专利名称：抗肿瘤作用增效剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及以具有Rho激酶抑制剂活性的化合物作为活性组分的抗肿瘤作用增效剂，它增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
背景技术：
恶性肿瘤的治疗可采取外科手术治疗、化学治疗、放射性治疗等方法。当然，近年来由于化学治疗中所使用药物的开发、先进的外科手术技术等，所述治疗方法也得到了改善。抗肿瘤剂的给药方法可采取单一给药方法(连续、间歇、短期内大剂量)、多种药物联合给药方法、与手术放射性治疗结合的给药方法、局部给药方法(肿瘤灌注方法、动脉内给药方法、体腔内给药方法)、全身给药方法等。抗肿瘤剂的给药方法依赖于原发肿瘤的位置、对药物的敏感性、有没有转移、抗肿瘤剂的作用机理等并且已经考虑到针对各种癌采取各自不同的复合治疗方法。
然而，通常，用抗肿瘤剂治疗恶性肿瘤的副作用问题是不可避免的。
例如，骨髓毒性如造血干细胞减少、骨髓发育不全等，由烷化剂引起的胃肠道毒性等，由抗代谢物引起的骨髓毒性、胃肠道毒性、肝病等，由抗癌剂抗生素引起的心毒性、血毒性、肺毒性(肺纤维化)等，由植物来源的抗癌剂引起的神经毒性、骨髓毒性等，由铂配位化合物引起的肾病、胃肠道毒性等(尤其，使用顺铂的肾毒性是令人担心的，可通过摄取大量水以减少对肾脏的损伤来处理)是有代表性的副作用。
当发生急性副作用如剧烈的恶心呕吐、腹泻、过敏反应、胃炎、发烧(40℃或40℃以上)、心动过速性心律失常和低血压时，减少抗肿瘤剂的剂量或中断给药。当出现慢性副作用和/或器官疾病如骨髓病、严重的感染性疾病、肝病、血纤维蛋白原过少、肺中异常发现物、心衰指症、肾病和神经症状时，彻底停止给予抗肿瘤剂。
如上所述，这些副作用是限制抗肿瘤剂剂量的因素并形成严重的结果，不管所述抗肿瘤剂提供的作用如何，因为副作用不得不减少剂量和中断药物治疗。
尽管利用抗肿瘤剂来治疗恶性肿瘤是目前使用的一种治疗方法，但现存抗肿瘤剂的联合应用通常引起副作用如骨髓抑制作用增强等。因此，需要严格地注意剂量，如减少剂量同时不断地监测病人的情况等。因为出现需要特别小心处理的副作用，如由环磷酰胺或异环磷酰胺和喷司他丁的组合引起心脏毒性，由氟尿嘧啶和索立夫定(Sorivudine)(抗病毒剂)的组合引起的骨髓病，由长春花生物碱类药物和铂配位化合物的组合引起的神经疾病和由长春花生物碱和丝裂霉素C的组合引起的呼吸道疾病，所有特定抗肿瘤剂的组合也存在单独给药时出现的副作用问题。
为了增强抗肿瘤作用和减少副作用，近年来已尝试在给予抗肿瘤剂前、后和给药过程中给予不同的对抗肿瘤剂有作用的药物(例如氟尿嘧啶和甲酰四氢叶酸，氟尿嘧啶和胸苷，组合用药(UFT))替加氟和尿嘧啶，在给予氟尿嘧啶前给予甲氨蝶呤等)。
然而，这些尝试尚未提供足够的对恶性肿瘤的治疗作用。
相反，已阐明，当接收到来自各种细胞膜受体的信号时，Rho被激活，并且被激活的Rho通过作为各种细胞现象如平滑肌收缩、细胞能动性、细胞粘连、细胞的形态学改变、细胞生长等分子开关的肌动球蛋白系统起作用。而且，正在阐明存在于通过Rho进行信号转换途径下游中的Rho激酶在上述Rho产生的应答细胞现象中发挥的重要作用。
另外，最近已报道了后述提到的具有Rho激酶抑制剂活性的式(I)化合物(WO98/06433)。也报道，异喹啉磺胺衍生物和异喹啉衍生物显示Rho激酶抑制剂活性(WO98/06433和Naunyn-Schmiedeberg’sArchives of Pharmacology 385(1)Suppl.，R219，1998)。而且已报道，利尿酸，某些乙烯基苯衍生物如4-[2-(2，3，4，5，6-五氟苯基)-丙烯酰基]肉桂酸等和肉桂酸衍生物具有Rho激酶抑制剂活性(WO00/57914，JP-A-2000-44513)。
具有Rho激酶抑制剂活性化合物的药学应用公开于WO98/06433，并被描述广泛地用作高血压治疗剂、心绞痛治疗剂、脑血管痉挛抑制剂、哮喘治疗剂、外周循环障碍治疗剂、早产预防药、动脉硬化治疗剂、抗癌药、抗炎药、免疫抑制剂、自身免疫性疾病治疗剂、抗AIDS药、骨质疏松症治疗剂、视网膜病治疗剂、大脑功能改善剂、避孕药和胃肠道感染预防药。
此外，已知式(I)化合物可用作循环器官，如冠状动脉、脑动脉、肾动脉、外周动脉等疾病的预防剂或治疗剂(例如，高血压治疗剂、心绞痛治疗剂、肾脏和外周循环疾病治疗剂、脑血管收缩抑制剂等)，该化合物的作用是有效的和持久的，并且也可用作哮喘治疗剂(JP-A-62-89679，JP-A-3-218356，JP-A-4-27 3821，JP-A-5-194401，JP-A-6-41080和WO95/28387)。
已知上述WO98/06433中描述的异喹啉磺胺衍生物是有效的血管舒张药、高血压治疗剂、脑功能改善剂、抗哮喘药、心脏保护剂、血小板聚集抑制剂、神经病学表现治疗剂、抗炎药、预防和治疗粘制性过高综合症的药物、青光眼治疗剂、减张力剂、脑血栓形成引起的运动麻痹改善剂、预防和治疗病毒感染的药物和转录控制因子抑制剂(JP-A-57-200366，JP-A-61-227581，JP-A-2-256617，JP-A-4-264030，JP-A-6-56668，JP-A-6-80569，JP-A-6-293643，JP-A-7-41424，JP-A-7-277979，WO97/23222，JP-A-9-227381，JP-A-10-45598和JP-A-10-87491)。
而且，已知上述出版物(Naunyn-Schmiedeberg’s Achives ofPharmacology 385(1)Suppl.，R219，1998)中所描述的异喹啉衍生物用作预防或治疗由血管痉挛引起的脑组织病的药物(WO97/28130)。
如上所述，已知在肿瘤形成和在诱导肿瘤细胞浸润和转移中涉及Rho和Rho激酶，具有Rho激酶抑制剂活性的化合物用作抗肿瘤药物。
然而，尚未报道具有Rho激酶抑制剂活性的化合物增强不同抗肿瘤药物的抗肿瘤作用。
发明公开本发明的目标是解决上述问题并且其目的是提供能够增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用、能够与抗肿瘤剂联合应用、能够减少剂量、能够提供足够的作用和/或减少副作用的抗肿瘤作用增效剂。
作为尝试解决上述问题的深入细致研究的结果，本发明发现，具有Rho激酶抑制剂活性的化合物增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用并且可用作抗肿瘤作用增效剂，在此基础上完成了本发明。
因此，当与抗肿瘤剂联合应用时，本发明具有Rho激酶抑制剂活性的化合物可减少抗肿瘤剂的剂量并且可提供足够的作用和/或减少副作用。
因此，本发明提供(1)、一种含有具有Rho激酶抑制剂活性的化合物作为活性组分的抗肿瘤作用增效剂，它增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
(2)、上述(1)抗肿瘤作用增效剂，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是下列式(I)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。 其中Ra是下列式(a)、(b)或(c)基团 在式(a)和(b)中，R为氢、烷基或环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，或式(d)基团 其中
R6为氢、烷基或式-NR8R9，其中R8和R9是相同的或不同的并且各为氢、烷基、芳烷基或苯基，R7为氢、烷基、芳烷基、苯基、硝基或氰基，或者R6和R7一起形成杂环的基团，在该杂环中不含有或进一步含有氧原子、硫原子或未取代的或取代的氮原子，R1为氢、烷基或在所述环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，或者R和R1与相邻的氮原子一起形成杂环，在该杂环中不含有或进一步含有氧原子、硫原子或未取代的或取代的氮原子，R2为氢或烷基，R3和R4是相同的或不同的并且各为氢、烷基、芳烷基、卤素、硝基、氨基、烷基氨基、酰氨基、羟基、烷氧基、芳烷氧基、氰基、酰基、巯基、烷硫基、芳烷硫基、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、一或二烷基氨基甲酰基、或叠氮化物，并且A为式(e)基团 其中R10和R11是相同的或不同的并且各为氢、烷基、卤代烷基、芳烷基、羟基烷基、羧基或烷氧基羰基，或者R10和R11一起形成环烷基并且l、m和n各为0或1-3的整数，在式(c)中，L为氢、烷基、氨基烷基、一或二烷基氨基烷基、四氢呋喃基、氨基甲酰基烷基、邻苯二甲酰亚氨基烷基、脒基或式(f)-(i)基， 其中B为氢、烷基、烷氧基、芳烷基、芳烷氧基、氨基烷基、羟基烷基、链烷酰氧基烷基、烷氧基羰基烷基、α-氨基苄基、呋喃基、吡啶基、苯基、苯基氨基、苯乙烯基或咪唑并吡啶基，Q1为氢、卤素、羟基、芳烷氧基或噻吩基甲基，W为亚烷基，Q2为氢、卤素、羟基、或芳烷氧基，X为亚烷基，Q3为氢、卤素、羟基、烷氧基、硝基、氨基、2，3-二氢呋喃基或5-甲基-3-氧代-2，3，4，5-四氢哒嗪-6-基；并且Y为单键、亚烷基或亚烯基，并且在式(C)中，虚线为单键或双键，并且R5为氢、羟基、烷氧基、烷氧基羰基氧基、链烷酰氧基或芳烷氧基羰基氧基；Rb为氢、烷基、芳烷基、氨基烷基或一或二烷基氨基烷基；并且Rc为未取代的或取代的含氮杂环。
(3)、上述(1)的抗肿瘤作用增效剂，其中，具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是下列式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。 其中Ra’是式(a’)和(b’)基团 其中，R’为氢、烷基或环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，R1为氢、烷基或在所述环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，或者R’和R1与毗邻的氮原子一起形成杂环，在该杂环中不含有或进一步含有氧原子、硫原子或未取代的或取代的氮原子，R2为氢或烷基，R3和R4是相同的或不同的并且各为氢、烷基、芳烷基、卤素、硝基、氨基、烷基氨基、酰氨基、羟基、烷氧基、芳烷氧基、氰基、酰基、巯基、烷硫基、芳烷硫基、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、一或二烷基氨基甲酰基、或叠氮化物，并且A为式(e)基团 其中R10和R11是相同的或不同的并且各为氢、烷基、卤代烷基、芳烷基、羟基烷基、羧基或烷氧基羰基，或者R10和R11一起形成环烷基并且l、m和n各为0或1-3的整数，Rb为氢、烷基、芳烷基、氨基烷基或一或二烷基氨基烷基；并且Rc为未取代的或取代的含氮杂环。
(4)、上述(1)的抗肿瘤作用增效剂，其中，具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐，特别是(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
(5)、上述(1)或(2)的抗肿瘤作用增效剂，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇(Paccltaxel)，特别是顺铂。
(6)、一种增强抗肿瘤作用的药物组合物，它包含具有Rho激酶抑制剂活性的化合物和可药用载体，其增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
(7)、上述(6)增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)特别是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或去可药用酸加成盐。
(8)、上述(6)增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐，特别是(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
(9)、上述(6)或(7)增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇，特别是顺铂。
(10)、一种治疗肿瘤的药物组合物，它包含具有Rho激酶抑制剂活性的化合物、抗肿瘤剂和可药用载体。
