专利名称：含1,2－丙二醇的高浓度人生长激素液体制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及可稳定存储、在存储期间结晶减少或没有结晶并且适于对人或动物体给药的人生长激素(hGH，促生长激素)的液体制剂。更特别地，本发明涉及稳定的、并且在高于冷藏温度的温度下存储至少一段时间时结晶最少或没有结晶的人生长激素的液体制剂。
天然hGH为含191个氨基酸的单多肽链蛋白质。该蛋白质通过两个二硫桥内部交联，并且其单体形式的分子量为约22kDa。
hGH的一个主要的生物学效应是促进体内所有器官和组织的生长。在整个生命过程中hGH以脉冲方式从脑垂体分泌。hGH主要的生物学效应是促进生长。hGH响应性的器官或组织包括肝、肠、肾脏、肌肉、结缔组织和骨骼。hGH缺乏在所有年龄段均可出现。hGH缺乏的后果包括骨密度减小、儿童身材矮小、瘦体重及细胞外容积减少和心血管的危险因数增加。已经证明使用重组hGH的替代治疗在逆转这些效应方面是安全和有效的，但需要要以固定的间隔反复注射。
例如，垂体功能减退性侏儒症是一种可通过对患有该疾病的患者给予hGH而易于治疗的疾病。在通过重组方式大量生产hGH之前，仅有限量的hGH可通过从人尸体的垂体中经费力地提取而制备。这种做法带来了与传染物、例如引起克罗伊茨费尔特-雅各布病(CJD)的传染物有关的危险，并且这些传染物可能会传输到接受hGH的患者。hGH基因的分离和表达重组hGH的转染宿主细胞在细胞培养中的构建不仅开拓了一种更可靠、更安全和更有经济效益的垂体功能减退性侏儒症的治疗法，而且开拓了用hGH治疗其它疾病和病情的可能。相应地，在本发明的上下文中，hGH优选指重组人生长激素。然而易于理解的是，从天然原料中分离的人生长激素原则上同样也可包括在本发明的药物制剂中。
一种与药用蛋白质而不仅仅是hGH的含水液体制剂有关的长期为人们所关注的问题是其在存放过程中不稳定。已知含水溶液中的hGH可经历多种降解变化。与大多数其它蛋白质相同，促生长激素(重组人生长激素，rhGH)有三种主要的可能降解途径，即导致游离酰胺基脱酰胺的水解、含硫氨基酸的氧化以及物理变化聚集，所述的聚集为两个或多个hGH分子物理上粘连在一起，例如导致形成不透明的不溶物质。也可能由于水解导致肽主链剪短。另外，一个主要的问题是hGH的结晶化。
早期有关如何解决上述不稳定问题的建议包括冷冻干燥，但是这当然意味着需要在给药前立即或不久重新配制所得的冻干产品。当患者在家中进行常规的自我给药的情形下，这通常意味着患者需要将冻干制剂重新配制成含水溶液。这对于患者是不方便的，并且具有因缺乏细心、没有注意细节和指导或者仅仅是患者方面的误解而错误地重新配制的危险。从制备角度来看，冷冻干燥制剂还具有价格昂贵和耗时的缺点。
因此在研发一种允许患者较简单的自我给予hGH的制剂方面进行了大量尝试。这些尝试聚焦于提供一种即可使用形式的足够稳定的含水液体hGH制剂的方法。该液体剂型的便利性增加，并且因此与必须重新配制并通过其它装置填充入笔式药液筒的冻干剂型相比具有较好的依从性。
然而，必须注意那些也许能稳定hGH含水制剂的赋形剂在对患者给药时可能会带来某些危险。许多可作为稳定剂的化合物在临床上是不能接受的，并且因此无法用来制备可药用的制剂。另外，药物管理要求指出，必须避免任何不必要的添加剂/赋形剂、特别是合成的添加剂/赋形剂，以减少对患者的风险。
方便地，hGH的含水药物制剂应当以多剂量制剂提供给患者，患者可通过注射装置给予该制剂。该多剂量药物制剂通常需要有适宜的防腐剂。
已知hGH的常规液体制剂含有较低浓度的药物，例如约3.33mg/ml，然而较低浓度在给药时可能引起对患者的某些不利。
特别地，患者每次注射不得不接受相对较大体积的该hGH低浓度制剂，这可能引起不适或者甚至是疼痛。例如，对于患有生长激素缺乏(GHD)的儿童，可能需给予剂量为约0.1IU/kg体重/天的hGH。相应地，体重为50公斤的患者每天不得不接受约5IU的hGH，该5IU的hGH包含在500μl含约3.33mg/ml hGH的液体制剂中(1IU hGH＝0.33mg hGH)。易于理解的是，特别希望使用的体积小于500μl。
可选择地，该剂量可通过2次或多次注射该低浓度hGH制剂、而每次注射的体积减少的方式给予。然而，就使用安全性而言，不推荐每剂量使用多于一次注射。
