用于口服的固体或液体形式，诸如片剂、丸剂、胶囊、粉末、糖浆剂、酏剂、可分散颗粒、扁囊剂、栓剂等，用于非肠道给药能够的无菌溶液、悬浮剂或乳剂，喷剂，例如鼻用喷剂，眼用配制品，例如贴片等。
5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的剂量水平和特定结合的剂量的给药频率根据多种因素改变，包括使用的每种具体化合物的效能、代谢稳定性和化合物作用的长度、患者的年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药形式和时间、排泄速度、药物组合、要治疗症状的严重程度。例如，5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的剂量每日剂量分别可以是每千克体重约0.001-150mg，优选每千克体重约0.01-100mg，特别是每千克体重约0.1-50mg，它们可以单剂或多剂给药，例如每剂月0.01mg至约1g。通常，这种合并剂量用于口服，但是也可以选择例如非肠道或直肠给药。片剂联合配方的例子可以是(A)双独立片的形式，1片含有10mg、20mg或50mg 5-HT2C受体激动剂，1片含有10mg、20mg或50mg 5-HT6受体拮抗剂；或(B)一个复合片，含有10mg、20mg或50mg 5-HT2C受体激动剂和10mg、20mg或50mg 5-HT6受体拮抗剂。
现通过下述非限制性的实验部分进一步具体说明本发明。
实验部分A.试验化合物的制备如WO 00/76984所述制备5-HT2C受体激动剂游离碱(2R)-甲基-1-{3-[2-(3-吡啶基氧基)乙氧基]-2-哌嗪基}哌嗪延胡索酸盐(“PNU-183933F”)。游离碱转化为其延胡索酸盐的形式，m.p.126-129℃。MS m/z 315(M)+。Anal.(C16H21N5O2·C4H4O4)C，H，N。
如WO 01/05793所述制备5-HT6受体拮抗剂6-甲基-9-(苯基磺酰基)-1，2，3，4，5，6-六氢丫庚因并[4，5-b]吲哚，盐酸盐(“PUN-186053A”)。
如WO 00/76984所述制备5-HT2C受体激动剂。(2R)-1-(3-{2-[(2-乙氧基-3-吡啶基)氧基]乙氧基}-2-吡嗪基)2-甲基哌嗪，延胡索酸盐(“BVT.2938F”)。
如2000年10月20日提交的瑞典专利申请No.0003810-9中所述制备5-HT6受体拮抗剂1-(苯基磺酰基)-4-(1-哌嗪基)-1H-吲哚，盐酸盐(“BVT.5182C”)。简而言之，BVT.5182C根据下述反应式1所示的一般过程制备，从可从市场购买的4-哌嗪基吲哚(化合物1)开始，进行步骤(a)至(C)，得到1-(苯基磺酰基)-4-(1-哌嗪基)-1H-吲哚，盐酸盐(产率80％)。HPLC纯度(P10框1)。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.64(br s，2 H)，8.00-7.85(m，3 H)，7.79(d，J＝3.77Hz，1H)，7.70-7.65(m，1H)，7.63-7.60(m，3H)，7.27-7.22(m，1H)，6.95(d，J＝3.76Hz，1H)，6.81-6.77(m，1H)，3.30-3.20(m，4H)；13C NMR(DMSO-d6)δ144.79，137.02，135.22，134.62，129.82，126.85，125.63，125.54，123.49，111.15，107.87，107.76，47.81，42.86；MS(posES-FIA) m/z 342(M+H).
