专利名称：用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物和方法，同时还涉及特定化合物在制备此组合物中的应用。更具体来说，本发明涉及用来改善因高血压、糖尿病和慢性阻塞性动脉硬化症等老年病引起的血管内皮血管张力调节功能低下的医药组合物和改善方法。
背景技术：
在当今社会步入老龄化的同时，高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症等老年病也逐年增多。这些老年病的共同特点之一就是在发病的同时，血管病变也不断加重。这样的血管病变逐步恶化，还会增加引发心肌梗塞等严重病症的危险。在血管病变的恶化过程中尤其令人关注的是因血管内皮细胞功能障碍引起的血管内皮功能低下。
血管内皮细胞是覆盖在血管内壁的细胞。近年来研究表明，这些细胞不仅选择性地控制物质通过血管，还在血压调节和抗血栓方面起着重要的作用。而且最近有研究表明，内皮细胞分泌的血管内皮衍生舒张因子(Endothelium-derivered relaxing factorEDRF)的存在对血管内皮的血管张力调节功能很重要。比如，运动增加了组织的氧消耗，这时就需要向此组织增加氧的供应，而这种供应是通过组织内的血管张力变弱、也就是使血管内皮舒张、增加动脉血的流入来达到的。一般认为在此种情况下，EDRF由血管内皮细胞大量分泌出来，促进了血管内皮的舒张。
因此，如果伴随着高血压、糖尿病等老年病而产生血管内皮细胞功能障碍，从而引起这些细胞的EDRF分泌能力低下的话，那么血管内皮的血管张力调节功能就会受到损害。其结果就是，随着高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症等的不断恶化，一直保持紧张状态而无法得到舒张的血管就会逐渐增多，产生慢性狭窄或闭塞，容易引发心肌梗塞等病症。下肢动脉如果产生这种慢性狭窄或阻塞而发病，具有代表性的病症就是间歇性跛行。EDRF分泌能力低下在形成间歇性跛行以外的血管病变的病态生理状态上也起着重要的作用。这一点，可以从对各种老年病的研究报告都指出EDRF分泌能力低下的现象判断出来。因此，如果可以抑制血管内皮细胞的EDRF分泌能力低下，就可以预防或治疗因高血压、糖尿病、动脉硬化和慢性闭塞性动脉硬化症等的不断恶化而引起的心肌梗塞或间歇性跛行、以及其他血管病变。
已有报告指出能抑制血管内皮细胞EDRF分泌能力低下的药物有抗高血脂药普罗布考。但普罗布考给药后，会引起高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)下降，同时心电图的QT间期延长。一般认为这些副作用与局部缺血性心脏病以及猝死有关系。因此人们希望开发得到没有这些副作用、可以抑制血管内皮细胞EDRF分泌能力低下的药物，尤其是可以改善血管内皮血管张力调节功能的药物。
发明内容
本发明的目的是提供新颖的用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物。
本发明者们为了解决以上课题进行了深入的研究，结果发现了特定的二氢化苯并呋喃化合物可以改善血管内皮的血管张力调节功能。
换而言之，本发明就是提供用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物、含有下列通式(1) (式中，R1表示氢原子、酰基、芳烷基氧羰基，R2和R3可以相同也可以不同，表示可被取代的烷基、可被取代的链烯基、可被取代的炔基，也可以是R2和R3合在一起形成环烷基)表示的化合物或其可药用盐作为有效成分的组合物。
本发明还提供改善血管内皮血管张力调节功能的方法、就是将有效量的通式(1)表示的化合物或其可药用盐对有改善必要的患者给药的方法。
本发明还提供通式(1)表示的化合物或其可药用盐在制备用来改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物中的应用。
通式(1)表示的化合物优选4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2’-二正丁基-2，3-二氢苯并呋喃、4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2’-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃、4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2’-二正己基-2，3-二氢苯并呋喃、或4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2’-二正庚基-2，3-二氢苯并呋喃。
有改善血管内皮血管张力调节功能必要的症状优选选自高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症的疾病所引起的症状。
有改善血管内皮血管张力调节功能必要的症状更优选间歇性跛行。
附图简单说明
图1表示浸入20μM被检化合物溶液中后由氧化LDL造成功能障碍的大鼠血管横截标本对乙酰胆碱的血管内皮依赖性舒张应答。
图2表示浸入50μm被检化合物溶液中后由氧化LDL造成功能障碍的大鼠血管横截标本对乙酰胆碱的血管内皮依赖性舒张应答。
具体实施例方式