(11)、上述(10)治疗肿瘤的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)特别是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或去可药用酸加成盐。
(12)、上述(10)治疗肿瘤的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐，特别是(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
(13)、上述(10)或(11)治疗肿瘤的药物组合物，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇，特别是顺铂。
(14)、一种治疗肿瘤的方法，它包括给予病人药用有效量具有Rho激酶抑制剂活性的化合物和药用有效量抗肿瘤剂。
(15)、上述(14)的方法，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)特别是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或去可药用酸加成盐。
(16)、上述(14)的方法，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐，特别是(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
(17)、上述(14)或(15)的方法，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇，特别是顺铂。
(18)、利用具有Rho激酶抑制剂活性的化合物来生产增强抗肿瘤剂抗肿瘤作用的抗肿瘤作用增效剂。
(19)、上述(18)的应用，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)特别是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
(20)、上述(18)的应用，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐，特别是(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
(21)、上述(18)或(19)的应用，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇，特别是顺铂。
(22)、一种商业包装，它包含上述(6)-(9)中任一增强抗肿瘤作用的药物组合物和与之有关的书面材料，所述书面材料指出，所述药物组合物可用于或应该用于增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
(23)、一种商业化包装，它包含上述(10)-(13)中任一治疗肿瘤的药物组合物和与之有关的书面材料，所述书面材料指出，所述药物组合物可用于或应该用于治疗肿瘤。
详述发明在本发明中，只要“抗肿瘤剂”对肿瘤特别是恶性肿瘤起作用，那么它可能具有任何机制并且有助于临床上缓解癌症。除了在有关领域中常规使用的那些外，任何临床上适用的包括正在开发中的和从现在开始开发的那些抗肿瘤剂都可能是本发明抗肿瘤作用增效剂和增强抗肿瘤作用的药物组合物增强作用的靶。更具体地说，它是下文(实施例)所提到的抗癌剂。抗肿瘤剂的具体实例包括烷化剂(氮芥、氮芥N-氧化物盐酸盐、因朴喹酮(inproquone)、三亚胺醌、美法仑、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、曲磷胺、甘露莫司汀、雌莫司汀钠磷酸盐、白消胺、英丙舒凡、达卡巴嗪、丙卡巴肼盐酸盐、carbazilquinone、曲他胺、塞替派、二溴甘露醇、卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、甲基-CCNU、尼莫司汀盐酸盐(ACNU)、streptozotocin、TA-077、达卡巴嗪、哌泊溴烷、乌拉莫司汀、依匹哌啶等)，抗代谢物(甲氨蝶呤、羟基脲、氨蝶呤、亚叶酸钙、氟尿嘧啶、替加氟、替加氟-uracil组合药物、S-1、卡莫氟、去氧氟尿苷、FUDR、阿糖胞苷、阿糖胞苷ocphosphate、安西他滨、依诺他滨、6-巯基嘌呤、核糖核苷、巯基嘌呤、8-氮杂鸟嘌呤、小药片、氮杂胞嘧啶核苷、gemcitabine等)，抗癌抗生素(盐酸阿霉素、盐酸柔红霉素、盐酸阿柔比星、盐酸依达比星、盐酸表柔比星、盐酸吡柔比星、4’-表阿霉素、4’-O-四氢吡喃基阿霉素、博来霉素、硫酸培洛霉素、丝裂霉素C、放线菌素D、色霉素A3、普卡霉素、新制癌菌素、净司他丁stimalamer、肉瘤霉素、嗜癌素等)，植物衍生抗癌剂(硫酸长春新碱、硫酸长春碱、硫酸长春地辛、鬼臼毒、依托泊甙、替尼泊甙、盐酸irinotecan、地美可辛、paclitaxel、docetaxel水合物等)，铂配位化合物(顺铂、卡铂、奈达铂等)，激素药物(泼尼松龙、泼尼松、地塞米松、醋酸可的松、氢化可的松、倍他米松、米托坦、氨鲁米特、甲睾酮、丙酸睾酮、庚酸睾酮、氟甲睾酮、丙酸曲他雄酮、睾内酯、卡鲁睾酮、共轭的雌激素、乙炔雌二醇、磷酸己烯雌酚、己烯雌酚、己烷雌酚、氯烯雌醚、环硫雄醇、美雄烷、枸橼酸他莫昔芬、盐酸奈福昔定、枸橼酸氯米芬、枸橼酸托瑞米芬、己酸羟孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮、醋酸环丙孕酮、炔诺酮、烯丙雌醇、无水甲状腺剂、左甲状腺素钠、碘塞罗宁钠、前列地尔、醋酸戈舍瑞林、醋酸亮丙瑞林、氟他胺等)，其他抗肿瘤剂(盐酸米托蒽醌、醋葡醛内酯、依托格鲁、L-门冬酰胺酶、盐酸fadrozole水合物、sobuzoxane、喷司他丁、二溴甘露糖醇、脒基腙、ゥベニクス、醋酸奥曲泰、维A酸、porfimer钠等)，MMP抑制剂(marimastat、prinomastat等)，血管生成抑制剂(neovastat、沙利度胺、来氟米特、ァャチルジナリン、vitaxin等)等。优选的是铂配位化合物(顺铂、卡铂、奈达铂等)，依托泊甙、紫杉醇、剋癌易(taxotere)等，更优选的是顺铂。
本发明“抗肿瘤作用”是指对肿瘤、特别是恶性肿瘤起作用和有助于临床上缓解癌症疾病的上述抗肿瘤剂的作用。例如，是指抑制肿瘤细胞生长、抑制肿瘤细胞浸润转移、延迟复发期、延迟癌症病人死亡期、改善癌症病人QOL等任何作用。
另外，本发明“肿瘤的治疗”是指对肿瘤、特别是恶性肿瘤起作用以便有助于临床上缓解癌症疾病。例如，是指在肿瘤、特别是恶性肿瘤治疗中的任何处理(恶化的预防和治疗等)，如抑制肿瘤细胞生长、抑制肿瘤细胞浸润转移、延迟复发期、延长癌症病人存活期、改善癌症病人QOL等任何作用。
在本发明中，“抗肿瘤作用增效剂”包含作为活性组分的具有Rho激酶抑制剂活性的化合物并通过与上述抗肿瘤剂联合应用增强所述抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。而且，“抗肿瘤增效作用”指增强上述抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
在本发明中用作活性组分的具有Rho激酶抑制剂活性的化合物可以是任何具有Rho激酶抑制剂活性的化合物。在本发明中，Rho激酶抑制剂是指同Rho一起激活的丝氨酸/苏氨酸激酶。例如，ROKα(ROCKIILeung，T.etal，J.Biol.Chem.，270，29051-29054，1995)，p160ROCK(ROKβ，ROCK-IIshizaki，T.et al，The EMBO J.，15(8)，pp.1885-1893，1996)和其他具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的蛋白质。
在本发明中使用的具有Rho激酶抑制剂活性的化合物实例包括描述于WO98/06433、WO97/28130和Naunyn-Schmiedeberg’s Archivesof Pharmacology 385(1)，Suppl.，R219(1998)中的酰胺化合物、异喹啉磺胺衍生物和异喹啉衍生物，和描述于WO00/57914和JP-A-2000-44513中的乙烯基苯衍生物和肉桂酸衍生物。
例如，作为上述酰胺化合物，使用上述通式(I)表示的化合物，特别是通式(I’)表示的化合物，作为上述异喹啉磺酸衍生物，使用盐酸法舒地尔〔六氢-1-(5-异喹啉基磺酰基)-1H-1，4-二氮杂一盐酸盐〕等，另外作为上述异喹啉衍生物，使用六氢-1-〔(4甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂二盐酸盐、(S)-(+)-六氢-2-甲基-1-〔(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂盐酸盐、六氢-7-甲基-1-〔(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂二盐酸盐、六氢-5-甲基-1-〔(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂二盐酸盐、六氢-2-甲基-1-〔(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂盐酸盐、(R)-(-)-六氢-2-甲基-1-〔(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂盐酸盐、(R)-(+)-六氢-5-甲基-1-〔(4-甲基-5-异喹啉基)磺酰基〕-1H-1，4-二氮杂盐酸盐等。
作为上述乙烯基苯衍生物和肉桂酸衍生物，可提及乙基丙烯酸(ethacrynic acid)、4-[2-(2，3，4，5，6-五氟苯基)丙烯酰基]肉桂酸等。
优选通式(I)表示的酰胺化合物，特别优选通式(I’)表示的酰胺化合物。
另外，本发明中，可以单独含有1种具有Rho激酶抑制活性的化合物，另外必要时也可以同时含有数种。
本说明书中，通式(I)和通式(I’)中各符号的定义如下所述。
R、R’、R1中的烷基是碳原子数1～10个的直链状或支链状烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等，优选碳原子数1～4个的烷基。
R、R’、R1中的环烷基表示环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等碳原子数3～7个的环烷基。
R、R’、R1中的环烷基烷基是环烷基部分为上述碳原子数3～7个的环烷基，烷基部分为碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基(甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、戊基、己基等)的环烷基烷基，例如环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基、环丙基乙基、环戊基乙基、环己基乙基、环庚基乙基、环丙基丙基、环戊基丙基、环己基丙基、环庚基丙基、环丙基丁基、环戊基丁基、环己基丁基、环庚基丁基、环丙基己基、环戊基己基、环己基己基、环庚基己基等。
R、R’、R1中的芳烷基是具有碳原子数1～4个的烷基作为烷基部分的基团，表示苯甲基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、4-苯基丁基等苯基烷基。
R、R’、R1中的环上可以具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基、芳烷基的取代基是卤素(氯、溴、氟、碘)、烷基(与R、R’、R1中的烷基同义)、烷氧基(是碳原子数1～6个的直链状或支链状烷氧基，表示甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等)、芳烷基(与R、R’、R1中的芳烷基同义)、卤代烷基(是R、R’、R1表示的烷基被1～5个卤素取代得到的基团，表示氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、2，2，3，3，3-五氟丙基等)、硝基、氨基、氰基、叠氮基等。