另外，根据治疗方案和剂量，患者也许不得不使用多于一次的该低浓度hGH制剂的单注射液，以便能得到规定量的hGH。该情况可能出现于例如具有与特纳综合症有关的发育缺陷的患者，该患者由于其体重增加可能需要较高量的hGH。在很多情形下，不可能通过单次注射合理体积的该低浓度hGH制剂对该患者传输需要量的hGH。
因此，一直需要有一种含高浓度hGH的液体药物制剂。
在本发明的进程中已经注意到，如果将已知的含水液体生长激素制剂中的hGH的浓度调节到较高值、例如5mg/ml hGH或更高，则在该制剂中易于形成结晶。不仅在将所述制剂存储于冷藏温度时如此，而且当它们在高于冷藏温度下存储至少一段时间时也是如此。在hGH液体制剂中存在有结晶是特别不希望的，因为在给药前需要将该制剂振摇或涡旋，并且可能存在当结晶细小或者未被观察到时而导致给予结晶未首先充分溶解的制剂的情形。当在存储期间形成结晶时，还存在有就hGH制剂的外观而言的明显缺陷。
因此本发明的目的是提供一种多剂量的含水液体hGH制剂，当其在冷藏温度长时间存储时是稳定的，例如数月，或者甚至是1或2年。本发明的另一目的是提供液体hGH制剂，当其在高于常规冷藏温度(例如高于2℃-8℃)或者甚至在冷藏箱外存储至少一段时间(例如数小时、数天或者甚至是数周)时仍然是稳定的。
在本申请的上下文中，“稳定”主要地指基本上避免了形成结晶的问题；优选完全避免了该问题。相应地，本发明的药物制剂在如上所述存储时结晶最少或没有结晶。
除了避免结晶外，稳定制剂应当优选在存储时hGH没有聚集或者聚集最少。同样地，稳定制剂优选应当没有或者仅仅是最低程度地发生hGH的其它降解，例如脱酰胺、氧化和/或水解。
在本发明的上下文中，已经发现，该含高浓度hGH的多剂量液体制剂中使用的1，2-丙二醇是有关稳定性的有利参数。此外，在本发明的上下文中，已经出人意料地确定稳定制剂可含有比以前所认为的量少的赋形剂。
相应地，本发明的实施方案涉及1，2-丙二醇作为稳定剂在制备如此处所描述的含高浓度人生长激素的多剂量含水液体药物制剂中的应用。
在本发明的研发期间，已经证明，1，2-丙二醇能够使药物制剂具有稳定性，并且同时可有助于制剂的所需张力。
在本发明的上下文中，液体药物制剂是以即可使用的形式提供的制剂，即它不是以需要在给药前重新配制的形式、例如冷冻干燥的形式提供的。
因此本发明提供了一种人生长激素的多剂量液体药物制剂，其基本上由浓度为约5mg/ml至约100mg/ml的人生长激素、1，2-丙二醇、含水缓冲液、非离子型表面活性剂和防腐剂组成，所述药物制剂的张力为约100至约500mosm/kg，pH为约6.1至约6.3。
当必要时，该药物制剂中可存在有其它张力调节剂，从而使张力为约100至约500mosm/kg。优选本发明的药物制剂为等渗的。
相应地，在其另一实施方案中，提供了基本上由浓度为约5mg/ml至约100mg/ml的人生长激素、1，2-丙二醇、含水缓冲液、非离子型表面活性剂和防腐剂组成，所述药物制剂的张力为约100至约500mosm/kg，pH为约6.1至约6.3，所述药物制剂还另外含有张力调节剂，使得药物组合物的张力为约100至约500mosm/kg。
如果制剂的其它赋形剂对制剂的总张力没有贡献，则有必要存在达到可获得预期张力的程度的其它张力调节剂。特别地，根据1，2-丙二醇的浓度，其能够提供预期张力的大部分。特别优选的是其中1，2-丙二醇与其它赋形剂一起就能提供预期张力而不需要存在其它张力调节剂的本发明的药物制剂，由此可使所用赋形剂的总数保持最少。
在本发明的上下文中，术语“基本上由...组成”指本发明的药物制剂除此处提及的、能有助于药物制剂的工艺学药物性能(例如在稳定性、pH、张力等方面)的赋形剂以外不含有其它赋形剂。然而，不排除该制剂含有一种或多种对制剂的工艺学药物性能不起作用的其它助剂的可能。该助剂例如可以是使液体制剂有颜色的可药用染料。这例如可帮助确定多剂量注射装置中液体的量或者帮助顺利地确定是否有结晶出现。
发明人由本发明已经认识到对患者、药剂师和职业医生的一个优点。迄今为止必需确保将生长激素制剂小心地存储于冷藏温度(例如在2℃至8℃范围内)，以便使结晶最少。在患者收到生长激素前，该制剂通常由厂家和药剂师可靠地存储于冷藏温度下。然而，一旦患者收到并存储在家用电冰箱中时，在贮存温度方面的可靠性就小得多。患者家用电冰箱中的温度例如由于频繁地打开而明显高于2-8℃，例如为约15℃。而且，所使用的含液体制剂的装置可能被存储在冰箱外，例如给药后忘记在厨房工作台上，由此在一段时间内暴露于室温下(例如约20℃至约27℃，常为约25℃)。在已知的hGH药物制剂中，hGH结晶在温度高于8℃时、即高于冷藏温度时更易于出现。