本发明的通式(1)所表示的化合物是已知的。特开平6-206842号以及WO94/08930号就记载了这些化合物具有抗氧化作用。另外，特开平11-21238号以及WO98/50025号记载了这些化合物可以抑制动脉粥状硬化病变和黄瘤。但是，本发明之通式(1)所示的化合物可以改善血管张力调节功能这一点还未为人知。
本发明中所用的通式(1)所示化合物，可以使用如特开平6-206842号以及与其相对应的美国专利5574178号或欧洲专利第0665208号中所记载的方法进行合成。
本发明的通式(1)中，R1表示酰基时，包括碳原子数1～10的脂肪族酰基以及碳原子数7～10的芳香族酰基。脂肪族酰基优选如甲酰基、乙酰基、丙酰基、己酰基等，芳香族酰基优选如苯甲酰基等。酰基优选脂肪族酰基，更加优选碳原子数1～6的脂肪族酰基，尤其优选乙酰基。R1表示芳烷基氧羰基的话，举例来说有碳原子数7～12的此类基团。优选碳原子数7～11的。更加优选的化合物有如苄氧羰基以及萘甲氧基羰基等。
R1优选氢原子或酰基，更加优选氢原子和乙酰基，尤其优选氢原子。
R2和R3表示烷基时，包括如碳原子数1～20的直链或支链烷基。具体来说，包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、叔戊基、新戊基、正己基、异己基、乙基丁基、正庚基、异庚基、乙基戊基、正辛基、乙基己基、丙基戊基、壬基、癸基、十五烷基、十八烷基等。烷基优选碳原子数1～10的直链或支链烷基，更加优选碳原子数3～8的直链烷基。
R2和R3表示链烯基时，包括如碳原子数2～20的直链或支链烷基。具体来说，包括乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基、戊烯基、异戊烯基、己烯基、异己烯基、乙基丁烯基、庚烯基、异庚烯基、乙基戊烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基、十五烯基等。链烯基优选碳原子数2～10的直链或支链链烯基，更加优选碳原子数3～8的直链链烯基。
R2和R3表示炔基时，包括如碳原子数2～20的直链或支链烷基。具体来说，包括如乙炔基、丙炔基、异丙炔基、丁炔基、异丁炔基、戊炔基、异戊炔基、己炔基、异己炔基、乙基丁炔基、庚炔基、异庚炔基、乙基戊炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基、十五炔基等。炔基优选碳原子数2～10的直链或支链炔基，更加优选碳原子数3～8的直链炔基。
R2和R3形成环烷基的情况下，可以是碳原子数3～10的环烷基。具体来说，包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基等。环烷基优选碳原子数5～8的环烷基，更加优选碳原子数4～7的环烷基。
R2和R3如果是可被取代的烷基、可被取代的烯基、可被取代的炔基时，其取代基包括如卤素、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、羟基、氨基、单或二烷基氨基、羧基、酰基、氰基、烷氧基、芳氧基、硝基、卤代烷基、芳基、杂芳基，优选卤素、低级烷氧基、羟基、氨基、硝基和三氟甲基。
R2和R3特别优选碳原子数3～8的直链状未取代烷基，具体包括如正丁基、正戊基、正己基、正庚基或正辛基，其中尤其优选的是R2和R3均为正戊基。
本发明的通式(1)所示化合物的可药用盐，是通式(1)的化合物如果在R2和R3处具有可与酸或碱成加成盐的基团时而生成得到的。用于生成酸加成盐的酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸和磷酸等无机酸，以及乙酸、乳酸、草酸、乙醇酸、酒石酸、苹果酸和柠檬酸等有机酸。用于生成碱加成盐的碱包括如甲胺、乙胺、乙醇胺、吡啶、哌啶、吗啉和三乙胺等碱。
本发明的通式(1)所示化合物的优选具体举例如下。
4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二乙基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正丙基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二异丙基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正丁基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二仲丁基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二叔丁基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二异戊基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二叔戊基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二新戊基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正己基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正庚基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正辛基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正壬基-2，3-二氢苯并呋喃；4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正癸基-2，3-二氢苯并呋喃。