R和R1或者R’和R1相结合与相邻的氮原子一起形成的环中可以进一步含有氧原子、硫原子或可以具有取代基的氮原子的杂环基团，优选5～6元环、其稠合环(bonded ring)，具体而言，例如1-吡咯烷基、哌啶子基、1-哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1-咪唑基、2，3-二氢噻唑-3-基等。另外，可以具有取代基的氮原子上的取代基例如烷基、芳烷基、卤代烷基等。其中，烷基、芳烷基、卤代烷基与R、R’、R1中所示的基团同义。
R2中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义。
R3、R4中的卤素、烷基、烷氧基、芳烷基与R、R’、R1中所示的基团同义。
R3、R4中的酰基表示碳原子数2～6个的烷酰基(乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、新戊酰基等)、苯甲酰基、或者烷酰基部分碳原子数2～4个的苯基烷酰基(苯基乙酰基、苯基丙酰基、苯基丁酰基等)。
R3、R4中的烷氨基是烷基部分具有碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基的烷氨基，表示甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、丁基氨基、异丁基氨基、仲丁基氨基、叔丁基氨基、戊基氨基、己基氨基等。
R3、R4中的酰氨基是作为酰基具有碳原子数2～6个的烷酰基、苯甲酰基或者烷酰基部分碳原子数2～4个的苯基烷酰基等的酰氨基，表示乙酰氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、戊酰氨基、新戊酰氨基、苯甲酰氨基、苯基乙酰氨基、苯基丙酰氨基、苯基丁酰氨基等。
R3、R4中的烷硫基是烷基部分具有碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基的烷硫基，表示甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、戊硫基、己硫基等。
R3、R4中的芳烷氧基是具有其烷基部分有碳原子数1～4个的烷基的芳烷基，表示苯甲氧基、1-苯基乙氧基、2-苯基乙氧基、3-苯基丙氧基、4-苯基丁氧基等。
R3、R4中的芳烷硫基是具有其烷基部分有碳原子数1～4个的烷基的芳烷基，表示苯甲硫基、1-苯基乙硫基、2-苯基乙硫基、3-苯基丙硫基、4-苯基丁硫基等。
R3、R4中的烷氧基羰基是烷氧基部分具有碳原子数1～6个的直链状或支链状烷氧基的基团，表示甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、异丙氧基羰基、丁氧基羰基、异丁氧基羰基、仲丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、戊氧基羰基、己氧基羰基等。
R3、R4中的单·二烷基氨基甲酰基是被碳原子数1～4的烷基单或二取代的氨基甲酰基，表示甲基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、二乙基氨基甲酰基、丙基氨基甲酰基、二丙基氨基甲酰基、丁基氨基甲酰基、二丁基氨基甲酰基等。
R5中的烷氧基与R、R’、R1中的烷氧基同义。
R5中的烷氧基羰基氧是烷氧基部分具有碳原子数1～6个的直链状或支链状烷氧基的基团，表示甲氧基羰基氧、乙氧基羰基氧、丙氧基羰基氧、异丙氧基羰基氧、丁氧基羰基氧、异丁氧基羰基氧、仲丁氧基羰基氧、叔丁氧基羰基氧、戊氧基羰基氧、己氧基羰基氧等。
R5中的烷酰氧基是烷酰基部分具有碳原子数2～6个的烷酰基的基团，表示乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、戊酰氧基、新戊酰氧基等。
R5中的芳烷氧基羰基氧具有其烷基部分有碳原子数1～4个的烷基的芳烷基，表示苯甲氧基羰基氧、1-苯基乙氧基羰基氧、2-苯基乙氧基羰基氧、3-苯基丙氧基羰基氧、4-苯基丁氧基羰基氧等。
R6中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义。另外，R8、R9中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义，R8、R9中的芳烷基与R、R’、R1中的芳烷基同义。
R7中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义，R7中的芳烷基与R、R’、R1中的芳烷基同义。
R6与R7相结合形成的环中可以进一步含有氧原子、硫原子或可以具有取代基的氮原子的杂环基团，例如咪唑-2-基、噻唑-2-基、噁唑-2-基、咪唑啉-2-基、3，4，5，6-四氢吡啶-2-基、3，4，5，6-四氢嘧啶-2-基、1，3-噁唑啉-2-基、1，3-噻唑啉-2-基、或者可以具有卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、硝基、氨基、苯基、芳烷基等取代基的苯并咪唑-2-基、苯并噻唑-2-基、苯并噁唑-2-基等。其中，卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、芳烷基与R、R’、R1中所示的基团同义。
另外，上述可以具有取代基的氮原子上的取代基例如烷基、芳烷基、卤代烷基等。其中，烷基、芳烷基、卤代烷基与R、R’、R1中所示的基团同义。
R10、R11中的羟基烷基是1～3个羟基取代碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基得到的基团，例如羟甲基、2-羟乙基、1-羟乙基、3-羟丙基、4-羟丁基等。
R10、R11中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义，R10、R11中的卤代烷基、烷氧基羰基与R、R’、R1中所示的基团同义，R10、R11中的芳烷基与R、R’、R1中的芳烷基同义。
R10、R11相结合形成的环烷基也与R、R’、R1中的环烷基同义。
L中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义。
L中的氨基烷基是氨基取代碳原子数1～6的直链状或支链状烷基得到的基团，例如氨基甲基、2-氨基乙基、1-氨基乙基、3-氨基丙基、4-氨基丁基、5-氨基戊基、6-氨基己基等。
L中的单·二烷基氨基烷基是被碳原子数1～4个的烷基单或二取代的氨基烷基，表示甲基氨基甲基、二甲基氨基甲基、乙基氨基甲基、二乙基氨基甲基、丙基氨基甲基、二丙基氨基甲基、丁基氨基甲基、二丁基氨基甲基、2-二甲基氨基乙基、2-二乙基氨基乙基等。
L中的氨基甲酰基烷基是氨基甲酰基取代碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基得到的基团，例如氨基甲酰基甲基、2-氨基甲酰基乙基、1-氨基甲酰基乙基、3-氨基甲酰基丙基、4-氨基甲酰基丁基、5-氨基甲酰基戊基、6-氨基甲酰基己基等。
L中的邻苯二甲酰亚氨基烷基是邻苯二甲酰胺亚氨基取代碳原子数1～6个的直链状或支链状的烷基得到的基团，例如邻苯二甲酰亚氨基甲基、2-邻苯二甲酰亚氨基乙基、1-邻苯二甲酰亚氨基乙基、3-邻苯二甲酰亚氨基丙基、4-邻苯二甲酰亚氨基丁基、5-邻苯二甲酰亚氨基戊基、6-邻苯二甲酰亚氨基己基等。
B中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义。
B中的烷氧基与R、R’、R1中的烷氧基同义。
B中的芳烷基与R、R’、R1中的芳烷基同义。
B中的芳烷氧基与R3、R4中的芳烷氧基同义。
B中的氨基烷基与L中的氨基烷基同义。
B中的羟基烷基与R10、R11中的羟基烷基同义。
B中的烷酰氧基烷基是具有碳原子数2～6的烷酰基部分的烷酰氧基取代碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基得到的基团，例如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基乙基、丙酰氧基乙基、丁酰氧基乙基、戊酰氧基乙基、新戊酰氧基乙基等。
B中的烷氧基羰基烷基是具有碳原子数1～6个的烷氧基部分的烷氧基羰基取代碳原子数1～6个的直链状或支链状烷基得到的基团，例如甲氧基羰基甲基、乙氧基羰基甲基、丙氧基羰基甲基、异丙氧基羰基甲基、丁氧基羰基甲基、异丁氧基羰基甲基、仲丁氧基羰基甲基、叔丁氧基羰基甲基、戊氧基羰基甲基、己氧基羰基甲基、甲氧基羰基乙基、乙氧基羰基乙基、丙氧基羰基乙基、异丙氧基羰基乙基、丁氧基羰基乙基、异丁氧基羰基乙基、仲丁氧基羰基乙基、叔丁氧基羰基乙基、戊氧基羰基乙基、己氧基羰基乙基等。
Q1、Q2、Q3中的卤素与R、R’、R1中的卤素同义。Q1、Q2中的芳烷氧基与R3、R4中的芳烷氧基同义。
Q3中的烷氧基与R、R’、R1中的烷氧基同义。
W、X、Y中的亚烷基是碳原子数1～6个的直链状或支链状亚烷基，表示亚甲基、亚乙基、三亚甲基、亚丙基、四亚甲基、五亚甲基、六亚甲基等。
Y中的亚烯基是碳原子数2～6个的直链状或支链状的亚烯基，例如亚乙烯基、亚丙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基等。
Rb中的烷基与R、R’、R1中的烷基同义。
Rb中的芳烷基与R、R’、R1中的芳烷基同义。
Rb中的氨基烷基与L中的氨基烷基同义。
Rb中的单·二烷基氨基烷基与L中的单·二烷基氨基烷基同义。
Rc中的含氮杂环在单环的场合表示吡啶、嘧啶、哒嗪、三嗪、吡唑、三唑，稠合环的场合表示吡咯并吡啶(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶、1H-吡咯并〔3，2-b〕吡啶、1H-吡咯并〔3，4-b〕吡啶等)、吡唑并吡啶(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶、1H-吡唑并〔4，3-b〕吡啶等)、咪唑并吡啶(1H-咪唑并〔4，5-b〕吡啶等)、吡咯并嘧啶(1H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶、1H-吡咯并〔3，2-d〕嘧啶、1H-吡咯并〔3，4-d〕嘧啶等)、吡唑并嘧啶(1H-吡唑并〔3，4-d〕嘧啶、吡唑并〔1，5-a〕嘧啶、1H-吡唑并〔4，3-d〕嘧啶等)、咪唑并嘧啶(咪唑并〔1，2-a〕嘧啶、1H-咪唑并〔4，5-d〕嘧啶等)、吡咯并三嗪(吡咯并〔1，2-a〕-1，3，5-三嗪、吡咯并〔2，1-f〕-1，2，4-三嗪等)、吡唑并三嗪(吡唑并〔1，5-a〕-1，3，5-三嗪等)、三唑并吡啶(1H-1，2，3-三唑并〔4，5-b〕吡啶等)、三唑并嘧啶(1，2，4-三唑并〔1，5-a〕嘧啶、1，2，4-三唑并〔4，3-a〕嘧啶、1H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶等)、噌啉、喹唑啉、喹啉、吡啶并哒嗪(吡啶并〔2，3-c〕哒嗪等)、吡啶并吡嗪(吡啶并〔2，3-b〕吡嗪等)、吡啶并嘧啶(吡啶并〔2，3-d〕嘧啶、吡啶并〔3，2-d〕嘧啶等)、嘧啶并嘧啶(嘧啶并〔4，5-d〕嘧啶、嘧啶并〔5，4-d〕嘧啶等)、吡嗪并嘧啶(吡嗪并〔2，3-d〕嘧啶等)、萘啶(1，8-萘啶等)、四唑并嘧啶(四唑并〔1，5-a〕嘧啶等)、噻吩并吡啶(噻吩并〔2，3-b〕吡啶等)、噻吩并嘧啶(噻吩并〔2，3-d〕嘧啶等)、噻唑并吡啶(噻唑并〔4，5-b〕吡啶、噻唑并〔5，4-b〕吡啶等)、噻唑并嘧啶(噻唑并〔4，5-d〕嘧啶、噻唑并〔5，4-d〕嘧啶等)、噁唑并吡啶(噁唑并〔4，5-b〕吡啶、噁唑并〔5，4-b〕吡啶等)、噁唑并嘧啶(噁唑并〔4，5-d〕嘧啶、噁唑并〔5，4-d〕嘧啶等)、呋喃并吡啶(呋喃并〔2，3-b〕吡啶、呋喃并〔3，2-b〕吡啶等)、呋喃并嘧啶(呋喃并〔2，3-d〕嘧啶、呋喃并〔3，2-d〕嘧啶等)、2，3-二氢吡咯并吡啶(2，3-二氢-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶、2，3-二氢-1H-吡咯并〔3，2-b〕吡啶等)、2，3-二氢吡咯并嘧啶(2，3-二氢-1H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶、2，3-二氢-1H-吡咯并〔3，2-d〕嘧啶等)、5，6，7，8-四氢吡啶并〔2，3-d〕嘧啶、5，6，7，8-四氢-1，8-萘啶、5，6，7，8-四氢喹啉等，这些环形成加氢的芳香族环时，环中的碳原子也可以是羰基，例如2，3-二氢-2-氧代吡咯并吡啶、2，3-二氢-2，3-二氧代吡咯并吡啶、7，8-二氢-7-氧代-1，8-萘啶、5，6，7，8-四氢-7-氧代-1，8-萘啶等也包括在内。