即使本发明的制剂在高于冷藏温度下存储一段时间，也可提供很强的对抗结晶的抵抗力。因此允许供应给患者足够多的生长激素，以在比迄今为止可推存或期望的时间周期更长的时间内提供每日剂量。然而以前，患者仅可能保存可使用一周的少数剂量，而使用本发明的制剂，患者可在家用电冰箱中保存供数周或甚至是数月使用的生长激素，并且没有或仅仅有最少量的结晶发生。因此通过本发明可显著减少给患者开处方的频率。
因此，本发明的药物制剂于冷藏温度至室温下存储是稳定的，特别是基本不含结晶。特别地，该制剂在冷藏温度至室温下存储时至少4周或至少1个月、优选至少7周、更优选至少13周是稳定的。在其优选实施方案中，该制剂在2℃至8℃之间存储时至少数月、例如3个月、优选至少12个月、更优选至少18个月是稳定的。在其另一优选实施方案中，该制剂在15℃至25℃之间至少7周、更优选至少13周是稳定的，特别是基本不含结晶的。
在本文中，应当提到的是，hGH制剂在存储前可含有约4％的“相关蛋白”，该“相关蛋白”为脱酰胺和氧化降解过程产生的蛋白质物质。该“相关蛋白”在欧洲药典中有定义并通过反相HPLC测定。发明人提出以最多20％“相关蛋白”作为制剂储存期限结束时的目标。
hGH的降解速率不呈严格的线性，降解速率随温度增加而增加。在2℃-8℃时，制剂中的“相关蛋白”每个月通常增加约0.8％。在25℃时每个月增加约13％，40℃时每个月增加约70％。在25℃存储1个月大致相当于在2℃-8℃存储17个月。在15℃存储1个月大致相当于在2℃-8℃存储5个月。因此连续在约25℃至40℃的温度范围内存储是不切实际的。
虽然本发明的制剂即使在温度达40℃、特别是达25℃、更特别是达15℃时仍可较好的对抗结晶，但是在这些温度下“相关蛋白”的迅速形成通常构成了对制剂可能储存期限的直接限制。
“相关蛋白”在不同温度下随时间推移的形成速率易于由普通技术人员来测定，并且根据该信息，可无需过度费力地计算出最优和最大存储时间/温度曲线。在实践中，本发明的制剂可容易地经受由于每天开关冰箱门或出于施用目的每天由冰箱中取出1小时左右而造成的每天温度上升至略高于约8℃的情况而无显著的储存期损失。有利地，如果在冰箱外于室温下放置大约一天，本发明的制剂不会受到降解或结晶方面的有害影响。
因此，本发明的药物制剂可在冷藏温度(例如在2℃至8℃范围内)下始终保持稳定状态。另外，当至少总存储时间中的部分时间处于高于冷藏温度时，可能是在冰箱外达约1周、可能在冰箱外长达约1个月或甚至是更长时间时，药物组合物也表现出足够的稳定性。
因此，制剂存储时间中的至少一部分时间可存储在至少8℃的贮存温度下，并可任选地储存在选自8℃至40℃、8℃至25℃或8℃至15℃的范围内的温度下。
在本发明的药物制剂的优选实施方案中，制剂中hGH的浓度为约6mg/ml至约14mg/ml。在其特别优选的实施方案中，制剂中hGH的浓度为约6.67mg/ml。
在本发明的研发中，已经出人意料地确定，1，2-丙二醇能提供给含高浓度hGH的本发明的制剂足够的稳定性。本发明的药物制剂优选含有浓度为约0.5mg/ml至约20mg/ml、更优选约5mg/ml至约15mg/ml、最优选约6mg/ml至约13mg/ml的1，2-丙二醇。优选的实施方案涉及含有约12.4mg/ml的1，2-丙二醇的本发明的药物制剂。
本发明的药物制剂中存在的含水缓冲液可以是任何可药用的缓冲液。在其优选实施方案中，含水缓冲液选自磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液和甲酸盐缓冲液，优选为磷酸盐缓冲液，更优选为磷酸钠缓冲液。通常，含水缓冲液的浓度为约5mM至约100mM。在其优选实施方案中，含水缓冲液的浓度为约10mM。在其特别优选的实施方案中，含水缓冲液是浓度为约10mM的磷酸盐缓冲液(数字10mM指磷酸根离子的浓度)。最优选的含水缓冲液是浓度为约10mM的磷酸钠缓冲液。同样优选的是10mM磷酸盐缓冲液，特别是10mM磷酸钠缓冲液。