反应式1 步骤(a)哌嗪N4氮的BOC保护4-哌嗪基吲哚(1eq)、DMAP(0.1eq)和Et3N(4eq)溶于DMF。加入(BOC)2O(1.1eq)，反应混合物在室温搅拌(12小时)。蒸出DMF，残留物通过色谱在硅胶上提纯，使用氯仿、甲醇和氨的混合物作为洗脱液。HPLC100％纯度。MS m/z 302.2(M+H)。
步骤(b)中间体3的制备中间体2(1.0eq)溶于DMF中，加入NaH(1.3eq)，悬浮液在氮气气氛下搅拌0.5小时。加入苯磺酰氯(1.2eq)，反应物在室温搅拌过夜。蒸出挥发性物质。残余物溶于DCM，用饱和NaHCO3溶液洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到油状残留物，通过色谱在硅胶上提纯，用己烷和乙酸乙酯(7∶3)的混合物作为洗脱液，得到4-[1-(苯磺酰基)-1H-吲哚-4-基]-1-哌嗪羧酸丁酯(3)。HPLC 100％。NMR(1H和13C)和MS分析确认了所述结构。
步骤(c)除去BOC保护基中间体3上的BOC基团通过将化合物溶于甲醇，然后加入HCl气体饱和的乙醚。过滤并干燥HCl盐(4)。
B.药物组合物的制备片剂成分 mg/片1 5-HT2C受体激动剂 10.02 5-HT6受体拮抗剂10.03 微晶纤维素 57.04 磷酸氢钙15.05 淀粉羟乙酸钠5.06 胶态二氧化硅0.257 硬脂酸镁0.75活性成分1和2与成分3、4、5和6混合约10分钟。然后加入硬脂酸镁(7)，生成的混合物混合约5分钟，压制成有或没有膜包覆的片。
C.受体亲和力和效能分析
5-HT2C受体亲和力分析5-HT2C受体亲和力在竞争试验中测定，其中通过在闪烁计数器中测量在玻璃纤维过滤器上过的膜匀化物的活性技术监测系列稀释度化合物代替结合在通过稳定表达人5-HT2C受体蛋白的转染HEK293细胞系制备的膜上的3H-标记的5-HT的能力。用5μM米安色林确定非特异性结合。
5-HT2A受体亲和力分析5-HT2A受体亲和力在竞争试验中测定，其中通过在闪烁计数器中测量在玻璃纤维过滤器上过的膜匀化物的活性技术监测系列稀释度化合物代替结合在通过稳定表达人5-HT2A受体蛋白的转染CHO细胞系制备的膜上的3H-标记的ketanserin或麦角酸酰二乙胺(LSD)的能力。用5μM米安色林确定非特异性结合。
5-HT2B受体亲和力分析5-HT2B受体亲和力在竞争试验中测定，其中用闪烁接近分析(SPA)技术监测系列稀释度化合物代替结合在通过稳定表达人5-HT2B受体蛋白的转染CHO细胞系制备的膜上的3H-标记的5-HT的能力。用5μM米安色林确定非特异性结合。
5-HT2C受体效能分析在5-HT2C受体的激动剂效能通过用钙螯合荧光染料FLUO-3(Sigma，St.Louis，MO，U.S.A)测定化合物在稳定表达人5-HT2C受体蛋白的转染HEK293细胞中松动细胞内钙的能力确定。相对于1μM血清素，测定相对效能(％)。
5-HT6受体亲和力分析放射性配体结合分析使用[3H]-1麦角酰二乙胺(LSD)。分析在96-孔样品板上进行，加入11μl适当稀释度的试验化合物(分析使用双份的11个系列浓度的样品)，11μl放射性配体，以及178μl洗过的WGA-涂敷的SPA珠，在结合缓冲剂中的膜用含有克隆人5-HT6受体的HEK293-细胞制备。将板振动约5分钟，然后在室温培养1小时。然后将板加载到计数暗盒中，在闪烁计数器中计数。得到的特定结合cpm用GraphPad Prism ver.2.0调整到一-位点结合模型。用Cheng Prusoff方程将评价的IC50值转化为Ki值(亲和常数)(Cheng，Y.C.等人，Biochem.Pharmacol.1973，22，3099-3108)。
5-HT6受体效能分析在5-HT6受体的拮抗剂效能用cAMP SPA直接萤光分析系统(RPA559，Amersham Pharmacia Biotech，Uppsala，Sweden)测定化合物在稳定表达人5-HT6受体蛋白的转染HEK293细胞中对由5-HT导致的cAMP增加的拮抗能力确定。
D.进食实验试验化合物5-HT2C受体激动剂(2R)-甲基-1-{3-[2-(3-吡啶基氧基)乙氧基]-2-哌嗪基}哌嗪延胡索酸盐(“PNU-183933F”)和(2R)-1-(3-{2-[(2-乙氧基-3-吡啶基)氧基]乙氧基}-2-吡嗪基)-2-甲基哌嗪，延胡索酸盐(“BVT.2938F”)溶于盐水(0.9％NaCl)，在相同的载体中稀释至合适的浓度。
5-HT6受体拮抗剂6-甲基-9-(苯基磺酰基)-1，2，3，4，5，6-六氢丫庚因并[4，5-b]吲哚盐酸盐(“PNU-186053A”)和1-(苯基磺酰基)-4-(1-哌嗪基)-1H-吲哚盐酸盐(5-HT6受体拮抗剂(“BVT.5182C”)在25％环糊精中溶解并稀释。
在处理的当天配制新鲜的溶液。
动物使用8-9周龄平均体重45g的雄性小鼠(C57BL/6JBom-Lepob(ob/ob)，Bomholtsgaard，Denmark)。动物单独关在笼中，温度23±1℃，湿度40-60％，可自由饮水并食用标准实验室食物。确立12/12h明/暗循环，在5p.m.关灯。在开始研究前，动物至少习惯1周。在试验期间，动物得到特别的食物(BioServ，Frenchtown，NJ，USA无尘精颗粒，每粒重20mg)。