另外，这些环也可以被卤素、烷基、烷氧基、芳烷基、卤代烷基、硝基、氨基、烷基氨基、氰基、甲酰基、酰基、氨基烷基、单或二烷基氨基烷基、叠氮基、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、单·二烷基氨基甲酰基、烷氧基烷基(甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基等)、可以具有取代基的肼基等取代基取代。
其中，可以具有取代基的肼基的取代基例如烷基、芳烷基、硝基、氰基等，烷基、芳烷基与R、R’、R1中的烷基、芳烷基同义，例如甲基肼基、乙基肼基、苯甲基肼基等。
作为通式(I)表示的化合物，具体可以列举下述化合物。(1)4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(2)1-苯甲氧基羰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(3)1-苯甲酰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(4)1-丙基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(5)〔3-(2-(2-噻吩基甲基)苯氧基)-2-羟丙基〕-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(6)4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(7)1-苯甲基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)-1，2，5，6-四氢吡啶(8)3-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(9)1-苯甲基-3-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(10)1-(2-(4-苯甲氧基苯氧基)乙基)-4-(N-(2-吡啶基)-N-苯甲基氨基甲酰基)吡啶(11)1-甲酰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(12)4-(3-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(13)1-异丙基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(14)1-甲基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(15)1-己基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(16)1-苯甲基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(17)1-(2-苯基乙基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(18)1-(2-(4-甲氧基苯基)乙基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(19)1-(2-(4-甲氧基苯基)乙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(20)1-(2-(4-氯苯基)乙基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(21)1-二苯基甲基-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(22)1-〔2-(4-(5-甲基-3-氧代-2，3，4，5-四氢哒嗪-6-基)苯基)乙基〕-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(23)1-(4-(4，5-二氢-2-呋喃基)苯基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(24)1-(2-硝基苯基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(25)1-(2-氨基苯基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(26)1-烟酰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(27)1-异烟酰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(28)1-(3，4，5-三甲氧基苯甲酰基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(29)1-乙酰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(30)1-(3-(4-氟苯甲酰基)丙基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(31)1-(3-(4-氟苯甲酰基)丙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(32)1-(1-(4-羟基苯甲酰基)乙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(33)1-(1-(4-苯甲氧基苯甲酰基)乙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(34)1-(2-(4-羟基苯氧基)乙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(35)1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基丁基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(36)1-(1-甲基-2-(4-羟基苯基)-2-羟乙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(37)1-肉桂酰基-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(38)1-(2-羟基-3-苯氧基丙基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(39)1-(2-羟基-3-苯氧基丙基)-4-(3-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(40)1-(2-羟基-3-苯氧基丙基)-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(41)1-(2-苯基乙基)-4-〔N-(2-吡啶基)-N-(2-(N，N-二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基〕哌啶(42)1-苯甲氧基羰基-4-(2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(43)1-(3-氯苯基)氨基甲酰基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(44)1-〔N-(2-吡啶基)-N-(2-(N，N-二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基〕哌啶(45)1-甲基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)-1，2，5，6-四氢吡啶(46)1-烟酰基-3-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(47)1-〔2-(4-氟苯甲酰基)乙基〕-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(48)1-(6-氯-2-甲基咪唑并〔1，2-a〕吡啶-3-羰基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(49)1-(4-硝基苯甲基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(50)1-己基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(51)1-苯甲氧基羰基-4-(2-氯-4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(52)4-(2-氯-4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(53)1-(2-氯烟酰基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(54)3-(2-氯-4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(55)1-(4-邻苯二甲酰亚氨基丁基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(56)1-(3，5-二叔丁基-4-羟基肉桂酰基)-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(57)1-氨基甲酰基甲基-4-(4-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(58)1-苯甲氧基羰基-4-(5-硝基-2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(59)4-(5-硝基-2-吡啶基氨基甲酰基)哌啶(60)反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(61)反式-4-氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(62)反式-4-甲酰氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(63)反式-4-二甲基氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(64)N-苯亚甲基-反式-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己基甲胺(65)反式-4-苯甲基氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(66)反式-4-异丙基氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(67)反式-4-烟酰氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(68)反式-4-环己基氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(69)反式-4-苯甲氧甲酰氨基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(70)反式-4-氨基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(71)反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(72)反式-4-氨基甲基-顺式-2-甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(73)(+)-反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基丙基)-1-环己烷甲酸(74)(+)-反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