本发明的药物制剂中存在的非离子型表面活性剂可以是任何可药用的非离子型表面活性剂。优选地，非离子型表面活性剂选自泊洛沙姆(例如泊洛沙姆184或188)和聚山梨醇酯(如例如吐温20或80)以及其他乙烯/聚丙烯嵌段聚合物。优选地，非离子型表面活性剂为泊洛沙姆，特别是泊洛沙姆188。所用的非离子型表面活性剂的量可以是约0.001％(w/v)至约10％(w/v)，更优选为约0.005％(w/v)至约5％(w/v)，甚至更优选为约0.01％(w/v)至约1％(w/v)。在其优选实施方案中，非离子型表面活性剂存在的浓度为约0.05mg/ml至约4mg/ml，优选为约2mg/ml。本发明的一个优选实施方案涉及其中非离子型表面活性剂是浓度为约0.05mg/ml至约4mg/ml、优选为约2mg/ml的泊洛沙姆188的药物制剂。
本发明的药物制剂中存在的防腐剂可以是任何可药用的防腐剂。优选地，防腐剂选自苄醇、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯酚、苯扎氯铵、苄索氯铵、三氯叔丁醇、2-苯氧基乙醇、硝酸苯汞和硫柳汞。防腐剂的浓度对本领域技术人员来说根据健康管理局有关多剂量制剂安全性的要求是易于获得的。相应地，防腐剂的浓度例如可以是约1mg/ml至约30mg/ml，其取决于实际所用的防腐剂。更优选地，防腐剂为苄醇。在其优选实施方案中，本发明的药物制剂含有苄醇作为防腐剂，其浓度为约7mg/ml至约12mg/ml，最优选为约9mg/ml。
如果本发明的药物制剂中存在有用于将制剂的张力调节至约100mosm/kg至约500mosm/kg的预期值的其它张力调节剂，则该张力调节剂可以是任意的可药用张力调节剂。优选地，该张力调节剂选自糖、糖醇、其它多元醇、中性盐和氨基酸。例如，糖可以是单糖或二糖，象例如乳糖或蔗糖。例如，中性盐可以是当溶于水中时呈约中性pH的无机盐、有机盐或混合的盐，象例如氯化钠或乙酸铵。例如，氨基酸可以是甘氨酸、精氨酸或组胺酸。在其优选实施方案中，张力调节剂为糖醇，优选为甘露糖醇。优选张力调节剂存在的浓度为最高70mg/ml，更优选最高50mg/ml，甚至更优选最高30mg/ml。在其特别优选的实施方案中，附加的张力调节剂是浓度为约30mg/ml的甘露糖醇。
本发明的药物制剂优选具有约100mosm/kg至约500mosm/kg的张力，即该制剂的张力可从低渗直到高渗。在其优选实施方案中，本发明的药物制剂的张力为略微低渗至略微高渗。优选的和根据公知常识(参见例如Pharmaceutical Dosage Forms，Parenteral Medications，第2卷；编者Kenneth E.Avis；Herbert A.Lieberman；Leon Lachman；MarcelDekker，Inc.纽约和巴塞尔，出版04/01/1993，第58-60页)，这相当于约250mosm/kg至约350mosm/kg的张力。在其特别优选的实施方案中，本发明的药物制剂是等渗的。等渗优选相当于约270mosm/kg至约328mosm/kg的张力。更优选等渗相当于约286mosm/kg的张力。
在优选实施方案中，本发明的药物制剂的pH值为约6.2。本领域技术人员可将pH为约6.2理解为pH为6.15至6.25。优选pH为6.2。
特别优选的本发明的药物制剂基本由以下物质组成6.67mg/ml人生长激素、6mg/ml至15mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、
2mg/ml泊洛沙姆188，必要时加入足以使制剂为基本等渗的浓度的甘露糖醇，其pH为6.2。
另一方面还提供了基本由下述物质组成的药物组合物6.67mg/ml人生长激素、6mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、22.5mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH为6.2。
本发明另一方面还涉及基本由下述物质组成的药物组合物6.67mg/ml人生长激素、9mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、8.1mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH为6.2。
另一方面本发明还涉及基本由下述物质组成的药物组合物6.67mg/ml人生长激素、12.4mg/ml 1，2-丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH为6.2。
