专利名称：一种抗白内障眼药和角膜渗透促进剂氮酮的眼科应用的制作方法
技术领域：
本发明属于眼科药物治疗技术领域。
(2)另一种方法是通过破坏角膜上皮的屏障功能增加水溶性药物的角膜通透性，此方法对眼组织具有潜在的的危险。
因此，进一步研制配方增加水溶性药物的角膜通透性，提高药物的生物利用度具有较大的实用价值。
氮酮(azone，化学名为1-正十二烷基氮杂环庚烷酮-2)是许多外用药剂的强效透皮吸收促进剂，且对人的皮肤、粘膜几乎无毒无刺激性。已用于开发系列外用药，系列经皮吸收控释药物及系列化妆品。azone能否增加滴眼剂的角膜渗透，有无眼科临床应用价值一直是大家近年来关注的课题。
1994年美国Tang-liu等的研究表明，0.1％azone在体外实验中(仿眼角膜结构模型)可使一些水溶性药物(乙酰唑胺、甲氰咪呱、呱乙啶、磺醋酰胺)的角膜通透性增加20倍左右，中等亲脂性药物(强的松龙)的角膜通透性至少增加2-5倍，这一结果非常令人鼓舞。但他们指出azone最终能否应用于眼科临床取决于它对眼组织有无毒性。
Newton等将环孢霉素溶解于5％azone中，给兔点眼6周，通过临床、放射免疫测定、组织病理和免疫组织学研究，在观察环孢霉素对角膜移植排斥反应发生率和严重程度影响的同时，未发现高浓度azone对角膜上皮细胞的毒性作用。但是，Duand-Cavagna等的研究却发现，应用1％～2％的azone滴兔眼一天3次，持续29天，裂隙灯检查发现，约1/3-1/2兔眼角膜轻度水肿，扫描电镜发现角膜内皮形态改变。但不能确定角膜内皮的损害是azone的直接作用还是配方中氯苄烷胺(阳离子表面活性剂及防腐剂)所致。
1999年徐岩、陈祖基等应用0.3％、0.6％、0.9％azone给家兔点眼，每天3次，连续4周，发现全部实验眼和对照眼结膜、角膜均无损害，其它眼组织形态正常，角膜内皮形态和细胞活性均正常。因而认为Duand-Cavagna实验中出现的角膜内皮改变，不能排除与其配方中加入的氯苄烷胺有关，从而提示azone有希望用于眼药配方。
但是，迄今为止所见研究报道主要还限于体外实验研究和azone对角膜及其眼组织结构的毒性影响方面。尽管Newton等将环孢霉素溶解于5％azone中，但是他们只不过是将azone作为一种眼科溶剂，在观察环孢霉素对角膜移植排斥反应影响的同时，观察了高浓度azone(5％)对角膜上皮细胞的毒性反应。
本发明的技术方案由苄达赖氨酸、氮酮、聚乙二醇等药物按一定比例配制而成。具体配方如下必备成分配比幅度A.苄达赖氨酸(主药) 0.500gB.氮酮(促渗透剂)0.220g～1.102gC.聚乙二醇--400(非离子表面活性剂) 1.160ml～3.850mlD.羟丙甲基纤维素(助悬剂)0.500gE.磷酸二氢钠(缓冲液)0.018gF.磷酸氢二钠(缓冲液)0.190gG.氯化钠0.300g～0.800gH.硫柳汞(防腐剂)0.001gI.注射用水 加至100ml本发明采用高效液相色谱法(high pressure liquid chromatography，HPLC)测定兔房水中苄达赖氨酸含量，实验组房水中苄达赖氨酸含量为对照组2.14倍和2.43倍。
眼刺激反应评分、石蜡切片、锥蓝-茜素红双重染色及扫描电镜等表明azone对结膜、角膜无刺激；角膜(包括上皮和内皮细胞)、晶状体、虹膜、玻璃体等眼内组织形态与结构无异常改变。
用钙荧光探针Fluo-3/AM结合激光共聚焦显微镜(LSCM)跟踪监测不同浓度azone对培养兔角膜上皮细胞胞内Ca2+的变化，表明azone对角膜上皮细胞内钙离子浓度无明显影响，细胞活性正常(
图1-图4)。Kitazana等在研究角质细胞生长因子的实验，即应用1000倍体外条件下该生长因子的有效浓度，作为滴眼液浓度。由此可见，对角膜上皮细胞而言，现有处方中使用的azone浓度十分安全。
本发明所述华臣眼液正在做进一步的动物实验并将进行临床验证。