基丙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(75)(-)-反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基丙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(76)(+)-反式-4-(1-氨基丙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(77)(-)-反式-4-(1-氨基丙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(78)(-)-反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(79)(+)-反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(80)(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(81)(-)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(82)反式-4-(4-氯苯甲酰基)氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(83)反式-4-氨基甲基-1-(2-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(84)反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基-1-(2-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(85)反式-4-甲基氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(86)反式-4-(N-苯甲基-N-甲基氨基)甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(87)反式-4-氨基甲基-1-(3-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(88)反式-4-氨基甲基-1-〔(3-羟基-2-吡啶基)氨基甲酰基〕环己烷(89)反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基-1-(3-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(90)反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基-1-〔(3-苯甲氧基-2-吡啶基)氨基甲酰基〕环己烷(91)反式-4-邻苯二甲酰亚氨基甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(92)反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基-1-(3-甲基-4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(93)反式-4-氨基甲基-1-(3-甲基-4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(94)4-(反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基环己基羰基)氨基-2，6-二甲基吡啶-N-氧化物(95)4-(反式-4-氨基甲基环己基羰基)氨基-2，6-二甲基吡啶-N-氧化物(96)反式-4-氨基甲基-1-(2-甲基-4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(97)反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(98)反式-4-(1-氨基-1-甲基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(99)反式-4-(2-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(100)反式-4-(2-氨基-1-甲基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(101)反式-4-(1-氨基丙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(102)反式-4-氨基甲基-反式-1-甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(103)反式-4-苯甲基氨基甲基-顺式-2-甲基-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(104)反式-4-(1-苯甲氧甲酰氨基-1-甲基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(105)反式-4-苯甲氧甲酰氨基甲基-1-(N-甲基-4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(106)反式-4-(1-乙酰氨基-1-甲基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷(107)反式-N-(6-氨基-4-嘧啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(108)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(109)(+)-反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(110)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)环己烷甲酰胺(111)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(112)(+)-反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(113)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)环己烷甲酰胺(114)(+)-反式-N-(2-氨基-4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(115)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-d〕嘧啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(116)(+)-反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-d〕嘧啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(117)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-d〕嘧啶-4-基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)环己烷甲酰胺(118)反式-N-(4-嘧啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(119)反式-N-(3-氨基-4-吡啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(120)反式-N-(7H-咪唑并〔4，5-d〕嘧啶-6-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(121)反式-N-(3H-1，2，3-三唑并〔4，5-d〕嘧啶-7-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(122)反式-N-(1-苯甲基-1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(123)反式-N-(1H-5-吡唑基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(124)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(125)反式-N-(4-哒嗪基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(126)反式-N-(7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(127)反式-N-(2-氨基-4-吡啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(128)反式-N-(噻吩并〔2，3-d〕嘧啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(129)反式-N-(5-甲基-1，2，4-三唑并〔1，5-a〕嘧啶-7-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(130)反式-N-(3-氰基-5-甲基吡唑并〔1，5-a〕嘧啶-7-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(131)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)环己烷甲酰胺(132)反式-N-(2-(1-吡咯烷基)-4-吡啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(133)反式-N-(2，6-二氨基-4-嘧啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(134)(+)-反式-N-(7-甲基-1，8-萘啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(135)反式-N-(1-苯甲氧基甲基吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(136)(+)-反式-N-(1-甲基吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(137)反式-N-苯甲基-N-(2-苯甲基氨基-4-吡啶基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)环己烷甲酰胺(138)反式-N-(2-叠氮基-4-吡啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(139)反式-N-(2，3-二氢-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(140)反式-N-(2，3-二氢-1H-吡唑并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)环己烷甲酰胺(141-1)反式-N-(2-羧基-4-吡啶基)-4-氨基甲基环己烷甲酰胺(141-2)(R)-(+)-反式-N-(3-溴-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺(142)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-胍基甲基环己烷甲酰胺(143)反式-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-胍基甲基环己烷甲酰胺(144)反式-N-(4-吡啶基)-4-胍基甲基环己烷甲酰胺(145)反式-N-(1-甲基吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