通过本发明使得在制剂中最少或避免的结晶似乎是生长激素的结晶。优选液体制剂中的任何结晶直接用肉眼观察，更优选在5倍放大率的光学显微镜下观察，甚至更优选在10倍放大率的光学显微镜下观察。在用光学显微镜观察之前，可将制剂过滤，测定过滤器上是否有结晶。当用光学显微镜观察时，过滤器的孔径可以是约5μm。
特别优选的结晶试验是将制剂在没有剩余空间的密封容器中、于15℃或25℃下避光存储一段时间，接着肉眼观察是否有结晶。
此外，本发明的含水生长激素制剂优选存储稳定，即生长激素在存储期间没有聚集或聚集最少。还优选生长激素没有如此处所述的化学降解(如脱酰胺等)或降解最少。适合用于测定含水溶液中生长激素稳定性的试验在本领域是众所周知的，例如如在WO 94/03198中所描述的，此处将其引入作为参考。
在本发明的优选制剂中，生长激素出现的聚集少于10％，优选少于1％，更优选少于0.1％，甚至更优选少于0.01％。
在本发明的药物制剂中，人生长激素优选为重组生产的hGH。相应地，特别优选的人生长激素通过重组方式生产，例如按照EP-A-0 217 822中的教导生产，此处将其引入作为参考。可单独或相互组合以及与天然激素组合用于本发明的人生长激素的变体包括称为促生长激素的191个氨基酸变体和称为人蛋氨生长素的192个氨基酸N-末端蛋氨酸(met)变体。还有在妊娠期的胎盘中天然发现的称为hGH-V的变体，其基因序列是已知的，并且已经制备了它的重组蛋白。
本发明的多剂量药物制剂优选含至少两个、更优选多个剂量的生长激素。
本发明的液体制剂中的hGH的量取决于制剂的体积和该体积意欲提供的hGH的剂量数。优选的剂量体积为小于0.5ml，如例如0.4ml，但原则上可采用每单次给药的体积为0.01ml至1.0ml。其它优选的剂量体积可落在0.1ml至0.6ml、优选0.1ml至0.4ml的范围内。
在优选的每日给药的单位剂量中，所给予的hGH的量为1.3mg，尽管精确剂量可根据特定的个体而改变。可采用0.033mg至3.33mg hGH范围内的剂量，优选0.33mg至2.0mg hGH范围内的剂量。当给药频率降低时，增加剂量是恰当的。
体积和/或剂量可根据主管临床医生的具体建议因不同个体而变化。
药物产品优选是与注射装置一起使用的容器形式，例如用于笔式注射器的药液筒。该药物产品可包含在注射装置中，优选包含在笔式注射器中。
因此，本发明还涉及含注射装置和含如前所述的液体生长激素制剂的单独容器的药盒。当给药装置仅仅是皮下注射器时，则该药盒可含有注射器、针头和含hGH制剂、与注射器一起使用的小瓶或安瓿。在更优选的实施方案中，注射装置不是简单的皮下注射器，因此可对单独的容器进行调整以与注射装置相连接，以便在使用时容器中的液体制剂与注射装置的出口液体相连。
给药装置的实例包括但不局限于皮下注射器和笔式注射装置。特别优选的注射装置为其中容器为药液筒的笔式注射器，优选为一次性的药液筒。相应地，本发明还提供了含任意如前所述的液体制剂、用于笔式注射装置的药液筒，该药液筒含有多个剂量的生长激素。
所提及文章的全部内容此处引入作为参考。
通过下述实施例详细解释了本发明，但本发明不局限于此。特别地，这些实施例涉及本发明的优选实施方案。
实施例此处所提及的物质如试剂对本领域技术人员来说是熟知的，可商业购得，并且可根据生产商的使用说明书来使用。
实施例1-重组hGH原药的制备和纯化在用hGH基因转化以在培养条件下表达hGH蛋白质的CHO细胞的细胞培养物中生产重组hGH。如何制备细胞并使之生长的细节在EP-A-0217 822(Scios Nova)中有描述，此处引入作为参考。对工业或商业规模的培养物生长的培养条件进行修改是在本领域普通技术人员的能力范围之内的。
一旦在培养物中由细胞生产出hGH，则需要将其提取并纯化为适于药物应用的形式。这可根据AU 629177(University of New South Wales &Garvan Institute of Medical Research)中描述的方法进行，此处引入作为参考。所得的hGH制剂为原药溶液形式，可用于制备下述的制剂。原药溶液中hGH的浓度(药物物质)通常为约8mg/ml至约15mg/ml，例如约10mg/ml。该药物物质可便利地存在于10mM的磷酸钠缓冲液中。
实施例2-人生长激素制剂的制备如下所概括的，通过将三倍浓赋形剂溶液稀释至hGH原药溶液中制备药物制剂，必要时调节pH(例如用HCl或NaOH调节)，之后用水调节最终重量。