综上所述，azone作为角膜渗透促进剂，有效地促进了抗白内障药物-苄达赖氨酸(醛糖还原酶抑制剂)往眼内的渗透，房水中药物浓度为对照组的2.14倍和2.43倍。同时眼刺激反应评分、石蜡切片、锥蓝-茜素红双重染色、扫描电镜以及分子细胞生物学研究(荧光探针结合共聚焦显微镜)等表明目前使用的azone浓度是十分安全的。与现有技术相比，其显著效果在于1.低浓度azone在兔体内实验中安全有效地提高了苄达赖氨酸等药物的角膜通透性，为azone用于开发系列眼药，提高药物的生物利用度，造福于眼病患者提供了依据，从而确定了azone在眼科的实际应用价值。
2.低浓度azone使房水中苄达赖氨酸浓度明显提高，必将加强该药物对醛糖还原酶的抑制，从而提高该药物对致盲主要疾病-白内障的防治效果，使之成为更为理想的抗白内障眼药。
3.由于低浓度azone即能使房水中药物浓度明显提高，因而使减少用药次数成为可能，这样不但能提高患者长期用药的依从性，而且还能避免主药长期应用可能带来的潜在不良反应。对其他可与azone配方的眼科药物也是如此。
4.同时由于低浓度azone能使房水中药物浓度明显提高，不仅可以增加原来角膜通透较差药物的角膜渗透性，提高其生物利用度，而且可能使原需口服(如乙酰唑胺)或其它途径(如球结膜下注射等)给药才能吸收的药物通过局部滴眼即能吸收，从而使给药途径趋于简便，避免全身用药给肝肾功能和其它方面所带来的不良影响以及球结膜下注射等用药途径给患者带来的不便、痛苦和相关并发症。
73秒0.0005％azone；238秒0.005％azone；343秒0.05％azone；413秒0.5％azone；
图二正常角膜上皮细胞形态和钙荧光强度。
图三给药后(0.5％azone)角膜上皮细胞形态和钙荧光强度。
图四给予过量氯化钾后角膜上皮细胞形态和钙荧光强度(与图一604秒同步)。
眼刺激反应评分、石蜡切片、锥蓝-茜素红双重染色及扫描电镜等表明azone对结膜、角膜无刺激；角膜(包括上皮和内皮细胞)、晶状体、虹膜、玻璃体等眼内组织形态与结构无异常改变。
用钙荧光探针Fluo-3/AM结合激光共聚焦显微镜(LSCM)跟踪监测不同浓度azone对培养兔角膜上皮细胞胞内Ca2+的变化，表明0.5％azone对角膜上皮细胞内Ca2+浓度无明显影响，细胞活性正常。Kitazana等在研究角质细胞生长因子的实验，即应用1000倍体外条件下该生长因子的有效浓度，作为滴眼液浓度。由此可见，对角膜上皮细胞而言，现有处方中使用的azone浓度十分安全。
权利要求
1.一种抗白内障眼药华臣眼液，其特征在于由苄达赖氨酸、氮酮和聚乙二醇等药物按一定比例配制而成。具体配方如下必备成分 配比幅度A.苄达赖氨酸(主药)0.500gB.氮酮(促渗透剂) 0.220g～1.102gC.聚乙二醇--400(非离子表面活性剂) 1.160ml～3.850mlD.羟丙甲基纤维素(助悬剂) 0.500gE.磷酸二氢钠(缓冲液) 0.018gF.磷酸氢二钠(缓冲液) 0.190gG.氯化钠 0.300g～0.800gH.硫柳汞(防腐剂) 0.001gI.注射用水 加至100ml
2.一种角膜渗透促进剂氮酮的应用，其特征为氮酮与苄达赖氨酸等药物配方可开发系列眼药，提高药物的生物利用度。
3.一种角膜渗透促进剂氮酮的应用，其特征在于氮酮与苄达赖氨酸等药物配方能使房水中药物浓度明显提高，可减少用药次数，提高患者用药的依从性，避免药物长期应用带来的不良反应。
4.一种角膜渗透促进剂氮酮的应用，其特征在于氮酮与苄达赖氨酸等药物配方可使原需口服或其它途径(如球结膜下注射等)给药才能吸收的药物通过局部滴眼即能吸收，从而使给药途径趋于简便，避免全身用药给身体带来的不良影响以及球结膜下注射等用药途径给患者带来的不便、痛苦和相关并发症。
全文摘要
本发明属于眼科药物治疗技术领域。本发明所述抗白内障眼药由苄达赖氨酸、氮酮和聚乙二醇等药物按一定比例配制而成。角膜渗透剂氮酮与苄达赖氨酸等药物配方可用于开发系列眼药,提高药物的生物利用度,减少用药次数,使原需口服或其它途径给药才能吸收的药物有望通过局部滴眼即能吸收。
文档编号A61P27/12GK1389206SQ02137909
公开日2003年1月8日 申请日期2002年7月8日 优先权日2002年7月8日
发明者朱承华, 王蔚青, 徐唐 申请人:南京医科大学第一附属医院