(胍基甲基)环己烷甲酰胺(146)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(2-咪唑啉-2-基)氨基甲基环己烷甲酰胺(147)反式-N-(1-苯甲氧基甲基吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-胍基甲基环己烷甲酰胺(148)反式-N-(2-氨基-4-吡啶基)-4-胍基甲基环己烷甲酰胺(149)反式-N-(1-苯甲氧基甲基-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(2-咪唑啉-2-基)氨基甲基环己烷甲酰胺(150)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(3-苯甲基胍基甲基)环己烷甲酰胺(151)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(3-苯基胍基甲基)环己烷甲酰胺(152)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(3-丙基胍基甲基)环己烷甲酰胺(153)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(3-辛基胍基甲基)环己烷甲酰胺(154)反式-N-(1-苯甲氧基甲基吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(2-苯甲基-3-乙基胍基甲基)环己烷甲酰胺(155)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(咪唑-2-基)氨基甲基环己烷甲酰胺(156)反式-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(噻唑-2-基)氨基甲基环己烷甲酰胺(157)(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(158)N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯甲酰胺(159)N-(4-吡啶基)-4-氨基甲基-2-苯甲氧基苯甲酰胺(160)N-(4-吡啶基)-4-氨基甲基-2-乙氧基苯甲酰胺(161)(R)-(-)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-3-硝基苯甲酰胺(162)(R)-(-)-N-(4-吡啶基)-3-氨基-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(163)(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-3-氯苯甲酰胺(164)N-(4-吡啶基)-3-氨基甲基苯甲酰胺(165)(R)-(+)-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(166)(R)-(+)-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(167)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-胍基甲基苯甲酰胺(168)N-(4-吡啶基)-4-胍基甲基苯甲酰胺(169)(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-3-氟苯甲酰胺(170)N-(4-吡啶基)-4-氨基甲基苯甲酰胺(171)N-(4-吡啶基)-4-氨基甲基-2-羟基苯甲酰胺(172)N-(4-吡啶基)-4-(2-氨基乙基)苯甲酰胺(173)N-(4-吡啶基)-4-氨基甲基-3-硝基苯甲酰胺(174)N-(4-吡啶基)-3-氨基-4-氨基甲基苯甲酰胺(175)(S)-(-)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(176)(S)-(-)-N-(4-吡啶基)-2-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(177)(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-2-氯苯甲酰胺(178)(R)-(+)-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-(3-丙基胍基)乙基)苯甲酰胺(179)(R)-(-)-N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)-3-叠氮基苯甲酰胺(180)(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-2-硝基苯甲酰胺(181)(R)-(-)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-3-乙氧基苯甲酰胺(182)(R)-(+)-N-(3-碘-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺(183)(R)-(+)-N-(3-碘-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)-3-叠氮基苯甲酰胺(184)(R)-(-)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)-3-羟基苯甲酰胺(185)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-胍基甲基-3-硝基苯甲酰胺(186)(R)-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-胍基乙基)-3-硝基苯甲酰胺(187)(R)-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)-2-硝基苯甲酰胺(188)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-胍基苯甲酰胺(189)(R)-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)-3-硝基苯甲酰胺(190)(R)-N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-胍基乙基)苯甲酰胺(191)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基-2-羟基乙基)苯甲酰胺(192)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-氨基甲基-3-硝基苯甲酰胺(193)N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-哌啶甲酰胺(194)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-哌啶甲酰胺(195)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-1-氨基乙酰基-4-哌啶甲酰胺(196)N-(1-甲氧基甲基-1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-4-哌啶甲酰胺(197)N-(2，3-二氢-1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-哌啶甲酰胺(198)N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-1-(2-苯基乙基)-4-哌啶甲酰胺(199)N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-1-咪基-4-哌啶甲酰胺(200)N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-1-(3-苯基丙基)-4-哌啶甲酰胺(201)N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-1-苯甲基-4-哌啶甲酰胺(202)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-1-(2-苯基乙基)-4-哌啶甲酰胺(203)N-(1H-吡唑并〔3，4-b〕吡啶-4-基)-1-(3-苯基苯基)-4-哌啶甲酰胺(204)N-(1H-吡咯并〔2，3-b〕吡啶-4-基)-4-(1-氨基-1-甲基乙基)-4-苯甲酰胺优选例如化合物(80)、(109)、(110)、(112)、(115)、(142)、(143)、(144)、(145)、(153)、(157)、(163)、(165)、(166)和(179)。
另外，作为本发明的具有Rho激酶抑制活性的化合物使用的化合物也可以是可药用的酸加成盐，这种酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸等无机酸，甲磺酸、富马酸、马来酸、扁桃酸、枸橼酸、酒石酸、水杨酸等有机酸。另外，具有羧基的化合物也可以与钠、钾、钙、镁、铝等金属成盐，或与赖氨酸等氨基酸成盐。而且，其1水合物、2水合物、1/2水合物、1/3水合物、1/4水合物、2/3水合物、3/2水合物、6/5水合物等也包括在本发明内。
通式(I)表示的化合物可以按照特开昭62-89679号、特开平3-218356号、特开平5-194401号、特开平6-41080号、WO95/28387号和WO98/06433号等记载的方法合成。
上述具有Rho激酶抑制活性的化合物存在光学异构体、其外消旋体或顺-反异构体时，在本发明中这些物质均可以使用，这些异构体可以按照常规方法分离，或使用各种异构体原料制备。
具有Rho激酶抑制活性的化合物可用作药物，特别是用作抗肿瘤增效剂或者作为增强本发明抗肿瘤效果的药物组合物，可以按常规的药物制备方法来制备。
例如，可以作为上述具有Rho激酶抑制活性的化合物与可药用的载体(赋形剂、粘合剂、崩解剂、矫味剂、矫臭剂、乳化剂、稀释剂、溶解助剂等)混合得到的药物组合物或片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、糖锭剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、悬浊剂、注射剂(溶液剂、悬浊剂等)、栓剂、吸入剂、透皮吸收剂、滴眼剂、眼软膏等制剂，以适于口服或非口服的形态进行配制。
制成固体制剂时，使用添加剂，例如蔗糖、乳糖、纤维素糖、D-甘露醇、麦芽糖醇、葡聚糖、淀粉类、琼脂、海藻酸盐类、壳多糖类、壳聚糖类、果胶类、西黄蓍胶类、阿拉伯胶类、明胶类、胶原类、酪蛋白、白蛋白、磷酸钙、山梨醇、甘氨酸、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甘油、聚乙二醇、碳酸氢钠、硬脂酸镁、滑石等。而且，片剂必要时可以制成实施了常规包衣的片剂，例如糖衣片、肠溶性包衣片、膜包衣片或二层片、多层片。
制成半固体制剂的场合，使用动植物性油脂(橄榄油、玉米油、蓖麻油等)、矿物性油脂(凡士林、白凡士林、固体石蜡等)、蜡类(霍霍巴油、巴西棕榈蜡、蜂蜡等)、部分合成或全合成甘油脂肪酸酯(月桂酸、肉豆蔻酸、软脂酸等)。作为这些物质的市售品的实例，例如Witepsol(Dynamitnovel公司生产)、Farmazol(日本油脂社生产)等。
制成液体制剂时，添加剂例如氯化钠、葡萄糖、山梨醇、甘油、橄榄油、丙二醇、乙醇等。特别是制成注射剂时，使用无菌的水溶液，例如生理盐水；等渗液；油性液，例如芝麻油、大豆油。另外，必要时也可以同时使用适当的悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠；非离子表面活性剂；溶解助剂，例如苯甲酸苯甲酯、苯甲醇等。而且，制成滴眼剂时，使用水性溶液剂或水溶液，特别是无菌的注射用水溶液。该滴眼用溶液剂中也可以适当添加缓冲剂(用于减小刺激的硼酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂、碳酸盐缓冲剂等)、等渗剂、溶解助剂、保存剂、增粘剂、螯合剂、pH调节剂(pH通常优选调节至约6～8.5)、芳香剂等各种添加剂。