在10mM磷酸盐中的hGH原药溶液可在浓缩至约150mg hGH/ml后使用，或者直接以例如10mg hGH/ml的浓度使用。为了方便，可由在10mM磷酸钠缓冲液中的含10mg/ml hGH的hGH原药溶液开始进行下述制备。如果由于不同的纯化步骤而得到具有不同含量的hGH和/或含有不同缓冲液的hGH原药溶液，则应相应地调节下述方案。可以理解的是，这种改变是在熟练技术人员的常规工作范围内的。
分别制备100mM的Na2HPO4×7H2O和NaH2PO4×2H2O的溶液，相互混合以使得最终pH为6.2。
将6.67ml的该100mM磷酸盐溶液置于烧杯中，用于制备66.67g三倍浓赋形剂溶液。加入下述量的赋形剂
表1三倍浓赋形剂溶液的组成
以相似的方法制备其它赋形剂溶液，该赋形剂溶液可制备得到下述的最终制剂。
用足够量的hGH原药制备最终药物制剂，得到hGH的最终浓度为6.67mg/ml。具体地，该制备包括将32.66g药物物质(hGH浓度＝10mghGH/ml)放入烧杯中。搅拌下加入16.67g三倍浓赋形剂溶液，必要时用HCl或NaOH调节pH为6.2，并将溶液用水加至50g。
将溶液用0.22微米过滤器过滤，填充入已装有活塞的药筒中。在适当位置折叠密封。
下表给出了含1，2-丙二醇作为稳定剂的最终药物制剂表2最终药物制剂的组成
③包括来自hGH原药溶液的磷酸盐。
③包括来自hGH原药溶液的磷酸盐。
3.制剂的存储和对结晶的评价将制剂1至8的各药液筒分别于2-8℃、15℃和25℃下存储。频繁用肉眼观察药液筒是否有结晶。
于2-8℃存储的制剂在测试期间没有出现结晶，对于制剂1和3测试期例如是3个月，对于制剂4、5和6测试期例如是12个月，对于制剂2测试期例如是18个月。于15℃或25℃存储的制剂1至4在至少4周内没有出现结晶。于15℃或25℃存储的制剂5至8在至少7周内没有出现结晶。
权利要求
1.基本由浓度为约5mg/ml至约100mg/ml的人生长激素、1，2-丙二醇、含水缓冲液、非离子型表面活性剂和防腐剂组成的人生长激素的多剂量液体药物组合物，所述药物组合物的张力为约100mosm/kg至约500mosm/kg，pH为约6.1至约6.3。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，还另外含有张力调节剂，使得药物组合物的张力为约100mosm/kg至约500mosm/kg。
3.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中人生长激素的浓度为约6mg/ml至约14mg/ml。
4.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中人生长激素的浓度为约6.67mg/ml。
5.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中1，2-丙二醇的浓度为约0.5mg/ml至约20mg/ml。
6.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中1，2-丙二醇的浓度为约5mg/ml至约15mg/ml。
7.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的缓冲液选自磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和甲酸盐缓冲液。
8.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的缓冲液为磷酸盐缓冲液。
9.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中缓冲液的浓度为约5mM至约100mM。
10.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中缓冲液的浓度为约10mM。
11.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的缓冲液为浓度约10mM的磷酸盐缓冲液。
12.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的非离子型表面活性剂选自泊洛沙姆、Pluronicpolyol和聚山梨醇酯。