其中特别优选的通式(1)所示化合物为4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃。
本发明的通式(1)所示化合物对血管张力调节功能障碍具有优良的改善作用，因此对高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症等老年病引起的血管内皮细胞功能障碍所致血管内皮血管张力调节功能低下是有效的。虽然不希望受理论上的限制，但大概这种血管张力调节功能的改善作用是由于通式(1)所示化合物具有抑制血管内皮细胞EDRF分泌能力低下的能力而产生的。血管内皮血管张力调节功能低下的状态可以举出，特别是下肢动脉发生慢性血管狭窄或闭塞时可见的间歇性跛行。
本发明的医药组合物可以将作为有效成分的通式(1)所示化合物，根据给药途径的不同与相应的生理上可用的固体或液体制剂载体配制在一起，而制成各种剂型。给药途径包括口服给药、静脉注射等非口服给药、通过缓释制剂进行的缓释型给药、通过局部给药导管进行的局部给药。制剂载体包括常用的赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包衣、溶解助剂、乳化剂、混悬剂、稳定剂、油脂和溶剂。剂型包括如口服给药用、静脉内/肌肉内或皮下等非口服给药用、经口腔给药用、经鼻内给药用、经肛门给药用、吸入或吹入用的剂型，具体举例来说，包括如片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、水剂、糖浆、混悬剂、乳浊剂、注射剂和气雾剂。
本发明的通式(1)所示化合物的给药量可以根据患者的年龄、病情的严重程度、给药途径等作适当的选择，一般每天成人的给药量为1～1000mg，优选10～500mg，更加优选50～400mg。这样的量一次性一起给药也可以，分开数次给药也可以。
以下结合实施例对本发明进行详细说明，但应理解本发明并不是仅限于这些实施例。
实施例实验例1本发明化合物对因氧化LDL引起的血管内皮血管张力调节功能障碍的改善作用(1)对由氧化低密度脂蛋白(氧化LDL)引起功能障碍的大鼠血管横截标本，在有本发明化合物存在的条件下测定其乙酰胆碱引起的血管内皮依赖性舒张应答，对本发明化合物改善血管内皮血管张力调节功能的能力进行评价。
氧化LDL是生物体内物质——低密度脂蛋白(LDL)受氧化应激变化而来的。有报告表明它与血管内皮细胞的功能障碍发生机理有关(Tanner FC，Noll G，Boulanger CM，Luscher TF，Oxidized low densitylipoproteins inhibit relaxations of porcine cornary arteries.Role ofscavenger receptor and endothelium-derived nitric oxide.Circulation.1991，832012-20)。此次实验所用的氧化LDL，是将按Havel等的方法(Havel R.J.et al，J.Clin.Invest.，34，1345(1955))配制的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)中的浓度200μg/mL的家兔LDL、与5μM硫酸铜一起在37℃下温孵24小时而制得的。
首先，取通过吸入二氧化碳而安乐死的大鼠的肠系膜动脉，浸入Krebs缓冲液(含有118.0mM氯化钠、4.7mM氯化钾、25.0mM碳酸钠、22.5mM氯化钙、1.5mM硫酸镁和10mM葡萄糖)中，切取动脉得到宽2毫米的圆环状横截面切片。接着，将此切片悬垂于马格纳斯装置中，用3mN的张力进行60分钟的平衡。平衡后，将切片用Krebs缓冲液中5μM的脱羟肾上腺素溶液进行收缩。
在确定得到了稳定的收缩以后，用含有20μM试验化合物的Krebs缓冲液取代作灌流液。试验化合物为本发明化合物的4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃，以及对照化合物普罗布考和α-生育酚。有报告说普罗布考这种化合物可以通过抑制血管内皮细胞EDRF分泌能力低下来改善血管内皮的血管张力调节功能。而α-生育酚被认为是可以抑制LDL氧化的生物体内脂溶性抗氧化物质。
经过30分钟的灌流后，添加浓度100μg/mL的氧化LDL。
在含有这种氧化LDL的灌流液中平衡60分钟，然后将乙酰胆碱(ACh)从浓度1×10-10M累积添加到1×10-5M。每达到一定的乙酰胆碱浓度就测定一下切片长度，将舒张前的切片长度和舒张后的长度的差除以舒张前的长度计算得到舒张度(％)。此处的舒张是由乙酰胆碱引起血管内皮细胞释放EDRF而发生的现象。
在进行以上实验的同时，还进行了除了不包括在含有试验化合物的Krebs缓冲液中进行灌流的步骤和添加氧化LDL进行平衡的步骤以外其他操作完全与上述相同的实验(对照实验)，以及未实施在含有试验化合物的Krebs缓冲液中灌流的操作但实施了加入氧化LDL进行平衡的操作并且其他操作与上述实验相同的实验(氧化LDL实验)。