这些制剂中的有效成分即具有Rho激酶抑制活性的化合物的量为制剂的0.1～100重量％，优选1～50重量％。给药量可以根据患者的症状、体重、年龄等变化，通常口服给药时，优选成人每1～500mg左右，一次或分数次给药。
本发明用于增强抗肿瘤作用的、包含具有Rho激酶抑制剂活性化合物的抗肿瘤作用增效剂或其药物组合物可以通过任何方法给药，只要该方法容许与抗肿瘤剂或具有抗肿瘤活性的化合物同时使用即可。例如，将抗肿瘤剂加到本发明用于增强抗肿瘤作用的抗肿瘤作用增效剂或其药物组合物中并以单一组合物形式给药。或者，可将抗肿瘤剂和本发明用于增强抗肿瘤作用的抗肿瘤作用增效剂或其药物组合物一起配制成能够分开给药的制剂并通过不同的给药方法给药。
在本发明中，给予抗肿瘤剂是获得所述作用必需的。所给予的抗肿瘤剂包括以上提到的那些，并且所述给药方法可以是本领域根据所给予的抗肿瘤剂通常使用的方法。抗肿瘤剂的剂量可根据所给予的药物的种类、病人的疾病、体重和年龄等改变并据此确定。由于在本发明中同时使用本发明抗肿瘤作用增效剂，与单独给予相比可以降低抗肿瘤剂本身的剂量。给予抗肿瘤剂的时间适于依据被给予药物的种类、病人的症状、体重和年龄等因素来确定。优选地，在给予本发明抗肿瘤效果增效剂的同时开始给药。抗肿瘤剂的给药期也适于依据被给予药物的种类、病人的症状、体重和年龄等因素来确定。
实施例本发明通过参考制剂实施例和药理作用来进行详细解释。这些实施例不以任何方式限定本发明。
在下列制剂实施例和实验实施例中，使用具有Rho激酶抑制活性的化合物(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺HCl。
在下文中，通过参考制剂实施例来解释本发明药物的制备方法。制剂实施例1片剂本发明化合物 10.0mg乳糖 50.0mg玉米淀粉 20.0mg微晶纤维素 29.7mg聚乙烯吡咯烷酮K305.0mg滑石 5.0mg硬脂酸镁 0.3mg总计 120.0mg将本发明化合物、乳糖、玉米淀粉和晶体纤维素混合，用聚乙烯吡咯烷酮K30的糊状溶液捏合并通过20筛目的筛来制粒。在50℃温度下干燥2小时后，将颗粒通过24筛目的筛，并加入滑石和硬脂酸镁。使用Φ7mm冲头，制备每片重为120mg的片剂。制剂实施例2胶囊本发明化合物10.0mg乳糖70.0mg玉米淀粉35.0mg聚乙烯吡咯烷酮K302.0mg滑石 2.7mg硬脂酸镁 0.3mg总计 120.0mg将本发明化合物、乳糖和玉米淀粉混合，用聚乙烯吡咯烷酮K30的糊状溶液捏合并通过20筛目的筛来制粒。在50℃温度下干燥2小时后，将颗粒通过24筛目的筛，并加入滑石和硬脂酸镁。将混合物填充到硬胶囊(4号)中以获得重量为120mg的胶囊。制剂实施例3注射剂本发明化合物 5.0mg氯化钠 18.0mg用注射蒸馏水加到总量为 2.0ml将氯化钠溶解在大约80份注射用蒸馏水中，加入本发明化合物并溶解以获得100份的总量。经膜过滤器(0.2μm)过滤后，填充到2ml安瓿中并在115℃温度下灭菌30分钟，获得2ml注射剂。
在下文中，通过实验实施例来解释本发明药物的药理作用。实验实施例1将小鼠B16-F10黑素瘤培养的细胞移植到尾静脉中之后在血原性的肺转移瘤中联合使用本发明化合物和抗癌剂(顺铂、依托泊甙和紫杉醇)来实验癌转移的抑制作用[方法](1)制备小鼠B16-F10黑素瘤培养的细胞(下文简称B16-F10)B16-F10细胞(获得美国M.D.Anderson Cancer Center，Dr.I.Fidler的使用许可并且由癌症研究癌症化疗中心日本基金，Dr.Tsuruo提供)在含有下列组分的最小必需培养基(下文简称MEM)中继代培养0.22 5％碳酸氢钠、2mM L-谷氨酰胺、1mM非必需氨基酸、MEM维生素、1mM丙酮酸，余量为5％热灭活的胎牛血清(FCS)。为了进行实验，将B16-F10细胞以5×105细胞/ml的浓度悬浮在MEM中并按0.2ml的量经尾静脉将其给予8周龄雄性C57BL/6小鼠(每组8只)。给予细胞后的14天时，将小鼠解剖并肉眼记录双侧肺中形成的B16-F10细胞转移集落的数目。
(2)通过下列方法给予试验化合物(本发明的化合物)将化合物溶解在0.5％metolose溶液并从移植那天开始每天一次口服给予所得溶液14天，或者将化合物溶解在生理盐水中、填充在渗透泵(产品名称Alzet，1002型，流速0.25ml/小时，使用14天)中并在B16-F10细胞植入前一天将渗透泵植入小鼠的腹膜内。
(3)关于顺铂，用生理盐水稀释注射剂(产品名称Randa注射剂)并在B16-F10细胞植入后那天每天一次腹膜内给药。
关于依托泊甙，用生理盐水稀释注射剂(产品名称Lastet注射剂)并在B16-F10细胞植入一天后开始每天一次腹膜内给药，重复5天。
紫杉醇购自Sigma化学公司，悬浮于0.5％metolose溶液中并在B16-F10细胞植入一天后开始每隔一天腹膜内给药一次(每周3次，共2周)。[结果]确定每组肺中B16-F10细胞转移集落的数目(平均值和标准误差)并将结果概述于表1、2、4和5中。另外，通过中值效果分析法分析联合使用组中本发明化合物-抗癌剂的联合作用(对照为[1]和[2])所显示的联用指数(CI)值被概括在表3和表6中。在对照[1]和[2]中，CI值低于1被解释为显示协同作用并且CI值为1被解释为显示加和作用。
表1顺铂本发明化合物 T/C±标准误差1)显著性差异2)(mg/kg) (mg/kg) (％)(口服给药)0.5 0 80.2±13.210 66.5±8.32.5 0 57.5±3.050 53.3±4.5100 46.7±4.101 77.1±10.003 65.2±3.751 13.4±1.453 14.4±2.0101 19.5±3.0P＜0.01103 16.5±1.4P＜0.011)T/C＝给药组肺转移集落的平均数/对照组肺转移集落的平均数×100(％)2)联合使用组比顺铂10mg/kg单独给药组，n＝8，Dunnett方法表2顺铂本发明化合物 T/C±标准误差1)显著性差异2)(mg/kg) (mg/kg) (％)(渗透泵)0.5 0 81.7±13.41 0 67.7±8.42.5 0 58.6±3.05 0 54.3±4.610 0 30.8±4.70 0.3 73.4±10.10 1 69.9±7.70 3 63.5±7.710 0.3 12.1±2.110 1 13.0±1.810 3 11.1±1.4P＜0.051)T/C＝给药组肺转移集落的平均数/对照组肺转移集落的平均数×100(％)2)联合使用组比顺铂10mg/kg单独给药组，n＝8，Dunnett方法由表1和表2清楚可见，与单独给予顺铂相比，在本发明化合物-顺铂联合使用组中肺中B16-F10细胞转移集落的数目明显减少(p＜0.01或p＜0.05，Dunnett方法)。
以相同方法确定本发明化合物-顺铂联合使用组的CI值。这些值概括在表3中。
表3顺铂本发明化合物 CI(联用指数)(mg/kg) (mg/kg) 口服给药渗透泵10 0.3 0.1910 1 0.12 0.2110 3 0.09 0.17如表3所示，本发明化合物与顺铂联合使用时，各剂量联合作用的CI值都小于1。因此，表明本发明化合物与顺铂联合使用时协同抑制B16-F10细胞血原性的肺转移。
本发明化合物与依托泊甙或紫杉醇联合使用的结果分别概括在表4和表5中。
表4依托泊甙本发明化合物 T/C±标准误差1)显著性差异2)(mg/kg)(mg/kg) (％)(口服给药)1 0 56.0±3.02.5 0 34.0±7.45 0 33.4±4.010 0 22.5±4.225 0 14.5±2.60 1 83.4±10.80 3 70.5±4.05 1 22.0±4.8 P＜0.055 3 19.2±2.8 P＜0.011)T/C＝给药组肺转移集落的平均数/对照组肺转移集落的平均数×100(％)2)联合使用组比依托泊甙5mg/kg单独给药组，n＝8，Dunnett方法表5紫杉醇本发明化合物 T/C±标准误差1)显著性差异2)(mg/kg) (mg/kg) (％)(口服给药)10 75.9±5.92.5 0 48.8±8.450 37.3±4.010 0 30.3±3.625 0 31.5±7.201 69.8±9.003 59.0±3.351 20.6±2.6P＜0.0553 16.3±3.0P＜0.011)T/C＝给药组肺转移集落的平均数/对照组肺转移集落的平均数×100(％)2)联合使用组比紫杉醇5mg/kg单独给药组，n＝8，Dunnett方法由表4和表5清楚可见，与单独给予依托泊甙或紫杉醇相比，在本发明化合物-依托泊甙或紫杉醇联合使用组中肺B16-F10细胞转移集落的数目明显减少(p＜0.01或p＜0.05，Dunnett方法)。
以相同方法确定本发明化合物-依托泊甙或紫杉醇联合使用组的CI值。这些结果概括在表6中。
表6本发明化合物 CI(联用指数)(mg/kg)(口服) 依托泊甙(5mg/kg)紫杉醇(5mg/kg)1 0.42 0.633 0.34 0.34如表6所示，本发明化合物与依托泊甙或紫杉醇联合使用时联合作用的联用指数都小于1。因此，表明本发明化合物与依托泊甙或紫杉醇联合使用时协同抑制B16-F10细胞血原性的肺转移。
在表1、2、4和5的实验中，对照组中肺B16-F10细胞转移集落的数目平均为164.2-232.6。实验实施例2细胞生长活性的测定方法[方法]在补充有2mM L-谷氨酰胺、1mM MEM非必需氨基酸、1％MEM维生素、1mM丙酮酸和5％FCS的MEM中培养小鼠黑素瘤B16-F10细胞(如上文所述)，并使用细胞刮器(3010号，由Coaster制造)每3-4天从培养烧瓶中刮取细胞，稀释10倍并通过继代培养保持。在检查试验物质对细胞生长影响的实验中，用细胞刮器回收通过继代培养体外保持的B16-F10细胞，以2×105细胞/ml悬浮在补充有10％FCS的MEM中并以1×104细胞/μl/孔的量加到96孔微试验板(Becton Dickinson)中。此后，将50μl试验物质以最终浓度为2倍稀释的浓度加到孔中，在CO2培养器(MCO-175，SANYO Electric Co.，Ltd.)中于37℃、5％CO2和95％空气下培养72小时。
培养后，以10μl/孔的量加入10mg/ml的MTT[(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基-四唑鎓溴化物)]，再培养3小时。此后，加入100μl的10％SDS(十二烷基硫酸钠)-0.01N HCl来溶解颜料并使用多标记记录仪(1420 ARVO SX，Pharmacia Biotech Corporation)测量570nm处的吸收度。按照试验物质的浓度，每个孔用吸收度、和平均值与标准误差来表示。使用该孔(只加入介质)作为对照，按下式计算生长抑制率生长抑制率(％)＝[1-加入试验物质的孔的OD570/只加入介质的孔的OD570]×100％分析方法基于本发明化合物单独治疗组和顺铂单独治疗组的量效曲线，通过中值效果分析来计算联合使用组的联用指数(CI)(对照为[1]和[2])。[结果]顺铂和本发明化合物对小鼠黑素瘤B16-F10细胞体外生长的影响显示在表7中。
表7顺铂(μM)本发明化合物 平均生长抑制率 显著性差异2)±标准误差(％)10 0 5.813±1.51030 0 29.609±4.5031000 96.631±0.1090 0.1 4.389±3.0940 0.3 5.196±0.2140 1 7.877±0.7270 3 10.012±1.4590 1010.700±0.3650 3022.657±4.7840 100 57.960±8.57510 0.3 17.200±11.245 NS(P＝0.1293)10 1 17.319±4.397 NS(P＝0.1236)10 3 26.406±8.364 P＝0.002810 1043.796±5.446 P＝0.000010 3090.320±2.220 P＝0.000010 100 96.180±0.164 P＝0.00001))联合使用组比顺铂10μM单独给药组，n＝8，Dunnett方法而且，本发明化合物和顺铂联合使用的CI值结果显示在表8中。
表8顺铂(μM)本发明化合物 CI(联用指数)(μM)100.30.42929101 0.46563103 0.447811010 0.440291030 0.50708101000.35585参考文献1)B.D.Kahan.“在人肾移植中使用环孢菌素与西罗莫司或布喹那的浓度控制免疫抑制方案”，Transplant.Proc.，27，33-36，1995.