13.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的非离子型表面活性剂为泊洛沙姆。
14.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的泊洛沙姆为泊洛沙姆188。
15.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中非离子型表面活性剂存在的浓度为约0.05至约4mg/ml。
16.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中非离子型表面活性剂存在的浓度为约2mg/ml。
17.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中非离子型表面活性剂为浓度为约2mg/ml的泊洛沙姆188。
18.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的防腐剂选自苄醇、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯酚、苯扎氯铵、苄索氯铵、三氯叔丁醇、2-苯氧基乙醇、硝酸苯汞和硫柳汞。
19.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的防腐剂为苄醇。
20.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的防腐剂为浓度为约7mg/ml至约12mg/ml的苄醇。
21.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其中的任选的张力调节剂选自糖、糖醇、其它多元醇、中性盐和氨基酸。
22.根据权利要求19中所述的药物组合物，其中张力调节剂是甘露糖醇。
23.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，所述的药物组合物基本是等渗的。
24.根据权利要求1中所述的药物组合物，其中所述药物组合物的pH为约6.2。
25.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其基本由下列物质组成6.67mg/ml人生长激素、约6mg/ml至15mg/ml丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、2mg/ml泊洛沙姆188，必要时加入足以使制剂为基本等渗的浓度的甘露糖醇，其pH为6.2。
26.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其基本由下列物质组成6.67mg/ml人生长激素、6mg/ml丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、22.5mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH为6.2。
27.根据权利要求1或2中所述的药物组合物，其基本由下列物质组成6.67mg/ml人生长激素、9mg/ml丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、8.1mg/ml甘露糖醇、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH为6.2。
28.根据权利要求1中所述的药物组合物，其基本由下列物质组成6.67mg/ml人生长激素、12.4mg/ml丙二醇、10mM磷酸钠缓冲液、2mg/ml泊洛沙姆188，其pH为6.2。
29.含有注射装置和含权利要求1或2中所述的人生长激素的多剂量液体组合物的单独容器的药盒。
全文摘要
本发明涉及可稳定存储、在存储期间结晶减少或没有结晶并且适于对人或动物体给药的人生长激素(hGH，促生长激素)的液体制剂。更具体地，本发明涉及稳定的、并且在高于冷藏温度的温度下存储至少一段时间时结晶最少或没有结晶的人生长激素的液体制剂。
文档编号A61K47/12GK1665540SQ03816119
公开日2005年9月7日 申请日期2003年7月8日 优先权日2002年7月9日
发明者M·贝茨, J·史蒂文斯 申请人:桑多斯股份公司