由图1可知，本发明化合物在乙酰胆碱浓度比氧化LDL实验中的低的情况下，就达到与氧化LDL实验相同程度的舒张度，因此可以说它改善了血管内皮的血管张力调节功能。比如50％的舒张度，在氧化LDL实验中是用345nM的乙酰胆碱来达到的，而在本发明化合物中是用126nM达到的。同时，达到50％的舒张度的乙酰胆碱浓度，对照实验为28nM，普罗布考为121nM，α-生育酚为261nM。
α-生育酚仅显示出与氧化LDL实验同等程度的舒张度，因此可以说在此次实验的乙酰胆碱浓度范围内未能改善血管内皮的血管张力调节功能。由此可知，即使是具有抑制LDL氧化能力的α-生育酚，也不能够阻止氧化LDL引起的血管内皮细胞功能障碍和改善功能障碍引起的血管张力调节功能低下。本发明化合物具有的改善血管张力调节功能的作用，不仅证明它通过抑制LDL氧化来消除氧化LDL对血管内皮细胞造成的功能障碍，从而改善了血管内皮的血管张力调节功能，实际上还证明它抑制氧化LDL产生的血管内皮血管张力调节功能障碍。
实验例2本发明化合物对氧化LDL引起的血管内皮血管张力调节功能障碍的改善作用(2)此次实验除了将试验化合物的浓度从20μM提高到50μM以外，其他操作完全与实验例1相同。
由图2可知，由于提高了溶液浓度，本发明化合物与实验例1中相比，以低浓度乙酰胆碱实现了高舒张度。特别是其乙酰胆碱浓度和舒张度的关系与对照组相似，这意味着氧化LDL引起的血管内皮细胞功能障碍给血管张力调节功能带来的恶劣影响已经完全被消除了。
工业实用性本发明的化合物与被认为能够抑制血管内皮细胞EDRF分泌能力低下的普罗布考相比，具有更高的安全性，因此对于改善伴随高血压、糖尿病、动脉硬化和慢性闭塞性动脉硬化症等老年病产生的心肌梗塞易发或间歇性跛行等血管张力调节功能低下症状是非常有用的。
权利要求
1.用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物，包含下列通式(1)表示的化合物或其可药用盐作为有效成分组成 式中，R1表示氢原子、酰基或芳烷基氧羰基，R2和R3可以相同也可以不同，表示可被取代的烷基、可被取代的链烯基、可被取代的炔基，或者R2和R3合在一起形成环烷基。
2.权利要求1记载的组合物，其中R1表示氢原子。
3.权利要求2记载的组合物，其中R2和R3表示可被取代的烷基。
4.权利要求3记载的组合物，其中可被取代的烷基为正丁基、正戊基、正己基或正庚基。
5.权利要求1记载的组合物，其中通式(1)所示化合物为4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃。
6.权利要求1记载的组合物，其中有必要改善血管内皮的血管张力调节功能的症状是由选自高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症的疾病所引起的。
7.权利要求6记载的组合物，其中有必要改善血管内皮的血管张力调节功能的症状是间歇性跛行。
8.改善血管内皮血管张力调节功能的方法，包括将有效量的化合物对有必要改善的患者给药的方法，其中化合物是指如通式(1)所示的化合物或其可药用盐 式中，R1表示氢原子、酰基或芳烷基氧羰基，R2和R3可以相同也可以不同，表示可被取代的烷基、可被取代的链烯基、可被取代的炔基，或是R2和R3合在一起形成环烷基。
9.权利要求8记载的方法，其中R1表示氢原子。
10.权利要求9记载的方法，其中R2和R3表示可被取代的烷基。
11.权利要求10记载的方法，其中可被取代的烷基为正丁基、正戊基、正己基或正庚基。
12.权利要求8记载的方法，其中通式(1)所示化合物为4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃。
13.权利要求8记载的方法，其中有必要改善血管内皮的血管张力调节功能的症状是由选自高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症的疾病所引起的。
14.权利要求13记载的方法，其中有必要改善血管内皮的血管张力调节功能的症状是间歇性跛行。
15.通式(1)所示的化合物或其可药用盐在制备用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物中的应用 式中，R1表示氢原子、酰基或芳烷基氧羰基，R2和R3可以相同也可以不同，表示可被取代的烷基、可被取代的链烯基、可被取代的炔基，或者是R2和R3合在一起形成环烷基。
16.权利要求15记载的应用，其中R1表示氢原子。
17.权利要求15记载的应用，其中R2和R3表示可被取代的烷基。
18.权利要求17记载的应用，其中可被取代的烷基为正丁基、正戊基、正己基或正庚基。
19.权利要求15记载的应用，其中通式(1)所示化合物为4，6-二叔丁基-5-羟基-2，2-二正戊基-2，3-二氢苯并呋喃。
20.权利要求15记载的应用，其中有必要改善血管内皮的血管张力调节功能的症状是由选自高血压、糖尿病和慢性闭塞性动脉硬化症的疾病所引起的。
21.权利要求20记载的应用，其中有必要改善血管内皮的血管张力调节功能的症状是间歇性跛行。
全文摘要
提供新颖的用于改善血管内皮血管张力调节功能的医药组合物，提供包含下列通式(1)(式中，R
文档编号A61P3/10GK1646515SQ0380865
公开日2005年7月27日 申请日期2003年4月18日 优先权日2002年4月18日
发明者进士修, 川边良树, 小森利彦 申请人:中外制药株式会社