2)K.Watannabe，S.Ito，K.Kikuchi，N.Ichikawa，Y.Ando，K.Meigata，Y.Nomura，T.Degawa，Y.Beck，S.Tomikawa，T.Nagao，和H.Uchida.“在体外和体内实验中通过联用指数评价他克莫司和咪唑立宾的协同作用”，Jap.J.Transplant.，31，23-30，1996.
工业实用性由上述制剂实施例和实验实施例以及其他药理实验可知，具有Rho激酶抑制活性的化合物增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用并且可用作抗肿瘤作用的增效剂。
具体来说，由上述实验实施例可知，具有Rho激酶抑制活性的化合物明显增强顺铂的抗肿瘤作用。所以，本发明的具有Rho激酶抑制活性的化合物与抗肿瘤剂联合使用时可降低抗肿瘤剂的剂量，并因此产生显著的作用和/或降低副作用。
本申请基于在日本的专利申请190233/2000，其内容引入本文。
权利要求
1.一种含有具有Rho激酶抑制剂活性的化合物作为活性组分的抗肿瘤作用增效剂，它增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
2.权利要求1的抗肿瘤作用增效剂，其中所述具有Rho激酶抑制剂活性的化合物为下列式(I)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐 其中Ra是下列式(a)、(b)或(c)基团 在式(a)和(b)中，R为氢、烷基或环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，或式(d)基团 其中R6为氢、烷基或式-NR8R9，其中R8和R9是相同的或不同的并且各为氢、烷基、芳烷基或苯基，R7为氢、烷基、芳烷基、苯基、硝基或氰基，或者R6和R7一起形成杂环基，在该杂环基中不含有或进一步含有氧原子、硫原子或未取代的或取代的氮原子，R1为氢、烷基或在所述环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，或者R和R1与毗邻的氮原子一起形成杂环，在该杂环中不含有或进一步含有氧原子、硫原子或未取代的或取代的氮原子，R2为氢或烷基，R3和R4是相同的或不同的并且各为氢、烷基、芳烷基、卤素、硝基、氨基、烷基氨基、酰氨基、羟基、烷氧基、芳烷氧基、氰基、酰基、巯基、烷硫基、芳烷硫基、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、一或二烷基氨基甲酰基、或叠氮化物，并且A为式(e)基团 其中R10和R11是相同的或不同的并且各为氢、烷基、卤代烷基、芳烷基、羟基烷基、羧基或烷氧基羰基，或者R10和R11一起形成环烷基并且l、m和n各为0或1-3的整数，在式(c)中，L为氢、烷基、氨基烷基、一或二烷基氨基烷基、四氢呋喃基、氨基甲酰基烷基、邻苯二甲酰亚氨基烷基、脒基或式(f)-(i)基之一， 其中B为氢、烷基、烷氧基、芳烷基、芳烷氧基、氨基烷基、羟基烷基、链烷酰氧基烷基、烷氧基羰基烷基、α-氨基苄基、呋喃基、吡啶基、苯基、苯基氨基、苯乙烯基或咪唑并吡啶基，Q1为氢、卤素、羟基、芳烷氧基或噻吩基甲基，W为亚烷基，Q2为氢、卤素、羟基、或芳烷氧基，X为亚烷基，Q3为氢、卤素、羟基、烷氧基、硝基、氨基、2，3-二氢呋喃基或5-甲基-3-氧代-2，3，4，5-四氢哒嗪-6-基；并且Y为单键、亚烷基或亚烯基，并且在式(C)中，虚线为单键或双键，并且R5为氢、羟基、烷氧基、烷氧基羰基氧基、链烷酰氧基或芳烷氧基羰基氧基；Rb为氢、烷基、芳烷基、氨基烷基或一或二烷基氨基烷基；并且Rc为未取代的或取代的含氮杂环。
3.权利要求1的抗肿瘤作用增效剂，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是下列式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐， 其中Ra’是式(a’)或(b’)基团 其中，R’为氢、烷基或环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，R1为氢、烷基或在所述环上不具有或具有取代基的环烷基、环烷基烷基、苯基或芳烷基，或者R’和R1与毗邻的氮原子一起形成杂环，在该杂环中不含有或进一步含有氧原子、硫原子或未取代的或取代的氮原子，R2为氢或烷基，R3和R4是相同的或不同的并且各为氢、烷基、芳烷基、卤素、硝基、氨基、烷基氨基、酰氨基、羟基、烷氧基、芳烷氧基、氰基、酰基、巯基、烷硫基、芳烷硫基、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、一或二烷基氨基甲酰基、或叠氮化物，并且A为式(e)基团 其中R10和R11是相同的或不同的并且各为氢、烷基、卤代烷基、芳烷基、羟基烷基、羧基或烷氧基羰基，或者R10和R11一起形成环烷基并且l、m和n各为0或1-3的整数，Rb为氢、烷基、芳烷基、氨基烷基或一或二烷基氨基烷基；并且Rc为未取代的或取代的含氮杂环。
4.权利要求1的抗肿瘤作用增效剂，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
5.权利要求4的抗肿瘤作用增效剂，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物为(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
6.权利要求1或2的抗肿瘤作用增效剂，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇。
7.权利要求6的抗肿瘤作用增效剂，其中抗肿瘤剂为顺铂。
8.一种增强抗肿瘤作用的药物组合物，它包含具有Rho激酶抑制剂活性的化合物和可药用载体，其增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
9.权利要求8的增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
10.权利要求8的增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
11.权利要求8的增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐.
12.权利要求11的增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物为(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
13.权利要求8或9的增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇。
14.权利要求13的增强抗肿瘤作用的药物组合物，其中抗肿瘤剂为顺铂。
15.一种治疗肿瘤的药物组合物，它包含具有Rho激酶抑制剂活性的化合物、抗肿瘤剂和可药用载体。
16.权利要求15治疗肿瘤的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
17.权利要求15治疗肿瘤的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
18.权利要求15治疗肿瘤的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
19.权利要求18治疗肿瘤的药物组合物，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物为(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
20.权利要求15或16治疗肿瘤的药物组合物，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇。
21.权利要求20治疗肿瘤的药物组合物，其中所述抗肿瘤剂为顺铂。
22.一种治疗肿瘤的方法，它包括给予病人药用有效量具有Rho激酶抑制剂活性的化合物和药用有效量抗肿瘤剂。
23.权利要求22的方法，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
24.权利要求22的方法，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
25.权利要求22的方法，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
26.权利要求22的方法，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物为(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
27.权利要求22或23的方法，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇。
28.权利要求27的方法，其中所述抗肿瘤剂为顺铂。
29.具有Rho激酶抑制剂活性的化合物在制备抗肿瘤作用增效剂中的应用。
30.权利要求29的应用，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
31.权利要求29的应用，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物是式(I’)酰胺化合物、其异构体和/或其可药用酸加成盐。
32.权利要求29的应用，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷、(+)-反式-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)环己烷甲酰胺、(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
33.权利要求29的应用，其中具有Rho激酶抑制剂活性的化合物为(R)-(+)-N-(4-吡啶基)-4-(1-氨基乙基)苯甲酰胺和/或其可药用酸加成盐。
34.权利要求29或30的应用，其中所述抗肿瘤剂选自顺铂、依托泊甙和紫杉醇。
35.权利要求34的应用，其中所述抗肿瘤剂为顺铂。
36.一种商业包装，它包含权利要求8-14中任一增强抗肿瘤作用的药物组合物和与之有关的书面材料，所述书面材料指出，所述药物组合物可用于或应该用于增强抗肿瘤剂的抗肿瘤作用。
37.一种商业包装，它包含权利要求15-21中任一治疗肿瘤的药物组合物和与之有关的书面材料，所述书面材料指出，所述药物组合物可用于或应该用于治疗肿瘤。
全文摘要
当与抗肿瘤剂同时使用时，一种具有Rho激酶抑制剂活性的化合物，如(R)－(+)－N－(4－吡啶基)－4－(1－氨基乙基)苯甲酰胺增强所述抗肿瘤剂的抗肿瘤作用并用作抗肿瘤作用增效剂。具体地说，一种与抗肿瘤剂联合应用的具有Rho激酶抑制剂活性的化合物可减少所述抗肿瘤剂的剂量，因此可提供足够的作用和/或减少副作用。
文档编号A61K31/337GK1447697SQ01814556
公开日2003年10月8日 申请日期2001年6月22日 优先权日2000年6月23日
发明者藤井明启, 田中宽, 大槻真希夫, 川口贵史, 尾下浩一 申请人:三菱制药株式会社