实验部分在研究的开始，动物转移到特殊的笼“operant试验笼”中(Habitest Modular Animal Behavior Test System；Colbourn Instr，Allentown，PA，USA)。这些笼包括一个喂食槽，其具有用于测量食物摄取的传感器；一个用于记录水摄取量的光学lickometer；以及一个基于红外线的监测器，用于记录所有一般的运动活动。监测器与计算机相连，计算机连续地控制并监测情况。称量出用于整个研究所需量的食物颗粒，水瓶注满新鲜的自来水并称重。动物在它们的新环境中适应3天以建立基准值。动物在开始和结束研究时在3p.m.称重。在黑暗开始前，在4.20和5.00p.m.投喂化合物。三组动物分别接受(i)在25％环糊精中的5-HT6受体拮抗剂；(ii)在盐水中的5-HT2C受体激动剂；和(iii)联合的5-HT2C受体激动剂/5-HT6受体拮抗剂。当联合使用时，5-HT6受体拮抗剂或盐水在5-HT2C受体激动剂或25％环糊精给药前30分钟投喂。第四组以相同的方法分别投喂载体。研究在第5天结束。用计算机辅助Mettler-Toledo PR5002/PR802称进行称重。
结果的评价每个剂量组包括12-16只动物。在22小时期间基于称重的泄漏量校正食物泄漏量数据，并且假定其是按照基于时间的比例的。在处理之前和之后计算数据。在处理前和3小时(5pm-8pm)、6小时(5pm-11pm)、12小时(5pm-5am)、21小时(5pm-2pm)之间食物摄取之间的差以基本摄食量的％数值(平均值±SEM)表示。
附图1所示的结果指出，用5-HT6受体拮抗剂“PNU-186053A”(50mg/kg皮下)和5-HT2C受体激动剂“PNU-183933F”(50mg/kg口服)联合处理所降低的食物消耗明显高于使用单一化合物。相应地，附图2所示的结果指出，用5-HT2C受体激动剂“BVT.2938F”(5mg/kg皮下)和5-HT6受体拮抗剂“BVT.5182C”(3mg/kg皮下)联合处理在给药后12和21小时所降低的食物消耗明显高于使用单一化合物。因此，显然用5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂联合治疗对食物摄取量的降低明显比单独使用激动剂或拮抗剂治疗更有效。
权利要求
1.一种药物组合物，包括有效量的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂或所述激动剂和/或拮抗剂的盐、对映体或前药形式的结合，以及任选的药学可接受的载体。
2.根据权利要求1的药物组合物，其中分别相对于5-HT2A、5-HT2B和5-HT6受体，5-HT2C受体激动剂对5-HT2C受体的选择性至少为10，优选至少20。
3.根据权利要求1或2的药物组合物，其中分别相对于5-HT2A、5-HT2B和5-HT2C受体，5-HT6受体拮抗剂对5-HT6受体的选择性至少为10，更优选至少20。
4.根据权利要求1、2或3的药物组合物，其中5-HT2C受体激动剂是芳基哌嗪化合物，诸如哌嗪基吡嗪化合物。
5.根据权利要求1-4任一项的药物组合物，其中5-HT6受体拮抗剂选自丫庚因并吲哚化合物，诸如芳基砜取代的六氢丫庚因并吲哚和芳基磺酰基吲哚化合物。
6.根据权利要求1-5任一项的药物组合物，其中5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂以治疗量结合，与药学可接受的载体均匀混合。
7.一种含有5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂的产品，其作为联合制剂在与5-HT2C受体和5-HT6受体相关的疾病的治疗中同时、分别或相继使用。
8.根据权利要求7的产品，其中疾病选自饮食失调、CNS失调、尿失禁和青光眼。
9.根据权利要求8的产品，其中疾病是体重过重或肥胖。
10.5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂在制备药物中的用途，所述的药物用于治疗与5-HT2C受体和5-HT6受体相关的疾病。
11.根据权利要求10的用途，其中疾病选自饮食失调、CNS失调、尿失禁和青光眼。
12.根据权利要求11的用途，其中疾病是体重过重或肥胖。
13.预防或治疗与5-HT2C受体和5-HT6受体相关的疾病的方法，包括给需要的人或动物施用足以提供治疗效果的5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂。
14.根据权利要求13的方法，其中疾病选自饮食失调、CNS失调、尿失禁和青光眼。
15.根据权利要求14的方法，其中疾病是体重过重或肥胖。
16.根据权利要求13、14或15的方法，其中5-HT2C受体激动剂和5-HT6受体拮抗剂作为联合药物组合物给药。
全文摘要
本发明涉及一种预防或治疗与5－HT
文档编号A61P13/02GK1443162SQ0181315
公开日2003年9月17日 申请日期2001年7月19日 优先权日2000年7月21日
发明者S·乔森, B·M·尼尔森, K·S·萨克里尔森, J·斯瓦腾格林 申请人:比奥维特罗姆股份公司